全自动毛细管电泳仪在新生儿α珠蛋白生成障碍性贫血筛查中的应用

目的探讨全自动毛细管电泳仪在新生儿α珠蛋白生成障碍性贫血筛查中的应用价值。方法使用全自动毛细管电泳仪对45863例新生儿脐血标本进行血红蛋白(Hb)电泳分析,检测HbA、HbF、HbA2和异常Hb的含量,对筛查表型阳性的病例召回进行基因分析。结果 45863例新生儿脐血标本中检测出巴特血红蛋白(HbBart′s)阳性者2964例,筛查阳性率6.46%(2964/45863);召回其中1278例行基因分析,1173例确诊为α珠蛋白基因缺失,符合率91.8%。确诊病例以标准型为主,占64.4%;基因分型以--SEA/αα最为常见。静止型的HbBart′s含量95%置信区间为0.13%～0.97%,标准型HbBart′s含量95%置信区间为1.28%～5.92%,HbH病HbBart′s含量95%置信区间为8.32%～30.28%,HbBart′s水肿胎HbBart′s含量高于80%。结论全自动毛细管电泳分析技术与基因分析有良好的一致性,根据HbBart′s含量的多少可初步进行α珠蛋白生成障碍性贫血的临床分型。

滤纸干血片法毛细管电泳Hb Bart′s带筛查新生儿α-珠蛋白生成障碍性贫血的应用价值评价

目的评估滤纸干血片毛细管电泳技术检测Hb Bart′s带在新生儿期筛查α-珠蛋白生成障碍性贫血的临床应用价值。方法对2 987例新生儿足跟血标本应用滤纸干血片毛细管电泳技术检测Hb Bart′s带水平并同时做基因分析,采用四格表法分析Hb Bart′s带对α-珠蛋白生成障碍性贫血的筛查价值。结果共检出Hb Bart′s带阳性标本131例,筛查阳性率为4.39%(131/2 987)。经基因分析,共检出2类6种α-珠蛋白生成障碍性贫血基因共226例。Hb Bart′s带对α-珠蛋白生成障碍性贫血诊断敏感度为50.00%(113/226),假阳性率为0.65%(18/2 761);特异性为99.35%(2 743/2 761);假阴性率(即漏诊率)为50.00%(113/226);其中Bart′s带对H病的筛查敏感度高达100.00%,标准型α-珠蛋白生成障碍性贫血的筛查敏感度为90.99%(101/111),对-α(3.7)/αα、-α(4.2)/αα静止型及非缺失型α-珠蛋白生成障碍性贫血的筛查敏感度较低。结论滤纸干血片毛细管电泳Hb Bart′s带在新生儿期筛查α-珠蛋白生成障碍性贫血有很高的特异性。对H病及标准型α-珠蛋白生成障碍性贫血亦有较高的筛查敏感度,但是对静止型及非缺失型α-珠蛋白生成障碍性贫血的筛查价值有限。

滤纸干血片毛细管电泳技术在新生儿α-珠蛋白生成障碍性贫血筛查中的应用

目的探讨干血片毛细管电泳技术在新生儿α-珠蛋白生成障碍性贫血(以下简称α-地贫)筛查中的应用价值。方法使用干血片毛细管电泳仪对46 718例新生儿足跟血滤纸干血片标本进行血红蛋白(Hb)电泳分析,检测HbA、HbF、HbA2和异常Hb的水平,对筛查表型阳性的病例召回进行基因分析。结果 46 718例新生儿足跟血滤纸干血片标本中检测出巴特血红蛋白(Hb Bart′s)阳性者2 598例,筛查阳性率5.56%(2 598/46 718);召回544例经基因分析确诊477例α-地贫基因携带者,故Hb Bart′s带筛查与基因确诊的符合率为87.68%(477/544)。进一步分析其临床表型与Hb Bart′s水平的关系可见,随着临床表型的加重,Hb Bart′s水平逐渐增加,且差异有统计学意义(P=0.000)。结论滤纸干血片毛细管电泳分析技术与基因分析有较好的一致性,可根据Hb Bart′s水平的多少初步判断α-地贫的临床分型。

