发酵中药和油莎豆复合物对湖羊生长性能及血清抗氧化和免疫指标的影响

【目的】研究发酵中药和油莎豆复合物对湖羊生长性能、血清抗氧化及免疫指标的影响,为新型饲料添加剂的开发提供依据。【方法】选取体重相近、健康状况良好的育肥湖羊40只,随机分为2组:对照组和试验组,每组20只。对照组湖羊饲喂基础饲粮,试验组湖羊在基础饲粮中添加2%复合发酵物,预试期7 d,正试期42 d,在正试期第0、42天分别称重,计算平均日增重;记录日采食量,计算料重比;在试验第1、21和42天颈静脉采血并分离血清,测定湖羊血清中抗氧化指标和免疫指标。【结果】试验组湖羊的终末体重、平均日增重及平均日采食量均显著高于对照组(P<0.05)。与对照组相比,在试验第21天,试验组湖羊血清中过氧化氢酶(CAT)、总抗氧化能力(T-AOC)活性及免疫球蛋白G(IgG)、γ干扰素(INF-γ)含量分别提高了2.75%、3.46%、7.28%和4.55%(P<0.05),丙二醛(MDA)含量降低了12.72%(P<0.05);在试验第42天,CAT、T-AOC活性及IgG、INF-γ含量分别提高了3.17%、3.67%、9.77%和11.91%(P<0.05),MDA含量降低了15.10%(P<0.05)。【结论】在本试验条件下,饲粮中添加2%发酵中药和油莎豆复合物能有效改善湖羊的生长性能,提高抗氧化和免疫机能,可作为一种新型饲料添加剂应用到畜牧生产中。

发酵中药后生元对母猪生产性能、抗氧化性能和肠道菌群的影响

试验旨在研究发酵中药后生元对母猪生长性能、抗氧化性能和肠道菌群等的影响。选取同批次妊娠母猪180头,随机等分为2组。对照组母猪饲喂基础饲粮,试验组母猪从上产床开始直至断奶,在全价料中添加6 kg/t发酵中药后生元,统计母猪的生产性能,测定血清抗氧化指标和肠道菌群指标。结果显示:①试验组窝均断奶数较对照组多0.64头,窝均断奶重较对照组高0.48 kg,哺乳期仔猪成活率较对照组高5.51个百分点,均差异显著(P<0.05)。②试验组母猪血清中过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)水平及总抗氧化能力(T-AOC)在第14天和第28天均显著升高(P<0.05);丙二醛(MDA)含量在第28天显著下降(P<0.05)。③与第0天相比,试验组母猪肠道菌群第28天时Faith’s PD指数显著升高(P<0.05),肠道菌群多样性得到提高;螺旋体门(Spirochaetes)、密螺旋体属(Treponema)和普雷沃氏菌属(Prevotella)等的相对丰度极显著升高(P<0.01);总体菌群的分布均匀性更好。综上,发酵中药后生元可提升哺乳期母猪的生产性能,显著增强哺乳期母猪血清抗氧化指标,降低体内有害代谢产物的积累;在改善肠道菌群结构方面具有明显效果。

发酵黄芪对肉鸡小肠黏膜上皮杯状细胞数量及MUC2基因表达的影响

为了研究发酵黄芪对肉鸡小肠黏膜上皮杯状细胞数量及MUC2基因表达的影响,随机选择1日龄且初始体重相近的健康肉鸡60羽,分为4组,分别为未发酵黄芪组、发酵黄芪组、乳酸菌组和空白对照组,试验周期为42 d,于21日龄和42日龄屠宰取样。分别利用石蜡切片-PAS染色和RT-PCR方法,计数各试验组小肠黏膜上皮杯状细胞数量及其分泌的黏蛋白MUC2基因表达的差异性变化。结果显示:与空白对照组相比,发酵黄芪组21日龄肉鸡十二指肠、空肠和回肠黏膜中杯状细胞数量分别增加了61.30%、77.63%、61.75%(P<0.01),其分泌的黏蛋白MUC2基因的相对表达分别提高了67.89%、64.35%、67.14%(P<0.01);发酵黄芪组42日龄肉鸡十二指肠、空肠和回肠黏膜中杯状细胞数量分别增加了70.89%、56.38%、40.18%(P<0.01),其分泌的黏蛋白MUC2基因的相对表达量分别提高了58.21%、54.61%、56.06%(P<0.01);未发酵黄芪组也有所提高(P<0.05),而乳酸菌组略有差异。结果表明:在肉鸡生长过程中,发酵黄芪能够提高各段小肠黏膜上皮内杯状细胞数量以及黏蛋白MUC2基因的相对表达量,且其效果优于乳酸菌和未发酵黄芪。

