滋金补水膏对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠的治疗作用及对lncRNAPVT1、miR-30b-5p表达的影响

【目的】探讨滋金补水膏对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠的治疗作用及机制。【方法】将96只大鼠随机分为正常组,模型组,滋金补水膏低、中、高剂量组,盐酸氨溴索组、滋金补水膏高剂量+pcDNA组,滋金补水膏高剂量+pcDNA-人浆细胞瘤转化迁移基因1(PVT1)组,每组12只。除正常组外,其他各组大鼠采用气道滴注脂多糖(LPS)联合烟雾暴露法构建COPD模型。建模成功后,进行给药干预。给药结束后,采用酶联免疫吸附分析(ELISA)检测大鼠血清中白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;流式细胞术检测大鼠外周血中辅助性T细胞17/调节性T细胞(Th17/Treg)水平,苏木素-伊红(HE)染色法观察肺组织病理变化,实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测血清和肺组织中长链非编码RNA(lncRNA)PVT1、miR-30b-5p表达,Western Blot法检测肺组织中维甲酸相关孤核受体γt(RORγt)、叉头框蛋白P3(Foxp3)蛋白表达,双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA PVT1与miR-30b-5p的关系。【结果】与正常组比较,模型组肺泡间隔变大,支气管周围有大量炎症细胞浸润,Treg细胞比例、miR-30b-5p表达水平、Foxp3蛋白表达水平降低,IL-6、TNF-α水平,Th17细胞比例、Th17/Treg比值,lncRNA PVT1表达水平,RORγt蛋白表达水平升高(均P<0.05);与模型组比较,滋金补水膏低、中、高剂量组及盐酸氨溴索组大鼠肺组织病理损伤减轻、Treg细胞比例、miR-30b-5p表达水平、Foxp3蛋白表达水平升高,IL-6、TNF-α水平,Th17细胞比例,Th17/Treg比值,lncRNA PVT1表达水平,RORγt蛋白表达水平降低(均P<0.05)。lncRNA PVT1靶向调控miR-30b-5p表达。【结论】滋金补水膏可能通过调节lncRNA PVT1/miR-30b-5p轴促进Th17/Treg细胞平衡来抑制COPD大鼠炎症反应。

基于微小RNA-30b-5p/B细胞淋巴瘤2样11轴分析滋金补水膏对慢性阻塞性肺疾病大鼠肺功能的影响及机制

目的基于微小RNA-30b-5p/B细胞淋巴瘤2样11轴(miR-30b-5p/BCL2L11轴)分析滋金补水膏对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺功能的影响及机制。方法选用84只SPF雄性Wistar大鼠,按照随机数字表法分为7组,即对照组、模型组、滋金补水膏低剂量组、滋金补水膏中剂量组、滋金补水膏高剂量组、antagomir NC组、miR-30b-5p antagomir组,每组12只组。除对照组外,其余6组采用气道滴注脂多糖(LPS)联合烟雾暴露构建COPD大鼠模型,建模成功后,各组灌胃、尾静脉注射相应药物,每日1次,连续12周。小动物肺功能检测仪检测各组大鼠肺功能;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测各组大鼠肺组织miR-30b-5p mRNA表达;苏木精-伊红(HE)染色法观察各组大鼠肺组织病理损伤情况,并测量肺组织小气道管壁厚度;原位缺口末端标记法(TUNEL)染色观察各组大鼠肺上皮细胞凋亡情况;酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组大鼠血清白细胞介素(IL)-8、IL-1β水平;Western blot法检测各组大鼠B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)及BCL2L11蛋白表达。双荧光素酶报告实验验证miR-30b-5p和BCL2L11之间的靶向关系。结果与对照组比较,模型组大鼠静息呼吸频率、RI、肺组织小气道管壁厚度、肺上皮细胞凋亡指数、血清IL-8和IL-1β水平及肺组织Bax、BCL2L11蛋白表达水平显著升高(P<0.05),肺组织病理损伤严重,PIF、C_(dyn)值、肺组织miR-30b-5 p mRNA表达水平和Bcl-2蛋白表达下降(P<0.05);与模型组比较,滋金补水膏低、中、高剂量组大鼠静息呼吸频率、RI、肺组织小气道管壁厚度、肺上皮细胞凋亡指数、血清IL-8和IL-1β水平及肺组织Bax、BCL2L11蛋白表达水平显著降低(P<0.05),肺组织病理损伤减轻,PIF、C_(dyn)值、肺组织miR-30b-5p mRNA表达水平和Bcl-2蛋白表达显著升高(P<0.05),且除滋金补水膏中剂量组静息呼吸频率与滋金补水膏低剂量组比较差异无统计学意义(P>0.05)外,其余指标滋金补水膏低、中、高剂量组两两比较差异均有统计学意义(P<0.05);与滋金补水膏高剂量组、antagomir NC组比较,miR-30b-5p antagomir组大鼠静息呼吸频率、RI、肺组织小气道管壁厚度、肺上皮细胞凋亡指数、血清IL-8和IL-1β水平及肺组织Bax、BCL2L11蛋白表达水平显著升高(P<0.05),肺组织病理损伤加重,PIF、C_(dyn)值、肺组织miR-30b-5p mRNA表达水平和Bcl-2蛋白表达下降(P<0.05),miR-30b-5p antagomir减弱了高剂量的滋金补水膏对COPD大鼠的改善作用。miR-30b-5p靶向负调控BCL2L11表达。结论滋金补水膏可抑制COPD大鼠肺上皮细胞凋亡和炎症反应,改善肺功能,缓解相关症状,其机制可能与促进miR-30b-5p表达、降低BCL2L11表达相关。

