基于Fas/FasL信号通路对桂药生精胶囊治疗少精子症的临床研究

目的探讨桂药生精胶囊对少精子症(肾精亏虚型)患者的精子浓度(SC)、前向运动精子比例(PR)、PR+非前向运动精子比例(NP)、精子总数、精子脂肪酸合成酶(Fas)信使RNA(mRNA)、脂肪酸合成酶配体(FasL)mRNA表达水平及精浆Fas蛋白、FasL蛋白表达水平的影响。方法选取2019年10月至2020年3月就诊于广西中医药大学附属瑞康医院男性科门诊的少精子症(肾精亏虚型)患者60例,随机分为对照组和治疗组,每组30例。对照组采用左卡尼汀治疗,治疗组在对照组的基础上联合桂药生精胶囊治疗,12周为1个疗程。观察治疗前后两组患者的SC、PR、PR+NP、精子总数、精子Fas mRNA、FasL mRNA和精浆Fas蛋白、FasL蛋白表达水平。结果治疗组总有效率比对照组高(P<0.05)。治疗前两组患者SC、PR、PR+NP和精子总数比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗后两组患者精子SC、PR、PR+NP和精子总数均比治疗前高(P<0.05),且治疗组患者精子SC、PR和精子总数高于对照组(P<0.05)。治疗前两组患者精浆Fas和FasL蛋白表达水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗后两组精浆Fas蛋白表达水平低于治疗前(P<0.05),且治疗组Fas蛋白表达水平低于对照组(P<0.05)。治疗前两组患者精子Fas mRNA和FasL mRNA表达水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗后两组患者精子Fas mRNA和FasL mRNA表达水平低于治疗前(P<0.05),且治疗组Fas mRNA表达水平低于对照组(P<0.05)。结论桂药生精胶囊能明显提高少精子症(肾精亏虚型)患者的SC、PR、精子总数,降低精子Fas mRNA及精浆Fas蛋白的表达水平。

前列消汤干预NLRP3炎性小体调控慢性非细菌性前列腺炎Caspase-1/IL-1β/NF-κB p65轴机制研究

目的探讨前列消汤通过干预NLRP3炎性小体调控慢性非细菌性前列腺炎Caspase-1/IL-1β/NF-κB p65轴机制研究。方法将120只雄性SPF级C57BL/6小鼠按随机数表法分为空白组、模型组、阳性对照组(MCC950)、前列消汤高/中/低剂量组;除空白组外,其它组采用复合因素造模法制备EAP小鼠模型,以湿热证候积分、前列腺湿重指数、HE染色评估模型;免疫荧光检测各组小鼠前列腺组织NLRP3、Caspase-1、IL-1β表达水平;Western Blot检测各组小鼠前列腺组织NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD、NF-κB p65、NF-κB p65磷酸化蛋白表达水平。结果模型组前列腺湿热证候积分(P<0.01)、前列腺湿重指数较空白组升高(P<0.05);与空白组比较,模型组腺体及间质见大量炎症细胞浸润、腺腔结构紊乱、纤维化增生,各药物组能不同程度改善模型小鼠前列腺的炎性浸润程度,以MCC950组及前列消中、高剂量组最为显著(P<0.01);免疫荧光显示:与空白组比较,模型组小鼠前列腺NLRP3、Caspase-1、IL-1β表达明显增强(P<0.01),与模型组比较,MCC950组、前列消汤高/中/低剂量组均能不同程度减弱模型小鼠前列腺NLRP3、Caspase-1、IL-1β(P<0.05),MCC950组与前列消中/高剂量组比较,差异不具有统计学意义;Western Blot显示:与空白组比较,模型组小鼠前列腺NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD、NF-κB p65、NF-κB p65磷酸化蛋白表达明显升高(P<0.01),与模型组比较,MCC950组能不同程度下调模型小鼠前列腺NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD、NF-κB p65、NF-κB p65磷酸化蛋白表达(P<0.01),前列消汤各剂量组下调以中/高剂量组较为显著(P<0.01)。结论前列消汤可通过干预NLRP3炎症小体介导的Caspase-1/IL-1β/NF-κB p65炎症轴发挥抑制慢性非细菌性前列腺炎炎症反应的作用。

