4个基因在副猪嗜血杆菌感染仔猪脑组织中DNA甲基化与mRNA表达联合验证

【目的】验证候选基因在副猪嗜血杆菌(Glaesserella parasuis,GPS)感染仔猪脑组织中DNA甲基化与mRNA表达之间的联合调控关系,为揭示副猪嗜血杆菌引起仔猪脑膜炎的表观致病机理提供理论依据。【方法】选取6头28日龄断奶仔猪,随机均分为对照组和GPS组,GPS组仔猪腹腔注射1 mL 2×109 CFU/mL副猪嗜血杆菌SH0165菌液,对照组仔猪腹腔注射等量生理盐水,7 d后采集仔猪脑组织提取DNA和RNA。采用实时荧光定量PCR检测4个候选基因(LYPD1、PITPNM1、SYP、ACVR1B)的mRNA表达量,并利用重亚硫酸盐测序(bisulfite sequencing PCR,BSP)、甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)检测副猪嗜血杆菌感染前后4个基因在仔猪脑组织中的DNA甲基化变化。【结果】本研究成功将MSP方法应用于基因的DNA甲基化测序研究,使其不局限于定点检测甲基化位点。实时荧光定量PCR结果显示,与对照组相比,GPS组仔猪LYPD 1、PITPNM 1、SYP、ACVR 1 B基因mRNA表达均显著或极显著下调(P<0.05;P<0.01)。DNA甲基化测序结果显示,除ACVR 1 B基因外,各基因DNA甲基化均上调。【结论】除ACVR 1 B基因外,LYPD 1、PITPNM 1、SYP 3个基因DNA甲基化与mRNA表达水平呈反向关联调控,副猪嗜血杆菌感染后仔猪脑组织DNA甲基化变化对4个候选基因的表达具有不同的调控模式。

猪印记基因MKRN3的SNPs筛选及胴体性状关联分析

以梅山猪、大白猪和长白猪为研究对象,筛选出MRKN3基因的单核苷酸多态位点(SNPs)并进行PCR-RFLP验证,利用PCR-Bst UI-RFLP对大白×梅山F2代资源家系(285头)DNA样品酶切分型,将分型结果与猪胴体性状进行关联分析。结果表明:猪MRKN3基因编码区有7个SNPs,分别为293C>G、361G>A、497G>A、630G>A、678T>C、1376C>T、和1407T>A;其中678T>C位点等位基因频率在中外不同猪种中存在差异;猪MRKN3基因678T>C位点与内脂率及臀部膘厚显著相关(P<0.05);678T>C位点对内脂率具有显性效应(P<0.05),表现为该位点杂合子比纯合子具有更高的内脂率;而该位点对臀部膘厚具有加性效应(P<0.05),表现为等位基因678C的累加具有降低臀部膘厚的效应。因此,猪MKRN3基因的678T>C位点可为猪的分子育种实践提供一定指导作用。

简支梁桥模态试验测点布置方式研究

《公路桥梁荷载试验规程》仅规定了桥梁模态试验时最少测点布置方式,导致模态试验数据在桥梁运维中利用率不高.为了揭示桥梁损伤与模态试验数据间的关系,基于结构动力学和损伤力学基本理论,以简支梁桥为研究对象,构建模态柔度曲率、模态柔度差曲率、模态柔度曲率差及模态柔度均值曲率差改变率等基于模态柔度矩阵的损伤识别指标,在此基础上对模态试验时拾震器的布设方式及模态数据的阶数对识别效果的影响进行研究.结果表明:模态试验时按主梁16等分布设拾振器得到的模态数据能较好完成结构的损伤识别;识别指标宜采用模态柔度曲率差;高阶模态的测试数据对损伤识别影响不明显,简支梁桥利用一阶模态试验数据构件的识别指标就能较好识别出结构的损伤.