全自动毛细管电泳仪在成人珠蛋白生成障碍性贫血筛查中的应用评价

目的探讨全自动毛细管电泳仪在成人珠蛋白生成障碍性贫血筛查中的应用价值。方法使用法国Sebia公司的CapillarYs2全自动毛细管电泳仪对18003例成人血标本进行血红蛋白电泳分析，检测HbA，HbF，HbA2和异常血红蛋白含量，对筛查表型阳性的病例召回进行基因分析。结果18003例成人标本筛查出a珠蛋白生成障碍性贫血表型阳性者2226例，筛查阳性率12．36％，其中召回1070例行基因分析，626例为α珠蛋白基因缺失，符合率58．50％；B珠蛋白生成障碍性贫血表型阳性者1329例，筛查阳性率7．38％，其中召回733例行基因分析，710例为β珠蛋白基因突变，符合率96．86％。结论全自动毛细管电泳作为一种新型液相分离技术，具有快速、灵敏度高、分辨率高等优点，能对HbA2进行准确的定位及定量，可初步区分α，β珠蛋白生成障碍性贫血，有效筛出高危患者，全自动毛细管电泳分析技术与基因分析有良好的符合性。为珠蛋白生成障碍性贫血的诊断提供重要依据。

新生儿先天性肾上腺皮质增生症筛查中17羟孕酮切值的建立

目的回顾性分析2010年1月-2010年9月，我院新生儿先天性肾上腺皮质增生症（CAH）的筛查数据，初步探讨不同性别、出生孕周及体重的新生儿17-羟孕酮（17-OHP）分布情况，并结合临床确诊病例，设定合理的筛查切值。方法采用时间分辨荧光免疫分析方法检测新生儿末稍血17-OHP浓度，采用百分位数法确定切值。结果新生儿筛查的17-OHP检测水平呈偏态分布；不同性别、体重及孕周的17-OHP亦有显著性差异；根据稳健回归统计发现孕周与170HP的相关性最好，所以在设定切值时分设早产儿和足月儿即可。早产新生儿（〈37周117-OHP的99％百分位数值为66．1nmol／L；正常孕周（≥37周）新生儿17-OHP的99％百分位数值为26．6nmol／L，与早产新生儿组差异有显著性（P〈0．01）。本文跟踪统计了从2010年1月到2011年8月间筛查的88061例活产新生儿，一共确诊了17例CAH，其中失盐型2例，发病率为1／44030；单纯男化型1例，发病率为1／88061；非典型14例，发病率为1／6290。结论中山地区的CAH发病率明显低于全国水平。用统一的17-OHP切值30nmol／L对新生儿CAH筛查结果有一定影响，建议早产儿筛查切值为60nmol／L，以减少假阳性率和召回率。

ADRB2基因rs1042713位点多态性与中国人群哮喘易感性关系的荟萃分析

目的：应用meta分析的方法综合评价ADRB2（β-2肾上腺素能受体）基因的SNP位点[Arg16Gly（A46G,rs1042713）]多态性与中国人群哮喘易感性的关系。方法：检索Pubmed、Embase、Web of Knowledge、中国知网、万方、维普等数据库,收集研究ADRB2基因多态性与中国汉族人群哮喘易感性的相关文献。采用Stata12.0软件对符合纳入标准的研究做meta分析。结果：共纳入12篇文献,累计哮喘病例2 193例,对照组2 033例,所有入选文献均满足Hardy-Weinberg遗传平衡定律。Meta分析结果显示,中国人群ADRB2基因rs1042713位点突变基因G携带者（GG＋GA）的哮喘发病风险较野生型纯合子（AA）比较,总体并未显著增加（OR=1.08,95%CI=0.82~1.44）,但亚组分析显示,G携带者儿童哮喘的发病风险相对增高（OR=1.69,95%CI 0.99~2.87）,而成人哮喘的发病风险则相对降低（OR=0.88,95%CI 0.68~1.15）。结论：ADRB2基因rs1042713位点基因多态性与中国儿童哮喘易感性存在一定的相关性,携带G突变基因者可相对增加儿童哮喘的患病风险。

