环状RNA调控冠心病的机制及中药干预研究进展

冠心病(coronary atherosclerotic heart disease,CHD)是冠状动脉粥样硬化引起血管腔狭窄或阻塞导致的缺血性心脏病,临床表现为心绞痛、心力衰竭或心源性猝死,是我国城乡居民主要死亡原因之一。circRNA是一类非编码RNA,可作为miRNA或RNA结合蛋白的上游调控分子,参与内皮细胞功能障碍、平滑肌细胞迁移、巨噬细胞泡沫化、血管新生、心肌损伤与修复、心梗后心衰等CHD病理过程,其表达模式具有疾病特异性和组织特异性,展现出作为疾病治疗靶点和生物标志物的潜力,同时也为中药药物靶点开发提供了新的方向。该文就近年来circRNA调控CHD的研究进展及中药干预机制作出综述,为CHD相关研究提供参考。

原代大鼠主动脉血管干细胞的体外培养扩增及鉴定

目的采用“切段外膜贴壁培养法”体外培养扩增出原代大鼠主动脉血管干细胞,为开展血管重构及相关疾病研究提供实用的工具细胞。方法无菌分离2~3周龄Sprague-Dawley大鼠胸腹主动脉,切成长约2.0 mm的血管节段,均匀种瓶,经外膜贴壁固化后进行原代培养,待细胞生长融合度达80%~90%时传代。镜下观察细胞形态及其生长特性,采用流式细胞仪分析目的细胞表面标志物CD分子表达情况,成脂、成骨诱导分化实验检测其多向分化潜能。结果接种3 d后,少量梭形、星形或多角形的细胞从血管节段周围爬出;5~6 d后形成岛屿状细胞集落,细胞增殖迅速,呈放射状向外扩大,并出现细胞克隆现象;7~8 d后细胞融合成片,呈涡旋状分布;传至第3代后,细胞匀质性较高,表现为典型的“成纤维样”排列生长。流式细胞仪分析细胞主要表达CD44、CD73、CD90,阳性率分别为80.3%、62.2%、46.8%;低表达CD34、CD45、CD11b/c,阳性率分别为1.1%、0.2%、0.2%。体外诱导分化实验表明目的细胞具有成脂、成骨分化潜能。结论“切段外膜贴壁培养法”可成功分离培养出具有间充质干细胞特性的大鼠主动脉血管干细胞。

人参、银杏叶提取物对β-淀粉样蛋白_(1-40)毒性损伤大鼠全脑神经递质的影响

目的探讨给予人参、银杏叶提取物（脑维康）前后,β-淀粉样蛋白（β-amyloid peptide,Aβ）1-40毒性损伤大鼠全脑乙酰胆碱、单胺类递质及其代谢产物水平的变化和可能机制.方法以双侧海马CA1区注射Aβ1-40（每侧4 g·L^-1）大鼠为模型,给药组大鼠每天灌胃给予脑维康（15.5、31、62 mg·kg^-1）4 wk.以改进的柱前、柱后双酶柱结合高效液相电化学方法检测大鼠全脑乙酰胆碱含量,以高效液相电化学方法检测大鼠全脑单胺类神经递质及其代谢产物的含量.结果双侧海马注射Aβ1-404 wk后,大鼠全脑乙酰胆碱、5-羟色胺含量明显降低 （P〈0.05～0.01）,多巴胺、去甲肾上腺素表现下降趋势.给药4 wk后,脑维康各给药组大鼠全脑乙酰胆碱含量较模型组大鼠升高（P〈0.05～0.01）,多巴胺、5-羟色胺水平无变化,高香草酸、5-羟吲哚乙酸水平呈下降趋势,其中脑维康15.5 mg·kg^-1组高香草酸含量下降（P〈0.05）.结论脑维康可升高Aβ1-40毒性损伤大鼠脑内的乙酰胆碱水平,对单胺类递质代谢有一定的调节作用.该药改善大鼠学习记忆损伤的机制可能与其保护脑内胆碱能和单胺能系统或干预神经递质的合成、摄取和降解等作用有关.

