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中国美利奴绵羊磷脂酶C zeta基因真核表达载体的构建及其表达研究 被引量:4
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作者 刘强 贺志锐 +2 位作者 王银龙 乌热力哈孜 赛务加甫 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期541-546,共6页
旨在构建PLCζ真核表达载体,初步研究其在体细胞系中的表达特性。本研究用PCR技术扩增出PLCζ基因片段,克隆至载体pEGFP-N1,鉴定无误后,将构建了重组质粒pEGFP-N1-PLCζ转染293T细胞和绵羊成纤维细胞,在倒置荧光显微镜和激光扫描共聚焦... 旨在构建PLCζ真核表达载体,初步研究其在体细胞系中的表达特性。本研究用PCR技术扩增出PLCζ基因片段,克隆至载体pEGFP-N1,鉴定无误后,将构建了重组质粒pEGFP-N1-PLCζ转染293T细胞和绵羊成纤维细胞,在倒置荧光显微镜和激光扫描共聚焦显微镜下观察重组质粒在细胞中的表达和分布。经酶切与测序证明,本试验成功的构建了pEGFP-N1-PLCζ真核表达载体,并且成功与绿色荧光蛋白融合表达。本试验实现了pEGFP-N1-PLCζ在绵羊胎儿成纤维细胞中的表达,这将有利于进一步通过核移植来研究其重组蛋白对卵母细胞的激活作用。 展开更多
关键词 磷脂酶C ZETA PEGFP-N1 真核表达
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雪鸡的驯化及人工养殖技术 被引量:3
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作者 米来.夏日甫 乌热力哈孜 +2 位作者 赛务加甫 冷青文 海肉拉 《中国家禽》 北大核心 1999年第6期31-32,共2页
就雪鸡诱捕,人工驯养和1995~1996两年间先后两次采用小型电孵机孵化雪鸡种蛋及育雏工作进行了总结,人工孵化雪鸡种蛋20个,其受精率为100%,出雏20只,孵化率为100%,育雏成活率达85%以上。为今后大量人工养... 就雪鸡诱捕,人工驯养和1995~1996两年间先后两次采用小型电孵机孵化雪鸡种蛋及育雏工作进行了总结,人工孵化雪鸡种蛋20个,其受精率为100%,出雏20只,孵化率为100%,育雏成活率达85%以上。为今后大量人工养殖雪鸡提供了科学依据。 展开更多
关键词 雪鸡 人工孵化 育雏 驯化 人工养殖 野生禽类
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中国美利奴绵羊磷脂酶C zeta基因表达载体的构建及原核表达 被引量:1
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作者 木尔扎提.阿勒腾别克 刘强 +3 位作者 贺志锐 王银龙 乌热力哈孜 赛务加甫 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第12期104-109,共6页
构建美利奴绵羊磷脂酶C zeta(PLCζ)融合蛋白表达载体,并在原核细胞内表达及纯化,为其特异性抗体的制备及生物学功能研究奠定基础。用PCR技术扩增出PLCζ基因片段,亚克隆到原核表达载体pCzn1中,导入Arctic Express TM(DE3)感受态细胞,I... 构建美利奴绵羊磷脂酶C zeta(PLCζ)融合蛋白表达载体,并在原核细胞内表达及纯化,为其特异性抗体的制备及生物学功能研究奠定基础。用PCR技术扩增出PLCζ基因片段,亚克隆到原核表达载体pCzn1中,导入Arctic Express TM(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达,收样后进行SDS-PAGE电泳或Western blot检验PLCζ的表达情况。用镍离子亲和层析的方法大量纯化融合蛋白。结果显示,重组质粒经PCR、酶切和测序鉴定证明载体构建正确。pCzn1表达载体在Arctic Express TM(DE3)表达菌中能很好地表达融合蛋白。表达纯化后可获得了分子量约74ku的融合蛋白,符合预期大小。成功构建pCzn1-PLCζ原核表达载体,表达并纯化了其融合蛋白,Western blot试验表明其蛋白分子的完整性良好,这将有利于对PLCζ蛋白进行深入的研究。 展开更多
关键词 磷脂酶C zeta蛋白 原核表达 WESTERN BLOT
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