艾草β-石竹烯合成酶AaCPS基因克隆、亚细胞定位与表达分析

目的对艾草Artemisia argyiβ-石竹烯合成酶基因(β-caryophyllene synthase,AaCPS)进行全长克隆、亚细胞定位与表达模式分析,为艾草倍半萜生物合成途径中的基因功能解析奠定基础。方法基于艾草转录组数据筛选注释为CPS的基因,采用PCR方法克隆获得目的基因c DNA的全长,对其编码区进行生物信息分析;构建原核表达载体,转化至大肠杆菌中进行诱导表达;构建绿色荧光蛋白(GFP)融合表达载体,利用农杆菌侵染烟草叶片的瞬时表达法进行亚细胞定位分析;运用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)技术分析不同采收期(4月、5月、6月、7月)AaCPS基因表达模式,HS-SPME-GC-MS测定β-石竹烯含量并进行相关性分析。结果从艾草中克隆得到的AaCPS基因开放阅读框(Open reading frame,ORF)为1647 bp,编码548个氨基酸,相对分子质量为63667 Da,等电点为5.40,含Terpene_synth和Terpene_synth_C保守结构域。系统进化分析显示AaCPS蛋白与同科植物黄花蒿CPS蛋白的亲缘关系最近。SDS-PAGE结果证实在75000-120000 Da出现目的蛋白条带(包含28132 Da的标签蛋白),说明所获基因能够成功表达出蛋白;亚细胞定位显示其编码蛋白位于细胞质中;实时荧光定量PCR结果表明AaCPS基因表达量呈上升趋势,在7月达到最高。HS-SPME-GC-MS结果显示β-石竹烯含量从4月逐渐升高,在6月达到最高,与4-6月AaCPS基因表达量趋势总体一致。结论通过对AaCPS基因的克隆与分析,为进一步研究该基因在艾草倍半萜物质生物合成途径的功能鉴定奠定基础。

石上柏化学成分研究

目的研究石上柏Selaginella doederleinii Hieron.的化学成分。方法石上柏80%乙醇提取物采用大孔树脂、硅胶、Sephadex LH-20、半制备HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从中分离得到18个化合物,分别鉴定为对羟基苯甲酸(1)、间羟基苯甲酸(2)、3-(3-羟基-苯基)-丙酸甲酯(3)、丁香脂素(4)、肉桂酸(5)、邻苯二酚(6)、detetrahydroconidendrin(7)、5,7-二羟基色原酮(8)、indole-3-carbaldehyde(9)、对羟基苯甲醛(10)、N-benzoyl-L-phenylalaninol(11)、unciflavone D(12)、阿魏酸(13)、loddigesiinol D(14)、丁香醛(15)、对甲氧基苯甲酸(16)、unciflavone E(17)、芹菜素(18)。结论化合物1~3、5~11、13~16为首次从该植物中分离得到。

湖北省卷柏科药用植物调查与研究

目的:掌握湖北省卷柏科药用植物的种类、分布、疗效应用。方法:通过野外调查采集标本,参考已收藏的部分标本及文献,进行分类鉴定研究。结果:发现湖北省卷柏科植物共有15种,其中药用14种,新记录1种;掌握了其资源分布与疗效应用;对部分种的形态描述作了补充。结论:研究结果为该科药用植物的开发推广利用提供了资源学基础。

江南卷柏的显微与HPLC指纹图谱鉴定

江南卷柏是卷柏科卷柏属植物江南卷柏Selaginella moellendorffi Hieron的干燥全草，为常用中草药与民族药。云南彝族主要用于治疗黄疸型肝炎、肺结核咯血、全身浮肿等病症。鄂西土家族尚用于癌症、腹泻、淋病、小儿惊风、吐血、便血、崩漏、痔疮出血．外用治烧烫伤、外伤出血。以本品为原料制得的江南卷柏片治疗原发性血小板减少性紫癜、过敏性紫癜、继发性紫癜及多种出血症均有良效。

火炭母与粗毛火炭母的比较鉴定研究

通过对药材火炭母的2个基源(蓼科植物火炭母及其变种粗毛火炭母的全草)进行比较鉴定研究,采用性状、显微鉴定及薄层色谱法研究药材的鉴别特征,比较两者的不同,结果表明:两者茎横切面组织特征基本一致,但粉末特征和薄层色谱有较明显区别;与火炭母比较,粗毛火炭母粉末有大量多细胞非腺毛;薄层色谱中槲皮素斑点明显较小较模糊,其他斑点也互有一定差异.研究结果为火炭母药材的应用提供了鉴定依据,并建议2010年版中国药典只收载资源分布较广的基源火炭母一种.