鸭源马尿气球菌的鉴定及全基因组测序分析

为鉴定一株鸭源分离菌,并探究其生物信息学特性,本研究分别通过Pacbio Sequel三代测序技术和Illumina NovaSeq二代测序技术对该株鸭源分离菌进行全基因组测序;基于该分离菌16S rRNA基因序列构建进化树;通过GTDB基于基因组之间的平均核苷酸相似性及采用infer软件构建120个单拷贝基因序列进化树并对其分类;利用NR数据库比对分离菌全基因组蛋白编码基因序列;采用VFDB数据库分析该分离菌相关毒力基因;采用K-B纸片法测定分离菌对21种药物的药敏性试验;采用CARD数据库分析分离菌的耐药基因;利用GO、KEGG、COG数据库对分离菌进行基因功能、信号通路及基因的注释。测序结果显示分离菌由一个环形染色体和一个环形质粒组成,大小分别为2 133 811 bp和37 505 bp,GC含量分别为39.04%和35.03%;通过GTDB分类及NR数据库比对分析显示,该菌为马尿气球菌亚种;VFDB数据库比对发现6种致病毒力基因;药敏试验结果显示分离菌对红霉素、多西环素、庆大霉素、卡那霉素等多种药物耐药,CARD数据库比对发现6种耐药基因;基因功能分析显示,1 277个基因参与25类代谢通路,1 767个基因编码蛋白质,3 304个基因与分子功能相关,1 977个基因与细胞组分相关,4 421个基因与生物学过程相关。本研究对鸭源分离菌进行全基因组测序及基因组结构、功能分析,丰富了鸭源马尿气球菌全基因组数据库资料,完善了该菌的系统进化信息,分析了其毒力因子和相关耐药基因,为后续对该菌株分子生物学特征、致病性和耐药基因筛选提供了基因组信息和基因资源。

小鹅瘟病毒、鹅星状病毒Ⅰ型与鸭疫里默氏杆菌混合感染的诊断及病原分析

【目的】2023年4月,河南新乡某地鹅场雏鹅群急性发病,死亡率高达25%,为确定引起该鹅场雏鹅发病的病因,本研究对送检的病死雏鹅进行剖检和实验室诊断。【方法】无菌采集病死雏鹅肝脏、脾脏、肾脏和小肠等组织样品及心血和肝脏外层纤维素性渗出物,通过对心血及肝脏外层纤维素性渗出物样品进行细菌分离培养、革兰染色镜检观察、16S rRNA基因及药物敏感性试验鉴定病鹅感染细菌及感染菌株的药物敏感性情况;通过PCR/RT-PCR方法对其常见雏鹅病毒性传染病病原核酸进行检验,并对阳性病原的主要结构蛋白基因进行测序分析,确定病鹅感染的病毒性病原及其分子流行病学情况。【结果】细菌学试验结果显示,分离菌株在血平板上呈半透明圆形突起、边缘整齐、表面光滑菌落,形态学观察显示,该菌为单个和成对的革兰阴性短杆菌,符合鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)的特性。16S rRNA基因扩增测序与BLAST分析进一步证实该菌为RA。药敏试验结果显示,该菌株对头孢曲松和头孢噻肟敏感,对阿莫西林、四环素和多黏菌素B耐药。常见雏鹅病毒性传染病病原核酸PCR/RT-PCR检测发现,该鹅场样品小鹅瘟病毒(Goose parvovirus,GPV)和鹅星状病毒Ⅰ型(genotypeⅠGoose astrovirus,GAstV-1)核酸呈阳性,GAstV-2、禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)和鹅呼肠孤病毒(Goose reovirus,GRV)核酸阴性,将致病毒株分别命名为GPV/HN-2023和GAstV-1/HN-2023。进一步对GPV/HN-2023和GAstV-1/HN-2023的主要结构蛋白基因分析发现,GPV/HN-2023与DY-16株的亲缘关系较近,属于DY-16-like毒株,且VP3蛋白存在2个特有的氨基酸位点突变D248E和V314L;GAstV-1/HN-2023与GAstV-1毒株亲缘关系较近,属于GAstV-1分支,ORF2蛋白存在3个特有的氨基酸位点突变G47R、S207G和A628T。【结论】本研究通过综合诊断方法明确了GPV、GAstV-1与RA混合感染是引起该鹅场雏鹅发病的病因,分析了致病菌RA的耐药性和病毒性致病原GPV和GAstV-1的遗传演化及变异特点,为河南地区雏鹅疫病的科学防控提供理论参考。

