尼罗罗非鱼无乳链球菌微滴式数字PCR检测方法的建立及临床应用

通过设计筛选引物和探针、优化反应浓度和退火温度,构建一种尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)的微滴式数字PCR(dd PCR)检测方法,分析该方法的敏感性、特异性及重复性,并应用于临床样品检测。结果显示:当引物、探针浓度分别为0.9μmol·L^(-1)、0.3μmol·L^(-1)且退火温度为56.9℃时,建立的罗非鱼无乳链球菌dd PCR方法阴、阳性微滴分布界限明显,平均拷贝数高,有较高扩增反应效率;线性关系线良好(R^(2)=0.997 3),最低检测限为2.56 copies·μL^(-1);与猪链球菌2型、鱼类海豚链球菌和其他5种常见的水生动物疫病病原体无交叉反应;重复变异系数为3.15%;临床样品检测结果与实时荧光PCR方法结果的符合率100%,与细菌分离鉴定方法结果符合率为94.12%。结果表明,建立的罗非鱼无乳链球菌dd PCR检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好,可对罗非鱼无乳链球菌感染的临床样品进行定量检测,为尼罗罗非鱼无乳链球菌的研究提供有益参考。

罗非鱼链球菌检测方法研究进展

罗非鱼链球菌在世界范围内广泛分布,是威胁全球水产养殖业的重要病原体之一。无乳链球菌(Sreptococcus agalactiae)和海豚链球菌(Sreptococcus iniae)是引起罗非鱼链球菌病的主要病原体,严重危害罗非鱼养殖业的健康发展。适合应用场景的快速、准确无乳链球菌和海豚链球菌检测技术,对于预防罗非鱼链球菌病的大规模暴发十分必要。本文总结了近年来罗非鱼链球菌检测方法研究状况,包括细菌分离培养鉴定、免疫学方法和分子生物学检测方法等,以期为罗非鱼链球菌病的诊断和预防提供技术支撑。

罗非鱼链球菌双重荧光PCR方法的建立及临床应用

为构建一种无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)和海豚链球菌(Streptococcus iniae)的双重荧光PCR检测方法,根据筛选的海豚链球菌LysR基因和无乳链球菌Sip基因设计特异性引物和探针,优化反应浓度和退火温度,建立标准曲线,分析方法的敏感性、特异性和重复性,最后进行方法的初步应用。结果显示:当无乳链球菌引物和探针浓度分别为0.20和0.16μmol/L,海豚链球菌引物和探针浓度分别为0.20和0.32μmol/L,且退火温度为53℃时,建立的双重荧光PCR方法荧光曲线标准,线性关系线良好,有较高的扩增反应效率;无乳链球菌和海豚链球菌最低检测限分别为29.6和10.7 CFU/mL,与猪链球菌2型(Streptococcus suis serotype 2)和其他8种常见的水生动物疫病病原体无交叉反应,重复变异系数均小于2%;临床样品及人工污染样品检测结果与细菌分离鉴定方法符合率为100%。结果表明,本研究建立的罗非鱼链球菌双重荧光PCR检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好,可同时对无乳链球菌和海豚链球菌进行检测,为罗非鱼链球菌病的临床诊断和研究提供了技术支撑。