JNK信号通路参与Aβ毒性对大鼠海马神经元的损伤

目的探讨β-淀粉样蛋白(β-amyloid peptide,Aβ)毒性对大鼠海马神经元的损伤以及JNK信号转导通路在此过程中的作用。方法应用Aβ1-40注射大鼠双侧海马CA1区建立毒性损伤模型,通过HE染色、Nissl染色、TUNEL染色、免疫组化法、透射电镜并结合图像分析技术研究海马的病理学变化以及神经元的存活与凋亡、超微结构及p-JNK阳性细胞率。结果与对照组比较,大鼠注射Aβ后,海马CA1区锥体细胞排列松散,数目减少,神经元固缩、浓染,胶质细胞明显增生,超微结构可见明显凋亡特征,TUNEL阳性细胞数明显增多(P<0.01),p-JNK阳性细胞比例明显升高(P<0.01)。结论 Aβ可明显诱导海马神经元凋亡,JNK信号转导通路参与了Aβ的神经毒性损伤作用。

人参、银杏叶提取物对PDAPP^(V717I)转基因小鼠海马乙酰胆碱和单胺类神经递质水平的影响

目的探讨人参、银杏叶提取物配伍(脑维康,NWK)对APP转基因小鼠海马神经递质水平的影响及其可能机理。方法以PDAPPV717I转基因小鼠为老年性痴呆动物模型,给药组小鼠每天1次灌胃给予NWK(31mg/kg和62mg/kg)12周。以高效液相电化学方法检测小鼠海马乙酰胆碱(ACh)含量及海马单胺类神经递质及其代谢产物的含量。结果与非转基因小鼠比较,转基因组小鼠海马ACh、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)水平均显著降低(P<0.01),5-羟色胺(5-HT)水平显著升高(P<0.05),去甲肾上腺素、多巴胺水平分别升高14.6%和17.7%。给药后NWK两个剂量组小鼠海马ACh含量均较转基因非给药组显著升高(P<0.05);NWK高剂量组小鼠海马5-HT水平显著下降(P<0.05)。结论NWK对APP转基因小鼠海马ACh和单胺能系统、特别是胆碱能和5-HT能系统具有明显的调节作用,这可能是其改善多种AD模型动物学习记忆能力的机理之一,从而对老年性痴呆有一定的治疗作用。

老年性痴呆动物模型研究进展

老年性痴呆 (Alzheimersdisease,AD)是以老年斑和神经纤维缠结为特征的一种进行性、退行性神经系统疾病。AD动物模型的研究可大大促进AD病因、发病机制及药物筛选的研究 ,是深入开展AD研究的必要条件之一。损伤性、自然衰老动物和复合型动物模型能够复制出认知缺损等表现 ,但缺乏AD的特征性病变。SAM P/ 8是相对理想的模型。转基因小鼠是目前研究的热点 ,为在体研究AD的特定发病基因及其代谢产物提供了新的载体。随着AD治疗学由对症治疗转向对因治疗 ,AD模型也应顺应这一发展。

脑维康对D半-乳糖致脑老化模型大鼠学习记忆的影响

目的:观察脑维康(NWK)对D-半乳糖致脑老化大鼠模型学习记忆障碍的影响。方法:大鼠背颈部皮下连续注射D-半乳糖生理盐水(80 mg/kg)8周建立脑老化大鼠模型,灌胃给予NWK 8周。以Morris水迷宫试验检测模型大鼠的空间学习记忆能力,以分光光度法检测乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)、黄嘌呤氧化酶法测定过氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、硫代巴比妥酸法测定丙二醛(maleic dialdehyde,MDA)的变化,以HE染色进行脑组织形态学观察。结果:D半-乳糖致脑老化大鼠在水迷宫中的游泳持续时间、路径长度明显延长。给药8周后,NWK 23 mg/kg、46 mg/kg组大鼠游泳持续时间、路径长度较模型组明显缩短,搜索策略均有改进。与空白组比较,模型组大鼠全脑AChE活力、MDA含量均明显升高,SOD活力明显降低。给药8周后,与模型组大鼠相比,NWK各给药组大鼠全脑AChE活力明显降低,NWK 46 mg/kg组大鼠全脑MDA含量明显降低,脑组织形态结构有所改善。结论:NWK可改善D-半乳糖致脑老化大鼠模型学习记忆能力。

川芎—赤芍药对研究进展

川芎—赤芍是著名的活血化瘀药对,川芎活血行气、祛风止痛,赤芍清热凉血、散瘀止痛,二者均为活血要药,配伍后达到同类相须、相辅相成、相互促进等功用,能够发挥抗动脉粥样硬化,改善血液流变性,改善心肌缺血,保护内皮功能,保护脑组织及神经等作用。芎芍胶囊是川芎和赤芍有效组分配伍的典型应用,主要用于治疗心血管疾病。本文从功效及物质基础、药理研究、临床应用方面对川芎—赤芍药对的研究进行了系统的阐述,以期为川芎—赤芍药对的进一步研究与开发提供依据。

