温度对南极衣藻ICE-L(Chlamydomonas sp.ICE-L)谷胱甘肽含量及其相关酶活性的影响

采用分光光度法研究了在不同温度下(包括最适温度、低于或高于最适温度)南极衣藻ICE-L(Chlamydomonassp.ICE-L)谷胱甘肽(GSH)含量、蛋白含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、谷胱甘肽还原酶(GR)和谷胱甘肽硫转移酶(GST)活性,同时分析了已适应高温(16℃)的衣藻重新适应低温(8℃)时这些指标的变化,以期阐明谷胱甘肽系统与南极冰藻低温适应性的关系。结果表明,当温度低于对照组(最适温度8℃)时,蛋白含量降低,而GSH含量、GPx、GST和GR活性上升,已适应高温的衣藻重新适应低温时也出现类似的结果。但当温度高于最适温度时,GSH含量、GST和GPx活性下降,而蛋白含量和GR活力有上升的趋势,GR活力增长幅度比低于最适温度时的变化小。由此可见谷胱甘肽系统在南极衣藻低温适应过程中,GSH、GPx、GR、GST与低温适应呈正相关,同时除GR外其他因子与南极衣藻高温适应呈负相关,GSH及其相关酶在南极冰藻低温适应中具有重要作用。

虎纹蛙烂趾病病原菌分离鉴定与药敏试验

从患典型烂趾病的虎纹蛙病灶组织分离到1株细菌,暂命名为WD-01,经人工感染证实该细菌为虎纹蛙烂趾病的病原菌。通过形态学、生理生化特性对其进行鉴定,并用纸片法进行药敏试验。鉴定结果表明,细菌WD-01为嗜水气单胞菌。药敏试验结果表明,新霉素、利福平、先锋霉素、诺氟沙星、庆大霉素、强力霉素、链霉素、卡那霉素、土霉素和金霉素等12种药物对菌株WD-01具有明显的抑制作用。

湖光岩拮抗菌的研究

采用涂布法、划线分离法以及形态学和生理生化特性分析,对湛江湖光岩微生物进行了分离纯化及部分性质研究;同时用平板菌落计数法对其异养细菌、真菌和弧菌等的数量进行初步统计。采用牛津杯法,对拮抗细菌进行筛选和培养特性研究。结果表明,微生物数量与种类在水平分布上具有显著差异。底泥异养菌总量为(1.3—8.6)×108cfu/g,真菌总量为(0.1—5.7)×107cfu/g。而水体细菌总量为(0.5—6.7)×105cfu/ml,真菌总量为(0.4—1.1)×103cfu/ml。共分离纯化到148株细菌,经筛选发现16株细菌对溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)具有明显的抑制作用,占细菌总数的10.8%,其中菌株DH078和DH113对溶藻弧菌的拮抗作用最明显。结果还表明,细菌DH078在营养肉汤中培养4d抑菌活性最强,其产生抗菌活性物质的最佳条件是稀释2倍的营养肉汤、蛋白胨0.6%、牛肉膏0.6%、酵母膏0.2%、盐度0和pH7.0。可见湖光岩微生物资源较为丰富,本研究可为保护和充分开发利用湖光岩微生物提供科学依据。

南极硅藻GJ01(Berkeleya rutilans)产谷胱甘肽条件的优化

以南极硅藻GJ01(Berkeleya rutilans)为对象,分别采用紫外、可见和荧光分光光度法,研究了营养条件等因子对GJ01生长和胞内谷胱甘肽含量的影响,并对培养的GJ01细胞合成谷胱甘肽的条件进行了优化。结果表明,在单因子影响条件下,1.2g/L的碳酸氢钠对南极硅藻GJ01的生长最好,且最有利于谷胱甘肽的积累;0.8mmol/L氯化钙对GJ01的生长最为有利,而0.2mmol/L氯化钙对谷胱甘肽的产生是适宜的;维生素B_(12)和生物素对GJ01胞内谷胱甘肽的产生影响较小。正交试验表明,GJ01细胞产生谷胱甘肽的最优条件是:光照周期为16h/8h、NaHCO_3为1.6g/L、Ca^(2+)为0.4mmol/L、Cys为10mmol/L。该结果为利用南极硅藻GJ01生产谷胱甘肽提供了参考和依据。

