柑桔抗盐突变体的原生质体培养与分离纯化研究

锦橙、桃叶橙抗盐胚性愈伤组织酶解后可得到大量的原生质体,FDA检查活性分别是92.5％和89.2％。抗盐原生质体在培养过程中首先逐渐再生细胞壁,覆盖整个细胞膜表面,然后恢复分裂。锦橙、桃叶橙抗盐原生质体经2个月培养,单个原生质体已分裂形成肉眼可见的细胞团,锦橙的细胞团平均达550×391μm,其中很多已分化形成球形胚状体,部分即将形成原生质体植株,桃叶橙原生质体的细胞团达389.2×280.0μm。

柑桔胚珠培养及胚状体发生的研究

选用‘椪柑’、‘锦橙’、‘桃叶橙’、‘华农本地早’花后7周幼果胚珠进行培养.其胚状体发生的百分率分别是:48.5%、21.2%、19.8%、6.4%;胚性愈伤组织则为:28.2%、13.5%、15.8%、5.8%.各品种胚状体和胚性愈伤组织发生的百分率明显不同.与品种胚数多少相一致.不同激素和有机物对柑桔胚珠培养、胚状体的发生及胚性愈伤组织形成产生不同的影响.多单胚的‘华农本地早’仅从基本培养基中产生胚状体和胚性愈伤组织.胚珠培养中,胚状体发生的方式,根据来源不同分为三种:第一种是由胚珠(或已黄的球形胚上)长出白色的胚性愈伤组织,继而产生胚状体:第二种是在已分化的幼苗下胚轴或根部产生胚性愈伤组织和胚状体;第三种是在畸形胚上直接不断的分化出胚状体.

草莓花药愈伤组织原生质体培养再生多细胞团

草莓花药愈伤组织经５次继代培养，生长旺盛，质地松软，可用于原生质体的分离。在含０．１％ＰｅｃｔｏｌｙａｓｅＹ－２３，０．５％纤维素酶（ＯｎｏｚｕｋａＲ－１０），０．５％离析酶（ＭａｃｅｒｏｚｙｍｅＲ－ｌ０）的混合酶液中酶解１３ｈ，原生质体的产量为１．４７×１０￣６／ｇＦＷ，活性６７．３５％。原生质体采用液体浅层和琼脂糖包埋培养，获得了肉眼可见的多细胞团。

诱发柑桔“适应型”珠心愈伤组织体细胞胚胎发生的研究

以我国四个优良柑桔栽培品种为试材,研究了他们的适应型珠心愈伤组织高频率体细胞胚胎发生与植株再生的条件,观察了胚胎发生时胞壁、细胞器的变化,发现2,4—D、IBA、KT、GA、BR、ABA、PP333等植物生长调节物质,CH、LH、YE等天然复合物和葡萄糖抑制胚胎发生;而乳糖(3%～8%)。半乳糖(5%～7%),特别是甘油(1%～5%)能诱发高频率体细胞胚胎发生。乳糖、甘油的这种效应不受PP333、BR、CH、AAC、ME的影响,但AC会显著地推迟胚胎发生。低温预处理对诱发体细胞胚胎发生不利。对球形胚状体的继续发育,以添加麦芽、SAD或ABA的MT培养基较好。电镜和光镜观察表明,适应型珠心愈伤组织由胚性细胞和非胚性细胞组成。胚性细胞质浓、核糖体特别多、淀粉粒多、液泡小而少、核大、壁较厚。胚状体从单个胚性细胞开始形成,一个胚性细胞分裂成的多个子细胞共存于一个厚壁之内。

柑桔胚性细胞系的建立

将乙烯作用的专化抑制剂——硝酸银应用于柑桔胚珠培养中,通过交替继代处理和不断选择,成功地建立起能供给原生质体分离并具有良好再生能力的胚性愈伤组织.