原发性高血压与血管内皮功能的相关性分析

目的通过临床调查病例,建立高血压及合并糖尿病患者的血管内皮功能标准,并分析其与中医证型相关性。方法测定89例高血压患者、48例高血压合并糖尿病患者及20例对照组的年龄、性别、心率、体重指数(BMI)、血压、血流依赖性血管内皮舒张功能(FMD)、抽取空腹血糖或行OGTT试验、生化全项、Hb Alc、SOD及中医分型等数据,以SPSS20.0软件进行统计分析。结果与对照组相比,高血压组及高血压合并糖尿病组FMD值均显著降低(P<0.01);与高血压组相比,高血压合并糖尿病组FMD值亦显著降低(P<0.01);FMD在高血压2级、3级水平患者FMD明显低于对照组(P<0.01);高血压合并脉压差增大组与对照组比较FMD值显著降低(P<0.01);FMD在有心血管临床并发症组与对照组相比明显降低(P<0.01);FMD与超氧化物歧化酶(SOD)、高密度脂蛋白(HDL-C)呈正相关,与年龄、BMI、尿酸、糖化血红蛋白均呈负相关;高血压组中医证型分布依次是阴虚阳亢证<阴阳两虚证<肝火旺盛证<血瘀证<痰湿壅盛证。高血压合并糖尿病患者血管内皮功能损伤的程度最严重,高血压组其次;高血压2级、3级水平血管内皮损伤程度较轻度高血压严重;合并脉压差增大时血管内皮功能进一步损伤。结论 FMD能很好地预测出高血压病人发生心血管系统靶器官损害的倾向,并在中医证型比较中与血瘀型关系最为密切。

维脑康胶囊对慢性脑低灌注大鼠脑内胆碱能系统及清除自由基能力的影响

目的：观察维脑康胶囊（WNK）对慢性脑低灌注所致大鼠认知障碍的干预作用及机制。方法：结扎大鼠双侧颈总动脉，4周后分为：假手术组，模型组，达纳康组，WNK8．25，16．5，33．0mg·kg^-1组；同时灌胃给药，给药周期8周，测定大鼠在MORRIS水迷宫中寻找平台的持续时间，同时HPLC—ECD测定脑组织中乙酰胆碱（ACh）含量，比色法测定乙酰胆碱酯酶（AChE）活性、超氧化物歧化酶（SOD）活性及丙二醛（MDA）含量。结果：与模型组比较，给药4～8周，WNK组大鼠寻找平台时间明显缩短，脑内AChE活性明显降低（P〈0．05），ACh含量明显增加（P〈0．05～0．01），SOD活性明显增强（P〈0．05）。结论：WNK对慢性脑低灌注引起的认知障碍的改善作用可能与增强清除自由基能力以及保护胆碱能系统有关。

维脑康对小鼠记忆障碍的影响

目的:观察维脑康(WNK)对小鼠获得性记忆与巩固性记忆障碍的保护作用。方法:将小鼠随机分为空白对照组、哈伯因组、达纳康组、WNK(11、22、44mg/kg)组,连续给药15日,给药14日时采用东莨菪碱、利血平、氯丙嗪、亚硝酸钠、乙醇造成小鼠记忆障碍,15日观察各组小鼠跳台或避暗的错误次数与潜伏期。结果:WNK可不同程度的减少模型小鼠错误次数,延长潜伏期。结论:WNK对化学损伤造成的小鼠获得性、巩固性和再现性记忆障碍有改善作用。

川芎-赤芍药对差异性调节冠心病血管新生的研究进展

改善心肌缺血和抗动脉粥样硬化是冠心病防治的重点。血管新生对冠心病存在双面性作用,可促进缺血心肌侧支血管生长但又易导致动脉粥样硬化斑块破裂,中医整体观指导下的活血化瘀治法可能有效解决冠心病治疗中的这一矛盾。川芎-赤芍药对是活血化瘀经典药对,临床对动脉粥样硬化、冠心病心绞痛和PCI术后再狭窄等有较好疗效,可促进缺血心肌血管新生而改善心肌缺血、抑制斑块内血管新生而抗动脉粥样硬化,其差异性调节血管新生的机制可能是通过调节以缺氧或炎症为主导的不同微环境、同一分子与不同受体/亚型的结合、共同的血管新生靶点实现的,提示活血化瘀方药可同步实现“弱者彰之”“亢者承之”的差异性调节作用,最终在整体水平上改善冠心病。

