小品种乳细胞外囊泡分离鉴定及生物学特性研究进展

乳源细胞外囊泡(milk-derived extracellular vesicles,MEVs)是一类由乳腺上皮细胞分泌的纳米级双层膜囊泡,携带蛋白质、核酸和脂质等生物活性分子,在细胞间信号传递和免疫调节等方面发挥关键作用。尽管小品种乳因其产量较低并不常见于市场,但它们具有独特的营养价值和潜在的健康益处,亦值得深入探究与挖掘。本文综述羊乳、驼乳、牦牛乳、驴乳、水牛乳、猪乳和马乳中MEVs分离鉴定技术、形态学特征、组成及其生物学特性,提出小品种乳MEVs研究中存在的挑战和未来发展方向,旨在为小品种乳MEVs的进一步研究和应用提供理论基础和科学参考,促进小品种乳产业的发展。

低乳糖牛乳粉品质分析及蛋白特性研究

为获得品质优良的低乳糖牛乳粉,该试验以生牛乳为原料,分别使用3种不同乳糖酶水解牛乳,对水解后的牛乳进行喷雾干燥得到了低乳糖牛乳粉-乳糖酶A(low lactose milk powder-enzyme A,LLMP-EA)、低乳糖牛乳粉-乳糖酶B(low lactose milk powder-enzyme B,LLMP-EB)、低乳糖牛乳粉-乳糖酶C(low lactose milk powder-enzyme c,LLMP-EC),测定其理化指标和游离巯基等蛋白特性。结果表明,LLMP-EA、LLMP-EB和LLMP-EC的外观及组织状态相近、色泽偏白,LLMP-EA的水分活度比LLMP-EB、LLMP-EC分别低6.29%、4.07%(P<0.05);LLMP-EA的水分含量比LLMP-EB、LLMP-EC分别低6.13%、3.32%(P<0.05);LLMP-EA多分散性指数(polydispersity index,PDI)值为0.13,LLMP-EA、LLMP-EB和LLMP-EC的Zeta电位无显著性差异(P>0.05);通过扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)观察发现,LLMP-EA乳粉颗粒较为饱满、表面光滑、有轻微凹陷、颗粒聚集程度较低;LLMP-EA的游离巯基含量比LLMP-EB、LLMP-EC分别低19.90%、12.15%(P<0.05),而LLMP-EA表面疏水性比LLMP-EB低12.29%(P<0.05);LLMP-EA的α-螺旋结构分别比LLMP-EB、LLMP-EC高1.35%、1.94%(P<0.05)。因此,LLMP-EA的水分含量和水分活度低、PDI值仅为0.13,品质最佳;游离巯基含量和溴酚蓝结合量低、α-螺旋含量高,蛋白特性较好。

羊奶乳清蛋白的分离提取研究

为获得品质更好的羊奶乳清蛋白,以鲜羊奶为原料,分别采用离心法、酸等电点沉淀法(盐酸法、乙酸法和柠檬酸法)和乙醇分级沉淀法对羊奶中的乳清蛋白进行分离提取,通过测定所得乳清蛋白性质,评估各方法的分离提取效果。结果表明,酸沉淀法分离的乳清酪蛋白残留量较少,其中盐酸法提取的乳清酪蛋白去除率为(75.90±0.30)%。乙酸法获得乳清的粒径显著高于其他4种方法(P<0.05)。3种酸沉淀法提取乳清的Zeta电位无显著差异(P>0.05)。经过酸法提取的乳清中β-折叠结构转向了α-螺旋结构。离心和盐酸法提取的乳清中游离巯基含量显著高于乙酸法获得乳清(P<0.05)。综上,乙酸分离提取效果最佳,提取的乳清品质最好,是一种有效的、科学的羊奶乳清蛋白分离方法。

牛乳蛋白过敏原检测与改性及低致敏性乳制品研究进展

牛乳过敏是一种较严重的食源性疾病,通常因为乳中蛋白质和其代谢产物之间发生交互作用而导致人体出现免疫功能紊乱。目前已有研究证明,牛乳过敏逐渐成为全球性的重大公共卫生问题,尤其是在婴幼儿阶段。本文详细阐述酪蛋白、α-乳白蛋白和β-乳球蛋白的过敏发生机理,介绍目前成功应用于检测牛乳过敏成分的技术并探讨其在实际应用中的不足,列举国内外研究人员利用改性技术研发出的一些低致敏性乳制品,并展望乳过敏原改性的发展方向和低致敏性乳制品的广阔市场前景,为低致敏性乳制品的发展提供一定的理论依据和研究思路。

钙型糖柱—高效液相色谱—蒸发光散射检测器法测定牛乳中的乳糖

目的:实现牛乳中乳糖含量快速检测。方法:建立基于钙型糖柱和高效液相色谱测定牛乳中乳糖的新方法。牛乳通过0.2 g/mL三氯乙酸溶液沉淀蛋白质,所得滤液稀释100倍并过滤膜后进入高效液相色谱系统,经过钙型糖柱分离,蒸发光散射检测器进行检测。结果:乳糖在线性范围(20~100 mg/L)内,色谱峰面积和质量浓度之间具有较好的相关性,R 2为0.9998。乳糖加标水平为15,40,80 mg/g时,回收率为90.96%~98.23%,检出限为3.6μg/g,定量限为12μg/g,在6 min内实现乳糖浓度的测定。并且用该方法测定11种市售乳样品,测得结果与国标(GB 5009.8—2016)法基本一致。结论:该方法的精密度、重复性、加标回收率均符合有关规定,检测结果准确且耗时短,适用于快速检测牛乳中的乳糖含量。

