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基于高效液相色谱-串联质谱和线粒体呼吸功能对开心散药效物质基础研究
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作者 安若凡 李镇 +6 位作者 李俊 高艳华 李韶菁 张琪曼 陈颖 万会花 杨维 《医药导报》 CAS 北大核心 2024年第12期1888-1897,共10页
目的基于高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)技术和“化学成分谱-血浆暴露成分谱-线粒体功能”联合分析,揭示开心散药效物质基础。方法通过研究文献、数据库及前期研究成果,系统梳理人参、远志、茯苓和石菖蒲的化学成分,建立开心散水提... 目的基于高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)技术和“化学成分谱-血浆暴露成分谱-线粒体功能”联合分析,揭示开心散药效物质基础。方法通过研究文献、数据库及前期研究成果,系统梳理人参、远志、茯苓和石菖蒲的化学成分,建立开心散水提物的化学成分定性分析方法,并对开心散水提物化学成分进行鉴定。建立基于HPLC-MS/MS大鼠血浆定性分析方法,并利用该法对大鼠灌胃开心散水提取物后的血浆暴露成分谱进行分析。使用Seahorse细胞能量代谢分析仪进行有氧呼吸检测,评估开心散关键成分对线粒体有氧呼吸的影响。结果对开心散水提取物中4类主要成分(皂苷、寡糖酯、[口山]酮和三萜)进行鉴定,共鉴定出化合物231个。对大鼠灌胃给予开心散30 min时的血浆进行分析,共鉴定开心散相关成分55个。利用体外细胞实验对入血的4类成分进行有氧呼吸检测,发现人参皂苷Rg1、3,6'-二芥子酰基蔗糖、远志[口山]酮Ⅲ、茯苓新酸B均可显著提高线粒体呼吸能力。结论皂苷、寡糖酯、[口山]酮和三萜类成分可能是开心散通过改善线粒体功能发挥药效的物质基础。“化学成分谱-血浆暴露成分谱-线粒体功能”联合分析为深入研究中药药效物质基础提供了新思路。 展开更多
关键词 开心散 线粒体 化学成分谱 血浆暴露成分谱 有氧呼吸
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月季F_1代群体表型性状变异分析 被引量:12
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作者 周利君 于超 +4 位作者 常笑 万会花 罗乐 潘会堂 张启翔 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期131-138,共8页
以月季(Rosa spp.)品种‘云蒸霞蔚’和‘太阳城’正交获得的184株F_1代群体为研究对象,采用方差分析、变异系数、遗传分析、相关性分析对花部形态性状以及叶片形态性状进行测定分析。结果表明:该杂交群体表型变异丰富,变异系数在7.33%~... 以月季(Rosa spp.)品种‘云蒸霞蔚’和‘太阳城’正交获得的184株F_1代群体为研究对象,采用方差分析、变异系数、遗传分析、相关性分析对花部形态性状以及叶片形态性状进行测定分析。结果表明:该杂交群体表型变异丰富,变异系数在7.33%~68.08%,其中花瓣数量在群体中的变异程度最高;杂交后代各个性状上均发生分离变异,出现不同于亲本的表现型,且离散程度较高。表型性状的遗传特点与关联分析,为挖掘控制表型性状的优良基因及辅助选择育种提供参考。 展开更多
关键词 月季 表型性状 遗传分析 相关性
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现代月季F_(1)代群体叶色与花色相关性研究 被引量:4
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作者 孙彦琳 程璧瑄 +4 位作者 周利君 罗昱 王婧 万会花 于超 《四川农业大学学报》 CSCD 北大核心 2021年第2期173-179,共7页
【目的】通过研究月季新叶与花色的相关性,探讨月季生产早期定向选择的方法,解决月季育种周期长、育种效率低等问题。【方法】以月季"云蒸霞蔚"×"太阳城"的F1代植株为材料,测定了其新叶相对叶绿素含量(soil an... 【目的】通过研究月季新叶与花色的相关性,探讨月季生产早期定向选择的方法,解决月季育种周期长、育种效率低等问题。【方法】以月季"云蒸霞蔚"×"太阳城"的F1代植株为材料,测定了其新叶相对叶绿素含量(soil and plant analyzer development,SPAD)、花青苷含量、色差值及花瓣色差值,用CIELab系统对叶色和花色进行描述,探索新叶各参数与花瓣色差值之间的关联性。【结果】花瓣亮度L^(*)和色相a^(*)、饱和度C呈显著负相关,根据L^(*)与C的关系,可将F1代植株分为2个类群;新叶花青苷含量与花瓣L^(*)呈显著负相关,与a^(*)和C呈显著正相关;新叶L^(*)和花瓣L^(*)、新叶a^(*)和花瓣a^(*)之间均呈显著正相关,新叶a^(*)与花瓣L^(*)、新叶L^(*)与花瓣a^(*)、新叶C与花瓣C间呈显著负相关。【结论】利用月季新叶花青苷含量和色差值对其花色进行预选具有可行性。 展开更多