氧化应激与高血压

氧化应激是血管损伤的重要因素,而血管受损后其收缩和舒张功能失调是血压异常的关键,因此阐明氧化应激在高血压发病中的具体作用及其机制对高血压的防治具有重要意义。血管氧化损伤与活性氧类(ROS)的过量生成密切相关,内皮型一氧化氮合酶(e NOS)作为血管内皮合成一氧化氮的关键酶,能拮抗ROS的生成、保护血管内皮。而e NOS活性受小凹蛋白、钙调蛋白、热激蛋白及血管紧张素Ⅱ等多种蛋白调节,其能使一氧化氮和ROS保持动态平衡。此外,血管促氧化酶系统和抗氧化酶系统是ROS生成、血管氧化损伤的又一重要因素。因此,通过调节血管氧化应激水平防治高血压可能成为未来的研究方向。

我国植物药(中药)研究的问题与建议

目的 :为我国植物药 (中药 )研究与全球性植物药研发相适应提供参考。方法 :结合作者的工作体会 ,归纳、分析当前我国植物药 (中药 )研究中存在的诸如资源、质量、活性成分等问题并提出建议。结果和结论 :面对全球性植物药研发带来的前所未有的契机 ,我国植物药 (中药 )顺利走向世界必须解决现存的几个主要问题。

气血并治方治疗动脉粥样硬化相关疾病的研究进展

动脉粥样硬化是心脑血管病的主要危险因素和病理基础,动脉粥样硬化相关疾病的发病率和死亡率一直居高不下。近两千余年的临床经验表明,中医药治疗动脉粥样硬化相关疾病有较好的疗效。近年来,研究者借助中西医互补的优势,不断探究中医药治疗动脉粥样硬化相关疾病的疗效和机制,获得显著成就。以活血化瘀经典复方血府逐瘀汤为基础精简化裁的气血并治方具有活血化瘀、理气止痛的功效,临床对颈动脉粥样硬化、心脑血管动脉硬化等疾病均有较好的疗效。对气血并治方治疗动脉粥样硬化相关疾病的药理作用机制及临床应用进行综述,以期为动脉粥样硬化相关疾病的治疗提供新的策略和靶点,为抗动脉粥样硬化药物的研发提供新的思路。

磨牙缺失后大鼠海马区乙酰胆碱含量改变的研究

目的探讨咬合支持丧失(磨牙缺失)对大鼠脑部海马区胆碱能神经递质的影响。方法24只10月龄Wistar大鼠随机分为对照组、单侧磨牙拔除组和双侧磨牙拔除组,6周后,大鼠快速断头处死,分离左右侧海马组织,分别测定乙酰胆碱含量和乙酰胆碱酯酶活性。结果单侧磨牙拔除组大鼠海马内乙酰胆碱含量较对照组降低(P<0.05),双侧磨牙拔除组大鼠海马内乙酰胆碱含量较对照组也降低(P<0.001),并且双侧组乙酰胆碱含量较单侧组低(P<0.05);各组间乙酰胆碱酯酶的活性均无显著性差异(P>0.05)。结论咬合支持丧失后6周,可以导致大鼠脑部海马区胆碱能神经递质—乙酰胆碱含量下降。

松龄血脉康胶囊对自发性高血压大鼠高血压相关基因表达的影响

目的::探讨松龄血脉康对自发性高血压大鼠血压的干预作用及机制。方法:自发性高血压大鼠随机分组后分别灌胃给予松龄血脉康和氯沙坦钾,连续给药9周,每周检测收缩压、舒张压变化。以HE染色观察药物对大鼠主动脉病理组织形态学影响,qPCR阵列技术检测高血压相关因子RNA水平的变化,继而借助String及KEGG Pathway数据库对差异基因进行网络分析。结果:给药9周后,与模型组比较高剂量松龄血脉康组及氯沙坦钾组大鼠的收缩压、舒张压均显著降低;高剂量松龄血脉康组大鼠血浆中血管紧张素Ⅱ水平较模型组明显降低,且与氯沙坦组比较特别显著性降低;对qPCR筛选得到的12个差异表达基因进行网络分析发现,Pde5a、Prkg1、Gucy1b3和Prkg2相互作用明显,且均参与cGMP-PKG通路的活化。结论:松龄血脉康降低自发性高血压大鼠血压,其机制可能与降低大鼠血浆中AngⅡ水平、调控差异表达基因Pde5a、Prkg1、Gucy1b3和Prkg2共同参与的c GMP-PKG通路有关。