猪MKRN3基因启动子区CpG岛在胚胎心脏组织甲基化模式分析

以梅山猪-大白猪正反交为模型,以65日龄和100日龄的胚胎心脏组织为研究材料,对MKRN3基因启动子区CpG岛进行预测,根据预测的CpG岛设计引物,采用重亚硫酸盐测序法(BSP法),分析MKRN3基因启动子区CpG岛在胚胎心脏组织的甲基化程度。结果显示:对于65日龄胚胎,猪MKRN3基因启动子区CpG岛在大白×梅山和梅山×大白杂交后代的胚胎心脏组织中均表现高度甲基化(75.6%、76.4%);对于100日龄的胚胎,大白×梅山杂交后代的胚胎心脏组织表现高度甲基化(80%),而梅山×大白杂交后代的胚胎心脏组织呈现低甲基化(35.6%)。由此可见,猪MKRN3基因启动子区CpG岛的甲基化模式随着正反交、胚胎发育时期不同而呈现出一定变化,即在胚胎发育65日龄时,正反交子代均具有高度甲基化;而在胚胎发育至100日龄,正交子代呈现高度甲基化,反交子代呈现低甲基化,说明在胚胎发育晚期父本或母本等位基因可能会发生明显的去甲基化。

自密实钢管混凝土系杆拱桥先梁后拱线形控制与吊杆张拉优化研究

文章以某二级公路哑铃形钢管混凝土简支系杆拱为研究对象,采用有限元软件对全桥施工阶段进行模拟分析,通过计算该系杆拱桥在先梁后拱施工顺序下不同工况及内力组合条件下的结构竖向位移,得出混凝土系梁和钢管拱的预拱度计算值;通过对吊杆不同张拉顺序方案的拱肋上下缘应力比较分析,得出吊杆张拉顺序的最优方案。结果表明:系梁和钢管拱的计算预拱度能保证桥梁结构在施工期的挠度和线形的控制;吊杆采用间隔式分批对称张拉更为合理,计算得出该方案下吊杆的初始张拉力和施工阶段的吊杆内力值。

基于时变特性的钢板组合梁桥性能退化规律研究

文章依托安徽省50座典型在役钢板组合梁桥,对钢板组合梁桥运营期的时变性能规律展开研究,分析了钢板组合梁桥体系性能的影响因素;综合考虑材料性能、荷载效应及抗力变化规律,形成了钢板组合梁桥的性能退化模型;建立40 m简支钢板组合梁精细化模型,分析了中载、偏载工况下钢板组合梁桥的时变性能退化规律。研究表明,钢板组合梁体系时变性能退化规律可采用乘幂函数曲线形式表达,其规律主要表现为桥梁运营初期性能退化速率较快并逐渐减缓,桥梁运营后期性能基本不发生退化或退化速率极缓。

胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白W自杀性质粒的构建

胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)是一种能够引起猪传染性胸膜肺炎的细菌病原体,它给养猪业带来巨大的经济损失。外膜蛋白W(Omp W)在细菌的生命活动中起着重要作用,大量研究表明Omp W与细菌的感染、耐药性以及分子调节等都有着紧密联系,因而阐明ompW基因对胸膜肺炎放线杆菌调节机制对于该疾病的防控具有重要意义。以胸膜肺炎放线杆菌ompW基因为研究对象,成功构建自杀性质粒p EM-Omp W,为构建胸膜肺炎放线杆菌Omp W突变株以及探究ompW基因对胸膜肺炎放线杆菌分子调节机制提供了基础。

阿莫西林在肉鸡体内的药物动力学研究

为研究阿莫西林在肉鸡体内的药物动力学特征,为兽医临床用药提供依据,试验选取12羽成年三黄肉鸡,阿莫西林口中灌服给药,利用高效液相色谱法测定血浆中药物浓度。结果表明,阿莫西林口灌给药(15 mg/kg.BW)后,其主要药动学参数:t1/2α为(0.627±0.071)h,t1/2ka为(0.139±0.011)h,t1/2β为(1.800±0.181)h,AUC为(6.005±0.641)μg/(m L·h),Tmax为(0.476±0.049)h,Cmax为(2.293±0.152)μg/m L。说明阿莫西林口灌给药后,在成年三黄鸡体内吸收迅速,消除较快。

