目的探讨miR-193a-3p/E2F6在鼻咽癌(NPC)中对细胞焦亡的调控作用及其潜在的分子机制。方法双荧光素酶基因报告实验评估了miR-193a-3p对E2F6的靶向调控作用。HNE-2细胞分为不同处理组:对照组、空白质粒组、沉默E2F6质粒组、空白质粒(miR...目的探讨miR-193a-3p/E2F6在鼻咽癌(NPC)中对细胞焦亡的调控作用及其潜在的分子机制。方法双荧光素酶基因报告实验评估了miR-193a-3p对E2F6的靶向调控作用。HNE-2细胞分为不同处理组:对照组、空白质粒组、沉默E2F6质粒组、空白质粒(miRNA)组、过表达miR-193a-3p组、过表达miRNA+空白(E2F6)质粒组以及过表达miRNA+过表达(E2F6)质粒组。通过qPCR检测miR-193a-3p的表达水平,Western blot检测E2F6蛋白的表达以及NLRP3/Caspase-1/GSDMD/GSDMD-N信号通路的激活情况。同时,使用扫描电子显微镜(scanning electron microscope,SEM)观察细胞形态,CCK-8法评估细胞增殖情况,进行集落形成实验和Transwell实验来检测细胞集落形成数量和迁移数量。结果与对照组(0.90±0.02)和空白质粒组(0.88±0.02)相比,沉默E2F6质粒组中E2F6蛋白(0.26±0.02)的表达水平显著降低,NLRP3/Caspase-1/GSDMD/GSDMD-N信号通路明显被激活,SEM显示细胞发生肿胀。CCK-8实验、集落形成实验和Transwell实验显示细胞活力、集落形成数量和迁移数量均下降(P均<0.05)。双荧光素酶报告基因实验证实E2F6是miR-193a-3p的靶基因。同对照组(1.01±0.03,1.02±0.02)和空白质粒(miRNA)组(1.02±0.04,0.21±0.03)相比,过表达miR-193a-3p组(2.02±0.32,0.23±0.02)中的miR-193a-3p的表达水平升高,E2F6的表达水平显著降低。而NLRP3/Caspase-1/GSDMD/GSDMD-N信号通路明显被激活,SEM显示细胞发生肿胀。CCK-8实验、集落形成实验和Transwell实验显示细胞活力、集落形成数量和迁移数量均下降(P均<0.05)。同过表达miR-193a-3p组和过表达miRNA+空白(E2F6)质粒组相比,发现过表达miR-193a-3p结合过表达E2F6组中E2F6蛋白的含量上升,NLRP3/Caspase-1/GSDMD/GSDMD-N蛋白的含量下降,SEM显示细胞肿胀减轻,CCK-8实验、集落形成实验和Transwell实验显示细胞活力、集落形成数量和迁移数量均上升(P均<0.05)。结论miR-193a-3p通过靶向抑制E2F6激活NLRP3/Caspase-1/GSDMD/GSDMD-N通路,诱导NPC细胞发生细胞焦亡,并抑制其增殖、克隆和侵袭。展开更多
目的探讨腺样体切除联合耳内镜下鼓膜置管或鼓膜穿刺治疗儿童分泌性中耳炎的临床效果。方法选取我院2012年1月~2014年1月62例药物保守治疗无效的儿童分泌性中耳炎,根据随机数字法分为观察组和对照组,各31例(观察组45耳,对照组49耳),...目的探讨腺样体切除联合耳内镜下鼓膜置管或鼓膜穿刺治疗儿童分泌性中耳炎的临床效果。方法选取我院2012年1月~2014年1月62例药物保守治疗无效的儿童分泌性中耳炎,根据随机数字法分为观察组和对照组,各31例(观察组45耳,对照组49耳),观察组采用腺样体切除术及耳内镜下鼓膜置管术治疗,对照组采用腺样体切除术及耳内镜下鼓膜穿刺术治疗。术后根据临床表现、纯音听阈测定、声导抗测试结果综合判断疗效,纯音听阈提高10 d B HL以上、鼓室导抗图为A型或C型为有效。结果 2组随访时间分别为(42.3±12.7)周、(40.6±13.1)周(t=0.518,P=0.605)。与对照组相比,观察组有效率高[86.7%(39/45)vs.69.4%(34/49),χ2=4.037,P=0.045],术后并发症少[8.9%(4/45)vs.28.6%(14/49),χ2=5.870,P=0.015],复发率低[2.2%(1/45)vs.16.3%(8/49),χ2=3.884,P=0.049]。结论腺样体切除联合耳内镜下鼓膜置管治疗儿童分泌性中耳炎,视野清晰,创伤小,恢复快,值得推广应用。展开更多
