芹菜素对MHCC97H源性球细胞对5-氟尿嘧啶敏感性的影响

目的 研究芹菜素(API)对人肝细胞癌MHCC97H源性球细胞(MH-SFC)对5-氟尿嘧啶(5-FU)的敏感性的影响,并探讨其分子机制。方法 应用无血清干细胞培养基超低黏附培养获得MH-SFC。CCK-8检测5-FU或API抑制MH-SFC和MHCC97H细胞存活力的半数抑制浓度(IC_(50))。实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)分析miR-34a-5p表达水平。API(10.0、40.0 μmol·L^(-1))预处理或API(40.0 μmol·L^(-1))联合miR-34a-5p抑制物(Anti-34a)共处理MH-SFC,随后测定5-FU的IC_(50)。Western blot分析MH-SFC的FoxM1及c-Myc蛋白表达水平。结果 与MHCC97H细胞相比,MH-SFC 的5-FU的IC_(50)增高。API优先抑制MH-SFC细胞存活力。API(10.0、40.0 μmol·L^(-1))预处理降低MH-SFC的5-FU的IC_(50)。与MHCC97H细胞相比,MH-SFC更低表达miR-34a-5p,同时,API上调miR-34a-5p表达。Anti-34a能消除API增强MH-SFC的5-FU敏感性和上调miR-34a-5p表达作用。此外,API(10.0、40.0 μmol·L^(-1))下调MH-SFC的FoxM1及c-Myc蛋白表达;Anti-34a能消除API下调FoxM1及c-Myc蛋白表达效应。结论 API增强MH-SFC的5-FU敏感性,其分子机制与上调miR-34a-5p表达,继而阻断FoxM1/c-Myc通路相关。

金雀异黄素调控miR-199a-5p表达抑制卵巢癌SKOV3细胞的糖酵解

目的:研究金雀异黄素能否增高miR-199a-5p表达水平及抑制卵巢癌SKOV3细胞糖酵解。方法:miR-199a-5p模拟物转染、亚细胞毒浓度的金雀异黄素(20和40μM)处理或金雀异黄素(40μM)联合miR-199a-5p抑制物转染SKOV3细胞。实时定量PCR实分析细胞miR-199a-5p表达水平,同时,检测乳酸产物和葡萄糖消耗水平。结果:miR-199a-5p模拟物有效抑制卵巢癌SKOV3细胞乳酸产生和葡萄糖消耗。亚细胞毒浓度的金雀异黄素以剂量依赖趋势增高卵巢癌SKOV3细胞miR-199a-5p表达水平和减少SKOV3细胞的乳酸产物和葡萄糖消耗。此外,miR-199a-5p抑制物能救援金雀异黄素抑制SKOV3细胞乳酸产物和葡萄糖消耗量作用。结论:金雀异黄素通过上调miR-199a-5p表达水平抑制卵巢癌SKOV3细胞糖酵解。

miR-34a-5p下调Notch1表达增强三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞对紫杉醇的敏感性

目的:本研究旨在阐明miR-34a-5p是否通过下调Notch1表达,进而增强三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞对紫杉醇的化疗敏感性。方法:qRT-PCR测定MCF-10A细胞与MDA-MB-231细胞miR-34a-5p的表达水平;以miR-34a mimic瞬时转染MDA-MB-231细胞,qRT-PCR与western blot分析Notch1表达情况,最后CCK-8试剂盒测定紫杉醇对于不同Notch1表达水平MDA-MB-231细胞的细胞毒作用。结果:miR-34a-5p在正常乳腺MCF-10A细胞高表达,而在三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞低表达;转染miR-34a mimic使MDA-MB-231细胞中Notch1表达降低,敲低MDA-MB-231细胞Notch1表达降低紫杉醇抑制细胞存活力作用的IC;。结论:miR-34a-5p通过下调Notch1表达,进而增强紫杉醇抑制三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞存活力作用。