壮药湿毒清洗剂治疗湿疮(湿热浸淫证)的临床疗效观察

目的:观察壮医湿毒清洗剂治疗湿疮(湿热浸淫证)的临床疗效。方法:选取2021年4月至2022年9月就诊于广西中医药大学附属瑞康医院的湿疮(湿热浸淫证)患者80例,随机分为治疗组及对照组各40例。治疗组用壮药湿毒清洗剂湿敷,对照组用复方黄柏液湿敷,两组均以14 d为1个疗程。1个疗程后,比较两组患者的临床疗效,治疗前后中医证候积分、湿疹面积及严重度指数(EASI)、瘙痒程度评分、皮肤病生活质量指数(DLQI)评分,以及血清免疫球蛋白E(IgE)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-4(IL-4)及IL-6表达水平。结果:治疗组和对照组的临床总有效率分别为83.33%(30/36)及54.29%(19/35),治疗组优于对照组(P<0.05);治疗后,两组患者的中医证候积分、EASI评分、瘙痒程度评分、DLQI评分均较治疗前降低(P<0.01),且治疗组患者中医证候积分、EASI评分及DLQI评分均低于对照组(P<0.05);治疗后,两组患者血清中IgE、TNF-α、IL-4、IL-6水平均较治疗前降低(P<0.05),且治疗组患者血清中IgE、TNF-α、IL-6水平均低于对照组(P<0.05)。结论:壮药湿毒清洗剂治疗湿疮(湿热浸淫证)有较好的临床疗效,且可明显降低患者血清中炎症因子IgE、TNF-α、IL-6、IL-4水平,这可能是壮药湿毒清洗剂治疗湿疮(湿热浸淫证)的机制之一。

盐酸奥洛他定联合依巴斯汀治疗慢性湿疹疗效观察

[目的]观察盐酸奥洛他定联合依巴斯汀治疗慢性湿疹的临床疗效。[方法]将80例慢性湿疹患者随机分为观察组和对照组各40例。对照组予依巴斯汀片口服治疗,观察组予盐酸奥洛他定片联合依巴斯汀片口服治疗,均治疗4周。观察两组患者治疗前后湿疹面积及严重程度指数(EASI)评分、瘙痒程度评分、免疫球蛋白E(IgE)水平、白细胞介素-6(IL-6)水平,并比较两组疗效。[结果]两组患者治疗后EASI评分及IL-6、IgE水平均较治疗前显著降低(P<0.05),且观察组明显低于对照组(P<0.05);两组患者治疗后瘙痒程度评分均较治疗前明显降低(P<0.05),但两组间比较无显著性差异;观察组总有效率为86.84%,对照组总有效率为67.57%,观察组疗效优于对照组(P<0.05)。[结论]盐酸奥洛他定联合依巴斯汀治疗慢性湿疹,可明显改善患者皮损情况,降低炎症因子水平,改善瘙痒程度,缓解病情,提升临床疗效。

前列消汤对EAP湿热证模型前列腺内NF-κB表达的影响

目的通过观察前列消汤对实验性自身免疫性前列腺炎(EAP)(湿热证)小鼠模型前列腺组织核转录因子-κB(NF-κB)P65和P50表达的影响,探讨前列消汤干预EAP模型前列腺内NF-κB的作用机制。方法建立EAP(湿热证)模型,用Western Blot和荧光定量PCR法、免疫组化法检测前列消汤对NF-κB P65和P50表达的影响。结果Western Blot结果显示,模型组与正常组比较,前列腺组织内NF-κB P65和P50的表达显著升高(P<0.05);与模型组比较,前列消高、中剂量组NF-κB P65的表达显著下降(P<0.05),前列消高、低剂量组NF-κB P50的表达显著下降(P<0.05)。荧光定量PCR结果显示,模型组与正常组比较,前列腺组织内NF-κB P65和P50的表达显著升高(P<0.05);与模型组比较,前列消高、中、低剂量组NF-κB P65的表达显著下降(P<0.05),前列消高剂量组NF-κB P50的表达显著下降(P<0.05)。免疫组化法显示,模型组与正常组比较,前列腺组织内NF-κB P65的表达显著升高(P<0.05);与模型组比较,前列消高、中剂量组NF-κB P65的表达显著下降(P<0.05)。结论前列消汤可通过抑制前列腺组织内NF-κB P65和P50的表达在CP的治疗中发挥作用。