一株猪源摩氏摩根菌的分离鉴定与药物敏感性分析

摩氏摩根菌是一种可导致多种疾病的条件性病原菌,已成为全球范围内的一种重要新发病原菌。为了解猪源摩氏摩根菌的药物敏感性和致病性,从河南省某猪场病死猪肠道中分离得到一株疑似致病菌,对其进行革兰氏染色、基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱鉴定和16S rRNA基因同源性分析,然后测定14种药物对该菌株的最小抑菌浓度,并进行小鼠感染试验。结果显示,该菌为革兰氏阴性短杆菌,鉴定为摩氏摩根菌,命名为A185。药敏试验结果表明,该菌对阿莫西林、美罗培南、替加环素、多黏菌素、多西环素、头孢西丁耐药;对环丙沙星、庆大霉素中度敏感;对磷霉素、头孢他啶敏感。小鼠感染试验结果显示,感染摩氏摩根菌的昆明鼠表现为肝脏、肠道和肺脏不同程度出血。以上结果表明,猪源摩氏摩根菌A185具有多重耐药性和较强的致病性。

新型鹅星状病毒衣壳蛋白原核表达及多克隆抗体制备

为了研制针对新型鹅星状病毒(GAstV)的血清学检测方法和高效抗体,克隆新型GAstV HNZZ-4毒株的ORF2基因序列,构建pET-32a-Cap重组质粒,进行衣壳蛋白(Cap)原核表达;用重组Cap蛋白免疫兔只制备多克隆抗体,并采用Western blot和免疫过氧化物酶单层试验鉴定制备的多克隆抗体的反应原性。结果表明,重组质粒pET-32a-Cap经限制性内切酶NdeⅠ和XhoⅠ进行酶切后,得到大小约5000 bp和750 bp的2个与预期一致的条带;阳性重组质粒测序结果显示,成功构建了重组表达载体pET-32a-Cap;pET-32a-Cap原核表达获得了分子质量约为27.5 ku的GAstV重组Cap蛋白;制备的兔抗GAstV Cap多克隆抗体能够与重组Cap蛋白发生特异性反应,且能特异性结合感染LMH细胞的GAstV。综上,制备的兔源抗新型GAstV Cap多克隆抗体保留了抗原性,特异性较好。

1株枯草芽孢杆菌的分离鉴定及其益生性能研究

本试验旨在研究从发酵泡菜中分离出的1株枯草芽孢杆菌的益生性能。毒性试验选用60日龄、雄性、健康强壮的小白鼠45只,随机分为对照组、低剂量组和高剂量组,每组3个重复,每个重复5只。对照组灌服0.1 mL生理盐水;低、高剂量组分别灌服浓度为1×10^(9)、5×10^(9) CFU/mL的枯草芽孢杆菌,剂量为0.1 mL,试验期7 d,连续灌服3 d,每天09:00时灌服1次,灌服后,每天观察小白鼠的行为和饮食等状况,试验结束后称量小白鼠体重。饲喂试验选用60日龄、雄性、健康强壮的小白鼠60只,随机分为对照组和3个试验组,每组3个重复,每个重复5只。试验Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组分别灌服浓度为2.14×10^(4)、2.14×10^(6)、2.14×10~8 CFU/mL枯草芽孢杆菌0.2 mL;对照组用等量0.9%生理盐水灌服。试验期14 d,前7 d每天09:00灌服1次,自由饮水采食。结果表明:毒性试验中小白鼠灌服低剂量枯草芽孢杆菌后,生长速度是对照组生长速度的2.3倍;当灌服高剂量枯草芽孢杆菌后,生长速度明显变慢;虽然枯草芽孢杆菌可促进小白鼠生长,但过高剂量的枯草芽孢杆菌会抑制小白鼠生长,小白鼠的行为反应无异常变化;饲喂试验中试验Ⅲ组小白鼠第7天体重高于对照组(P<0.05),对照组小白鼠第14天体重低于试验Ⅱ组、试验Ⅲ组(P<0.05);对照组血清免疫球蛋白A(Ⅰg A)含量低于试验Ⅲ组(P<0.05),试验Ⅲ组血清Ⅰg G含量高于对照组(P<0.05);随着菌种浓度增加,血清白细胞介素6(ⅠL-6)含量逐渐降低,试验Ⅲ组含量最低,与对照组差异显著;试验Ⅲ组血清超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)含量高于其他组(P<0.05)。由此可见,该菌株对小白鼠生长无毒副作用并能促进小白鼠生长,且对沙门菌有抑制作用,可有效提高小白鼠的免疫性能和抗氧化性能。