关键词 现代月季 SPAD值 花青苷含量 叶色 花色
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冻伤蓝变对广义虾脊兰属植物中4种吲哚基衍生物含量的影响
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作者 张一鸣 万会花 +3 位作者 苏勇 鲁梦 杨维 翟俊文 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期1951-1958,共8页
以6种广义虾脊兰属植物和2种树兰亚科植物为材料,利用液相色谱-串联三重四极杆质谱仪(LCMS-QQQ)测定了冻伤处理前后花和叶片中靛苷、靛红、靛蓝和靛玉红4种吲哚基衍生物的含量,分析广义虾脊兰属植物吲哚基衍生物的生成及种属间含量的差... 以6种广义虾脊兰属植物和2种树兰亚科植物为材料,利用液相色谱-串联三重四极杆质谱仪(LCMS-QQQ)测定了冻伤处理前后花和叶片中靛苷、靛红、靛蓝和靛玉红4种吲哚基衍生物的含量,分析广义虾脊兰属植物吲哚基衍生物的生成及种属间含量的差异。结果显示:(1)4种吲哚基衍生物在所测定的6种广义虾脊兰属植物中均被检出,但在2种树兰亚科植物五唇兰和足茎毛兰中均未被发现。(2)在所测定的6种广义虾脊兰属植物花和叶片中,冻伤处理后的靛蓝、靛玉红和靛红含量均显著上升,而靛苷含量显著下降,同时花中的吲哚基衍生物含量均高于叶片。(3)6种广义虾脊兰属植物花和叶中吲哚基衍生物总含量以黄兰花最高,三褶虾脊兰叶最低。研究表明,冻伤处理引起靛苷向靛蓝的大量转化是导致冻伤后广义虾脊兰属植物组织中呈现出蓝色的主要原因,推测吲哚基衍生物可能也是一类与植物防御相关的化合物,在植物抵御逆境中扮演着重要的角色。 展开更多
关键词 广义虾脊兰属 吲哚基衍生物 冻伤 蓝变
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UPLC-QQQ-MS/MS同时测定黄花蒿中7个青蒿素类相关化合物的含量 被引量:1
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作者 王梦月 万会花 +5 位作者 向丽 蒲雨婷 尹青岗 高冉冉 师玉华 邬兰 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1260-1265,共6页
同时检测黄花蒿Artemisia annua中多个化合物,以对黄花蒿的品质进行多角度评价。建立超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱(UPLC-QQQ-MS/MS)同时检测黄花蒿中紫穗槐-4,11-二烯、青蒿醛、双氢青蒿酸、青蒿酸、青蒿素B、青蒿烯和青蒿素7个... 同时检测黄花蒿Artemisia annua中多个化合物,以对黄花蒿的品质进行多角度评价。建立超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱(UPLC-QQQ-MS/MS)同时检测黄花蒿中紫穗槐-4,11-二烯、青蒿醛、双氢青蒿酸、青蒿酸、青蒿素B、青蒿烯和青蒿素7个青蒿素类相关化合物的方法,并对黄花蒿不同组织部位(根、茎、叶和侧枝)中这7个化合物含量进行差异比较,检测其在黄花蒿中的累积情况。采集生长盛期4月龄黄花蒿的根、茎、叶和侧枝,检测黄花蒿不同组织部位7个青蒿素类相关化合物的含量。采用UPLC-QQQ-MS/MS的多反应监测(MRM)采集模式,大气压力化学离子源(APCI)正离子模式,色谱柱为Eclipse Plus RRHD C_(18)(2.1 mm×50 mm,1.8μm),流动相为含甲酸(0.1%)-甲酸铵(5 mmol·L^(-1))水溶液(A)和甲醇(B),梯度洗脱(0~8 min,55%~100%B;8~11 min,100%B;平衡3 min)。流速0.6 mL·min^(-1),柱温40℃,进样量5μL,检测时间8 min。通过方法学考察,建立了基于UPLC-QQQ-MS/MS同时定量检测青蒿素生物合成途径中7个代表性化合物含量的方法。对黄花蒿根、茎、叶和侧枝的含量比较分析结果表明:黄花蒿中青蒿素含量高于青蒿素B,且青蒿素和双氢青蒿酸在黄花蒿各部位的含量相对较高;7个化合物在各部位的含量存在较大差异,均在叶片中最高,且青蒿烯和青蒿醛在根中未检测到。该研究建立了基于UPLC-QQQ-MS/MS同时检测青蒿素生物合成途径上7个代表性化合物的定量方法,准确、灵敏且高效,可用于黄花蒿中青蒿素类相关化合物的含量测定、新品种选育和中药材质量控制等。 展开更多
关键词 UPLC-QQQ-MS/MS 黄花蒿 青蒿素 青蒿素B 多反应监测(MRM)
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中药与天然药物2015~2020年研究亮点评述 被引量:27
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作者 陈士林 孙奕 +2 位作者 万会花 张晗 赵庆贺 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期2751-2776,共26页