一株鸭瘟病毒的分离与鉴定

从湖北省武汉市某种鸭场送检的死亡鸭肝脏中分离到1株病毒,结合流行病学调查,剖检病理变化特征初步诊断为鸭瘟病毒感染。根据Gen Bank上公布的鸭瘟病毒UL6基因序列设计一对引物,提取病毒核酸DNA进行PCR扩增,得到大小约为416 bp的目的片段。测序结果表明与Gen Bank上公布的鸭瘟病毒UL6基因的序列相似性达到99%。鸭胚感染试验表明,感染的鸭胚在第四天开始死亡,并出现典型的鸭瘟病毒感染症状。上述结果表明,该种鸭场种鸭死亡是由鸭瘟病毒所引起的。

某三跨连续中承式钢桁架拱桥静载试验研究

通过对某三跨连续中承式钢桁架拱桥(80+200+80)m进行静载试验,将试验过程中的应变、吊杆增量、挠度测试结果与理论值作了比较,了解了大跨径钢桁架拱桥的整体受力状况,结果表明,该钢桁架拱桥在试验荷载作用下,结构的强度、刚度及吊杆力增量均满足要求,桥梁整体受力性能良好。

某三跨自锚式悬索桥静载试验研究

以某三跨自锚式悬索桥(80+200+80)m进行静载试验为例,简述自锚式悬索桥的试验工况和试验内容。通过实测结果理论分析和评定,该桥在试验荷载作用下,结构校验系数,相对残余值,吊杆力增量偏差及主缆线形,均满足要求,表明该桥整体受力性能良好。

副猪嗜血杆菌反应调节因子CpxR自杀性质粒的构建

以副猪嗜血杆菌双组分信号转导系统CpxA/R中反应调节因子CpxR为研究对象,成功构建自杀性质粒ΔpEM-CpxR,这就为构建副猪嗜血杆菌CpxR突变株以及探究CpxA/CpxR双组分信号转导系统调控副猪嗜血杆菌分子致病机制提供了基础。

中草药饲料添加剂在畜禽生产中应用的研究进展

概述了中草药添加剂天然可靠、功能多样、资源丰富的基本特性及其在畜禽生产中能提高生产性能、改善产品品质和繁殖机能、增强免疫机能和抗病能力、提高抗应激能力的应用效果,分析了存在的问题与今后的研究方向。

中草药超微粉在畜禽生产中的应用研究进展

中草药超微粉具有粒径小、粒度分布均匀、有效成分溶出速度和溶出率高等特点。概述了中草药超微粉在畜禽生产中提高生产性能、改善产品品质、增强免疫机能、防治疾病、缓解应激的应用效果以及存在的主要问题和研究方向,以期对中草药超微粉在畜禽生产中的应用与开发提供参考。

基于荷载试验的钢桁梁桥静动力性能研究

钢桁梁桥因整体性能好、施工周期短、工厂预制化程度高等优点,在桥梁建设中得到广泛应用。为了探究此类型桥梁结构在运营期间的静动力性能,文章以跨径为67 m的某高速公路钢桁梁桥为研究对象,采用有限元模拟与现场荷载试验相结合的方法,对该结构在设计荷载下的静力性能及动力特性进行研究。结果表明,该结构在试验荷载作用下,结构关键截面的应变及挠度校验系数分别介于0.50~0.90与0.45~0.83,且各工况下的相对残余应变及相对残余变形均低于0.1。静载试验结果表明:在运营荷载下,该钢桁梁桥处于弹性工作状态,安全储备较大;此外,实测的结构一阶竖向频率为2.764 Hz,大于模态分析结果的2.149 Hz,且通过跑车试验得到的桥梁实测冲击系数均低于理论计算值0.149,表明该钢桁梁桥具有良好的动力特性,满足运营期要求。