联合检测促甲状腺素及游离甲状腺素筛查新生儿先天性甲状腺功能减低症

目的初步探讨联合检测干血滤纸片中促甲状腺素(TSH)及游离甲状腺素(FT4)水平筛查新生儿先天性甲状腺功能减低症(CH)的临床意义。方法对2013年6月至2013年12月出生的活产新生儿,采用时间分辨荧光免疫分析法联合检测干血滤纸片中TSH及FT4水平;对筛查阳性者再采血检测血清TSH及FT4水平,并与干血滤纸片法结果进行比较。结果共筛查新生儿31 199例,确诊CH 12例,发生率1/2 600,高TSH血症4例,未检测到垂体性甲状腺功能减低症。筛查确诊CH新生儿的血清TSH及FT4的检测结果与干血滤纸片检测结果一致,差异无统计学意义(P>0.05)。结论联合检测干血滤纸片中TSH及FT4水平可用于新生儿CH筛查,并有助于早期诊断与治疗,以及对中枢性CH的筛查。

血清AFU对原发性肝癌诊断价值的meta分析

目的用meta分析的方法评价血清α-L-岩藻糖苷酶(AFU)在原发性肝癌(PHC)诊断中的价值。方法检索Cochrane Library、Pub Med、web of knowledge(Medline、BIOSIS Previews)、Springer link、Science Direct数据库,检索时间为1997年1月至2013年12月。中国生物医学文献数据库(CBM)、中国知网、万方、重庆维普等数据库,检索时间为19841月年至2013年12月。检索语言限定为中文和英文。收集研究血清AFU对PHC诊断价值的相关文献,对符合纳入标准的文献进行质量评价,采用meta-Disc 1.4软件进行分析,综合评价血清AFU在原发性肝癌诊断中的价值。结果共纳入20篇文献(中文15篇,英文5篇)。分析病例组2 114例,对照组5 718例。对入选20篇文献进行异质性检验,提示所纳入文献具有非阈值效应引起的异质性,因此选用随机效应模型进行meta分析。汇总灵敏度为0.77;汇总特异度为0.87;汇总阳性似然比为5.37;汇总阴性似然比为0.28;诊断比值比为20.47;受试者工作曲线(SROC)曲线下面积为0.87。结论血清AFU在PHC的诊断中具有较高的灵敏度和特异度,对其临床诊断具有较高的价值。

pcDNA3.1-HMOX1重组质粒载体的构建与鉴定

目的构建pc DNA3.1-HMOX1重组质粒载体。方法使用基因合成法合成HMOX1基因,在其N端添加Kozak序列及His标签序列,将扩增后的目的基因双酶切连接至pc DNA3.1载体的Bam HⅠ和NotⅠ之间。转化DH5α大肠杆菌后,挑取阳性克隆子进行质粒抽提电泳及测序鉴定。结果 p CDNA3.1-HMOX1重组质粒经酶切电泳及DNA测序证实,目的基因HMOX1的序列完全正确,重组质粒载体构建成功。结论成功构建p CDNA3.1-HMOX1融合基因并在DH5α大肠杆菌内表达,为进一步探讨HMOX1的生物学功能奠定了基础。

pCDNA3.1-MT2A真核表达载体的构建及亚细胞定位

目的:构建pCDNA3.1-MT2A真核表达载体并观察其在293T和SMMC7721细胞株中的定位和表达情况。方法:使用基因合成法合成MT2A基因,在其N端添加Kozak序列及His标签序列,将扩增后的目的基因双酶切连接至pcDNA3.1(+)载体的BamHⅠ和NotⅠ之间。转化DH5α大肠杆菌后,挑取阳性克隆子进行质粒抽提电泳及测序鉴定。将鉴定正确的pCDNA3.1-MT2A质粒采用脂质体法转染293T和SMMC7721细胞株,激光共聚焦显微镜观察其在真核细胞中的表达和定位情况。结果:pCDNA3.1-MT2A重组质粒经酶切电泳及DNA测序证实,目的基因MT2A的序列完全正确,真核表达载体构建成功,激光共聚焦观察发现该重组质粒表达于293T和SMMC7721细胞的胞质中。结论:成功构建pCDNA3.1-MT2A融合基因并进行真核表达,发现MT2A主要定位于293T和SMMC7721细胞的细胞质中。本研究为探讨MT2A在肝癌细胞内的功能奠定了基础。