近缘种药材垂盆草与佛甲草的比较鉴定

目的:对属于近缘种、外形极似的药材垂盆草与佛甲草进行鉴定比较研究。方法:采用显微鉴定法研究两者茎的横切面及粉末的显微特征;采用薄层色谱比较两者的异同。结果:垂盆草与佛甲草茎横切面组织特征十分相似,但在导管数目、髓部形状及含紫红色物质的细胞数目等有显著差异。对8月份样品而言,前者导管数一般仅有35-58个,髓部多呈三角形;后者则多达75-150个,髓部呈"Y"形。两者的薄层色谱也有较大不同。此外,不同采集期的样品在显微特征上存在某些明显差异。结论:研究结果为两种药材的应用提供了鉴定参考依据,并提示近缘植物药的显微鉴定应注意排除共性。

5种卷柏科药材的显微与薄层色谱鉴定

目的:建立5种卷柏科药材(卷柏、垫状卷柏、江南卷柏、翠云草、薄叶卷柏)的显微与薄层色谱鉴定方法。方法:对茎横切面进行显微观察及对全草进行薄层色谱研究,通过比较,确立各种药材的鉴别特征。结果:5种药材均有稳定的显微特征及各自的薄层色谱。结论:研究结果为5种卷柏类药材的应用提供了鉴别依据;并说明比较研究是中药鉴定学科中不可忽视的基本方法。

10种卷柏属植物茎的解剖学研究及其分类鉴定意义

对湖北省及邻近地区产10种卷柏属(Selaginella)植物茎进行了比较解剖研究。结果表明它们在解剖学方面既存在共性特征,又各有其自身的特征。其共性特征表现在:(1)表皮细胞壁多少增厚。(2)皮层通常具机械组织(纤维、厚壁细胞,通常仅有厚壁细胞)。(3)内皮层以内有大型气室,中柱由多数横桥悬于气室中。(4)中柱鞘由1至数层薄壁细胞环列而成。(5)维管束周韧型。但10种卷柏属植物茎的横切面外侧是否具脊状突起,皮层是否具纤维,皮层外侧是否具厚壁细胞以及厚壁细胞的层数,构成横桥的薄壁细胞的形态、数目,气室及中柱的形态、数目,木质部形态等方面具有种间差异,可作为分类鉴定的重要依据。同时,利用茎的解剖学特征,可辅助解决某些仅靠形态学性状难以解决的分类鉴定问题。根据其相似程度,还可进行部分种间亲缘关系的分析。

关于我国民族药材标准及其研究制定的若干思考

本文初步论述了加强我国民族药材工作的重要意义,根据我国民族药材标准工作的成绩与不足,对纳入标准的品种范围,标准研究制定的总体原则,标准中项目、内容与指标的确立,以及标准具体研究制定中需注意的几个问题提出了自己的观点。并从宏观上就加强我国民族药材标准化建设提出了几点积极性建议。

鄂西医院用民族药品种调查研究(Ⅳ)

为考察鄂西土家族地区咸丰县、宣恩县和利川市中医院民族药及其临床应用情况,规范品种的应用,通过对医院药房的民族药材(饮片)品种进行样品收集、民族医生访谈、原植物标本采集鉴定、药材样品鉴定和资料整理分析,总结了第四批12种药材的名称、功效、中医院使用情况,纠正了某些品种文献记载及使用中的相关问题,明确了8种药材的基源,首次对“龙竹”“野葡萄藤”“边芥”药材的性状进行了观察记述.研究结果可为这些土家药在医院的规范使用和深入研究提供参考.

土家药资源调查概况

通过查阅我国土家族地区药物资源调研文献资料和相关地方药材标准,结合对实地调研工作的梳理,调查研究了我国湘、鄂、黔等土家族地区药物资源的种类.结果表明:我国土家族地区药物资源种类约有2600种,较常用及有特色的土家药约有600个品种,目前医疗机构常用土家药有170余个品种.上述结果可为土家药资源种类的研究和开发利用提供详实的基础信息.

不同采收期木芙蓉叶总黄酮的含量测定

为比较不同采收期木芙蓉叶药材（包括近枯萎的黄色老叶）的总黄酮含量，以芦丁为对照品，采用分光光度法研究及测定不同采收期木芙蓉叶的总黄酮含量．结果表明：芦丁浓度在7．77～155．4Izg／mL范围内与吸光度呈良好的线性关系，其平均加样回收率为100．91％，RSD为1．11％．木芙蓉叶的总黄酮含量从6月中旬至12月中旬递增，且同一采收期成熟绿叶（干品）的总黄酮含量普遍高于黄叶．于冬初采摘总黄酮含量最高．该含量测定方法简单、可靠，可为木芙蓉叶的质量控制及合理地采收和利用木芙蓉叶资源提供一定的科学依据．

薄叶卷柏及其变异类型的鉴定研究

目的对薄叶卷柏及其变异类型进行比较鉴定研究。方法分别采用形态学、解剖学方法研究两者的植物形态、药材性状及其显微特征;采用薄层色谱、近红外漫反射光谱比较两者的异同。结果薄叶卷柏及其变异类型在形态解剖上存在较小但稳定的差异;其茎的显微构造极为特殊(有气室、横桥、多体中柱等特征);两者薄层色谱与近红外二阶导数光谱也略有不同。结论研究结果为其药材资源的开发利用提供了鉴定依据;其变异类型宜作为薄叶卷柏的一个变种处理。