中药与天然药物在2015~2020年取得多项突破性进展,屠呦呦青蒿素研究获得诺贝尔奖促使国内外掀起研究中药与天然药物的热潮,“甘露寡糖二酸”、“桑枝总生物碱片”等原创药物获得新药证书;多项研究成果入选年度“中国十大医学进展”,在Na... 中药与天然药物在2015~2020年取得多项突破性进展,屠呦呦青蒿素研究获得诺贝尔奖促使国内外掀起研究中药与天然药物的热潮,“甘露寡糖二酸”、“桑枝总生物碱片”等原创药物获得新药证书;多项研究成果入选年度“中国十大医学进展”,在Nature、Science、New England Journal of Medicine、Lancet等国际顶级期刊发表了高水平的研究论文,本文梳理总结了这五年期间国内外科学家在国际著名期刊发表中药与天然药物相关的亮点学术成果,并对其在化学、药物资源、药理、制剂、新药开发等相关领域取得的重要进展进行了评述,以期追踪和报道中药与天然药物领域发展的前沿和热点,并通过对其分析得出学科发展的启示和展望。 展开更多
关键词 中药 天然药 天然产物 药用植物 药理 制剂
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药用植物分子遗传学研究规律的探讨 被引量:11
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作者 陈士林 孙伟 +11 位作者 吴问广 陈万生 王瑛 董扬 刘义飞 徐志超 孙超 尹青岗 李勇青 罗鸣 肖莹 万会花 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第23期5577-5588,共12页
该文探讨了药用植物分子遗传学的定义,即是以药用植物作为研究对象的综合性学科,该学科关注药用植物的遗传和变异规律,研究药用植物关键性状(有效成分、产量、抗性等)和基因型的相关性,主要从分子水平上研究药用植物基因的结构与功能,... 该文探讨了药用植物分子遗传学的定义,即是以药用植物作为研究对象的综合性学科,该学科关注药用植物的遗传和变异规律,研究药用植物关键性状(有效成分、产量、抗性等)和基因型的相关性,主要从分子水平上研究药用植物基因的结构与功能,遗传与变异,从而揭示药用植物生长发育和环境应答过程中遗传信息传递、表达和调控的分子机制。详细论述了药用植物分子遗传学的三大研究重点方向:一是药用植物个体和群体的遗传和变异规律,主要突出药用植物的人工驯化的遗传机制、药用植物物种层面的个体基因组学和药用植物群体遗传多样性的形成和规律;二是药用植物药效成分合成途径的解析及代谢途径的进化。重点阐述药用植物有效成分的生物合成、有效成分的多样性及分子进化;三是药用植物体内外因子影响其关键性状形成的分子遗传调控机制。主要涉及到药用植物药用活性成分的积累和分布,环境因子对活性成分积累调控网络分子机制。最后结合多组学技术的快速发展对药用植物分子遗传研究重点的未来发展方向进行了展望,并提出应用药用植物分子遗传学规律实现药用植物保育、育种和有效成分生物合成等的具体方法和措施。 展开更多
关键词 药用植物分子遗传学 多组学 群体遗传学 转录调控
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月季花瓣中类黄酮和类胡萝卜素的提取与测定 被引量:5
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作者 万会花 于超 +3 位作者 罗乐 韩瑜 潘会堂 张启翔 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2019年第20期6800-6811,共12页
月季(Rosa spp.)是一种具有重要价值的观赏植物,花色是其最重要的观赏性状之一。为了解析月季花色形成的分子机理,本研究以‘云蒸霞蔚’和‘太阳城’的杂交后代为试验材料,探索类黄酮和类胡萝卜素的提取与测定方法,并且对‘梅朗口红’... 月季(Rosa spp.)是一种具有重要价值的观赏植物,花色是其最重要的观赏性状之一。为了解析月季花色形成的分子机理,本研究以‘云蒸霞蔚’和‘太阳城’的杂交后代为试验材料,探索类黄酮和类胡萝卜素的提取与测定方法,并且对‘梅朗口红’花瓣中类黄酮和类胡萝卜素进行定性定量分析。结果表明:(1)类黄酮提取的最佳浸提剂为甲醇-水-甲酸-三氟乙酸(70∶27∶2∶1, V/V),采用超声波辅助提取,流动相为0.5%甲酸水溶液(A)和乙腈(B),洗脱梯度为0 min 5%B,5 min 10%B,30 min 19%B,50 min 40%B,50.01~60 min 5%B;(2)类胡萝卜素提取的最佳浸提剂为甲醇(含0.1%BHT),需要皂化,最佳复溶溶剂为甲醇-甲基叔丁基醚(1∶1,V/V,含0.1%BHT);(3)‘梅朗口红’花瓣中总共检测到1种花青苷、8种黄酮醇和6种类胡萝卜素,其中花青苷含量最高,黄酮醇次之,类胡萝卜素最低,开花过程中色素含量变化显著,矢车菊3,5-双氧葡萄糖苷的含量先升高后降低,在S3时期,最大值为1 705.90μg/g FW,槲皮素3-O-鼠李糖苷、槲皮素总含量以及黄酮醇总含量先升高后降低,在S2时期达到最大值,槲皮素7-O-鼠李糖苷和山奈酚总含量逐渐下降;(4)相关分析显示,明度L*与花青苷含量极显著负相关,色相a*与花青苷含量显著正相关。本研究不仅为月季花色的分子育种提供帮助,同时也为月季花瓣中功能物质的开发提供借鉴。 展开更多