南极硅藻GJ01谷胱甘肽合成酶法生产谷胱甘肽

以南极微藻中的南极硅藻GJ01(Berkeleya rutilansGJ01)为材料,采用分光光度法研究谷胱甘肽的前体氨基酸等因子对谷胱甘肽合成酶的影响,并在少量可供应ATP的南极硅藻GJ01细胞存在的情况下,对其游离谷胱甘肽合成酶合成谷胱甘肽的条件进行优化。结果表明,南极硅藻GJ01谷胱甘肽合成酶的最适温度为10～25℃,最适pH值为7.0;Glu、Cys、Gly的最适浓度分别为24 mmol.L-1、12 mmol.L-18、mmol.L-1。此外Met对谷胱甘肽的合成也有影响,而且南极硅藻GJ01的谷胱甘肽合成酶还具有Mg2+依赖性。正交实验表明,南极硅藻GJ01游离谷胱甘肽合成酶,产生谷胱甘肽的最理想条件为,温度30℃、Cys浓度10 mmol.L-1、Mg2+浓度30 mmol.L-1、pH 7.5。该方法用于工业化生产谷胱甘肽是可行的。

对虾病毒病暴发前期病毒和弧菌相互作用关系

模拟天然继发感染研究对虾病毒病暴发前期病毒和弧菌的关系。结果显示 ,弧菌先感染再病毒感染组比病毒先感染再弧菌感染组死亡率高、死亡快、生长慢、免疫功能低下。表明弧菌的潜伏感染对病毒的增殖有利 ,而病毒的潜伏感染对弧菌的继发感染没有明显的促进作用。说明病毒性流行病的暴发前期可能是由弧菌先感染 ,使对虾体内环境发生变化而助长病毒感染 。

草鱼(Ctenopharyngodon idellus)呼肠孤病毒(GCRV)VP6相互作用蛋白的筛选

为筛选与草鱼呼肠孤病毒GCRV096 VP6发生相互作用的宿主蛋白,先将VP6基因的PCR扩增产物,克隆至酵母表达载体p GBKT7以构建其诱饵质粒(p GBKT7-VP6);再将酵母菌Y2HGold(含p GBKT7-VP6)与酵母菌Y187[含草鱼肾脏细胞(CIK)c DNA文库质粒]进行人工诱导融合,然后经选择培养筛选阳性克隆。结果共筛选到4株阳性克隆,经测序、生物信息学分析,分别属于两条不同的核苷酸序列,其中之一所编码的产物与GAPDH(3-磷酸甘油醛脱氢酶)同源性较高。可见,该酶极可能在GCRV096侵染宿主的初期发挥着重要作用。

黄鳍鲷弧菌病病原特性及其全菌苗的研究

自湛江市发病养殖黄鳍鲷分离一株致病菌。对该菌的基本特征、药物筛选、灭活全菌苗等进行了研究。结果表明该病原菌为溶藻弧菌 ,且对四环素、土霉素、氯霉素、氟哌酸、氧氟沙星等药物敏感 ,pH6 0比pH8 4时灭活效果好 ,加入福尔马林可以提高灭活效果 ;全菌苗能够提高鱼体的免疫能力 。

流沙湾海区异养菌和弧菌动态变化规律研究

对流沙湾海区异养菌、弧菌动态变化规律及其优势菌群进行了初步探讨。采用平板稀释法对异养菌和弧菌数量进行了周年检测；对优势菌株进行分离纯化，并对代表性月份样品优势菌中的孤菌进行菌种鉴定。结果显示，流沙湾海区的异养菌和弧菌密度分别为8．8×10^3～9．60×10^5cfu／mL和1．0×10^3-2．45×10^4cfu／mL，其中异养菌数量高峰出现在6月，弧菌数量高峰出现在12月，异养菌、弧菌数量与水温变化的相关性不明显；流沙湾海区优势菌群中存在着溶藻弧菌等多种致病性弧菌。

罗非鱼溶菌酶活力的研究

采用试管法 (测定溶菌酶活力 )研究pH和温度对罗非鱼血清、肝、鳃中溶菌酶活力的影响 ,以确定其最适pH和最适温度 ,同时研究了溶菌酶对温度的耐受性及其在体外的抑菌效果。结果表明 ,罗非鱼血清、肝溶菌酶的最适pH是 6 3 0 ,最适温度是 2 8℃ ;鳃中溶菌酶的最适pH是 6 1 0 ,最适温度是 3 4℃。各种酶在 5 0℃保温 40min以上将被灭活 ,在 3 7℃以下活性是稳定的 ;体外抑菌试验表明罗非鱼溶菌酶对革兰氏阳性菌具有较好的抑菌效果。

对虾病毒性疾病研究最新进展

本文从病因病理、人工感染、检测与分子生物学、组织培养。

本地胡子鲶头甲溃烂症病原菌的分离与特性

从患头甲溃烂症的本地胡子鲶(Clarias fuscus)病灶处分离出1株细菌Hu02,用该菌株回归感染健康的本地胡子鲶,死亡率为100%,证明其是该病的致病菌。经细菌形态学观察,培养特征和生理生化反应测定,菌株Hu02被鉴定为嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)。经药敏试验结果表明,该菌株对氟哌酸、红霉素、利福平、庆大霉素等敏感。培养温度试验还表明,该菌株在4℃不生长,在17℃、28℃、37℃和42℃中均可生长,其中28℃是其最适生长温度。