一株罗非鱼无乳链球菌的分离鉴定及药敏试验

为确定东莞市某养殖场罗非鱼发病的原因,有针对性制定防治措施,采集发病罗非鱼的脑、肝脏、脾脏、肾脏等组织样品进行细菌分离培养鉴定,通过VITEK-2 Compact进行生化鉴定和16S rRNA基因序列分析以及系统进化树构建,并对分离菌株(DG210721)进行药敏试验。结果显示:分离纯化培养的菌株特征、形态和生化鉴定结果均与无乳链球菌相符;16S rRNA基因序列分析发现,分离菌株与罗非鱼无乳链球菌(JQ039371)同源性高达100%且亲缘关系最近;分离菌株对药物的敏感性由高到低依次是盐酸多西环素、恩诺沙星、甲砜霉素、氟苯尼考、氟甲喹、磺胺甲噁唑+甲氧苄啶、磺胺间甲氧嘧啶钠、硫酸新霉素。结果表明:该养殖场罗非鱼发病的原因之一是无乳链球菌感染;分离菌株遗传序列较稳定,并对部分临床使用的药物产生了一定的耐药性。结果提示,需要加强罗非鱼无乳链球菌感染的防控,定期采样检测,及时确诊,选用敏感药物进行科学防治。

关注物理核心素养提升单元复习课的有效性

文章以核心素养为目标,在单元复习课的教学过程探索以"教学目标精准化、教学内容情境化、教学方式多样化、评价体系多元化"为导向,提升高中物理单元复习课的有效性.

九年级英语教学有效复习策略之归纳法的运用研究

九年级英语教学过程中,更多的是对前面所学知识点的归纳和总结。教学时应巧妙抓住各个环节的知识点,进行合理归纳,以起到挈领提纲功效,使学生所学知识化零为整、化繁为简、化难为易,进而提升学生掌握知识的时效性、能力性和素养性,也为学生今后的英语学习"搭桥铺路",同时也能激发学生愉快学习之兴趣。

运用活动导学 提升解题思维

习题课是高中物理教学的重要课型之一,对教学质量的好坏起着举足轻重的作用。通过恰当、具体的物理习题的解答,不但能够帮助学生理解物理学的基本概念及基本规律,巩固所学知识,而且可以帮助学生提高应用物理知识分析并解决实际问题的能力,还能提升学生思维的灵活性、发散性、深刻性。本文将以高三第一轮复习中笔者自编的一道传送带习题的教学为例,进行说明。

从经济学角度浅谈中学物理教学

从经济学的角度来讲，效益就是投入与产出比，教学过程可以被看作是一个投入产出系统，教学效率就是教学投入与产出的比率，从教学的角度看，有效教学应该考虑教学投入与产出的关系。

师生共同演绎生命课堂

活动教学以关注学生主体地位为前提，活动建构过程在教师科学指导下通过互动合作，使学生在活动中实现自主建构．活动建构过程呈现的是不断优化的课堂结构，折射的是对生命的尊重，放飞的是灵性与智慧．活动教学旨在建构民主、开放、互动、生命的课堂．下面笔者基于课堂活动教学过程中总结出的一些活动教学的基本要素，与同仁共探讨．

高中物理开放性习题设计初探

随着高考试题近年来不断趋于开放性，对教师在教学工作如何编制开放性习题，培养学生思维的开放性，提高他们的综合能力提出了新的挑战。

运用活动导学 提升解题思维

习题课是高中物理教学的重要课型之一,对教学质量的好差起着举足轻重的作用.通过恰当、具体的物理习题的解决,不但能够帮助学生完善理解物理学的基本概念及基本规律、巩固所学知识,而且可以帮助学生提高应用物理知识分析并解决实际问题的能力,还能提升学生思维的灵活性、发散性、深刻性.本文将以高三一轮复习中的笔者自编的一道传送带习题的教学为例,说明运用活动导学帮助学生提升解题思维.

小学语文阅读教学回归简真的思考

语文阅读教学对于学生理解能力和交际能力的培养具有重要的作用。语文作为一门人文学科,它既能提升技能,又能完善人格。然而,新课改以来,一系列新的教学理念和教学方法都在追求新奇,失去了语文教学的简真。

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在市场经济中更需加强医院计量管理工作李海舰，丁文桂计量工作是医院各项工作的基础性工作，计量管理是医院管理的一个组成部分。搞好计量工作，保证计量单位的统一和量值的准确可靠是医院信誉的保证。一、加强领导，把计量工作纳入医院的工作日程天津医科大学总医院是市...