关键词 月季(Rosa spp.) 花色 花青苷 黄酮醇 胡萝卜素
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植物中靛蓝生物合成途径研究进展 被引量:12
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作者 张一鸣 黄元贞 +5 位作者 万会花 李泽鑫 孙伟 吴沙沙 翟俊文 米要磊 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期491-496,共6页
天然靛蓝是历史上最为悠久的染料之一,具有独特的化学特性,也是当今棉质布料的重要染料。同时,富含靛蓝类化合物的多种植物是我国许多传统的中药材的基原植物。靛蓝化合物具有多种生物和药理活性,包括抗惊厥、抗菌、抗真菌、抗病毒和抗... 天然靛蓝是历史上最为悠久的染料之一,具有独特的化学特性,也是当今棉质布料的重要染料。同时,富含靛蓝类化合物的多种植物是我国许多传统的中药材的基原植物。靛蓝化合物具有多种生物和药理活性,包括抗惊厥、抗菌、抗真菌、抗病毒和抗癌等。近年来有关靛蓝的生物合成途径研究已取得较大进展,该文从靛蓝的文化历史、靛蓝的生物合成途径及靛蓝合成途径中相关衍生物的药理活性来阐明靛蓝的价值,并且阐述靛蓝生物合成途中重要节点的最新研究进展,为天然靛蓝的开发利用奠定理论基础。 展开更多
关键词 靛蓝 药用价值 生物合成途径 研究进展
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基于UPLC-QQQ-MS/MS的工业大麻中6种大麻素类成分定量研究 被引量:10
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作者 李俊 米要磊 +10 位作者 王思嘉 朱雪雯 万会花 王思凡 杜伟 苏畅 马伟 陈士林 徐志超 孙伟 杨维 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期1163-1172,共10页
目的建立基于超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱(UPLC-QQQ-MS/MS)技术的工业大麻中6种大麻素类成分的定量分析方法,并利用该方法对9个火麻仁基原植物工业大麻植株3个不同部位(雌花、苞片、叶)中的大麻素类成分含量进行研究,为合理合法... 目的建立基于超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱(UPLC-QQQ-MS/MS)技术的工业大麻中6种大麻素类成分的定量分析方法,并利用该方法对9个火麻仁基原植物工业大麻植株3个不同部位(雌花、苞片、叶)中的大麻素类成分含量进行研究,为合理合法开发利用工业大麻,甄选商业化品种以及选育符合我国法规的高大麻二酚(cannabidiol,CBD)含量、低四氢大麻酚(tetrahydrocannabinol,THC)含量品种奠定基础。方法采用液质联用技术:Agilent Eclipse Plus C18色谱柱(50 mm×2.1 mm,1.8µm),流动相为0.1%甲酸水溶液(A)-甲醇(B),梯度洗脱,体积流量0.3 mL/min,多反应监测模式。结果以工业大麻中6种大麻素类成分大麻二酚、四氢大麻酚、大麻萜酚(cannabigerol,CBG)、大麻二醇酸(cannabidiolic acid,CBDA)、大麻萜酚酸(cannabigerolic acid,CBGA)和四氢大麻酚酸(tetrahydrocannabinolic acid,THCA)为研究对象,建立了基于UPLC-QQQ-MS/MS的定量方法。方法学验证结果显示:6种大麻素类成分线性良好,R2为0.9991~1.0000,准确度为0.29%~2.80%,精密度为0.84%~2.74%,加样回收率为99.36%~102.88%。样品分析结果显示:花和苞片中的6种大麻素类成分含量显著高于叶片中的含量,不同品种大麻中6种大麻素类成分在花、苞片和叶中的分布具有特异性。结论基于UPLC-QQQ-MS/MS所建立的大麻中6种大麻素类成分的定量分析方法,灵敏度高,准确性好,方法简单,适用于工业大麻中6种大麻素类成分的含量测定。 展开更多
关键词 UPLC-QQQ-MS/MS 工业大麻 大麻二酚 大麻萜酚 四氢大麻酚 大麻二酚酸 大麻萜酚酸 四氢大麻酚酸
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大麻中大麻素类化学成分及其分析方法研究进展 被引量:25
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作者 李俊 朱雪雯 +7 位作者 万会花 米要磊 王思凡 孟祥霄 杜伟 苏畅 孙伟 杨维 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2020年第24期6414-6425,共12页
