多囊卵巢综合征患者程序性细胞死亡因子4表达及睾酮与胚胎质量相关性研究

目的:探讨控制性超促排卵(COH)中多囊卵巢综合征(PCOS)患者卵巢颗粒细胞中程序性细胞死亡因子4(PDCD4)表达及睾酮的临床意义。方法:选取于枣庄市妇幼保健院生殖遗传中心行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)助孕的COH周期PCOS患者(28例)和非PCOS患者(40例),经阴道超声引导下取卵后,收集卵泡液及卵丘周围颗粒细胞,提取RNA,逆转录后应用实时定量PCR检测PDCD4表达情况,分析PDCD4表达及睾酮与胚胎质量的相关性。结果:PCOS组和非PCOS组患者的年龄、不孕年限、体质量指数(BMI)、基础FSH、E_(2)、PRL和睾酮比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。两组的正常受精率、卵裂率、优胚率、可用胚率和卵母细胞利用率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。PCOS组的PDCD4表达略高于非PCOS组,但差异无统计学意义(P>0.05)。低可用胚组的PDCD4表达高于正常可用胚组(P=0.04)。高睾酮水平组的正常受精率(P=0.00007)和卵母细胞利用率(P=0.038)低于低睾酮水平组。结论:COH中卵巢颗粒细胞PDCD4表达增高与低可用胚率相关,睾酮水平与受精率和卵母细胞利用率密切相关,睾酮水平升高,受精率和卵母细胞利用率降低。

Ex-FABP作为鸡腹脂性状主要候选基因的研究

细胞外脂肪酸结合蛋白(extracellular fatty acid-binding protein,Ex-FABP)基因是脂肪酸结合蛋白(fatty acid-binding protein,FABP)家族的另一成员,参与鸡的脂肪酸、肌纤维、骨骼等调控过程.利用PCR-SSCP(single strand conformation polymorphism)和DNA测序的方法,对不同品种的杂交鸡进行了Ex-FABP基因5'调控区部分序列的多态性分析,发现了3个单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)位点.其中,此片段中的碱基C(-1000)的插入和碱基T→C(-1011)的突变,导致此处比野生型基因少了1个cap,多了1个Nkx-2、1个AhR/Ar和2个CF1等转录因子结合位点的产生.利用SAS软件对Ex-FABP基因5'调控区的SNPs与屠体性状的最小二乘分析,发现基因型BB(突变型)与腹脂重存在极显著相关(P<0.01).研究结果表明,细胞外脂肪酸结合蛋白(Ex-FABP)基因是影响脂肪沉积、控制腹脂性状的主要候选基因.

用放射杂交板定位鸡的MC4R基因以及其在鸡和人染色体上同源区的比较分析

黑素皮质素受体 (melanocortin 4receptor ,MC4R)基因的突变与猪、鼠和人等的食欲、肥胖和生长有关联性 ,然而对鸡的MC4R基因的功能却知之甚少。为了确定鸡的MC4R基因在染色体上的位置 ,使用鸡 -仓鼠杂交板 (ChickRH6 )做了该基因的定位工作。通过扩增ChickRH6杂交板上的 93个样品 ,然后经整合分析将MC4R基因定位在 2号染色体上的标记MCW 0 0 6 2、BCL2和OVY附近 ,即 2q12。这个连锁图上的 5个标记基于两点分析与MC4R的LOD值都大于 5。同时 ,以MC4R基因为标记做了鸡和人的染色体比较分析。结果显示鸡的 2号染色体 (GGA2 )和人的 18号染色体 (HSA18)存在同源区 ,且基因BCL2和肥胖基因 (obesity)位于MC4R基因附近。推测鸡的MC4R基因与人的MC4R基因可能具有相似的功能。该研究揭示了鸡和人MC4R基因的染色体分布 ,并用杂交放射板将鸡的MC4R基因定位在 2号染色体的 12区带。

影响动物肉质性状主要候选基因的研究进展

随着分子生物学在动物遗传育种中的应用,对数量性状主效基因的研究成为必然。本文对影响肉质的脂肪酸结合蛋白基因、肥胖基因、leptin基因、黑素皮质受体基因、脂蛋白脂酶基因、激素敏感脂酶基因的国内外研究状况加以综述。