发酵黄芪对肉鸡生长性能、抗氧化功能的影响

试验旨在研究黄芪发酵前后对肉鸡生长性能、抗氧化功能的影响。将210只1日龄AA肉鸡随机分为7组,每组3个重复,每个重复10只。A组为对照组,饲喂基础日粮;B、C、D、E、F、G组分别在基础日粮中添加0.2%黄芪、0.5%黄芪、0.8%黄芪、0.2%发酵黄芪、0.5%发酵黄芪、0.8%发酵黄芪,添加量以质量百分比计。试验期为42d。分别于第21、42天测定肉鸡生长指标、抗氧化指标。结果表明,在第21天,发酵黄芪组平均日采食量均显著高于黄芪组(P<0.05),黄芪组料重比显著低于对照组和发酵黄芪组(P<0.05);E组血清过氧化氢酶(CAT)含量显著高于A、B组(P<0.05),血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著高于与A组(P<0.05)。在第42天,发酵黄芪组平均日增重均较高,料重比显著低于A、B组(P<0.05);试验组GSH-Px活性均显著高于A组(P<0.05),发酵黄芪组与黄芪组相比差异不显著(P>0.05),发酵黄芪组血清中超氧化物歧化酶(T-SOD)活性均高于黄芪组,且与B和C组差异显著(P<0.05)。综上所述,在肉鸡日粮中添加一定量发酵黄芪能显著提高平均日增重,降低料肉比,且可通过提高血清中GSH-Px和T-SOD活性来提高其抗氧化能力;发酵黄芪的作用效果优于黄芪,最适宜添加量为0.5%。

黄曲霉毒素的危害及其脱毒方法研究进展

论文综述了黄曲霉毒素对动物免疫功能、生长发育、繁殖机能的危害及产生的致畸致癌作用,对人类健康的危害及对全球农业经济影响,并介绍了利用物理、化学和生物技术进行脱毒的方法和措施,旨在为降解黄曲霉毒素提供理论基础和研究思路。

鸡脾转移因子的制备及对雏鸡免疫应答的作用研究

采用透析法提取鸡脾转移因子(TF)并对其理化性质、生物活性、安全性进行了研究.通过对小白鼠腹腔注射低剂量、中剂量和高剂量转移因子(TF),和对10日龄未免疫健康雏鸡接种新城疫疫苗和不同剂量TF,观察TF对鸡红细胞的吞噬率和吞噬指数的影响以及TF的细胞免疫和体液免疫作用.结果表明:TF小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的最高比例和最高吞噬指数均产生在中剂量组,分别为60%和1.9,TF能增强T淋巴细胞转化率,与对照组相比新城疫抗体水平可提高3～4个滴度.

乳酸菌对苜蓿草粉发酵品质的影响

通过为期60d的发酵,探讨添加乳酸菌对苜蓿(Medicago sativa)草粉发酵品质的影响。试验设4个处理,分别为添加无菌水(对照)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum,LP)、屎肠球菌(Enterococcus faecium,EF)和植物乳杆菌+屎肠球菌(LP+EF)发酵苜蓿草粉,设5个时间点采样进行相关项目测定。结果表明,与对照组相比,发酵60d时各试验组发酵苜蓿草粉的评分提高,总酸含量显著升高(P<0.05),pH显著降低;LP、LP+EF和对照组的干物质含量明显低于EF组;各试验组酸性洗涤纤维含量明显低于对照组;有氧暴露7d后,各试验组的pH均显著低于对照组、总酸含量均显著高于对照组(P<0.05),且只有对照组中检测到酵母菌(Saccharomycetes)和霉菌(Mycete)。综上可知,添加乳酸菌对苜蓿草粉的发酵品质、稳定性及营养组成具有良好的改善作用。