Fas/FasL基因和蛋白表达对精子浓度和活力的影响

目的:探讨精液中细胞凋亡Fas/FasL基因和蛋白的表达对精子浓度和活力的影响。方法:将精液标本根据精子浓度和前向运动精子百分率分为4组:正常精子组、弱精子症组、少精子症组和少弱精子症组,每组20例。分别检测各组精液常规参数、Fas/FasL蛋白浓度、Fas/FasL基因表达水平。结果:(1)4组精子的浓度(×10^(6)/ml)分别为68.11±35.49、92.21±60.96、8.55±2.82、5.96±3.80;4组精子的前向运动精子百分率(%)为:49.40±13.86、22.12±7.13、40.77±8.41、14.53±9.74;(2)ELISA法检测4组精子Fas蛋白水平(pg/ml)分别为:381.07±52.37、425.03±50.56、442.32±84.88、448.42±84.79,与正常组比较均偏高,有统计学差异(P<0.05),与精子浓度呈负相关关系(r=-0.377,P<0.01),与前向运动精子呈负相关关系(r=-0.350,P<0.01);Fasl蛋白水平(pg/ml)分别为:167.49±29.91、166.98±27.39、169.51±32.62、171.46±32.61,与正常组比较无统计学差异(P>0.05);(3)RT-PCR方法检测4组的Fas基因的相对定量结果分别是:1、0.88±1.17、2.55±2.11、0.69±0.90,与正常组比较,弱精子症组和少弱精子症组的Fas基因表达下调,精子活力较低的样本中Fas基因表达较低;FasL基因的结果分别是:1、1.99±1.81、2.08±2.06、2.03±2.23,与正常组比较,少精子症组和少弱精子症组FasL基因表达上调,精子浓度较低的样本FasL基因表达较高;与正常组比较,弱精子症组Fas、FasL表达均下调,少精子症组Fas、FasL表达均上调,而少弱精子症组Fas表达下调,FasL表达上调。前向运动精子(PR%)与Fas mRNA基因呈正相关关系(r=0.355,P=0.01);精子总活力(PR+NR%)与Fas mRNA基因呈正相关关系(r=0.358,P<0.01);精子浓度与FasL mRNA基因表达呈负相关关系(r=-0.305,P<0.05);其余指标无明显相关关系。结论:Fas/FasL在正常、弱精子、少精子和少弱精子症组的表达水平有差异,Fas/FasL表达上调可能促进了生精细胞和精子细胞的凋亡,这可能是少精子症的发生的原因之一,而Fas/FasL表达下调可能是生长异常的生精细胞和精子细胞没有即时执行程序性死亡,这可能是弱精子症发生的原因之一。

中医药在转化生长因子-β1介导的自身免疫性炎症疾病中作用的研究进展

转化生长因子-β1(TGF-β1)是已知发生自身免疫反应的关键因子,是一种多分子蛋白多肽,参与细胞的增殖、分化、凋亡等过程来发挥生物学效应,对炎症疾病的发生、抑制等起着非常重要的作用。目前在自身免疫性疾病(AID)研究中,TGF-β1信号在炎症疾病的多靶点、多功能的调节作用受到越来越多学者的关注。随着对AID发病机制和炎症靶点的研究,发现调节TGF-β1信号的表达在AID中呈现多极化趋势。中医药有着多层次、多靶点的调节优势,对自身免疫性炎症疾病有较好的干预效果。但是AID发病机制较为复杂,对研究具体炎症疾病作用机制存在一定的难度。目前中医药调节TGF-β1信号干预炎症疾病,是研究TGF-β1介导的AID炎症疾病重要方向。文章就近年来中医药在TGF-β1介导的溃疡性结肠炎、类风湿性关节炎、慢性前列腺炎中调节作用的临床与实验进展进行综述。

