ox-LDL/LOX-1信号通路在糖尿病相关疾病中的研究进展

氧化型低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)是低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)的氧化修饰产物,具有很强的细胞毒性,是诱发脂毒性的主要异常脂类。植物血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1(lectin-like oxidized low-density lipoprotein receptor-1,LOX-1)是一种分子量为50 kDa跨膜糖蛋白。研究表明,ox-LDL/LOX-1信号通路在糖尿病并发症、主动脉粥样硬化、类风湿性关节炎及肿瘤等疾病中具有重要的病理生理作用,特别是糖尿病相关疾病的进展与ox-LDL/LOX-1信号通路的激活或表达上调密切相关。本文通过对ox-LDL/LOX-1信号通路在糖尿病相关疾病中的研究进展进行综述,旨在为糖尿病相关疾病的诊治提供理论依据。

内质网蛋白TXNDC5的研究进展

硫氧还蛋白5(thioredoxin domain containing protein 5,TXNDC5)是近年来新发现的位于内质网中的蛋白质,是一种蛋白质二硫键异构酶,是蛋白质二硫键形成、异构及还原的关键限速酶,属于蛋白质二硫键异构酶(protein disulfide isomerase,PDI)。研究发现,在肿瘤领域对其研究较多。近年来研究显示,TXNDC5在代谢性疾病和纤维化相关疾病等中都发挥着重要作用,本文就其与最新相关疾病做一介绍。

国内“健康中国”战略研究现状的文献计量学分析

目的:针对国内形势的动态发展,分析我国“健康中国”战略研究和合作的现况,归纳总结热点前沿和趋势。方法:运用文献计量方法,检索2016—2020年中国知网数据库中有关“健康中国”的全部文献,利用Excel梳理发文量、机构、基金等数据,通过VOSviewer、CiteSpace对作者、机构和关键词进行可视化分析。结果:共纳入有效文献640篇,其中有396篇被基金资助。三分之一的文章来源于北京,王秀峰是发表相关文献最多的作者(发表8篇,占1.25%),华中科技大学同济医学院卫生管理学院(发表9篇,占1.41%)是对此研究最多的机构。当前“健康中国”研究的热点是医学生、预防和体医融合。结论:健康中国的相关研究受到学术界高度重视,但作者及各大研究机构之间缺少学术合作。随着互联网的发展,对于政策的研究需要加强不同地区多领域的区域联动合作,这将对中国健康体系的发展和完善提供很大帮助。

2型糖尿病腹型肥胖患者血清镍纹样蛋白水平与糖脂代谢和炎症状态相关性的研究

目的 探讨腹型肥胖的T2DM患者血清镍纹样蛋白(Metrnl)水平与糖脂代谢和炎症状态的相关性.方法 选取 2022 年 5~9 月于甘肃省人民医院老年医学科住院治疗的T2DM患者124 例,根据是否合并腹型肥胖分为T2DM合并腹型肥胖组(T2DM+AO,n=81)及单纯T2DM组(n=43);另选取同期 140 名体检健康者,分为腹型肥胖组(AO,n=69)及正常对照组(NC,n=71).ELISA 法检测血清Metrnl、IL-4、IL-13 水平,比较各组血清 Metrnl 与 WC、BMI、内脏脂肪面积(VFA)、FPG、HbA1c、TC、TG、LDL-C、HDL-C等代谢指标和IL-4、IL-13 等炎症指标的差异,探讨Metrnl与T2DM合并腹型肥胖的关系.结果 与NC组比较,AO、T2DM及T2DM+AO组血清Metrnl 降低(P<0.05).Spearman相关分析显示,血清Metrnl 与HDL-C呈正相关(P<0.05),与WC、BMI、VFA、FPG、HbA1c、TG、IL-4、IL-13 呈负相关(P<0.01).多元线性回归分析显示,年龄、WC、BMI、IL-4 是血清Metrnl的影响因素.Logistic回归分析显示,WC、VFA、FPG、Metrnl是T2DM合并腹型肥胖的影响因素.受试者工作特征曲线分析显示,Metrnl预测T2DM合并腹型肥胖的曲线下面积为0.929,敏感度为82.5%,特异度为93.8%.结论 T2DM合并腹型肥胖患者血清Metrnl显著降低,与糖脂代谢及炎症状态密切相关.血清Metrnl可能是T2DM合并腹型肥胖的新型生物学标志物.

凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体1通过糖原合成酶激酶-3β/信号转导和转录激活因子3通路调控高糖诱导的心肌成纤维细胞纤维化的研究

目的 探讨凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体1(LOX-1)通过糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)通路调控高糖诱导的心肌成纤维细胞(CFs)纤维化的相关机制。方法 分离、培养及鉴定CFs,构建LOX-1 RNAi慢病毒载体(LV-LOX-1)及慢病毒空载体(LV-Con)并感染CFs。将细胞分为正常对照(NC)组、25 mmol/L葡萄糖的高糖(HG)组、高渗(HPG)组、LV-LOX-1组和LV-Con组,LV-LOX-1及LV-Con感染CFs后加入HG培养24h,记为HG+LV-LOX-1组和HG+LV-Con组,分别使用10μmol/LSB216763和10μmol/L STATTIC处理HG+LV-LOX-1、HG+LV-Con组24h,记为HG+LV-LOX-1+SB216763组、HG+LV-Con+SB216763组、HG+LV-LOX-1+STATTIC组和HG+LV-Con+STATTIC组。CCK-8法检测CFs活力,q RT-PCR和Western blot法检测LOX-1、I型胶原(COL-I)、硫氧还蛋白5(TXNDC5)、GSK-3β、STAT3、p-GSK-3β、p-STAT3 mRNA和蛋白表达。结果 获得LV-LOX-1感染的CFs,荧光显微镜下呈绿色。与HG、HG+LV-Con组比较,HG+LV-LOX-1组LOX-1、COL-I、TXNDC5m RNA表达降低(P<0.05)。与HG+LV-LOX-1组比较,HG+LV-LOX-1+SB216763、HG+LV-LOX-1+STATTIC组COL-I、TXNDC5 mRNA表达降低(P<0.05)。与HG、HG+LV-Con组比较,HG+LV-LOX-1组p-GSK-3β蛋白表达升高(P<0.05),LOX-1、p-STAT3、COL-I、TXNDC5蛋白表达降低(P<0.05)。与HG+LV-LOX-1组比较,HG+LV-LOX-1+SB216763组p-GSK-3β蛋白表达升高(P<0.05),HG+LV-LOX-1+SB216763、HG+LV-LOX-1+STATTIC组p-STAT3、COL-I、TXNDC5蛋白表达降低(P<0.05)。结论 LOX-1、GSK-3β、STAT3、TXNDC5、COL-I参与高糖诱导的CFs纤维化,LOX-1通过GSK-3β/STAT3通路促进TXNDC5和COL-I表达,抑制LOX-1可抑制高糖诱导的CFs纤维化。

凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体1通过β-连环蛋白/激活转录因子6α通路对高糖诱导的小鼠小胶质细胞吞噬功能影响的研究

目的 探讨凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体1(LOX-1)通过β-连环蛋白(β-catenin)/激活转录因子6α(ATF6α)通路,参与调控高糖(HG)诱导的小鼠小胶质(BV2)细胞吞噬功能障碍的分子机制。方法 体外培养BV2细胞,构建慢病毒LOX-1RNAi载体(LV-LOX-1)及慢病毒空载体(LV-Con),分为正常对照(NC)组、HG组、LV-LOX-1组和LV-Con组。LV-LOX-1及LV-Con感染BV2细胞后,用HG(25 mmol/L葡萄糖)培养24 h后,记为HG+LV-LOX-1组和HG+LV-Con组,分别使用15μmol/L的β-catenin抑制剂(FH535)和ATF6α抑制剂(AEBSF)处理HG+LV-LOX-1及HG+LV-Con感染的BV2细胞24 h后,记为HG+LV-LOX-1+FH535组、HG+LV-Con+FH535组、HG+LV-LOX-1+AEBSF组、HG+LV-Con+AEBSF组。荧光显微镜、RT-PCR和Western blot判断转染效率。CCK-8检测细胞活力,RT-PCR和Western blot检测各组LOX-1、β-catenin、ATF6α、乳脂肪球表面生长因子Ⅷ(MFG-E8)m RNA及蛋白表达。结果 LV-LOX-1重组体感染细胞72 h后,LV-LOX-1、LV-Con组细胞出现大量绿色荧光,NC组细胞无绿色荧光。与NC组比较,HG组LOX-1、ATF6α mRNA和蛋白表达升高(P<0.05),MFG-E8、β-catenin mRNA和蛋白表达降低(P<0.05)。与HG+LV-Con组比较,HG+LV-LOX-1组MFG-E8、β-catenin mRNA和蛋白表达升高(P<0.05),LOX-1、ATF6α mRNA和蛋白表达降低(P<0.05)。与HG+LV-LOX-1组比较,HG+LV-LOX-1+FH535组ATF6α mRNA和蛋白及p-β-catenin、p-ATF6α蛋白表达升高(P<0.05),MFG-E8、β-catenin mRNA和蛋白表达降低(P<0.05)。与HG+LV-LOX-1组比较,HG+LV-LOX-1+AEBSF组MFG-E8m RNA和蛋白表达升高(P<0.05),ATF6α mRNA和蛋白及p-ATF6α蛋白表达降低(P<0.05)。结论 LOX-1、MFG-E8、β-catenin、ATF6α参与调控BV2细胞吞噬功能,LOX-1通过β-catenin/ATF6α信号通路促进HG诱导的BV2细胞吞噬功能障碍。

凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1下调对糖尿病小鼠肝损伤及Ⅲ型纤维连接蛋白域蛋白5的影响研究

目的探讨凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)下调对糖尿病小鼠肝损伤及Ⅲ型纤维连接蛋白域蛋白5(FNDC5)的影响。方法30只7~8周龄的雄性db/db小鼠进行糖尿病造模,按照随机数字表法将其分为3组:db/db LOX-1敲减[AAV(腺相关病毒)-shLOX-1]组、db/db空载体(AAV-shCON)组和空白对照(db/db)组,每组10只;10只同龄的雄性db/m小鼠为正常对照(NC)组。采用HE染色观察小鼠肝脏的病理形态,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、Western blotting法检测小鼠肝脏中LOX-1、白细胞介素-6(IL-6)及FNDC5的mRNA和蛋白表达水平,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、甘油三酯(TG)及FNDC5的水平。采用单因素方差分析进行组间比较。结果HE染色显示,与NC组相比,AAV-shLOX-1组、AAV-shCON组和db/db组小鼠肝小叶结构紊乱,肝细胞内可见大量的空泡样脂滴,呈显著的脂肪变性;与AAV-shCON组和db/db组相比,AAV-shLOX-1组小鼠肝细胞中脂滴数量明显减少,脂肪变性明显减轻。qRT-PCR和Western blotting结果显示,与NC组相比,AAV-shLOX-1组、AAV-shCON组和db/db组小鼠肝脏中LOX-1、IL-6的mRNA和蛋白表达均升高,FNDC5的mRNA和蛋白表达均降低;与AAV-shLOX-1组相比,AAV-shCON组和db/db组小鼠肝脏中LOX-1、IL-6的mRNA和蛋白表达均升高,FNDC5的mRNA和蛋白表达均降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与NC组相比,AAV-shLOX-1组、AAV-shCON组和db/db组小鼠血清中ALT、TG均升高,FNDC5降低;与AAV-shLOX-1组相比,AAV-shCON组和db/db组小鼠血清中ALT、TG均升高,FNDC5均降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论LOX-1参与调控了db/db小鼠肝损伤和FNDC5的变化,LOX-1下调可减轻db/db小鼠肝脏的脂肪变性及炎症反应,提高db/db小鼠FNDC5的组织和血清水平,糖尿病小鼠的肝损伤可能与LOX-1/FNDC5的调控有关。