影响草莓花药培养效率的若干因素

本试验结果表明，基本培养基的愈伤组织诱导率，Ｂ５明显地高于ＭＳ、Ｎ６、Ｅ１。［ＮＯ３-］／［ＮＨ4＋］值大，有利于愈伤组织的诱导。乳糖作为碳源，其诱导愈伤组织的效果明显优于蔗糖。花药愈伤组织诱导率的高低与基因型和培养基有关。ＭＳ＋ＢＡ２．０ｍｇ·Ｌ－１＋ＩＡＡ４．０ｍｇ·Ｌ－１＋ＺＴ２．０ｍｇ·Ｌ－１适于作不定芽的分化培养基，其分化率达４０．００％。

乌天麻和红天麻及其杂种的同工酶分析

利用过氧化物酶同工酶分析红天麻、乌天麻及其杂种,结果表明:天麻的根状茎茎尖分生组织可用于过氧化物酶同工酶分析和杂种鉴定,带谱清晰,稳定性好。以红天麻为母本,乌天麻为父本所得的杂种,其谱带表现出明显的亲本互补关系。本试验说明,过氧化物酶可用于天麻杂种的鉴定。

柑桔茎尖嫁接操作方法的改进及研究

通过大量摸索试验，对影响茎尖嫁接成活率的关键步骤嫁接操作方法作了改进。改进的“⊥”压法能使供试品种嫁接成活率提高到６０％～８０％，而对照成活率则为３８．５％～５８．１％；采用不同浓度的６－ＢＡ（６－苄氨基嘌呤）作茎尖预处理，在３个品种试验中发现用０．５ｍｇ／ｋｇ的６－ＢＡ预处理１０ｍｉｎ成活率明显优于对照。试验还在试管苗移栽、最佳消毒条件的确定、试管苗提早结果几个方面作了有益的尝试。

1个新的椪柑突变体──“桂林良丰”无核椪柑的细胞学鉴定

从体细胞染色体数、气孔大小与密度、花粉粒的形态与大小、小孢子母细胞的形态与大小，对“桂林良丰”无核 柑（ＣｉｔｒｕｓｒｅｔｉｃｕｌａｔａＢｌａｎｃｏ）的细胞学进行了鉴定。结果表明，“桂林良丰”无核 柑为４ｘ与２ｘ两种倍数性的混倍体，且４ｘ细胞与２ｘ细胞的比例为１∶１。此研究在 柑上尚属首例报道。因此，本突变体既可作为无核 柑的新类型，又可作为新的种质资源进一步用于育种。

乌天麻和红天麻及其杂种花粉形态扫描电镜观察

采用扫描电子显微镜对天麻种内两个不同变型乌天麻和红天麻及其杂种的花粉进行了观察 ,结果表明 :4种材料的花粉均表现出复合花粉类型 ;在高倍镜下 ,花粉粒表面具有明显的网状纹饰 ,网脊较宽 ;花粉块上有白色粘性分泌物 ;乌天麻和以乌天麻为母本的杂种其花粉为花粉块类型 ,红天麻和以红天麻为母本的杂种花粉包括四合花粉类型和花粉块类型 。

提高柑橘茎尖微芽嫁接成活率的研究

由于黄龙病的迅速蔓延,使我国南方柑橘生产遭到严重的威胁,而防治这类病害的根本性措施是培育无病苗木。1972年美国Murashige T.et al.首创STG(Shoot-tip Grafting)茎尖嫁接技术,1975年L.Navarro对STG作了改进,并证明STG可以脱除柑橘衰退病、鳞皮病、顽固病和裂皮病。我国陈駉、蒋元晖等研究表明STG也可脱除黄龙病病原,并较热处理、抗生素疗法具有更广泛的应用价值。

朋娜和纽贺尔脐橙胚珠离体培养获得无病毒珠心苗方法研究

以花后７周的朋娜、纽贺尔脐橙的幼果为实验材料，挑取胚珠进行离体培养。在ＭＴ培养基上分别附加麦芽汁（２ｍｌ／Ｌ），６ＢＡ（５ｍｇ／Ｌ）和麦芽汁＋６ＢＡ（２ｍｌ／Ｌ，５ｍｇ／Ｌ）诱导愈伤组织及胚状体，获得２０７％～２１３％（朋娜）和１６２％～１８１％（纽贺尔）的胚状体。胚状体及愈伤组织在附加ＮＡＡ（０５ｍｇ／Ｌ）＋ＢＡ（２ｍｇ／Ｌ）的ＭＴ培养基上，能较好地诱导多丛芽。多丛芽用枳壳、枳橙试管苗为砧木进行嫁接，成活率可达８４４％～９１９％，在培养基中加入ＡｇＮＯ３（５ｍｇ／Ｌ）多次继代培养，能筛选出胚性愈伤组织。