大麻Cannabis sativa又名线麻、白麻、胡麻、野麻和火麻,为大麻科大麻属一年生草本植物,是我国传统经济作物,应用涉及医药、食品和化妆品等多个领域。大麻素类成分是大麻的主要活性成分,具有镇痛、抗炎、抗氧化、镇静、抗呕吐等功效。... 大麻Cannabis sativa又名线麻、白麻、胡麻、野麻和火麻,为大麻科大麻属一年生草本植物,是我国传统经济作物,应用涉及医药、食品和化妆品等多个领域。大麻素类成分是大麻的主要活性成分,具有镇痛、抗炎、抗氧化、镇静、抗呕吐等功效。根据化合物结构特点,对大麻中已报道的121个大麻素类成分进行了总结归纳,并在此基础上按分离技术对大麻素类成分的常用分析方法进行了综述,旨在为大麻资源的质量控制以及大麻的深入研究提供参考依据。 展开更多
关键词 大麻 大麻素类 大麻萜酚类 大麻环萜酚类 大麻环酚类 大麻艾尔松类 分析方法
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植物激素对类黄酮代谢调控机制研究进展 被引量:8
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作者 于江珊 张苗苗 +6 位作者 施江 杨雨 孟雪 薛建平 孙伟 万会花 盛玮 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第15期3806-3813,共8页
植物激素在植物生长的各个阶段都发挥着重要作用,它们不仅影响植物生长发育,而且调控植物次生代谢,可影响植物体内黄酮、黄酮醇、花青素等类黄酮化合物的合成。类黄酮化合物是一种广泛存在于自然界植物中的重要次生代谢产物,具有抗氧化... 植物激素在植物生长的各个阶段都发挥着重要作用,它们不仅影响植物生长发育,而且调控植物次生代谢,可影响植物体内黄酮、黄酮醇、花青素等类黄酮化合物的合成。类黄酮化合物是一种广泛存在于自然界植物中的重要次生代谢产物,具有抗氧化、抗菌、消炎等生物活性,在中医药及食品营养学领域具有广阔的应用前景。随着生物技术的发展,植物激素对类黄酮代谢的影响与调控已成为近年来的研究热点,该文综述了国内外关于常见植物激素如脱落酸、赤霉素、茉莉酸甲酯、水杨酸等对植物类黄酮代谢调控机制的研究进展,从分子角度探讨类黄酮次生代谢物形成和积累的机制,以期系统了解植物激素在类黄酮代谢过程中发挥的关键作用,不仅为生产上合理使用植物激素提高植物中类黄酮代谢产物的含量提供了科学指导,同时为研究激素对植物类黄酮代谢的调控机制提供参考。 展开更多
关键词 植物激素 类黄酮 药用植物
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药用植物大麻C2H2基因家族鉴定与表达分析 被引量:6
13
作者 刘美琦 孙伟 +6 位作者 孟祥霄 万会花 刘廷霞 孙嘉莹 王震 米要磊 马伟 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期1486-1496,共11页
C2H2型转录因子在植物生长发育及次生代谢调控中发挥重要作用,本文利用生物信息学从基因组层面鉴定大麻(Cannabis sativa L.)C2H2基因家族成员,基于大麻基因组数据及转录组数据,使用TBtools、MEGA软件以及NCBI、PlantTFDB、ExPASy、HMMS... C2H2型转录因子在植物生长发育及次生代谢调控中发挥重要作用,本文利用生物信息学从基因组层面鉴定大麻(Cannabis sativa L.)C2H2基因家族成员,基于大麻基因组数据及转录组数据,使用TBtools、MEGA软件以及NCBI、PlantTFDB、ExPASy、HMMSCAN、MEME、WoLFPSORT、PlantCARE等在线网站对其基因信息、染色体定位、进化关系、保守基序、共线性关系等进行分析。结果显示,大麻中含有30个C2H2型基因家族成员(CsC2H2-1~CsC2H2-30),分布在大麻的9条染色体上,氨基酸大小介于138~635个氨基酸,理论等电点介于5.85~9.52,蛋白质分子质量介于15909.48~68445.53 Da。转录组结果分析显示,CsC2H2在大麻Diku品种的雌花、苞片、叶、茎及不同品种雌花中表达量均存在差异。实时荧光定量PCR结果验证了CsC2H2-1、CsC2H2-5、CsC2H2-19在Diku品种的雌花及苞片中表达显著,为深入研究C2H2基因家族功能及大麻优质品种的选育提供理论参考。 展开更多
关键词 大麻 C2H2基因家族 生物信息学 系统进化 功能预测
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大麻GRAS转录因子全基因组研究 被引量:6
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作者 张苗苗 于江珊 +5 位作者 施江 杨雨 孟雪 孙伟 万会花 薛建平 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期1423-1433,共11页