壮药前列舒外洗剂对ⅢA型前列腺炎患者相关细胞因子表达水平的影响

目的:观察壮药前列舒外洗剂对ⅢA型慢性前列腺炎(chronic prostatitis,CP)(湿热挟瘀证)患者相关细胞因子表达水平的影响。方法:将80例CP患者随机均分为观察组和对照组,每组40例。观察组使用壮药前列舒外洗剂联合盐酸坦洛新缓释片治疗,对照组予盐酸坦洛新缓释片治疗,两组均以28天为1个疗程。比较两组总有效率、慢性前列腺炎症状评分表(national institutes of health chronic prostatitis symptom index,NIH-CPSI)评分、证候评分及前列腺液中白细胞(expressed prostatic secretious white blood cell,EPS-WBC)、白细胞介素2(interleukin-2,IL-2)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的表达水平。结果:观察组总有效率[86.84%(33/38)]优于对照组[78.38%(29/37)](P<0.05);两组NIH-CPSI评分、证候评分及EPS-WBC、IL-6、TNF-α水平治疗后较治疗前明显降低,IL-2水平较治疗前升高(P<0.05),且观察组各项指标改善程度大于对照组(P<0.05)。结论:壮药前列舒外洗剂对ⅢA型CP(湿热挟瘀证)有较好的疗效,能够在降低EPS-WBC、IL-6、TNF-α表达水平的同时提高IL-2水平,这可能是壮药前列舒外洗剂治疗ⅢA型CP(湿热挟瘀证)的机理之一。

中药调控CD^(+)_(4)T细胞干预湿疹炎症应答的研究进展

湿疹是一种变态反应性炎症性皮肤病,近期研究表明以CD^(+)_(4)T细胞亚群如Th1/Th2、Th17/调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)细胞分化失衡导致湿疹发病中出现过度炎症应答,而中药以改善CD^(+)_(4)T细胞亚群分化平衡干预湿疹免疫微环境具有较好的调节作用。以湿疹炎症应答前沿研究动态,探讨中药在改善调控CD^(+)_(4)T细胞亚群分化干预湿疹致病的作用优势,为中药在改善湿疹临床症状及机制研究提供一定的理论指导。

壮医药物熏洗疗法治疗慢性非细菌性前列腺炎的临床效果

目的观察壮医药物熏洗疗法治疗慢性非细菌性前列腺炎(CAP)的临床效果。方法选取2015年1月~2016年8月160例于广西中医药大学附属瑞康医院就诊的CAP患者,按随机数字表法分为治疗组及对照组,各80例。治疗组使用壮药前列舒外洗剂进行熏洗治疗,对照组予前列安栓干预,两组均以28 d为1个疗程。1个疗程后,比较两组的临床总有效率。比较两组治疗前后美国国立卫生研究院慢性前列腺炎症状指数量表(NIH-CPSI)评分、中医证候学评分和前列腺液中白细胞介素(IL)-2、IL-8、IL-10水平。结果治疗后,治疗组的临床总有效率高于对照组(P<0.05)。治疗后,两组NIH-CPSI及中医证候学评分均较治疗前降低(P<0.05),且治疗组低于对照组(P<0.05)。治疗后,两组前列腺液中IL-8水平较治疗前降低(P<0.05),且治疗组低于对照组(P<0.05);治疗后,两组前列腺液中IL-2、IL-10水平较治疗前均升高(P<0.05),且治疗组高于对照组(P<0.05)。结论壮医药物熏洗疗法治疗CAP有较好的效果,且该方法能降低患者前列腺液中IL-8水平,升高IL-2、IL-10水平,这可能是壮医药物熏洗疗法治疗CAP的机制之一。