文摘目的探讨miR-193a-3p/E2F6在鼻咽癌(NPC)中对细胞焦亡的调控作用及其潜在的分子机制。方法双荧光素酶基因报告实验评估了miR-193a-3p对E2F6的靶向调控作用。HNE-2细胞分为不同处理组:对照组、空白质粒组、沉默E2F6质粒组、空白质粒(miRNA)组、过表达miR-193a-3p组、过表达miRNA+空白(E2F6)质粒组以及过表达miRNA+过表达(E2F6)质粒组。通过qPCR检测miR-193a-3p的表达水平,Western blot检测E2F6蛋白的表达以及NLRP3/Caspase-1/GSDMD/GSDMD-N信号通路的激活情况。同时,使用扫描电子显微镜(scanning electron microscope,SEM)观察细胞形态,CCK-8法评估细胞增殖情况,进行集落形成实验和Transwell实验来检测细胞集落形成数量和迁移数量。结果与对照组(0.90±0.02)和空白质粒组(0.88±0.02)相比,沉默E2F6质粒组中E2F6蛋白(0.26±0.02)的表达水平显著降低,NLRP3/Caspase-1/GSDMD/GSDMD-N信号通路明显被激活,SEM显示细胞发生肿胀。CCK-8实验、集落形成实验和Transwell实验显示细胞活力、集落形成数量和迁移数量均下降(P均<0.05)。双荧光素酶报告基因实验证实E2F6是miR-193a-3p的靶基因。同对照组(1.01±0.03,1.02±0.02)和空白质粒(miRNA)组(1.02±0.04,0.21±0.03)相比,过表达miR-193a-3p组(2.02±0.32,0.23±0.02)中的miR-193a-3p的表达水平升高,E2F6的表达水平显著降低。而NLRP3/Caspase-1/GSDMD/GSDMD-N信号通路明显被激活,SEM显示细胞发生肿胀。CCK-8实验、集落形成实验和Transwell实验显示细胞活力、集落形成数量和迁移数量均下降(P均<0.05)。同过表达miR-193a-3p组和过表达miRNA+空白(E2F6)质粒组相比,发现过表达miR-193a-3p结合过表达E2F6组中E2F6蛋白的含量上升,NLRP3/Caspase-1/GSDMD/GSDMD-N蛋白的含量下降,SEM显示细胞肿胀减轻,CCK-8实验、集落形成实验和Transwell实验显示细胞活力、集落形成数量和迁移数量均上升(P均<0.05)。结论miR-193a-3p通过靶向抑制E2F6激活NLRP3/Caspase-1/GSDMD/GSDMD-N通路,诱导NPC细胞发生细胞焦亡,并抑制其增殖、克隆和侵袭。
文摘目的探讨腺样体切除联合耳内镜下鼓膜置管或鼓膜穿刺治疗儿童分泌性中耳炎的临床效果。方法选取我院2012年1月~2014年1月62例药物保守治疗无效的儿童分泌性中耳炎,根据随机数字法分为观察组和对照组,各31例(观察组45耳,对照组49耳),观察组采用腺样体切除术及耳内镜下鼓膜置管术治疗,对照组采用腺样体切除术及耳内镜下鼓膜穿刺术治疗。术后根据临床表现、纯音听阈测定、声导抗测试结果综合判断疗效,纯音听阈提高10 d B HL以上、鼓室导抗图为A型或C型为有效。结果 2组随访时间分别为(42.3±12.7)周、(40.6±13.1)周(t=0.518,P=0.605)。与对照组相比,观察组有效率高[86.7%(39/45)vs.69.4%(34/49),χ2=4.037,P=0.045],术后并发症少[8.9%(4/45)vs.28.6%(14/49),χ2=5.870,P=0.015],复发率低[2.2%(1/45)vs.16.3%(8/49),χ2=3.884,P=0.049]。结论腺样体切除联合耳内镜下鼓膜置管治疗儿童分泌性中耳炎,视野清晰,创伤小,恢复快,值得推广应用。