目的GRAS转录因子在植物响应逆境胁迫和调控次生代谢方面起重要作用。为了研究GRAS转录因子在大麻素生物合成途径中的潜在功能,对大麻Cannabis sativa基因组中的GRAS基因进行全基因组鉴定、表达模式和功能分析。方法使用NCBI、PlantTFDB... 目的GRAS转录因子在植物响应逆境胁迫和调控次生代谢方面起重要作用。为了研究GRAS转录因子在大麻素生物合成途径中的潜在功能,对大麻Cannabis sativa基因组中的GRAS基因进行全基因组鉴定、表达模式和功能分析。方法使用NCBI、PlantTFDB、ExPASy等在线网站以及TBtools、MEGA、DNAMAN等软件对CsGRAS基因进行鉴定、可视化分析和功能预测。结果在大麻基因组中共鉴定出44个GRAS基因,在10条染色体上不均匀分布,基因之间存在串联重复现象;CsGRAS基因编码氨基酸数目为436~757,等电点介于4.77~7.24,相对分子质量为49164.54~85748.52;亚细胞定位分析显示CsGRAS主要定位在细胞核中;系统发育分析将CsGRAS分为10个亚家族;CsGRAS基因启动子区含有光响应元件、GA响应元件和MeJA响应元件等;CsGRAS在不同品种不同组织中表达量差异显著,其中CsGRAS4、CsGRAS13、CsGRAS15、CsGRAS17和CsGRAS44在花中特异性高表达,推测其可能调控大麻素生物合成。结论全面分析了大麻基因组中的GRAS家族,有助于更好地挖掘GRAS基因在大麻的大麻素生物合成调控和响应逆境胁迫中的作用。 展开更多
关键词 大麻 GRAS基因家族 基因表达 系统进化 功能预测
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中药火麻仁基原植物大麻LBD基因家族成员的鉴定与表达分析 被引量:6
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作者 王震 米要磊 +4 位作者 孟祥霄 万会花 季爱加 孙伟 马伟 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第22期5477-5486,共10页
LBD(lateral organ boundaries)转录因子在植物生长发育和次生代谢调控中起着重要作用。为了发掘大麻LBD基因的功能,该研究在基因组和转录组水平上利用生物信息学手段,对大麻LBD基因家族进行系统鉴定,并对其表达模式进行分析。结果表明... LBD(lateral organ boundaries)转录因子在植物生长发育和次生代谢调控中起着重要作用。为了发掘大麻LBD基因的功能,该研究在基因组和转录组水平上利用生物信息学手段,对大麻LBD基因家族进行系统鉴定,并对其表达模式进行分析。结果表明,大麻LBD基因家族含有32个成员,可分成2大类,7亚族,ClassⅠ分为5个亚族分别是ClassⅠ_a至ClassⅠ_e,ClassⅡ分为2个亚族分别是ClassⅡ_a和ClassⅡ_b;理化性质分析显示,大麻LBD基因家族编码的氨基酸数目为172~356,等电点为4.92~9.43,相对分子质量为18 862.92~40 081.33,大部分成员定位于细胞核中;染色体定位显示32个成员不均一地分布在大麻的10条染色体上;LBD转录因子结构域、基因结构和Motifs相对保守,不同类成员特征相近;基因上游启动子区含有多种植物激素及环境因子相关的顺式作用元件,表明LBD基因的表达可能会受到激素和外界环境因素的诱导;大麻LBD基因在ZYS品种(低四氢大麻酚,高二氢大麻酚)茎、叶、花的表达模式不同,LBD基因家族成员主要在ZYS品种的花和茎中表达,而在叶中表达的成员很少;ClassⅡ成员CsLBD21和CsLBD23在花和茎中表达,CsLBD8和CsLBD18在花、茎和叶中均有表达,这些基因可能参与大麻的生长发育发育进而影响大麻素的生物合成。该研究为后续大麻LBD基因家族的功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 大麻 LBD基因家族 基因表达 系统进化
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工业大麻PP2C基因家族成员鉴定及表达分析 被引量:2
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作者 蔡晓雪 王思凡 +7 位作者 米要磊 万会花 曹雪 孙伟 苏畅 陈士林 徐艳琴 陈伟强 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第19期162-172,共11页
目的:2C类蛋白磷酸酶(PP2C)参与植物多种信号转导途径。其通过负调节丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路参与植物多种胁迫响应和代谢产物合成的调控。对工业大麻PP2C(CsPP2Cs)基因家族进行全基因组鉴定及表达分析,以期为研究CsPP2Cs在工... 目的:2C类蛋白磷酸酶(PP2C)参与植物多种信号转导途径。其通过负调节丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路参与植物多种胁迫响应和代谢产物合成的调控。对工业大麻PP2C(CsPP2Cs)基因家族进行全基因组鉴定及表达分析,以期为研究CsPP2Cs在工业大麻生长发育过程中的生物学功能提供参考。方法:利用MEGA-X构建系统发育树,利用ExPASy、WoLF PSORT、MEME、Batch-CD-Search、PlantCare、TBtools分别对CsPP2Cs蛋白理化性质、亚细胞定位、保守基序、蛋白结构域、CsPP2Cs基因启动子顺式作用元件和与拟南芥PP2Cs(AtPP2Cs)基因的共线性进行预测和分析。