虾夷马粪海胆CYP51基因cDNA的克隆及其SNPs分析

采用RT-PCR、PCR-SSCP等分子生物学技术和关联分析等方法对虾夷马粪海胆Strongylocentrotusintermedius CYP51基因的cDNA序列进行了克隆和单核苷酸多态性分析。结果表明:虾夷马粪海胆的CYP51基因包括一个1 491 bp的开放阅读框,编码496个氨基酸;其开放阅读框的第161个核苷酸处存在1个单核苷酸多态性,即核苷酸发生了A→G突变。关联分析结果表明,该单核苷酸多态性与虾夷马粪海胆的体质量、性腺质量之间存在显著相关性(P<0.05)。本研究中首次克隆了虾夷马粪海胆CYP51基因的cDNA序列并进行了SNPs分析,研究结果可为虾夷马粪海胆的分子标记辅助育种提供参考。

虹鳟MC4R基因的PCR扩增及其应用

黑素细胞皮质激素受体(MC4R)是跨膜G蛋白偶联受体。MC4R在人和鼠的体重、能量稳态和采食量的调控中具有重要作用,是第一个发现的与人类显性遗传疾病性肥胖相关的靶位点。虹鳟(Oncorhynchus mykiss)属于冷水性鱼类,具有很好的药用和食用价值,但生长缓慢。本研究根据斑马鱼的MC4R基因保守区的核苷酸序列设计引物,通过PCR扩增出虹鳟的MC4R基因,纯化后测序。本实验测出虹鳟MC4R基因968bp,并发现其与其它鱼类的MC4R进行了同源性分析,构建基因进化树。

腐植酸对肉仔鸡屠体品质的影响

在基础日粮的基础上，添加０．６％（Ａ）、０．３％（Ｂ）和０．０％（Ｃ）三种不同添加量的腐植酸饲喂ＡＡ肉仔鸡，以研究腐植酸对肉仔鸡屠体品质的影响。结果表明。

蛋鸡VLDL选择对蛋组成性状影响的研究

对鸡血浆极低密度脂蛋白（ＶＬＤＬ）浓度进行高低选择之后，测定了２８周龄的蛋组成性状。研究了高低ＶＬＤＬ对蛋组成性状的影响，尤其与鸡体脂肪代谢关系密切的蛋黄性状及其蛋黄胆固醇含量的变化规律。本实验以父系同胞法估计了蛋组成性状在产蛋早期的遗传参数。结果表明：用ＶＬＤＬ间接选择蛋黄重、蛋黄比例、蛋白蛋黄比的效果好；蛋白蛋黄比高和蛋黄比例低的鸡，具有显著低的蛋中胆固醇含量；可通过蛋白蛋黄比。

VLDL选择对蛋鸡血脂性状影响的研究

本研究对鸡的血浆极低密度脂蛋白（ＶＬＤＬ）浓度进行高、低选择之后，研究了与鸡的脂肪代谢关系密切的血脂性状，在产蛋前期与血浆极低密度脂蛋白浓度的关系及这些血脂成分在产蛋期的变化规律。本实验以父系同胞法估计了血脂性状在产蛋早期的遗传参数。结果为：血脂性状的变异较大，对血脂性状选择有效；母鸡随着年龄的增长，合成、沉积脂肪的能力加强；母鸡比公鸡有较强的合成、沉积脂肪的能力和较弱的分解脂肪的能力；低浓度ＶＬＤＬ组具有较高的饲料效率；磷脂、甘油三酯这两个性状可作为选择瘦型蛋鸡的间接指标。

