猪流行性腹泻的综合防控方案

猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的一种接触性肠道传染病,也是一种对猪场生产及经济效益影响较大的疾病。猪场防控猪流行性腹泻的主要措施有疫苗免疫、消毒、检测、净化等,但因PEDV的变异速度较快,从以往的防控效果来看,目前疫苗的免疫效果不稳定,采用消毒等管理措施起到的效果也不稳定。部分猪场每年因PED死亡的哺乳仔猪数占整个哺乳阶段总仔猪数的30%以上,有的甚至超过50%,对猪场造成较大损失。本研究以华东地区某猪场为基地,通过技术分析、试验对比,探索该猪场PED的有效防控措施,并形成综合防控方案,为该猪场后期防控及行业防控提供参考。

分散固相萃取结合超高效液相色谱-串联质谱法测定猪、鸡可食性组织中巴氯芬残留量

建立分散固相萃取结合超高效液相色谱-串联质谱法测定猪、鸡可食性组织中巴氯芬残留量的分析方法。取均质后的动物组织经乙腈-1 moL/L高氯酸(80∶20,V∶V)溶液提取,加入无水硫酸镁和氯化钠进行脱水和盐析,高速离心分层后取适量乙腈层溶液经200目C18粉末净化后,滤液以40℃水浴氮气吹干。残渣以乙腈-0.1%甲酸(15∶85,V∶V)复溶后,以反相C18为固定相,0.1%甲酸水溶液与0.1%甲酸乙腈溶液为流动相,采用梯度洗脱程序进行分离,以超高效液相色谱-串联质谱法进行同位素内标法定性定量分析。结果显示,巴氯芬在0.5~50.0μg/kg范围内线性关系良好(r=0.9994),方法的检出限为0.25μg/kg,定量限为0.50μg/kg,回收率批间均值在89.14%~109.52%之间,批内批间变异系数<10%。本方法具有较好的灵敏度、准确度与精密度,适用于猪、鸡可食性组织中巴氯芬残留量的测定。

猪繁殖与呼吸综合征及其防控对策

猪繁殖与呼吸综合征是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,RRRSV)引起的一种传染病,对猪群的影响主要是降低分娩率,减少产仔数和窝均断奶仔猪数,以及仔猪、生长育肥猪的呼吸道问题。我国的RRRSV以北美型为主,临床上以妊娠母猪流产,产死胎、弱胎、木乃伊以及仔猪的呼吸困难和高死亡率为特征,病理学上以局灶型间质性肺炎为特征。2006年之后,该病在全国范围内流行,对我国养猪业影响很大。RRRSV容易变异、毒株多样、感染时间、防控难度大。猪感染PRRS后会造成免疫抑制,易出现各种混合感染和继发感染,这增加了防控难度。本文阐述了猪繁殖与呼吸综合征的病原学、流行病学、临床症状、病理变化和相关的防控措施。

高效液相色谱-串联质谱法测定虾中万古霉素及去甲万古霉素残留量

建立了虾中万古霉素和去甲万古霉素残留量的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)检测方法。样品经0.1%甲酸-乙腈(9∶1,体积比)混合溶液提取,乙腈饱和的正己烷除脂,PCX结合Florisil固相萃取柱进行净化后,以乙腈和0.1%甲酸溶液为流动相,经CAPCELL PAK MG-C18色谱柱分离后,采用高效液相色谱-串联质谱在多反应离子监测(MRM)模式进行测定,以双去氯万古霉素作为内标物,内标法定量。结果表明:万古霉素和去甲万古霉素在2~250 ng/m L范围内呈良好的线性关系,相关系数(r2)均大于0.99。在5,25,50μg/kg加标水平下,万古霉素和去甲万古霉素的平均回收率为87.2%~102%,相对标准偏差为1.3%~8.7%。方法的检出限(LOD)为2.0μg/kg,定量下限(LOQ)为5.0μg/kg。该方法灵敏、准确,重复性好,适用于虾类中万古霉素及去甲万古霉素残留量的测定。