基于LC-MS代谢组学的植物乳杆菌发酵黄芪的代谢产物分析

试验旨在利用色谱-质谱联用(liquid chromatograph-mass spectrometer,LC-MS)代谢组学技术分析植物乳杆菌发酵黄芪的代谢产物,并探索其互作发酵机制。分别采取植物乳杆菌发酵黄芪(FT组)和未发酵黄芪固态粉末(CT组),经样本前处理、LC-MS分析、生物学信息分析等探寻差异代谢物并分析代谢通路。结果显示,总离子流图峰图重现性良好,发酵黄芪主要代谢物共鉴定出183种代谢成分,正离子和负离子模式样品间关系PCA图均能良好区分。火山图分析表明,FT和CT组间的代谢物变化具有差异性,正离子模式上调的1416个代谢物富集到83个代谢途径;下调的935个代谢物富集到83个代谢途径;负离子模式上调的1040个代谢物富集到52个代谢途径,下调的809个代谢物富集到45个代谢途径。发酵黄芪差异代谢产物酸类、脂类、酮类等氨基酸显著增加,烯类等氨基酸显著下调,其中上调代谢物15个,下调代谢物2个,关键代谢产物主要为α-硫酸二乙酯、2-甲基柠檬酸、3-异丙烯基-6-氧代庚酸等,涉及到丙酮酸代谢、丙酸代谢、半乳糖代谢等途径。本研究结果为发酵黄芪的代谢产物、发酵互作机制和临床应用提供理论依据。

发酵杜仲叶对肉鸡生产性能、抗氧化性能和免疫相关基因表达的影响

【目的】研究不同菌发酵杜仲叶对肉鸡生产性能、抗氧化性能、脏器及肠道免疫相关基因表达的影响,为新型替抗添加剂的研发提供科学依据。【方法】将基础饲粮(A组)及屎肠球菌发酵杜仲叶(B组)、植物乳杆菌发酵杜仲叶(C组)、屎肠球菌和植物乳杆菌混合发酵杜仲叶(D组)饲粮饲喂肉鸡,在第28和56天分别称重,计算平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)和料重比(F/G);心脏采血检测血清中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(T-AOC)指标;采集肉鸡脾脏、肝脏、回肠组织,利用实时荧光定量PCR检测γ-干扰素(IFN-γ)、一氧化氮合成酶(iNOS)、白细胞介素6(IL-6)和IL-10基因表达量。【结果】①与A组相比,1~28和1~56 d,B、C、D组ADG显著提高,F/G显著降低(P<0.05);29~56 d,B、C组ADG显著提高,B、C、D组F/G显著降低(P<0.05)。②饲喂28、56 d,B、C组GSX-Px活性显著高于A组(P<0.05)。③与A组相比,饲喂28 d,B、C、D组脾脏以及D组回肠IFN-γ基因mRNA表达量均显著提高(P<0.05);饲喂56 d,B、D组肝脏以及B、C、D组脾脏、回肠IFN-γ基因mRNA表达量均显著提高(P<0.05)。④与A组相比,饲喂28 d,B、D组回肠IL-6基因mRNA表达量显著降低(P<0.05);饲喂56 d,D组肝脏、C和D组脾脏以及B、D组回肠IL-6基因mRNA表达量均显著降低(P<0.05)。⑤与A组相比,饲喂28 d,B、D组回肠IL-10基因mRNA表达量显著提高(P<0.05);饲喂56 d,B、C、D组肝脏及回肠IL-10基因mRNA表达量均显著提高(P<0.05)。⑥与A组相比,饲喂28 d,D组脾脏及B、C、D组回肠iNOS基因mRNA表达量均显著提高(P<0.05);饲喂56 d,C、D组肝脏、脾脏以及B、C、D组回肠iNOS基因mRNA表达量均显著提高(P<0.05)。【结论】在饲料中添加不同益生菌发酵杜仲叶能促进肉鸡生产性能,并对血清抗氧化指标及肠道免疫相关基因产生影响。