蛋鸡血浆甘油三酯与蛋黄性状关系的研究

本实验对蛋鸡血浆甘油三酯 (Triglyceriche ,TG)浓度进行高、低选择之后 ,测定了两个世代的产蛋早期的褐壳鸡的血脂成分 (血浆中胆固醇、磷酯、游离脂肪酸 )及其鸡的蛋黄性状 (蛋黄比例、蛋黄胆固醇含量 ) ;且以父系半同胞法估计了血脂和蛋黄性状的遗传参数。研究了与鸡体脂肪代谢关系密切的血脂成分和蛋黄性状的变化规律及其之间的相互关系 ,来寻找能降低蛋黄胆固醇的新途径。结果表明 :血浆甘油三酯的变异系数较大为 5 3.5 2 % ;血浆甘油三酯、蛋黄比例和相对蛋中胆固醇含量的遗传力较高分别是 0 .2 74、0 .90 2、0 .30 4 ,它们之间的遗传相关分别是 0 .2 71、0 .36 6。即血浆甘油三酯可以作为间接选择蛋中胆固醇含量的指标。

稀释精液用于种鸡生产的效果分析

通过对罗曼蛋种鸡采用生理盐水稀释精液、奶粉稀释精液和原精液进行人工授精的对比，结果表明，应用生理盐水稀释精液受精效果最好；原精液次之；而应用奶粉稀释精液的受精效果差些。

用无鱼粉日粮饲喂蛋种鸡

通过对罗曼蛋鸡父母代采用无鱼粉日粮和有鱼粉日粮的对比饲养试验，在饲养日产蛋率、种鸡淘死率、种蛋破损率、种蛋受精率、受精蛋孵化率及受精蛋中死率等六个指标上，无鱼粉日粮和有鱼粉日粮差异不显著，无鱼粉日粮比有鱼粉日粮的成本每公斤降低0.20元，完全可以采用无鱼粉日粮饲喂蛋种鸡。

猪RN基因的研究

RN基因是影响猪肉质性状的一个主效基因,已被定位在猪的15号染色体上(15q25),包含显性的不利等位基因(RN)为影响猪肉的工艺产量和隐性正常的等位基因(rn)。最近发现的与肌肉过量糖原含量相关的PRKAG3基因的非保守替换(R200Q),被认为是引起酸肉的主要原因。

腐植酸对肉仔鸡生产性能的影响

本试验在基础日粮基础上，添加0.9％、0.6％、0.3％和0％四种不同添加量的腐植酸饲喂AA肉仔鸡，以研究腐植酸对肉仔鸡生产性能的影响。试验结果表明：添加0.6％腐植酸的试验组在7周龄时的体重和料肉比明显优于对照组（P＜0.01），添加0.3％腐植酸的试验组也好于对照组（P＜O.05）。

建构主义的澄清与反思

建构主义近几年影响越来越大,同时,对建构主义的批评和误解也有增无减。首先,本文追本溯源,从当代建构主义的时代背景和一般特征出发,回答了"为什么说建构主义是与客观主义或实证主义相对应的认识论"。其次,从理论发展方法的"演绎法"视角,阐释了建构主义与学习理论、教学设计的关系。最后,分析了典型案例——乔纳森的建构主义观对学习理论、教学设计的影响,以揭示建构主义给教育教学理论发展所带来的影响,反思建构主义在教育实践中的困境。本文期望通过在认识论、方法论、实践三个层面系统理清与反思建构主义,促进人们对该理论的深层次正确理解和有效运用。

斑马鱼CYP11a1基因在不同性腺发育时期的表达

采用实时荧光定量PCR技术,分析了斑马鱼Danio rerio的CYP11a1基因在成鱼4个组织和性腺发育3个时期的表达情况。结果表明:CYP11a1基因在卵巢、精巢、肌肉和脑组织中均有表达且存在差异,在脑中表达量最低(P<0.05),在卵巢、精巢、肌肉中的表达量分别为脑中表达量的204.7倍、38.9倍、17.0倍;CYP11a1基因在3个卵巢发育时期的表达量表现为先降低后升高的趋势,其在卵巢成熟期的表达量最低(P>0.05),在卵巢成熟前期、卵巢成熟后期的表达量分别为卵巢成熟期表达量的1.7倍、1.5倍;CYP11a1基因在3个精巢发育时期的表达量表现为先升高后降低的趋势,在精巢成熟期表达量最高(P<0.05),分别为精巢成熟前期、精巢成熟后期表达量的6.5倍、13.4倍。研究表明,尽管CYP11a1基因在卵巢和精巢发育过程中的表达规律不同,但CYP11a1基因在一定程度上与斑马鱼的性腺发育相关,其可能在促进斑马鱼精子成熟中发挥一定作用。