老年病中医防治学术思想述要

学术思想与临床经验是中医师承教育的核心内容,尤其是学术思想乃当前中医临床研究老中医经验的热点与难点之一。为探索中医治疗老年病学术思想渊源,文章就近三十年对《内经》以来历代各家治疗老年病的学术思想的理论研究作一概述。当今社会老年化问题越来越严峻的形势下,学习、研究、继承和发展老年病防治学术思想具有更加重大的现实意义。

张觉人教授运用补中益气汤治疗老年病验案举隅

补中益气汤是金元时期李东垣所创,具有补中益气,升阳举陷之功效,主要用于治疗脾虚气陷证。张觉人教授在长期的临床实践中善于灵活运用补中益气汤化裁治疗各类老年疾患,辨证论治,古方新用,极大地扩大了该方的临床使用范围,认为只要临床出现脾胃气弱、清阳不升,或中气下陷之病机者,均可辨证处方,用本方灵活化裁治之。文章选取张教授运用该方治疗老年腰痛、便秘、带状疱疹后遗神经痛、尿路感染、高血压、重症肌无力的几个典型案例以论之。

张觉人教授运用《灵枢·天年》理论治疗老老年病经验撷萃

介绍张觉人教授运用《灵枢·天年》理论治疗老老年(高龄老年)病的经验,张教授据"八十岁,肺气衰"、"九十岁,肾气焦,四脏经脉空虚"指出,老老年病病机以本虚为主;又依"乱而相引"提出治法当以匡扶正气为主;且告诫用药要兼顾脾胃,这是因为"六腑化谷,津液布扬,各如其常,故能长久",且佐以验案。

张觉人教授临证特点浅析

张觉人教授系湖北中医药大学教授、博士生导师、主任医师,第5批全国老中医药专家学术经验继承工作指导老师,湖北省知名中医,武汉市中医名师。张觉人教授悬壶41载,学贯中西,学验俱丰,对肺系病、胃肠病、脑病等多种内科疾病的诊治有着独特的经验。张教授崇尚经典,又结合临床与时俱进,重视整体观念,四诊合参、注重舌脉,临证时除采用一般的望闻问切外,认为舌诊是辨证论治的关键,司外以揣内,观舌质可验其证之阴阳虚实,审苔垢即知邪之寒热深浅。张教授临证紧扣病机,通过各种外在的临床表现抽丝剥茧找出病变的本质即病机,确立证候,辨证论治,故临证每获良效。张教授尊崇经典,但又不拘泥于经典,充分结合病人具体情况,灵活化裁经方。

张觉人教授运用益气固脱法治疗急危重症经验

益气固脱法是具有传统医学特色的危重症治法。笔者有幸受第5批全国名老中医药专家学术经验继承工作指导老师张觉人教授指导，跟师查房、门诊、出诊，目睹张师运用益气固脱法治疗危重症。张师认为现代医学急症的快速发展不能完全取代传统医学急症治法．用之得当常可起到相得益彰的效果。益气固脱法就是例证。

张觉人教授临床运用参苓白术散

参苓白术散出自宋代官修《太平惠民和剂局方》,临床主治脾虚夹湿证,是一首药物性味平和、温而不燥、补而不腻的临床常用方剂,其组方严谨、配方精当、疗效确切,受到历代医家的广泛重视。张觉人教授在长期的临床实践中善于从脾胃论治,运用参苓白术散化裁治疗各类疾患,辨证论治,古方新用,屡起沉疴,极大地扩大了该方的临床使用范围,逐步形成了"疗杂病尤重脾胃,治脾力推参苓白术散"的主张。文章选取张教授运用该方治疗围绝经期综合征、发热不退、慢性腹泻、胃癌术后、慢性阻塞性肺疾病的几个典型案例以论之。

从《灵枢·天年》篇七对关键词探讨补虚抗衰延年规律

文章根据《灵枢·天年》篇提出长寿与短命、先天与后天、生长与衰老、形体与神气、气血(精)与脏腑、正气与外邪、终寿与卒死(病死)七对关键词,以此作为临床中药补虚抗衰的初步规律,并以临床验案加以佐证。

探索各家学说中中医老年人合理用药原则

该文基于37年临床,从金元明清各家学说中探索并践行中医老年人合理用药原则,且与西医原则比较中彰显了中医特色,全文以临床验案加以佐证。

HPLC法测定麻杏止咳片中绿原酸的含量

目的用高效液相色谱法测定麻杏止咳片中绿原酸的含量。方法采用XB-C_(18)(4.6 mm×250mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液,流速1.0 mL/min,柱温20℃,检测波长为326 nm,进样量为10μL。HPLC法测定麻杏止咳片中绿原酸的含量。结果绿原酸的进样量在0.625~15.000μg(R^(2)=0.9973)范围内与峰面积的线性关系良好。平均回收率为100.73%,RSD=1.05%。结论所建立的方法准确,重现性好,可用于麻杏止咳片中绿原酸含量的测定。