液相色谱-串联四极杆质谱法测定鸡蛋中8种三唑类农药残留量

目的建立液相色谱-串联四极杆质谱法测定鸡蛋中丙环唑、三唑酮、烯唑醇、抑霉唑、三唑醇、戊唑醇、氟硅唑和三环唑残留量的分析方法。方法取均质后的鸡蛋样品经乙腈溶液提取,加入无水硫酸镁和氯化钠进行脱水和盐析,高速离心后,取适量上层提取液经0.1%(V:V)甲酸稀释后,用中性氧化铝粉末净化并以10000 r/min离心取上清液,过0.22μm滤膜后上机测定。使用反相色谱柱进行分离,流动相为0.1%甲酸与乙腈,采用梯度程序进行洗脱,串联四极杆质谱法进行定性定量分析。结果 8种农药在2.5~250μg/kg范围内线性关系良好(r≥0.995),方法的检出限为1μg/kg,定量限为2.5μg/kg,添加回收率在78.31%~88.53%内,相对标准偏差低于10%。结论该方法具有较好的准确度与精密度,适用于鸡蛋中丙环唑、三唑酮、烯唑醇、抑霉唑、三唑醇、戊唑醇、氟硅唑和三环唑的残留量测定。

超高效液相色谱-串联四极杆质谱结合分散固相萃取技术测定禽蛋中五氯苯酚残留量

目的建立超高效液相色谱-串联四级杆质谱结合分散固相萃取技术测定禽蛋中五氯苯酚残留量的分析方法。方法取均质后的禽蛋样品经乙腈溶液提取,加入无水硫酸镁和氯化钠进行脱水和盐析,高速离心分层后取适量上层提取液,经0.1%(V:V)甲酸溶液稀释后,用酸性氧化铝粉末净化样品并以10000r/min离心取上清液,过0.22μm滤膜后上机测定。使用流动相为乙腈:0.1%甲酸=65:35(V:V),采用反相色谱柱分离,等度程序洗脱,串联四级杆质谱法定性定量分析。结果五氯苯酚在5~250μg/kg范围内线性关系良好(r>0.995),方法的检出限为2.5μg/kg,定量限为5μg/kg,添加回收率为74.44%~91.91%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)低于10%。结论该方法具有较好的精密度与准确度,适用于禽蛋中五氯苯酚残留量的测定。

犬的生产过程及助产要点

犬是人类最忠实的朋友，犬的繁殖尤其是优良犬种的繁殖具有很高的经济价值和社会价值。笔者长期从事于犬病诊疗和育种工作，每年接生数十窝幼犬，积累了一定的经验，将犬的生产过程及人工助产要点叙述如下，与大家共享。犬妊娠期为60天，但多为不足60天或超过60天。笔者接触妊娠期最短的为56天，最长的为67天。

犬子宫蓄脓症的诊治体会

子宫蓄脓症是指含脓物质在子宫内的大量聚集，是子宫腔内感染而贮留大量脓汁并伴有子宫内膜囊泡性增殖的疾病，是母犬生殖系统的一种常见病。分为开放型和闭合型两种。表现为精神沉郁、呕吐、腹围增大，开放型还表现为阴道口有液体流出，是由致病微生物在子宫内大量繁殖．子宫腺分泌加强，液体积聚引起的。严重影响了犬的正常生活生产，若不及时科学地诊断和治疗甚至危及生命。笔者从事犬猫疾病诊疗期间接触此病十余例，有些心得，与大家交流。

对犬猫牙石的认识与诊治体会

犬猫牙石病是2岁以上犬猫易发的疾病,尤其是5-8岁时发生的比例很高。牙石病是一种形成很慢的疾病,因此不同于其他疾病易被主人发现。笔者从事于犬猫疾病的诊治工作8年，共诊治犬猫牙石病19例，有了一些认识与体会，与大家共享。

浅谈预防犬难产的几项措施

难产是动物繁殖过程中常见的一种现象，造成动物繁殖率降低和危及母畜生命。种犬具有较高的经济价值，再加上犬是人类最好的朋友，避免难产具有十分重要的意义，笔者长期从事犬的繁殖工作，积累了一些预防难产的经验，与大家共享。