分拣蛋白过表达通过沉默信息调节因子1/叉头盒蛋白O1通路减轻氧化型低密度脂蛋白诱导的肝窦内皮细胞内吞功能障碍的研究

目的探讨分拣蛋白(Sortilin)参与调控氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人肝窦内皮细胞(HLSECs)内吞功能障碍的作用机制。方法体外培养HLSECs,构建Sortilin慢病毒过表达载体(LV-Sortilin)及慢病毒空载体(LV-Con)并转染HLSECs。将细胞分为正常对照(NC)组、ox-LDL组、LV-Sortilin组和LV-Con组。LV-Sortilin及LV-Con感染HLSECs后,加入100μg/ml ox-LDL培养HLSECs 24 h,记为ox-LDL+LV-Sortilin组和ox-LDL+LV-Con组。分别用10μmol/L的EX527和1μmol/L的AS1842856处理LV-Sortilin和LV-Con感染的HLSECs 24 h后,记为ox-LDL+LV-Sortilin+EX527组、ox-LDL+LV-Con+EX527组、ox-LDL+LV-Sortilin+AS1842856组、ox-LDL+LV-Con+AS1842856组。荧光显微镜、RT-PCR和Western blot判断转染效率,CCK-8检测HLSECs活力,RT-PCR和Western blot检测各组Sortilin、沉默信息调节因子1(SIRT1)、叉头盒蛋白O1(FoxO1)、小窝蛋白1(CAV-1)mRNA和蛋白表达。结果LV-Sortilin重组体感染细胞72 h后,LV-Sortilin、LV-Con组细胞出现大量绿色荧光,NC组细胞无绿色荧光。LV-Sortilin组Sortilin mRNA和蛋白表达高于NC组(P<0.05)。与NC组比较,ox-LDL组Sortilin、SIRT1、FoxO1 mRNA和蛋白表达降低(P<0.05),CAV-1 mRNA和蛋白表达升高(P<0.05),Ac-FoxO1蛋白表达升高(P<0.05)。与ox-LDL组、ox-LDL+LV-Con组比较,ox-LDL+LV-Sortilin组Sortilin、SIRT1、FoxO1 mRNA和蛋白表达升高(P<0.05),CAV-1 mRNA和蛋白表达降低(P<0.05),Ac-FoxO1蛋白表达降低(P<0.05)。与ox-LDL+LV-Sortilin组比较,ox-LDL+LV-Sortilin+EX527、ox-LDL+LV-Sortilin+AS1842856组SIRT1、FoxO1 mRNA和蛋白表达降低(P<0.05),CAV-1 mRNA和蛋白表达升高(P<0.05),Ac-FoxO1表达升高(P<0.05)。结论Sortilin通过SIRT1/FoxO1途径调控CAV-1表达进而调控ox-LDL诱导的HLSECs内吞功能障碍,过表达Sortilin可抑制该病理反应。

凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1敲减抑制糖尿病小鼠视网膜血管损伤和肿瘤进展位点2磷酸化影响的研究

目的探讨凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1(LOX-1)敲减对db/db小鼠视网膜血管损伤和肿瘤进展位点2(TPL2)磷酸化的影响。方法30只db/db小鼠随机分为db/db LOX-1敲减组[db/db+腺相关病毒9型(AAV9)-LOX-1]、db/db空载体组(db/db+AAV9-Con)、db/db空白对照组(db/db),db/m小鼠为正常对照(NC)组,每组各10只。构建重组AAV9型LOX-1 siRAN载体尾静脉注射转染小鼠。眼底荧光血管造影(FFA)和HE染色观察视网膜血管病变,ELISA法检测各组血清VEGF、色素上皮衍生因子(PEDF)、TG,RT-PCR和Western blot检测各组视网膜组织IL-6、TPL2、p-TPL2、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)mRNA和蛋白表达。结果db/db+AAV9-Con、db/db+AAV9-LOX-1组视网膜组织中观察到绿色荧光蛋白。db/db+AAV9-LOX-1组视网膜血管走形接近于NC组,未见视网膜微小血管形态迂曲及明显强荧光,视网膜各层细胞排列较规则、整齐,外核层细胞间稍疏松。与NC组比较,db/db、db/db+AAV9-Con组LOX-1、IL-6 mRNA表达、LOX-1、p-TPL2和NOX4蛋白表达、VEGF、TG升高(P<0.05),TPL2 mRNA表达、TPL2蛋白表达、PEDF降低(P<0.05),db/db+AAV9-LOX-1组TPL2 mRNA表达、p-TPL2、NOX4蛋白表达、PEDF、VEGF、TG升高(P<0.05),LOX-1、IL-6 mRNA表达、LOX-1、TPL2蛋白表达降低(P<0.05)。与db/db、db/db+AAV9-Con组比较,db/db+AAV9-LOX-1组TPL2 mRNA表达、TPL2蛋白表达、PEDF升高(P<0.05),LOX-1、IL-6 mRNA表达、LOX-1、p-TPL2、NOX4蛋白表达、VEGF、TG降低(P<0.05)。结论LOX-1参与调控db/db小鼠视网膜血管损伤和TPL2表达,其敲减可抑制视网膜炎症、氧化应激和TPL2磷酸化,减轻视网膜病理改变和病理性血管生成。