浓缩生长因子与生物陶瓷材料iRoot BP体外对人牙髓细胞存活、增殖和矿化的影响

背景:浓缩生长因子富含多种高浓度生长因子,可以诱导牙髓细胞增殖,促进局部牙本质的修复。目的:对比浓缩生长因子及生物陶瓷材料i RootBP在体外对人牙髓细胞存活、增殖及矿化的作用,进而评估浓缩生长因子用作直接盖髓材料的可行性。方法:采集健康成年人外周血,离心提取浓缩生长因子。采用改良组织块酶消化法分离培养人牙髓细胞,分别采用浓缩生长因子膜片浸提液与i RootBP材料浸提液处理细胞,采用CCK-8法检测细胞增殖。将人牙髓细胞分别接种于浓缩生长因子膜片与i RootBP材料表面,检测细胞的碱性磷酸酶活性、细胞周期分布、细胞凋亡与成牙相关基因表达。结果与结论:(1)CCK-8检测显示,浓缩生长因子膜片浸提液组处理1,3,7 d的细胞增殖快于i RootBP材料浸提液组(P <0.05);(2)浓缩生长因子组处理3 d的细胞碱性磷酸酶活性高于i RootBP组(P <0.05),两组处理1,7 d的碱性磷酸酶活性比较差异无显著性意义(P> 0.05);(3)浓缩生长因子组处理1,3,7 d的S期细胞百分比均高于i RootBP组(P <0.05),处理1,3,7 d的细胞凋亡率均低于i RootBP组(P <0.05);(4)处理第7天的q RT-PCR检测显示,浓缩生长因子组Runx2、碱性磷酸酶、牙本质涎磷蛋白、骨钙素m RNA水平均高于i RootBP组(P <0.05);(5)结果表明,浓缩生长因子可促进人牙髓细胞的存活、增殖及矿化,有望作为直接盖髓材料。

浓缩生长因子促人脐静脉血管内皮细胞成血管化作用研究

目的研究浓缩生长因子(CGF)对人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)的增殖、迁移和分化的作用。方法取健康志愿者静脉血制成CGF,再用CGF制备浓缩生长因子提取液(CGFe)。体外培养细胞分为2%CGFe组、5%CGFe组、10%CGFe组和对照组。CCK-8和细胞周期实验检测各组细胞增殖活性;划痕实验检测内皮细胞迁移;实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)检测各组细胞血管内皮生长因子(VEGF)、趋化因子受体4(CXCR4)、血小板衍生因子(PDGF)m RNA表达量。结果 CCK-8法和细胞周期结果显示CGFe明显促进细胞增殖(P<0.05),且增殖效应呈CGFe浓度依赖性,各组间均有统计学差异(P<0.05);划痕实验中12 h时实验组划痕愈合效率明显高于对照组,且愈合效率与CGFe浓度呈正比(P<0.05);CGFe明显促进VEGF、CXCR4、PDGF的m RNA表达量,促进效应与浓度呈正比(P<0.05)。结论 CGFe能有效促进HUVECs的增殖、迁移和成血管分化。

人根尖牙乳头干细胞条件培养基体外诱导成牙分化的研究

目的探讨人根尖牙乳头干细胞(conditional medium of stem cells from apical papilla,SCAP-CM)条件培养基诱导牙髓细胞成牙分化的作用。方法从人新鲜拔除的离体牙中,分离培养根尖牙乳头干细胞,收集其在常氧和低氧环境下培养的条件培养基[SCAP-CM(N)和SCAP-CM(H)]。用浓缩后的SCAP-CM(N)、SCAPCM(H)处理牙髓细胞,检测牙髓细胞的碱性磷酸酶活性,以qRT-PCR检测成牙相关基因Runx2、ALP、DSPP、OCN及DMP-1的表达,以WesternBlot检测牙本质涎蛋白的表达。结果在加入成骨诱导培养基的前提下,7天后SCAP-CM(H)组的碱性磷酸酶活性明显提高,SCAP-CM(N)组其次,而空白对照组的碱性磷酸酶活性最低。在基因水平上,相比空白对照组,SCAP-CM(N)和SCAP-CM(H)组的成牙相关基因Runx2、ALP、DSPP在mRNA水平上的表达增加。在蛋白水平上,SCAP-CM(H)和SCAP-CM(N)组DSP表达较其他组有所增加。结论SCAP-CM在体外具有一定的诱导成牙本质的能力,具有协同促进矿化的能力,在再生性牙髓治疗中具有潜在的应用价值。