基于数据挖掘与生物信息学对中药成方制剂中“苍术-厚朴”证治规律及机制分析

目的基于数据挖掘与生物信息学分析中药成方制剂中"苍术-厚朴"药对的证治规律及主要相关的生物学通路,为后期该药对的深入研究提供依据。方法收集国家药典委员会制定的《中华人民共和国药典临床用药须知·中药成方制剂卷》中含有"苍术-厚朴"药对成方制剂。运用中医传承辅助平台V2.5对其证治规律进行数据挖掘和分析;运用BATMAN-TCM在线分析平台对进行可视化的KEGG通路富集分析。结果共整理出"苍术-厚朴"药对成方制剂94首,主治疾病43种,主治证候36种;得到生物学相关通路142条,其中KEGG富集信号转导通路13条和相关靶点39个。其中高频主治疾病为积滞、感冒,其核心方剂是对金散、保和丸、五积散、藿香正气散;高频主治证候为食积证、湿困脾胃证、风邪袭表证,其核心方剂是对金散、平胃散、藿香正气散、不换金正气散;13条富集通路为MAPK、Ras、Rap1、Calcium、CGMP-PKG、NF-κB、FoxO、PI3K-Akt、AMPK、VEGF、Hippo、Jak-STAT、TNF信号通路。结论该研究初步明确了含"苍术-厚朴"药对在成方制剂中的证治规律和主要相关的生物学通路,可为"苍术-厚朴"药对的后期应用与机制研究提供参考依据。

大黄防治前列腺癌的质量标志物研究及分子对接验证

目的:基于整合药理学和分子对接技术预测大黄防治前列腺癌可能的质量标志物。方法:通过中医药整合药理学网络计算研究平台V2.0(TCMIP V2.0),将大黄化学信息进行靶标预测,与前列腺癌疾病靶标信息进行蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络构建,从而开展药物干预疾病的关键靶标富集分析。在此基础上,利用大黄的化学成分、关键靶标、疾病通路的多维网络,绘制中药“成分-靶标-通路-疾病”网络图,解析获得作用于这些关键靶标的主要成分,然后依据中药质量标志物(Q-marker)“五原则”结合已知相关文献对大黄防治前列腺癌的质量标志物进行预测分析。最后,应用AutoDock Vina分子对接软件对候选成分与关键靶点进行分子对接计算和验证。结果:筛选得到大黄防治前列腺癌的活性成分14个,关键核心靶标21个,涉及11条信号通路。分子对接表明雄激素受体(AR)与大黄蒽醌类中8个均入最佳药物油水分配系数范围的成分有较好的结合性。结论:通过TCMIP V2.0及前期文献研究基础上,分析并获得大黄防治前列腺癌可能的质量标志物为大黄蒽醌类化合物,具体成分包括大黄素、大黄酸、大黄酚、芦荟大黄素、大黄素甲醚等,对药物和疾病的共同靶标AR产生药理作用。

基于CNKI数据库的民族医药研究相关文献计量学分析

目的:分析CNKI数据中收录的民族医药相关文献的研究趋势和发展概况。方法:于CNKI检索口输入“主题=民族医药或者篇名=民族医药”(模糊匹配),检索1978年1月1日至2018年12月7日被CNKI收录的民族医药研究相关文献,通过可视化计量分析获得主题、出版年限、期刊、基金支持、作者团体等方面的可视化结果。结果:CNKI中共收录相关文献3512篇,研究整体呈上升趋势,近10年出现阶段性回落;高频主题词以民族医药相关内容为主;发文期刊以中国民族医药杂志、中国民族民间医药杂志、中医药管理杂志为主;学术团体以云南中医学院、广西中医药大学、中央民族大学等为主;基金论文以国家社会科学基金及国家自然科学基金支持为主体。结论:关于民族医药研究涉及多个层次,具备了一定的研究基础和经验,随着转化医学的引入,结合中医药特征可能是发展民族医学的新方向。

前列腺按摩治疗慢性前列腺炎的疗效探讨

慢性前列腺炎是成年男性常见的泌尿系统疾病,其发病机制尚未完全清楚,可能与急性尿路感染、急性炎症病变、性交频繁等存在密切关联。其诊疗方法多种多样,而前列腺按摩则是治疗慢性前列腺炎的基本方法。现就前列腺按摩在慢性前列腺炎治疗中的应用研究综述如下。