毛细管电泳技术在分析胎儿脐血血红蛋白中的应用

目的：分析不同孕周胎儿脐血血红蛋白的组成,探讨毛细管电泳技术在定量分析中晚孕胎儿脐血血红蛋白中的应用价值.方法：收集在产前诊断中心行B超引导下脐静脉穿刺术,并剔除夫妻双方或一方确诊或可疑为地中海贫血的孕妇脐带血样本,对其进行血红蛋白毛细管电泳分析.结果：全部425例样本HbA含量间于2.3％ ～ 18.0％,平均6.80％;HbF含量间于82.0％～97.7％,平均值93.18％.随着胎儿孕龄的增加,脐静脉血中HbA的百分含量逐渐增多,HbF的百分含量逐渐减少,且各孕龄组之间HbA百分含量及HbF百分含量的差异均具有统计学意义（P＜0.05）.结论：毛细管电泳技术定量分析血红蛋白,简便、准确,可用于中晚孕胎儿脐血血红蛋白电泳,并为诊断胎儿地中海贫血和异常血红蛋白病提供了参考依据.

银行职员EB病毒感染调查分析

目的调查银行职员EB病毒感染率,推测EB病毒感染途径,更好地防治EB病毒感染。方法比较555例中山市中国银行职员与1034例健康体检人群的EB病毒感染率,分析两组的差异。结果555例中国银行职员体检者中,EB病毒阳性检出者38例,感染率6.8,而1034例健康体检人群EB病毒阳性检出者31例,感染率为3.0。两组男女间感染率均差异无显著性。结论银行职员EB病毒感染率明显高于健康体检人群。推测纸币在感染中起传播媒介作用。重视银行职员EB病毒感染对提高银行职员的健康具有重要意义。

HSPC238相互作用蛋白RPL5的初步筛选

目的:构建HSPC238诱饵载体,筛选与HSPC238相互作用的目标蛋白。方法:基因合成法合成HSPC238基因,sfi IA和sfi IB双酶切后与pGBKT7诱饵载体连接,获得诱饵质粒pGBKT7-HSPC238,经测序鉴定后与酵母双杂交空质粒pGBKT7共同转化到酵母菌株AH109,在营养缺陷培养基中观察pGBKT7-HSPC238的自激活作用,进一步从人胎肝c DNA文库中筛选与HSPC238相互作用的目标蛋白。结果:诱饵载体pGBKT7-HSPC238构建成功,经表型筛选检测无自激活作用,经酵母双杂交技术结合文献分析,从人胎肝c DNA文库中初步筛选发现核糖体蛋白L5(Ribosomal protein L5,RPL5)可能是HSPC238相互作用的目标蛋白之一。结论:成功构建pGBKT7-HSPC238诱饵质粒载体,且经酵母双杂交技术结合文献分析发现RPL5可能是与HSPC238相互作用的目标蛋白之一。

中山地区新生儿先天性甲状腺功能减低症筛查结果分析

目的探讨不同性别、胎龄、出生体质量新生儿与先天性甲状腺功能减低症(CH)患病的关系及其促甲状腺激素(TSH)水平人群分布特点,指导临床筛查工作。方法对2014-2018年中山地区新生儿CH筛查结果进行回顾性分析,采用单因素分析比较不同性别、胎龄、出生体质量新生儿间CH发病率差异及TSH水平人群分布情况。结果筛查239006例新生儿,确诊CH 139例,发病率为0.058%(139/239006)。过期产儿CH发病率高于足月儿,差异有统计学意义(P<0.05)。新生儿TSH水平呈右偏态分布,不同性别、胎龄、出生体质量新生儿TSH水平单侧95%参考值范围均不同,各组人群TSH水平比较,差异均有统计学意义(P<0.001)。结论新生儿疾病筛查能有效帮助CH患儿早期诊断,过期产是CH发病的影响因素,临床医生在实际工作中还可将新生儿TSH水平人群分布特点纳入参考,做好CH的筛查工作。