树脂预衬对自粘接树脂水门汀粘接纤维桩的粘接强度和耐久性的影响

目的研究树脂预衬对自粘接树脂水门汀粘接纤维桩的粘接强度和耐久性的影响。方法经过严格筛选的80颗人下颌第一前磨牙经根管治疗后按不同处理因素随机分为4组:树脂预衬+模拟老化(RA);树脂预衬+不模拟老化(RN);未树脂预衬+模拟老化(NA);未树脂预衬+不模拟老化(NN)。各组离体牙进行标准桩道预备。采用复合树脂对RA和RN组纤维桩进行树脂预衬。按标准程序粘接纤维桩。4组试件在生理盐水中储存24h后,RN和NN组测试即刻粘接强度,RA和NA组进行6m的热循环实验后测试老化后粘接强度。在纤维桩的根颈、中、尖位置分别取1mm厚度的薄片试件进行粘接强度测试。结果采用方差分析,Turkey检验(α=0.05)。扫描电镜观察并统计断裂模式,采用Fisher精确概率法分析(α=0.05)。结果桩道深度(P=0.031)和模拟老化(P=0.012)对粘接强度的影响有统计学意义。随桩道深度的增加,粘接强度下降。模拟老化降低粘接强度。树脂预衬(P=0.417)对粘接强度的影响没有统计学意义。但是,在桩道的根颈部,树脂预衬(P=0.032)增加粘接强度,模拟老化(P=0.011)降低粘接强度,并且树脂预衬与模拟老化有交互作用(P=0.038)。各组断裂模式的差异没有统计学意义。树脂水门汀与牙本质的粘接界面断裂发生率最高,混合断裂其次。结论树脂预衬可增加自粘接树脂水门汀粘接的纤维桩根颈部的粘接强度,并可增加其粘接耐久性。

翻转课堂在口腔实验教学设计中的应用

学生自主学习能力的激发与综合能力的提升一直以来是教学创新改革的关注点,翻转课堂教学模式作为教学创新改革的着力点,旨在解决这一问题。故本文结合现有教学实践,对学科应用局限性问题、教与学能力匹配度问题以及教学成本问题进行分析,有针对性地将翻转课堂设计融入混合式教学模式,在口腔医学专业牙体牙髓病学实验教学中进行具体实施。文中初步将实验课堂划分课前微课、初阶翻转、高阶翻转、成果评价四个阶段,同时辅以具体教学内容说明,以期为相关课程中的教学设计提供借鉴。

交联剂对一种酸蚀-冲洗粘接剂SB2的牙本质粘接性能的影响

目的:探索3种交联剂对一种酸蚀-冲洗粘接剂Adper^(TM)Single Bond 2(SB2)的牙本质粘接性能的影响。方法:72颗人离体磨牙随机分为4组(n=18),分别应用蒸馏水,碳二亚胺(EDC,1 mol/L),表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG,0.1%)和核黄素(RF,0.1%)预处理后涂布SB2,然后制作树脂粘接试件。每种预处理方式的试件分为即刻组和老化组(n=9),对老化组样本行热循环处理。分别在粘接后24 h和热循环老化后检测剪切强度,观察断裂模式,并通过扫描电镜(SEM)观察粘接界面和界面纳米渗漏。双因素方差分析和Tukey检验分析剪切强度。结果:4组即刻组剪切强度差异无统计学意义(P>0.05),老化前后EDC和EGCG组剪切强度差异无统计学意义(P>0.05)。预处理方式和老化的交互作用差异有统计学意义(P<0.05)。断裂模式及SEM观察显示EDC和EGCG组具有良好的粘接界面。结论:EDC和EGCG预处理不影响SB2的即刻剪切强度,并可维持老化后的剪切强度,改善粘接界面。

血小板浓缩生长因子对人牙髓细胞存活及其增殖分化的影响

目的探讨血小板浓缩生长因子(Concentrate Growth factors,CGF)对人牙髓细胞(human dental pulp cells,hDPCs)增殖分化的影响,为其今后在牙髓及根尖周疾病治疗应用进行前期研究。方法从因正畸治疗拔除的健康恒牙分离培养出人牙髓细胞,在体外采用CGF或矿物三氧化物聚合体(mineral trioxide aggregate,MTA)处理人牙髓细胞,分别在第1、3、7天,CCK-8法测定各组细胞增殖水平、碱性磷酸酶活性、流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡情况。结果与MTA组相比,CGF组的细胞增殖能力增强,S期细胞的比例增加,且第3、7天ALP活性增高(P<0.05),而第1、7天牙髓细胞凋亡率降低。结论 CGF在体外具有良好的促进牙髓细胞增殖,抗凋亡以及诱导成骨/成牙分化的能力。