通过转录组数据和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)对CsPP2Cs基因表达进行分析和验证。结果:从工业大麻全基因组中共鉴定出52个具有保守结构域的PP2Cs,基因编码蛋白长度244~1089个氨基酸不等,相对分子质量在26.76~122.53 kDa,亚细胞定位主要分布于细胞核、细胞质和叶绿体。系统进化树将52个CsPP2Cs分为10个亚族和5个未分组成员。共线性分析发现,工业大麻与拟南芥存在7对同源基因。顺式元件预测显示光响应元件和脱落酸元件居多。基因表达热图显示,相同基因在各组织中存在差异表达。对部分基因进行Real-time PCR验证,进一步证实了转录组数据的准确性。同时,可变剪切分析表明部分CsPP2Cs基因在进化过程中存在可变剪切本。结论:从全基因组层面对CsPP2Cs进行了分析和预测,提示CsPP2Cs可能广泛参与工业大麻的多种生物学过程,为进一步研究CsPP2Cs功能奠定了基础。 展开更多
关键词 工业大麻 2C类蛋白磷酸酶(PP2C)基因家族 成员鉴定 功能预测 表达分析
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汉麻聚酮合酶基因家族成员鉴定与表达分析 被引量:2
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作者 朱雪雯 米要磊 +8 位作者 孟祥霄 陈伟强 王思凡 曹雪 陈士林 徐志超 苏畅 孙伟 万会花 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期886-897,共12页
目的在从全基因组层面对汉麻Cannabis sativa聚酮合酶(polyketide synthases,PKSs)基因家族进行鉴定和功能分析,为解析汉麻次生代谢产物的合成与积累奠定理论基础。方法基于已发布的高质量汉麻基因组,利用生物信息学工具对汉麻PKS基因... 目的在从全基因组层面对汉麻Cannabis sativa聚酮合酶(polyketide synthases,PKSs)基因家族进行鉴定和功能分析,为解析汉麻次生代谢产物的合成与积累奠定理论基础。方法基于已发布的高质量汉麻基因组,利用生物信息学工具对汉麻PKS基因家族进行鉴定并对其物化性质、基因结构、蛋白构象以及表达模式进行分析,利用Alphafold算法对关键PKS蛋白结构进行预测。结果共鉴定出9个汉麻PKSs(CsPKS1~CsPKS9),分布在5条染色体上。通过对汉麻和其他物种PKS的系统发育分析,CsPKSs主要被分为3组:group1包括Cs PKS2~CsPKS4与花药特异性CHS样酶(anther specific chalcone synthase-like,ASCL)同源;group2含有CsPKS1和CsPKS5~CsPKS8为类CHS超家族(chalcone synthase like,CHSL)与苯戊酮合酶(valerophenone synthase,VPS)和茋类合酶(stilbene synthase,STS)等关系较密切;group 3仅含有CsPKS9,为查耳酮合成酶(chalcone synthase,CHS)参与类黄酮的合成。其中,CsPKS1和CsPKS7串联重复,是汉麻中酚萜类化合物合成通路中的橄榄醇合成酶(olivetolsynthases,OLS)。此外,CsPKS5和CsPKS8可能参与汉麻茋类化合物的生物合成。CsCHS的功能在进化中相对保守,而CHS-like的CsPKS的功能出现了分化。通过对汉麻不同组织部位和不同品种腺毛的RNA-seq数据分析,汉麻PKSs基因的表达存在组织特异性,尤其与酚萜类、类黄酮、茋类次生代谢产物密切相关的基因在雌花和苞片中特异性表达。结论为深入研究汉麻PKS基因家族的功能提供了方向,为进一步阐明汉麻中萜酚类化合物的生物合成机制和CsPKSs在汉麻中的生理功能奠定基础,并对开发新聚酮化合物药用资源提供理论基础。 展开更多
关键词 汉麻 基因家族 聚酮合酶 生信分析 基因表达 次生代谢产物
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大麻遗传转化研究进展 被引量:2
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作者 王思凡 蔡晓雪 +6 位作者 孟祥霄 万会花 曹雪 米要磊 徐艳琴 孙伟 陈伟强 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期2882-2889,共8页
自从乌拉圭、加拿大和美国部分州将中药“火麻仁”的基原植物大麻Cannabis sativa合法化以来,工业大麻的市场价值逐年提高。高市值推动大麻基础研究迅猛发展,其遗传转化研究也实现了质的突破。目前,发根农杆菌介导的大麻毛状根转化、根... 自从乌拉圭、加拿大和美国部分州将中药“火麻仁”的基原植物大麻Cannabis sativa合法化以来,工业大麻的市场价值逐年提高。高市值推动大麻基础研究迅猛发展,其遗传转化研究也实现了质的突破。目前,发根农杆菌介导的大麻毛状根转化、根癌农杆菌和纳米材料介导的大麻瞬时转化、病毒介导的基因沉默和大麻稳定转化均已实现,但是稳定遗传转化效率仍然不高。而建立高效的大麻遗传转化体系,不但可加速大麻分子生物学的研究,还可用于大麻新品种的创制。综述大麻遗传转化的研究进展,以期为深入开展大麻遗传转化提供参考。 展开更多