10种卷柏属药用植物的红外光谱鉴别及部分种间亲缘关系探讨

利用红外光谱技术对卷柏属10种药用植物进行了比较鉴定研究.结果表明,10种植物样品通常具有10个共有红外吸收峰,但又具有各自的特征吸收峰(卷柏、垫状卷柏、疏叶卷柏、细叶卷柏、异穗卷柏等),或所有吸收峰的组合具有种间特征性.可利用整体峰形及吸收峰的数目、位置(cm^(-1))、强度等特征,尤其是指纹区(1 250～400 cm^(-1))的上述特征,对各个种进行有效的鉴别.根据光谱图的相似程度,推测异穗卷柏Selaginella heterostachys、细叶卷柏S.labordei及伏地卷柏S.nipponica之间具有较密切的亲缘关系,江南卷柏S.maellendorffii与中华卷柏S.sinensis的关系也较接近;并结合形态解剖学等方面的差异,提出将薄叶卷柏的变异类型作为它的一个变种处理.研究证实,红外光谱操作简便、快速,可有效辅助用于近缘植物种的分类鉴定,辅助解决鉴定中的某些疑点问题,推断部分种间的亲缘关系.

异穗卷柏的显微与近红外光谱鉴定研究

对两种不同类型的异穗卷柏(Selaginella heterostachysBaker)药材的外观形态、孢子与茎的显微特征及近红外光谱特征进行了比较研究。结果表明:两类异穗卷柏的植株性状虽有明显不同,但其孢子形态、茎的解剖特征及近红外漫反射光谱特征一致。研究结果为异穗卷柏物种分类与药材鉴定提供了依据。

民族药翠云草的本草考证

目的:对民族药翠云草的基源、药用历史及疗效记载等进行本草考证,为对其深入研究与临床应用提供一定的历史依据.方法:查阅古今相关文献,利用本草学以及植物形态学、植物生态学等知识进行研究考证.结果:古代本草记载的翠云草与今用翠云草(卷柏科)物种一致.该品早期主要用于治疗喉痈、吐血等症,可解火毒,现代尤其是我国南方少数民族地区主要用于治疗黄疸、痢疾、肺热咳嗽、咽喉肿痛、跌打损伤及多种出血等症.结论:古今药用的翠云草均来源于卷柏科植物翠云草的干燥全草,其药用历史至少近400年,研究结果将为翠云草的研究开发及临床应用提供本草学依据.

鄂西土家族常用植物药(豆科和虎耳草科)的调查研究

为调查整理鄂西土家族常用的隶属于豆科和虎耳草科的植物药种类和民族医疗应用,通过走访民族医生、野外实地调查、标本鉴定和资料整理分析,获得的研究结果表明:鄂西土家族常用的此两科18种植物药中,豆科植物药有13种,虎耳草科植物药5种,其中14种植物药的某些药用经验在国内药学专著未见记载.此调研结果为上述植物药的深入研究、开发利用提供了珍贵的实地应用资料.

垂盆草及其同属(景天属)药用种的民族医疗应用

报道了垂盆草及其同属(景天属)药用植物的民族应用概况,涉及该属在世界范围内的23个种(含变种,下同),其中我国少数民族包括土家、苗、壮、彝、瑶、朝鲜、藏、畲、白、纳西、普米等民族药用的有17个种。这些民族药用种类多具有清热解毒(抗炎)、止血、收敛(促进伤口愈合)等作用,广泛用于多种炎症、各种出血、烧烫伤、疮痈疔毒等的治疗,有深入研究及开发推广应用的价值。

艾叶的鉴定、品质与国际标准研究概况

目的:对近10年来艾叶的鉴定、品质研究及国际标准制定研究等成果进行了概述,为药用与灸用艾叶的质量保障、质量控制及我国艾叶资源的合理利用提供重要参考依据.方法:广泛查阅文献,总结前人研究成果,并以本课题组近6年来收集的艾叶大样本及获得的大量相关实验研究结果和艾叶国际标准研究成果为主,进行整理概述,对某些文献记载的疏漏进行修订与完善.结果:概述了艾叶的鉴别特征和质量分析方法有关问题,总结了产地、环境因素及栽培管理加工条件对艾叶品质的影响,介绍了艾叶国际标准(ISO 20759:2017)及相关标准研究制定情况.结论:本文为艾叶的规范化生产加工、艾叶的品质提升及艾叶资源的合理利用提供了重要参考,为艾叶的鉴定、质量评价与质量控制提供了重要依据.艾叶国际标准的颁布,有助于促进我国艾产业的发展,推动艾产品的国际贸易.