用血凝抑制实验(HI)检测非典型鸡新城疫

非典型鸡新城疫(CND)是近10多年来一些专家、学者应用的新名词,由于现在鸡群普遍进行了新城疫的免疫接种,使得新城疫的发病向非典型化转变。

乳铁蛋白的生物学功能及应用前景

乳铁蛋白是一种天然、具有免疫功能的活性铁结合糖蛋白，主要由哺乳动物体内腺上皮细胞和中性粒细胞产生，广泛分布于具有分泌功能的组织及其分泌物（如乳汁、血液、泪液、精液、胆汁、胰液、小肠腺液）中，具有杀菌、抗病毒、抗氧化、抗癌、促进肠道铁的转运和吸收、调节免疫系统等多种生物学功能。因此，作为一种饲料添加剂在动物生产中具有广泛的应用前景。

牛病毒性腹泻的流行病学调查

牛病毒性腹泻（BVD ）是由黄病毒科、瘟病毒属的牛病毒性腹泻病毒（BV DV ）引起的一种复杂的传染病性疾病.该病常见的有发烧 ,黏膜溃烂 ,溃疡 ,腹泻 ,怀孕母牛流产 ,牛体内的白细胞减少或者是畸形牛胚胎等现象[1 ] .此病广泛分布于世界各地 ,给奶牛业的发展带来较大的经济损失.近年来 ,我国BVD血清流行病学调查结果表明 ,该病在我国流行范围较广且阳性率较高.BVD在我国西北、西南、华北、东北等地区流行 ,流行程度呈上升趋势[2] . BV DV的隐性感染均以持续性和免疫耐受为特点 ,由此造成群体持续感染 ,导致病原清除和防控都极其困难 ,严重危害养牛业的健康发展.

液相色谱-串联质谱法测定水产品中喹乙醇和卡巴氧的代谢物残留量

目的建立液相色谱-串联质谱法(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)测定水产品中喹乙醇代谢物3-甲基-喹噁啉-2-羧酸(3-methyl-quinoxaline-2-carboxylic acid,MQCA)和卡巴氧代谢物喹噁啉-2-羧酸(quinoxaline-carboxylic acid,QCA)的残留量的分析方法。方法样品在0.2 mol/L Tris/HCL缓冲溶液作用下,47℃水浴振荡进行酶解,将与组织以结合态形式存在的MQCA和QCA转变为游离态,酶解液经盐酸酸化,乙酸乙酯提取,提取液吹干后加入20%甲醇水溶解,过PAX固相萃取柱净化,浓缩定容,采用ACQUITY UPLC HSS T_3色谱柱分离,以乙腈、0.1%甲酸溶液为流动相,多反应离子监测(multiplereaction reaction monitoring,MRM)模式测定,内标法定量。结果 MQCA和QCA在2.5~100 ng/m L范围内呈良好的线性关系,相关系数(r^2)均大于0.99。在0.5、2.5和10μg/kg加标水平下(n=6),MQCA和QCA的平均回收率为75.6%~92.4%,相对标准偏差为3.81%~9.73%。MQCA和QCA的检出限均为0.25μg/kg,定量限均为0.5μg/kg。结论该方法灵敏、准确,重复性好,适用于水产品中MQCA和QCA残留量的同时测定。

亚甲基蓝检测方法及代谢动力学研究进展

亚甲基蓝(methylene blue,MB)属于噻嗪类染料,在医学治疗和染色试剂等方面的应用具有100多年的历史。在孔雀石绿、结晶紫等三苯甲烷类染料被禁用的情况下,亚甲基蓝作为替代药物被用于水产品中,但是其毒性也对水产品以及人类健康也造成了一定的危害。本文主要对亚甲基蓝残留检测方法(液相色谱法、液相色谱-串联质谱法、毛细管电泳法以及电化学方法等)以及其在动物体内的代谢规律进行综述,以期为亚甲基蓝的科学应用和合理开发提供参考。

高效液相色谱法测定鸡蛋中氟苯尼考残留量的不确定度研究

通过数学模型,对DB34/T 1376-2011HPLC法测定鸡蛋中氟苯尼考残留量的方法不确定度进行评估。从影响不确定度的标准溶液配制u_s、样品的前处理u_p、仪器测量的不确定度u_m三个主要因素,对不确定度分量进行计算合成。结果表明,该方法在本实验室的合成相对标准不确定度为u_x=0.028 8,k=2。