牛蒡苷元对疫苗免疫猪抗体和T细胞亚群的影响

为了研究牛蒡苷元对猪外周血T细胞亚群和对不同疫苗免疫抗体的影响,将16只25~30日龄的健康仔猪,随机分成4组,将牛蒡苷元溶液分别以高、中、低3个剂量和生理盐水同时注射,给药前后不同时间点采血,流式细胞术检测猪外周血中T淋巴细胞亚群的变化。结果显示,中剂量的牛蒡苷元可显著促进猪外周血CD3^+、CD4^+细胞的增殖。另外25~30日龄断奶仔猪16头随机分为4组,将牛蒡苷元分别以高、中、低3个剂量和猪瘟疫苗同时注射,于免疫后7、14、21、28、35 d采血,ELISA方法检测猪瘟抗体水平。研究表明,与仅用疫苗免疫对比,牛蒡苷元疫苗联合使用,在免疫的初期和中期能够有效的快速提高猪体抗体水平,并且低、中剂量组比高剂量组更能够提高抗体水平,合适剂量的牛蒡苷元可以作为免疫增强剂单独或与疫苗联合使用。

跨运河钢桁架梁拱组合体系通航渡槽力学性能

依托引江济淮工程淠河总干渠渡槽工程,对110 m世界最大跨度钢渡槽,采用数值计算和现场试验相结合的方法,对跨运河钢桁架梁拱组合体系新型钢渡槽结构的力学性能进行评价。首先,通过现场充水试验,对承受超级可变水荷载的钢渡槽结构关键截面应变和变形进行重点监测,比较监测数据与数值计算结果,分析评价结构静力性能。其次,通过现场脉动试验测试不同水位下结构的自振频率,并与数值分析结果对比,分析评价结构动力性能。充水试验结果表明,淠河总干渠新型钢渡槽处于安全状态,承载力满足设计要求。研究成果可为类似工程提供技术参考。

黄芩苷对脂多糖诱导后仔猪血清和组织中炎性细胞因子表达的影响

为评价黄芩苷的抗炎作用,研究黄芩苷对脂多糖(LPS)刺激后仔猪血清中炎性因子表达的影响,试验选取36头健康状况良好、体重(11.0±1.2) kg的"杜×长×大"断奶仔猪,随机分为阴性对照组、LPS组、氟尼辛葡甲胺组和黄芩苷组(黄芩苷剂量分别为按体重25,50,100 mg/kg添加)6组。饲喂7 d后,氟尼辛葡甲胺组和黄芩苷组提前0.5 h肌肉注射给药,然后与LPS组一起按体重0.1 mg/kg腹腔注射LPS,阴性对照组腹腔注射等量生理盐水,注射LPS 6 h后再次给药1次。检测注射LPS后3,24小时时猪血清中炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8的含量,并于注射LPS 24 h后检测血管和腹膜中炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8的基因表达量。结果表明:LPS刺激仔猪3 h后,LPS组血清中TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8的含量显著或极显著增加(P<0.05或P<0.01),氟尼辛葡甲胺能显著抑制血清中IL-6含量的升高(P<0.05),黄芩苷能显著或极显著抑制血清中TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8含量的升高(P<0.05或P<0.01);LPS刺激仔猪24 h后,LPS组血清中TNF-α含量极显著增加(P<0.01),氟尼辛葡甲胺对血清中TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8含量升高无显著抑制作用(P>0.05),100 mg/kg黄芩苷能极显著抑制血清中TNF-α、IL-6和IL-8含量的升高(P<0.01),显著抑制IL-1β含量的升高(P<0.05)。LPS刺激24 h后,仔猪血管和腹膜中TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8基因的表达显著或极显著上调(P<0.05或P<0.01);氟尼辛葡甲胺和黄芩苷能显著或极显著抑制血管中TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8基因表达上调(P<0.05或P<0.01);氟尼辛葡甲胺和黄芩苷能显著抑制腹膜中TNF-α、IL-1β、IL-6基因表达上调(P<0.05)。说明黄芩苷能有效地抑制LPS刺激后仔猪血清中炎性因子的分泌及血管和腹膜组织中相关基因的表达。

露天采矿技术及其发展方向探讨

在本次论文研究当中首先针对于露天采矿技术进行细致的介绍,随后探讨以及分析当前我国露天采矿技术的发展方向与趋势,从而逐步明确露天采矿技术在应用阶段的优劣势,以此确保在展开露天采矿工程当中选择合适的技术类型,有效促进矿产资源开采行业的快速发展。