冷冻贮藏对喷雾干燥羊乳粉品质特性的影响

对新鲜羊乳、低温冷冻(-16~-18℃)和超低温冷冻(-76~-80℃)贮藏3个月的常温解冻(20~25℃)羊乳进行喷雾干燥,制备了鲜羊乳粉、低温冷冻常温解冻(CFHT)羊乳粉和超低温冷冻常温解冻(UFHT)羊乳粉,对其品质进行比较分析。结果表明:喷雾干燥羊乳粉的水分质量分数符合国家标准,水分活度均小于0.2,总色差(△E)均小于0.3,具有良好的贮藏特性;3组羊乳粉复水后多分散性指数(PDI)均小于0.3;激光共聚焦显微镜图像显示3组羊乳粉复水后组间脂肪球与蛋白质颗粒无明显差异。相比于鲜羊乳粉,CFHT和UFHT羊乳粉的脂肪损失较严重(P<0.05),蛋白质和乳糖质量分数损失10%~19%(P<0.05);而UFHT羊乳粉的蛋白质和乳糖高于CFHT羊乳粉,水分质量分数和水分活度低于CFHT羊乳粉。因此,冷冻贮藏可用于喷雾干燥羊乳粉的制备,且UFHT羊乳粉的品质优于CFHT羊乳粉。

掺假羊乳及其制品中牛乳的检测技术研究进展

羊乳具有营养价值高、蛋白质组成更接近人乳、脂肪球直径小及致敏性低等优点,更利于人体消化吸收,受到消费者和乳品企业的青睐。近年来我国羊乳产业发展迅速且潜力巨大,但由于受羊乳产量和养殖规模的限制,羊乳价格昂贵,市场中存在羊乳及其制品掺假牛乳的现象,且掺假手段多样,难以辨别。为了保证消费者的健康和权益,保障羊乳市场良性发展,羊乳及其制品的纯正性、真实性检测已经成为热点研究方向。本文通过分析基于乳中蛋白质、脂肪和核酸差异的羊乳中牛乳掺假检测技术的研究现状,介绍和探讨了各检测技术的基本原理及其在应用中的优缺点,同时展望羊乳掺假检测技术的发展方向,旨在为牛羊乳混合掺假检测技术的进一步发展提供资料参考和思路。

4个糖酵解途径基因的siRNA干扰及其在肌肉卫星细胞中的沉默效应

为探究糖酵解途径关键基因干扰对其他肉品质功能基因的影响,先采用脂质体转染技术向分离、培养的肌肉卫星细胞中转染siRNA,干扰4个糖酵解途径关键基因(PKM、PFKM、PGK1、ALDOA)的表达,再利用经诱导分化的肌肉卫星细胞进行RNA提取和反转录,并使用qPCR方法检测4个目的基因及15个肉品质功能基因的mRNA表达情况。结果表明,与对照组相比,转染组细胞在增殖特点和表型上没有明显差异,转染组4个目的基因的表达量下降33.5%~93.8%。PKM干扰后,7个肉品质功能基因表达显著下调,5个显著上调;PFKM和PGK1干扰后,12个肉品质功能基因表达显著下调,3个显著上调;ALDOA干扰后,8个肉品质功能基因表达显著下调,3个上调。在4个转染组中,LDHA、ACOX1、PNPLA、CAPN1基因的表达水平均发生显著下降,而I-FABP、POMC、DGAT1基因的表达水平上调最明显,相关基因主要涉及细胞能量代谢、糖脂代谢以及细胞组织结构形成通路,其中脂质代谢和能量调节通路基因在目的基因干扰下受到的影响最大。研究结果为在基因水平探究肉品质形成的内在调控机制提供了参考。

冷冻大熊猫初乳XO和PAO活性测定及其与牛、羊乳的比较

黄嘌呤氧化酶(XO)和多胺氧化酶(PAO)是乳汁中两类重要的氧化还原酶,与新生幼崽免疫系统的形成密切相关。采用牛、羊鲜乳及其冷冻乳建立XO和PAO活性的AmplexRed荧光检测方法,对冷冻大熊猫初乳中XO和PAO活性进行测定,并与新鲜和冷冻牛、羊乳中这两种酶的活性进行比较。结果表明,3种乳中XO活性高于PAO活性;XO活性总体趋势为牛乳>大熊猫初乳>羊乳;PAO活性总体趋势为牛乳>羊乳>大熊猫初乳。大熊猫初乳通过XO、PAO和乳过氧化物酶LPO系统的协同抗菌机制在新生幼崽肠道微生物和先天免疫系统形成过程中发挥作用且以XO为主。

商品羊奶粉中DNA的质量评价及牛源性成分掺假检测

该研究对38个品牌的市售国内外羊奶粉进行了DNA提取和质量检测,采用普通聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)和实时荧光定量PCR对羊奶粉中的牛源性成分进行定性和定量检测。结果表明,商品羊奶粉中DNA的OD值为1.3~1.5,质量浓度为200~500 ng/μL,其中纯羊奶粉DNA的纯度和质量浓度均显著高于配方羊奶粉(P<0.05),DNA有不同程度的降解,PCR扩增效果明显,满足后续的掺假检测试验要求;普通PCR与实时荧光定量PCR均最低可检测到0.1%的牛源性成分,实时荧光定量PCR可对0.1%~50%的牛源性成分定量;对38种市售羊奶粉定性掺假检测得到有4种羊奶粉含有牛源性成分,与产品标签不相符,进一步定量结果发现其中3种羊奶粉中牛源性成分含量约为1%,1种羊奶粉中牛源性成分含量高于50%。因此,基于PCR技术的羊奶粉中牛源性成分的掺假检测方法可为羊奶粉标签声明的验证和产业品质控制提供可靠依据,保证市售羊奶粉产品的纯正性。