脐橙叶片施用^(15)N和^(32)P同位素的运转分配规律和座果机制的研究

在萌芽期和花芽分化期叶片施用１５Ｎ硫铵、３２Ｐ磷酸二氢钠和１５Ｎ尿素，研究脐橙在萌芽期、初花期、生理落果期以及花芽分化期氮、磷营养吸收运转分配规律。结果表明开花过程需消耗大量氮、磷营养。在落花落果的３２Ｐ放射比强度和ＮＤＦＦ％都比座果的小，说明氮、磷营养不足是引起脐橙落花落果的主要原因之一。ＧＡ３＋ＢＡ或ＧＡ３激素处理能吸引氮、磷营养向幼果运输，从而提高座果率。

用光生物素标记F20探针检测柑桔裂皮病类病毒

用光生物素标记Ｆ２０探针检测柑桔裂皮病类病毒陈纯贤，万蜀渊（武汉华中农业大学柑桔研究所４３００７０）关键词柑桔裂皮病类病毒，Ｆ２０探针，光生物素，斑点杂交核酸分子杂交技术因其灵敏度高、特异性强，也广泛用于病毒和类病毒的检测。最初，一般采用放射性同位素...

组织培养技术在植物病毒和类病毒研究中的应用

组织培养技术在植物病毒和类病毒研究中的应用陈纯贤，万蜀渊（华中农业大学柑桔研究所武汉４３００７０）植物病毒和类病毒不能在人工培养基上生长，但可以在离体培养的寄主组织或细胞里繁殖。利用组织培养技术为研究病毒、类病毒等植物病原与寄主细胞的关系，建立离体鉴...

苹果种质资源的离体保存

苹果（ＭａｌｕｓｄｏｍｅｓｔｉｃａＢｏｒｋｈ）试管苗在ＭＳ附加０．５ｍｇ／ｌＢＡ、０．２ｍｇ／ｌＩＡＡ、０．５％甘露醇、３０ｇ／ｌ蔗糖和５ｇ／ｌ琼脂的培养基上，在４℃黑暗条件下连续保存１２个月，其存活率达８７％。

柑桔被膜贮藏与乙醇积累的探讨

柑桔被膜贮藏与乙醇积累的探讨戴葵堂王华利万蜀渊（宜昌市农业学校，宜昌４４３００３）（华中农业大学园艺系，武汉４３００７０）柑桔是我国南方栽培的主要果树。目前我国柑桔仍以鲜果销售为主，只有少量用于加工。由于我国柑桔主栽品种成熟期过于集中（１０月上旬～...

柑桔鲜果商品化处理设备

柑桔鲜果商品化处理设备张华珍，万蜀渊，杨玉衡，袁巧霞，邓伯勋，夏俊芳华中农业大学在我国南方各省，柑桔是主要水果品种之一，也是山区农民脱贫致富的重要财源之一，除了少量制罐、榨汁外，大部分是以鲜果形式上市。因此，在采收后及时对果实进行商品化处理，使之果皮...

温州蜜柑“水肿”病致病因子的研究

"水肿"病是限制温州蜜柑(Citrus unshin Marc)等宽皮柑桔贮藏期的重要因素。其外因主要是贮藏环境的高浓度CO_2。随着CO_2浓度升高,"水肿"率增高,二者呈正相关关系。其次是低温伤害,不适宜的低温下,CO_2浓度明显升高。内因关键是果皮细胞膜的伤害。高浓度CO_2或低温环境下,果皮相对电导率和丙二醛含量明显增高,果皮组织透性和膜脂过氧化作用程度明显增大,"水肿"发生。此外,"水肿"病与果皮维生素C含量的下降、乙烯的产生、乙醇的累积及自身抗性下降密切相关。