关键词 大麻 遗传转化 瞬时转化 稳定转化 基因沉默 纳米材料
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中药火麻仁基原植物大麻全基因组YABBY转录因子分析 被引量:2
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作者 孙嘉莹 王震 +5 位作者 米要磊 孟祥霄 万会花 闫赟 孙伟 马伟 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期124-131,共8页
目的:分析大麻(Cannabis sativa)YABBY转录因子家族序列特征、染色体定位、基因结构、保守基序、系统进化和基因的差异表达;为深入研究YABBY基因功能提供分子基础,为工业大麻优良品种选育提供理论支撑。方法:通过生物信息学手段对火麻... 目的:分析大麻(Cannabis sativa)YABBY转录因子家族序列特征、染色体定位、基因结构、保守基序、系统进化和基因的差异表达;为深入研究YABBY基因功能提供分子基础,为工业大麻优良品种选育提供理论支撑。方法:通过生物信息学手段对火麻仁基原植物大麻YABBY基因家族进行鉴定和分析,使用PlantTFDB,ExPASy,MEME,WoLFPSORT,PLANTCARE等在线网站及TBtools,MEGA,DNAMAN等软件进行YABBY预测和分析并进行可视化作图。结果:大麻中含有6个YABBY基因成员,分布在5条染色体上,其中5个定位在细胞核,1个定位在胞外;氨基酸数目185~235个,等电点介于5.05和9.34,相对分子质量在20 582.45~26 282.7 Da;所有CsYABBY蛋白都包含有锌指结构和YABBY两个保守结构域,CsYABBY基因启动子区具有多种与胁迫相关的顺式作用元件,并且在不同部位和不同品种的表达量存在差异。结论:该基因家族的表达可能会受到激素和外界环境因素影响,大麻YABBY基因具有组织表达特异性,花中特异性高表达的基因可能对大麻雌花的发育有重要调控作用,YAB1和YAB5亚族的CsYABBY可能参与大麻素的合成过程。 展开更多
关键词 生物信息学 大麻 YABBY基因 保守分析 进化分析
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三七药材禁用农药残留的检测研究 被引量:6
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作者 冯红 李金柱 +4 位作者 肖践丽 王晓东 陆文亮 万会花 陈士林 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期1980-1988,共9页
目的:建立中药材三七中33种禁用农药残留的检测方法。方法:以乙腈为溶剂,高速匀浆提取。检测方法:气相色谱-串联质谱(GC-MS/MS)法,采用DB17MS弹性石英毛细管柱(30 m×0.25 mm×0.25μm),电子轰击离子源(EI);超高效液相色谱-串... 目的:建立中药材三七中33种禁用农药残留的检测方法。方法:以乙腈为溶剂,高速匀浆提取。检测方法:气相色谱-串联质谱(GC-MS/MS)法,采用DB17MS弹性石英毛细管柱(30 m×0.25 mm×0.25μm),电子轰击离子源(EI);超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法,采用十八烷基硅烷键合硅胶柱Hypersil GOLD aQC18(150 mm×2.1 mm,3μm),以0.1%甲酸水溶液(含5 mmol·L^(-1)甲酸铵)和0.1%甲酸乙腈溶液(含5 mmol·L^(-1)甲酸铵)(95∶5)为流动相,梯度洗脱,电喷雾离子源(ESI),正离子模式下多反应监测(MRM)。结果:GC-MS/MS法检测的禁用农药质量浓度在20~600 ng·mL^(-1)范围内线性关系良好,相关系数在0.9903以上,回收率在85.0%~127.6%,精密度RSD(n=6)在1.3%~25.0%;UPLC-MS/MS法检测的禁用农药质量浓度在20~600 ng·mL^(-1)范围内线性关系良好,相关系数在0.9911以上,回收率在76.2%~123.7%,精密度RSD(n=6)在1.0%~13.0%。基于GC-MS/MS和UPLC-MS/MS分析方法,60批样品中共检出12种农药,其中特丁硫磷检出率最高为10.8%;农药残留超出限量范围的有特丁硫磷、苯线磷、氯唑磷、地虫硫磷、杀虫脒,其中杀虫脒超出限量值的3倍。结论:本方法能快速有效地检测中药材三七中的农药多残留,为其他药用植物中的农残检测提供借鉴,为三七规范化种植提供依据。 展开更多
关键词 中药材 三七 禁用农药残留 快速样品处理法 超高效液相色谱-串联质谱法 气相色谱-串联质谱法
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