SOX、DMRT性别决定基因家族及其应用研究进展

SOX基因家族是在动物中发现的一类新的编码转录因子的基因家族,其产物具有一个HMG基序保守区,参与诸如性别决定等多种早期胚胎发育过程。到目前为止,在XXXY染色体性别决定系统中,只发现了两个性别决定基因:一个是SRY,它主要在哺乳动物性别决定中起作用;一个是DMY,它是在青鳉(Oryziaslatipes)中发现的。SRY属于SOX基因家族,而DMY则属于另一个普遍参与脊椎动物性别决定过程的DMTR基因家族。本文综述了这两大性别决定基因的研究进展,并探讨了它们在水产养殖动物性别决定基因研究中的意义和价值。

红鳍东方鲀抗苗勒氏管激素(AMH)基因在不同发育时期的组织表达

为研究抗苗勒氏管激素（AMH）基因在红鳍东方鲀Takifugu rubripes各组织和不同发育时期的表达情况以及在性别分化和性腺发育等过程中的作用,利用荧光实时定量PCR（qRT-PCR）技术对红鳍东方鲀成鱼的肾脏、脑、心脏、脾脏、肝脏、精巢和卵巢等组织进行了amh基因的表达分析以及不同发育时期（23、30、40、60、80日龄及2龄和3龄鱼）红鳍东方鲀个体水平上amh基因的表达分析。结果表明：红鳍东方鲀3龄成鱼脾脏、肾脏和肝脏中的amh基因表达量极显著高于其他组织（P〈0.01）,在精巢和心脏中的表达量极显著高于卵巢和脑（P〈0.01）,其中脾脏中表达量最高,脑中表达量最低;红鳍东方鲀23日龄、30日龄、2龄和3龄鱼中,雄鱼amh基因的表达量极显著高于同期雌鱼（P〈0.01）,而60日龄和80日龄时雌鱼表达量显著高于雄鱼（P〈0.05）,40日龄时雌、雄鱼的表达量无显著性差异（P〉0.05）,3龄时雌、雄个体性腺中amh基因的表达量均显著高于2龄鱼（P〈0.05）;雄性幼鱼amh基因的表达量从23~30日龄呈增长趋势,且在30日龄时达到最高,随后逐渐降低,而雌鱼整体amh基因的表达量也呈现先升高后降低的趋势,80日龄时雌鱼amh基因表达量最高。研究表明,amh基因在红鳍东方鲀的性腺发育和性别分化过程中发挥着一定的作用。

血浆miRNA检测在肿瘤临床应用的研究进展

微小RNA(micro RNA,miRNA)是一类长度为21～24个核苷酸的非编码小分子RNA,它通过与靶基因3'端非翻译区完全配对及不完全配对地结合来调控基因表达,影响个体发育、细胞增殖等基本生命活动。miRNA调控几乎参与了生物生命活动的各种生物学过程,且与恶性肿瘤的发生、转移及进展相关。在血浆中miRNA具有含量丰富、性质稳定、易于检测等特征,自发现血浆中存在miRNA以来,血浆miRNA作为肿瘤诊断、治疗和预后的潜在生物标志物备受关注。作者对miRNA在肿瘤早期诊断、个体化治疗以及预后监测等方面的应用价值作一综述。

牙鲆体质量和形态性状异速生长的遗传分析

为了对牙鲆Paralichthys olivaceus进行品种选育,运用联合异速生长尺度模型,对牙鲆多个部分体大小相对整体体大小的异速生长进行了遗传分析。结果表明：体长、头长、尾柄长、体高、尾柄高5个形态性状相对体质量的异速生长遗传力为0.251~0.755,除尾柄长和尾柄高的表型相关为正值外,其余性状的表型相关均为负值;而相对体长的异速生长中,除了尾柄高的遗传力很高（0.871）外,大多数形态性状表现为中等遗传力,且这些异速生长尺度的遗传相关大多数为负值。本研究对牙鲆形态性状相对于体质量和体长的遗传参数分析结果可为牙鲆的品种选育提供一定的理论基础。