协同育人平台建设的体会与思考——以广东海洋大学生物工程专业为例

在广东海洋大学"创新强校工程"项目的资助下,生物工程协同育人平台经过近两年的建设,取得了一定的成效。在确立协同创新育人的理念与制度体系、学科专业定位的基础上,以人才培养方案的修订为突破口,将协同育人的理念贯穿于新的培养方案,突出其海洋与工程的特点;有效整合校内各部门、校外各相关企业等的现有资源,构建协同育人的新机制;并逐步建立协同育人的科学评价标准与系统,实行可持续发展。该平台的建设为创新型应用型人才的培养奠定了较好的基础。

南极冰藻谷胱甘肽相关因子的测定

谷胱甘肽系统在清除活性氧和生物保护中发挥重要作用，探讨了南极冰藻胞内谷胱甘肽含量及谷胱甘肽相关酶的活力。采用分光光度法，对24种南极冰藻胞内谷胱甘肽含量、谷胱甘肽合成能力（GPA）、谷胱甘肽还原酶活力等进行测定。测定结果表明，南极蓝藻B-1中谷胱甘肽含量最高；南极衣藻ICE-L和南极硅藻GJ01的谷胱甘肽总产量居前2位；南极冰藻GPA普遍高于常温藻的。南极硅藻GJ01和南极衣藻ICE—L GR活力高于对照组的。培养基的选择表明，f／2培养基适合南极硅藻GJ01的生长，而Provasoli培养基适合南极衣藻ICE—L的生长。可见，南极冰藻成为谷胱甘肽的新来源是有可能的，尤其是南极硅藻GJ01和南极衣藻ICE—L。

锂对光合细菌生长和罗非鱼免疫功能的影响

为锂元素在水产免疫中的应用作了探讨。主要包括无机锂对光合细菌和罗非鱼的毒性,无机锂对光合细菌的生长和罗非鱼免疫因子的影响,含锂培养的光合细菌体外抑菌和体内对罗非鱼免疫因子的影响等。试验结果表明,锂对光合细菌最小抑菌浓度为50mg/kg,最小杀菌浓度为100mg/kg,在8mg/kg～12mg/kg间对光合细菌生长具有显著促进作用。锂对罗非鱼半致死浓度为0.5mg/kg,安全浓度为0.1mg/kg,无机锂可以提高罗非鱼血清(浆)中溶菌和抗菌活力、增加免疫细胞的核质比,但吞噬细胞活力和免疫细胞数量没有增加;含锂培养的光合细菌细胞破碎物体外具有显著抑制弧菌的能力,体内可以显著提高罗非鱼血清中溶菌活力。说明锂作为免疫激活剂,在水产上应用是可行的,同时可以用光合细菌作为锂的载体来消除无机锂对罗非鱼的毒性。

爱迪康101微生物制剂对养殖环境弧菌的影响

于2000年8月至10月采用活菌平板计数法研究爱迪康101微生物制剂对养殖环境弧菌的影响。分实验室条件和天然池两大部分,并设立不同底质,不同使用浓度等组,结果表明101制剂对弧菌有一定的控制作用。弱光时对沙质底的水体效果好,而强光时对泥质底的水体效果要好;制剂最佳使用浓度为(3～5)×10^(-6)。天然池表明101制剂对高位池的水体效果较好,而对底质中的微生物控制效果不显著。

“海洋微生物学”研究生示范课程建设与实践

“海洋微生物学”是广东海洋大学硕士研究生(海洋生物学专业)的一门专业选修课。文章从“海洋微生物学”课程特点与建设成效出发,阐述其课程建设的路径:优化授课内容,创新教学方法与手段,开展课程资源建设、开发与利用,共享协同育人平台与创新,建立“五个结合”课程内容体系、基于微助教的多渠道信息反馈系统、多位一体的教学资源综合体等,在教学中取得较好的效果。

学科专业布局优化后生物科学专业建设管理创新与实践

广东海洋大学设置了具有海洋水产特色的生物科学专业,项目组在原有相关专业建设的基础上,立足于学科专业调整的大背景,对生物科学专业建设的管理进行了大胆的创新与实践:建立与完善专业负责人(专业首席教师)负责制及其管理制度;以学校完全学分制改革为契机,深入优化培养方案,建立培养方案制订与修订、课程教学大纲制订与修订的管理制度;加强青年教师的引进与培养,完善本科生导师制,加强其过程管理与考核;完善专业负责人指导下的课程组组长负责制及其管理制度,加强课程建设与教材建设。项目建设对生物科学专业的建设与快速发展具有重要意义,也为生物类相近专业建设提供了参考。