新生儿脐带血红细胞指标在新生儿地中海贫血筛查中的价值

目的:探讨新生儿脐带血红细胞指标与地中海贫血的相关性,揭示其在新生儿地中海贫血筛查中的临床价值。方法:收集2017年7月至2018年12月在南方医科大学附属中山市博爱医院出生的2919例新生儿脐带血,进行血常规检测,另采集外周血检测地中海贫血基因,确定各指标中的cut-off值,并计算灵敏度、特异度等评价指标。结果:2919例新生儿脐带血共检出地中海贫血314例,阳性检出率为10.76%。2605例非地中海贫血患儿的RBC、RDW的平均水平低于314例地中海贫血患儿;非地中海贫血患儿的Hb、MCV、MCH、MCHC、HCT、Hb/RBC、MCV/RBC水平高于地中海贫血患儿,两组间各指标的比较均有显著性差异。其中α地中海贫血组的RBC和RDW水平高于非地中海贫血组,而Hb、MCV、MCH、MCHC、HCT、Hb/RBC和MCV/RBC水平均低于非地中海贫血组;β地中海贫血组的MCV、MCH、Hb/RBC水平均低于非地中海贫血组;α,β复合地中海贫血组的MCV、MCH、Hb/RBC和MCV/RBC水平均低于非地中海贫血组。MCV的cut-off值设为106.05fl时,灵敏度为0.548,特异度为0.907,特异度在各指标中最高。MCH+MCV/RBC联合诊断的ROC曲线下面积最大,为0.807,其中灵敏度为0.710,特异度为0.841,阳性预测值为0.348,阴性预测值为0.960。结论:单一脐带血红细胞指标对于地中海贫血的筛查各有优缺点,而联合MCH+MCV/RBC可以提高其对地中海贫血筛查或诊断的准确性,对于降低重型地中海贫血患儿的出生率有积极的作用,在基层医院具有很高的普及价值。

脐带血红细胞参数检验在α-地中海贫血筛查中的应用价值

目的研究脐带血红细胞参数检验在α-地中海贫血筛查中的应用价值。方法选择2018年1—12月于南方医科大学附属中山市博爱医院出生且基因诊断为α-地中海贫血的202例新生儿作为α-地中海贫血组,另外选择802名正常新生儿作为正常对照组。对所有新生儿进行脐带血血常规检验,并抽取外周血进行α-地中海贫血基因检测,观察和比较两组新生儿脐带血中红细胞计数(RBC)、血红蛋白(Hb)、红细胞分布宽度(RDW)、血细胞比容(HCT)、平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白量(MCH)和平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)的水平。绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线)并计算曲线下面积(AUC),比较各参数单独或联合检测的诊断效能。结果202例α-地中海贫血患儿基因型中,以--^(SEA)/αα基因型最常见〔49.50%(100/202)〕,其次为-α^(3.7)/αα〔33.17%(67/202)〕;α-地中海贫血组的RBC和RDW均明显高于正常对照组〔RBC(×10^(12)/L):4.88±0.68比4.43±0.46,RDW:(16.66±1.22)%比(14.96±0.38)%,均P<0.01〕,而Hb、MCV、MCH、MCHC和MCV/RBC水平均明显低于正常对照组〔Hb(g/L):147.78±17.20比154.96±15.74,MCV(fL):101.87±8.20比111.37±5.10,MCH(pg):30.56±3.23比35.02±1.83,MCHC(g/L):299.62±14.19比314.76±15.63,MCV/RBC:21.52±5.09比25.45±3.39,均P<0.01〕。MCH的截断值为33.65 pg时,诊断α-地中海贫血的敏感度为所有指标中最高(83.2%);MCV+MCH联合检测的特异度最高(94.6%);MCH+MCV/RBC联合检测对α-地中海贫血的检验效能最高(AUC=0.889),其对应的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为81.7%、87.8%、62.7%和95.0%。结论脐带血血常规红细胞参数联合应用对α-地中海贫血的诊断具有较高的敏感度和特异度,能够为该疾病临床诊断和防控提供重要的参考依据,值得临床应用和推广。