基于GoPubMed中医药治疗前列腺炎的文献计量学分析

目的:探讨分析PubMed中收录的中医药治疗前列腺炎相关文献的研究趋势和发展概况。方法:利用GoPubMed检索输入“prostatitis[mesh]”,通过“Find concepts in Knowledge Base”查找“Chinese Medicine”,检索1980年1月1日至2018年10月28日被PubMed收录的中医药治疗前列腺炎的相关文献,选取Statistics功能进行文献计量分析,以获得从主题、出版年限、期刊、作者所属国家和城市等方面分析的可视化结果。结果:PubMed中共收录文献451篇,检索结果研究整体呈上升趋势,近10年出现阶段性回落;高频主题词以前列腺炎相关内容为主;发文期刊主要分布在中国、美国、欧洲区域;中医药防治的研究以中国区域学者为主;缺乏明确的中医药防治前列腺炎的理论研究和科研基础。结论:利用GoPubMed可较好地反映PubMed数据库中医药治疗前列腺炎的研究现状和发展趋势,为今后的系统理论建立和学科建设提供参考依据。

基于Nrf2/HO-1通路的加味大黄虫庶虫颗粒对精索静脉曲张模型大鼠附睾生精细胞凋亡的影响

目的:探讨加味大黄蟅虫颗粒对精索静脉曲张模型大鼠附睾组织的保护作用及与核因子NF-E2相关性因子(Nrf2)、血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白表达的关系。方法:60只SPF级SD大鼠,按随机数字表法分成假手术组、模型组、迈之灵组及加味大黄蟅虫颗粒低、中、高剂量组。采用Turner法构建精索静脉曲张大鼠模型。造模完成后,加味大黄蟅虫颗粒低、中、高剂量组分别给予浓度为0.6、1.2、2.4 g/ml的大黄蟅虫丸生药水冲剂灌胃,假手术组和模型组予以等量的生理盐水灌胃,迈之灵组则予54 mg/kg迈之灵片,以上各组灌胃体积均为1 ml/100 g,1次/d,持续8周。给药8周后全部处死以上各组大鼠,取出左侧附睾检测精子质量及观察局部显微超微结构的变化;Annexin V-FITC法检测左侧附睾生精细胞凋亡情况;免疫组织化学法检测左侧附睾组织中Nrf2、HO-1的表达。结果:模型组中左侧附睾组织内发生明显病理损伤,各级生精细胞和精子数量重度减少,细胞结构部分破坏,溶酶体、线粒体、内质网、细胞核、细胞膜等部分亚细胞结构消失,而加味大黄蟅虫颗粒各剂量组及迈之灵组中左侧附睾组织的病理损伤具有一定程度的改善。与模型组相比,加味大黄蟅虫颗粒中、高剂量组及迈之灵组大鼠左侧附睾的精子浓度及活率显著增高(P<0.05)。与迈之灵组比较,加味大黄蟅虫颗粒高剂量组精子浓度及活率显著升高(P<0.05)。模型组中左侧附睾生精细胞凋亡率显著高于假手术组(P<0.05),加味大黄蟅虫颗粒中、高剂量组及迈之灵组中生精细胞凋亡率显著低于模型组(P<0.05)。免疫组织化学法显示,模型组大鼠左侧附睾组织中Nrf2/HO-1棕黄色阳性表达呈散在排列,且细胞辉度低;而加味大黄蟅虫颗粒高剂量组、迈之灵组中棕黄色阳性表达的细胞辉度明显提升。结论:加味大黄蟅虫颗粒可以有效修复精索静脉曲张大鼠附睾组织的病理损伤,提高Nrf2/HO-1的蛋白表达,进而拮抗生精细胞的凋亡,为精子的发育成熟提供有利条件。