鸭源绿色气球菌的分离鉴定及16S rRNA基因序列测定与遗传进化分析

【目的】研究河南某鸭场雏鸭发生急性死亡的致病菌及其系统发育地位。【方法】采集发病鸭场病死鸭肝脏、脾脏,进行细菌形态学观察、革兰氏染色、生化特性鉴定、16S rRNA基因的序列分析、药敏试验及致病性试验。【结果】分离菌在鲜血琼脂培养基上长出表面光滑,凸起,乳白色,呈α-溶血的革兰氏阳性球菌。生化试验结果表明,分离菌对麦芽糖、蔗糖、棉籽糖、硝酸盐还原反应、MP-VP试验、尿素、赖氨酸脱羧酶、鸟氨酸脱羧酶、七叶苷均为阳性,对木糖、乳糖、葡萄糖、山梨醇、硫化氢、枸橼酸盐、蛋白胨、甘露醇、苯丙氨酸、甲基红试验等均为阴性。16S rRNA基因测序及BLAST比对结果显示,分离菌16S rRNA基因序列与NCBI上已发布的绿色气球菌相似性性在94.8%~99.9%之间,其中与菌株Mnlv1、Mnlv2、W66等相似性最高,达99.9%;与菌株GXBL-1相似性最低,为94.8%。系统发育树分析表明,分离菌与绿色气球菌FL0915MS、Mnlv2等绿色气球菌在同一分支上,属于同一属群,其中与FL09亲缘关系最近。药敏试验结果显示,分离菌对磷霉素、氨苄西林、阿莫西林敏感;对青霉素、新生霉素、阿米卡星等中度敏感;对利福平、新霉素、杆菌肽、红霉素、恩诺沙星等耐药。致病性试验结果表明该菌具有致死性,并随着接种浓度增大而增强。【结论】本研究确定了河南某鸭场引起雏鸭急性死亡的病原菌是绿色气球菌,为该菌引起疾病的临床诊断和治疗提供了参考依据。

黄芪提取液发酵枯草芽孢杆菌工艺优化研究

为研究黄芪提取液发酵枯草芽孢杆菌的工艺流程,将活化后的枯草芽孢杆菌菌液以1%的比例分别接入含黄芪提取液浓度为100%、90%、80%、70%、60%、50%、40%、30%的液体培养基中,置于37℃温箱中进行培养,分别取24h、48h、72h的培养物检测菌液数量、芽孢形成率和OD值。对初筛的培养基配方选取接种量、pH、温度和摇床转速4个条件进行正交试验观察影响发酵的主要因素并进行发酵罐大量培养。结果表明:含60%黄芪提取液芽孢数量最高可达1.70×109,芽孢形成率99%,OD值为2.961。正交试验结果优化条件为接种量10%,pH9.0,温度37℃,转速250r/min,发酵罐培养结果48h即可发酵结束,芽孢数量比摇瓶培养高5倍左右。

鸡传染性鼻炎氢氧化铝佐剂灭活苗的制备及免疫试验

用副鸡嗜血杆菌分离株制成氢氧化铝胶佐剂灭活疫苗接种8周龄试验鸡,结果表明三批次疫苗保护率均可达到100%,疫苗于室温放置3、6、9、12个月后均能起到保护作用,最小免疫剂量检测结果显示肌肉注射0.25mL/只就可起到免疫保护作用。研究表明本地区分离菌株制备的疫苗可以对本地传染性鼻炎的防控起到很好的预防作用。

猪脾转移因子的制备及临床应用

本试验采用透析法提取猪脾转移因子(TF),并对其理化性质、生物活性、安全性进行了研究。结果表明,TF可增强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能,体外抑菌结果显示金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌对转移因子敏感,而链球菌不敏感。对猪流行性腹泻、猪传染性胃肠炎分别使用TF(0.2、0.1、0.05 mL/kg)和药物进行治疗,结果表明使用0.1 mL/kg TF的剂量效果较好。

猪圆环病毒2型Cap基因的原核表达及ELISA检测方法的建立

目的:方法:为建立PCV-2 ELISA检测方法。利用PCR技术从PCV-2基因组中克隆Cap抗原表位基因,并将其插入到载体pET-22b(+)中,构建成原核表达质粒pET-22b(+)-Cap,使其在E.coliBL21(DE3)中以IPTG诱导表达并进行纯化,以表达的蛋白进行包被,建立ELISA检测方法。结果:表达产物分子质量约30 kD,经Western blot表明具有良好的免疫活性,对643份猪血清进行检测,阳性率为73.1%,阴性率为26.9%。结论:该检测方法能在临床中进行应用。