滤纸干血片毛细管电泳技术检测HbA在筛查新生儿β-地中海贫血中的应用价值

目的探讨滤纸干血片毛细管电泳技术在新生儿β-地中海贫血(简称β-地贫)筛查中的应用价值。方法对2 987份新生儿足跟血标本应用滤纸干血片毛细管电泳技术检测血红蛋白(Hb)A并同时做基因分析,采用四格表分析Hb A对β-地贫的筛查价值。回顾性分析2012年7—12月在广东省中山市出生的180 106份新生儿足跟血标本,应用滤纸干血片毛细管电泳技术检测Hb A含量,对β-地贫筛查表型阳性的病例(Hb A<8.6%)召回进行基因分析。结果 2 987份新生儿足跟血标本中,基因确诊β-地贫携带者94例。经四格表分析,Hb A<8.6%作为诊断β-地贫的切值时,其敏感性为26.60%(25/94),假阳性率为1.18%(34/2 893),特异性为98.82%(2 859/2 893),假阴性率为73.40%(69/94),阳性预测值为42.37%(25/59),阴性预测值为97.64%(2 859/2 928)。回顾性分析180 106份新生儿足跟血滤纸干血片标本,检测出β-地贫表型阳性(Hb A<8.6%)者4 539例,筛查阳性率为2.52%(4 539/180 106);其中在召回的1 149例新生儿中经基因分析确诊为β-地贫基因携带者510例,重型β-地贫16例。Hb A筛查与基因确诊的符合率为45.78%(526/1 149)。进一步分析其临床表型与Hb A含量的关系,重型β-地贫Hb A含量明显低于β-地贫基因携带者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论滤纸干血片毛细管电泳技术检测Hb A在新生儿期筛查β-地贫有很高的特异性(98.82%)及阴性预测值(97.64%)。可以根据Hb A含量的多少初步判断β-地贫的严重程度,特别对重型β-地贫的早期筛查和诊断有很好的临床指导意义。

切值重设定在串联质谱法筛查新生儿高苯丙氨酸血症中的临床价值

目的对中山市85323例新生儿行串联质谱法筛查高苯丙氨酸血症(HPA)的结果进行回顾性分析,评价重设定苯丙氨酸(Phe)、Phe/酪氨酸(Tyr)切值在新生儿HPA筛查中的临床价值。方法选取2014年2月至2018年9月行串联质谱法筛查HPA的新生儿为研究对象,分析切值重设定前后的初筛和确诊情况,了解切值重设定的临床意义。结果切值重设定前后新生儿HPA的筛查阳性率分别为4.57%(1716/37527)、0.47%(223/47796),分别确诊HPA2、3例,该市新生儿HPA发病率约为1/17064(5/85323)。Phe与Phe/Tyr新切值联用对全部新筛结果、切值设定前后及男女新筛结果进行分析,筛查阳性率分别为0.02%、0.01%、0.02%、0.02%、0.02%,均明显低于分别使用Phe原新切值、Phe与Phe/Tyr原切值及HPA诊断“金标准”(120μmol/L)对其进行新筛的阳性率,进一步验证新切值筛查性能结果显示无漏筛,且随访未发现假阴性案例,表明Phe、Phe/Tyr新切值联用在保持筛查敏感性的同时,可提高新生儿HPA的筛查特异度;新生儿性别对Phe、Phe/Tyr切值的影响差异无统计学意义(P>0.05)。结论串联质谱法筛查新生儿HPA在实验室积累一定样本量情况下,应重设定本实验室的参考值,以获得更高的筛查特异性,指导临床早期确诊和治疗新生儿HPA。

轻型β地中海贫血人群HbA2水平与缺铁水平的相关性分析

目的探讨轻型β地中海贫血人群的血红蛋白A2(HbA2)水平与缺铁水平的相关性。方法将研究对象分为健康人群组(n=504)、缺铁性贫血组(n=126)、轻型β地中海贫血组(n=107)和轻型β地中海贫血合并缺铁性贫血组(n=84),分析各组的HbA2水平和缺铁水平,并使用Pearson相关性分析探讨两者的相关性。结果非地中海贫血组中的缺铁人群与不缺铁人群的HbA2水平差异无统计学意义(P=0.525);但血清铁水平差异有统计学意义(P<0.001)。地中海贫血组中缺铁人群与不缺铁人群的HbA2水平差异也无统计学意义(P=0.764),但血清铁水平差异显著(P<0.001)。各研究组男女之间HbA2水平差异不显著;轻型β地中海贫血合并缺铁性贫血组患者HbA2水平和机体的血清铁水平之间并无显著相关性(r=0.053,P>0.05)。结论缺铁的严重程度可以影响HbA2水平,轻型β地中海贫血合并缺铁性贫血患者的HbA2水平和血清铁之间并无显著相关性。