前列消汤干预TGF-β1/Smad4、Smad 7信号通路调控实验性自身免疫性前列腺炎小鼠前列腺成纤维细胞增殖与凋亡的研究

目的:观察中药方前列消汤干预TGF-β1/Smad4、Smad 7信号转导通路对实验性自身免疫性前列腺炎(EAP)小鼠前列腺成纤维细胞(PrF)增殖与凋亡的调控作用。方法:采用C57BL/6小鼠制备前列消汤含药血清,根据细胞毒性实验结果,以5%、10%、20%的含药血清分别作为低、中、高剂量组进行干预实验。采用"免疫诱导+中医病因造模法"建立湿热证EAP小鼠模型,无菌条件下取出前列腺组织,分离培养PrF,采用差速贴壁法纯化PrF,免疫荧光法检测PrF纯度,纯度达90%以上即以5 ng/ml TGF-β1浓度的培养液刺激进行建模。取建模后对数生长期的PrF随机分为空白组(无血清培养液),模型组,阳性对照组(含TGF-β1浓度5 ng/ml的培养液),前列消汤低、中、高剂量组,每组6个复孔;干预培养24 h后检测各组PrF增殖情况,采用Western印迹检测TGF-β1的表达水平和Smad4、Smad7、p-Smad4、p-Smad7的表达水平,qPCR检测TGF-β1、Smad4、Smad7 mRNA的表达,流式细胞术检测PrF细胞凋亡情况。结果:经TGF-β1诱导后,与模型组比较,阳性对照组PrF细胞增殖明显(P<0.05),前列消汤低、中剂量组PrF细胞增殖受抑制(P<0.05),前列消汤高剂量组PrF细胞增殖受明显抑制(P<0.01);与阳性对照组比较,前列消汤各剂量组PrF细胞增殖明显受到抑制(P<0.01),且呈明显的量效关系。与模型组比较,阳性对照组Smad4、p-Samd7和TGF-β1蛋白表达显著增加(P<0.05);经前列消汤含药血清干预后,与阳性对照组比较,前列消汤含药血清能显著下调PrF细胞内p-Smad4,TGF-β1蛋白的表达(P<0.01),而增加p-Samd7的表达水平(P<0.01)。qPCR结果显示,与模型组相比,前列消汤高剂量组Smad4基因表达有显著差异(P<0.05),前列消汤低、中、高剂量组Smad7基因表达有显著差异(P<0.05);前列消汤低、中、高剂量组TGF-β1基因表达水平显著上调(P<0.01);与阳性对照组相比,前列消汤高剂量组Smad4基因表达有显著差异(P<0.05),模型组、前列消汤低、中、高剂量组Smad7基因表达有显著差异(P<0.01),前列消汤低、中、高剂量组TGF-β1基因表达水平显著下降(P<0.01)。与模型组比较,阳性对照组PrF细胞凋亡率无明显差异(P>0.05),前列消汤各剂量组凋亡率均显著提高(P<0.05),且呈明显的量效关系。结论:经TGF-β1诱导可刺激PrF细胞增殖,上调TGF-β1、p-Smad4的表达,下调p-Smad7的表达。前列消汤可以抑制PrF增殖,且呈明显的量效关系,其机制可能与其降低TGF-β1和p-Smad4的表达、提高p-Smad7的表达从而阻断TGF-β1通过Smad4途径诱导PrF细胞增殖相关。

加味大黄蟅虫颗粒对精索静脉曲张大鼠的影响

目的探讨加味大黄蟅虫颗粒对精索静脉曲张大鼠睾丸局部微环境及生精细胞凋亡基因表达的影响。方法采用Turner法构建精索静脉曲张大鼠模型,按随机数字表法将60只SPF级SD大鼠分为假手术组、模型组、迈之灵组(迈之灵片54 mg/kg)及加味大黄蟅虫颗粒低、中、高剂量组(生药水冲剂5.4、10.8、21.6 g/kg),每组10只,造模完成后4周开始给药,连续8周。运用精子计数板和彩色精子质量分析系统检测大鼠精液质量;透射电镜观察各组大鼠睾丸局部超微结构病理变化;Annexin V-FITC检测各组大鼠睾丸生精细胞凋亡情况;荧光定量PCR检测各组大鼠睾丸组织中凋亡基因Fas、FasL、caspase-3、caspase-9的表达。结果模型组睾丸组织多见未成熟的生精细胞,出现空泡变性,而加味大黄蟅虫颗粒组管腔内见大量成熟生精细胞,浆内可见大量的线粒体、高尔基体及精子。相较于模型组,加味大黄蟅虫颗粒各剂量组及迈之灵组大鼠精子密度、活率增高(P<0.01),凋亡率降低(P<0.05,P<0.01),凋亡基因Fas、FasL、caspase-3、caspase-9表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论加味大黄蟅虫颗粒对精索静脉曲张模型诱导的大鼠睾丸组织损伤具有保护作用,从而改善睾丸局部微环境,为精子的发育成熟提供有利条件,这可能与其有效调控生精细胞凋亡基因表达有关。

中医药干预TGF-β1/Smads信号通路对组织器官细胞纤维化调控作用的研究进展

转化生长因子-β1(TGF-β1)是一种重要的调节细胞外基质(ECM)积聚的细胞因子,也是目前治疗组织器官细胞纤维化的新靶点。近年来中医药在防治心、肝、肺、肾等组织器官细胞纤维化相关疾病方面取得了较好的临床疗效,随着Smads蛋白家族的研究深入,对各组织器官细胞纤维化发生机制的探讨已进入细胞内信号转导、细胞因子水平,了解转录和转录后水平的细胞内信号通路之间的交叉对话,将使我们能够开发出特异性和有效的治疗方法。因此,探讨中医药对TGF-β1/Smads信号通路的调控作用,将为中医药预防及治疗各组织器官细胞纤维化相关的疾病提供有力依据。就中医药干预TGF-β1/Smads信号通路对心肌纤维化、肝纤维化、肺纤维化、肾脏纤维化及前列腺纤维化的调控作用研究进展进行综述。

补肾活血类中药对少弱精子症模型生殖激素水平干预研究的系统评价

目的:系统评价补肾活血类中药对少弱精子症模型生殖激素水平的干预作用。方法:检索中国知网、重庆维普中文科技期刊数据库、万方数据知识服务平台、中国生物医学文献数据库、PubMed、Embase和Cochrane Library,筛选补肾活血类中药干预少弱精子症模型的实验研究,制作资料提取表并实施资料提取,采用SYRCLE动物实验偏倚风险评估工具对纳入文献的研究方法学偏倚风险进行评估,并用RevMan5.3软件对结局指标进行Meta分析。结果:共纳入10个研究,研究对象为SD大鼠、KM小鼠和BALB/c小鼠,均为随机对照实验。Meta分析结果显示,与模型组比较,补肾活血类中药可在一定程度上降低卵泡刺激素(follicle stimulating hormone,FSH)(SMD=0.14,95%CI[-0.13,0.41],P<0.00001)、黄体生成素(luteinizing hor-mone,LH)(SMD=-0.32,95%CI[-0.57,-0.08],P<0.00001)含量,提高睾酮(testosterone,T)(SMD=0.85,95%CI[0.61,1.08],P<0.00001)、雌二醇(estradiol,E2)(SMD=0.63,95%CI[0.07,1.20],P=0.003)、催乳素(prolactin,PRL)(SMD=0.36,95%CI[-0.27,0.99],P=0.006)含量。亚组分析结果显示,相较于模型组:补肾活血类中药低剂量组0.05~0.7 g/(kg·d)、中剂量组1~1.7 g/(kg·d)、高剂量组2~6 g/(kg·d)均可提高T含量,且差异均有统计学意义(P<0.05);补肾活血类中药高、中剂量组均可降低FSH、LH含量,且差异均有统计学意义(P<0.05);补肾活血类中药高剂量组可降低E2、PRL含量,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:补肾活血类中药能够有效改善生殖激素水平,且存在一定的量效关系。但是受纳入文献数量与质量要素的限制,以上结论尚待相关高质量研究的验证。