自噬在大鼠睾丸扭转致缺血再灌注损伤中的作用机制

目的探讨自噬在大鼠睾丸扭转所致缺血再灌注损伤(I/RI)中的作用机制。方法将40只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、I/RI组、I/RI+雷帕霉素(RAPA)组和I/RI+3-甲基腺嘌呤(3-MA)组,每组10只。后3组大鼠建立左侧睾丸扭转(720°,1 h)复位模型,I/RI+RAPA组和I/RI+3-MA组大鼠造模前分别给予自噬激动剂RAPA和自噬抑制剂3-MA干预。于睾丸复位12 h后取各组大鼠左侧睾丸和附睾,收集精子进行精子质量分析,采用H-E染色观察睾丸组织病理变化,采用试剂盒检测睾丸组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、总抗氧化能力(T-AOC),采用TUNEL染色检测睾丸组织细胞凋亡水平,通过蛋白质印迹法检测睾丸组织中自噬相关蛋白(Beclin1、p62)和凋亡相关蛋白(Bcl2、Bax、cleaved caspase 3)表达水平。结果与假手术组比较,I/RI组大鼠精子质量下降,睾丸曲细精管排列松散,生殖细胞减少、脱落,睾丸组织SOD活性、T-AOC降低(均P<0.05),MDA含量升高(P<0.05),p62和Bcl2蛋白表达水平降低(均P<0.05),Beclin1、Bax和cleaved caspase 3蛋白表达水平升高(均P<0.05),凋亡生殖细胞明显增多。与I/RI组比较,I/RI+RAPA组大鼠精子质量提高,睾丸曲细精管排列正常,睾丸组织SOD活性、T-AOC升高(均P<0.05),MDA含量降低(P<0.05),Beclin1和Bcl2蛋白表达水平升高(均P<0.05),p62、Bax和cleaved caspase 3蛋白表达水平降低(均P<0.05),凋亡生殖细胞减少;I/RI+3-MA组大鼠精子质量下降,睾丸曲细精管排列松散,睾丸组织SOD活性、T-AOC降低(均P<0.05),MDA含量升高(P<0.05),Beclin1和Bcl2蛋白表达水平降低(均P<0.05),p62、Bax和cleaved caspase 3蛋白表达水平升高(均P<0.05),凋亡生殖细胞增多。结论激活自噬可改善I/RI大鼠精子质量和睾丸组织病理损伤,缓解氧化应激,抑制生殖细胞凋亡。

miR-630靶向Slug信号通路影响人肾癌细胞株侵袭、迁移的作用

目的 探讨微小核糖核酸(miR)-630靶向锌指转录因子Slug信号通路调节人肾癌细胞株ACHN侵袭、迁移的作用。方法 取人肾癌细胞株ACHN培养传代,分为正常组(未转染)、阴性对照组(转染携带miR-630抑制剂阴性对照的慢病毒)、过表达组(转染携带miR-630模拟物的慢病毒)、低表达组(转染携带miR-630抑制物的慢病毒)。培养48 h后,Transwell小室实验检测各组细胞侵袭能力,划痕实验检测各组细胞迁移能力;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)测量miR-630、E-钙黏蛋白(cadherin)、Slug、波形蛋白(Vimentin)和N-cadherin信使核糖核酸(mRNA)表达;Western印迹法检测各组Slug、E-cadherin、N-cadherin和Vimentin蛋白表达;双荧光素酶报告基因检测验证miR-630是否靶向Slug信号通路。结果 阴性对照组、过表达组和低表达组转染效率分别为(87.39±17.36)%、(86.11±17.01)%和(85.43±16.98)%,各组间差异无统计学意义(P>0.05)。与正常组和阴性对照组比较,过表达组穿膜细胞数、miR-630 mRNA、Vimentin和N-cadherin mRNA和蛋白表达显著升高,划痕间距(48 h)显著减小,E-cadherin、Slug mRNA和蛋白表达显著减少(P<0.05)。与阴性对照组、正常组和过表达组比较,低表达组miR-630 mRNA、N-cadherin和Vimentin mRNA和蛋白表达及穿膜细胞数减少,Slug、E-cadherin mRNA和蛋白表达增加,划痕间距(48 h)增加,差异有统计学意义(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验证实miR-630靶向Slug。结论 miR-630可能通过靶向调节Slug信号通路,上调N-cadherin、Vimentin表达,下调E-cadherin表达,进而促进肾癌细胞侵袭和迁移。

circ-RACGAP1在膀胱癌组织中的表达及对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭的作用机制

目的分析circ-RACGAP1在膀胱癌组织中的表达与临床意义,探究circ-RACGAP1对膀胱癌细胞恶性生物学行为的影响及作用机制。方法通过TCGA数据库探究circ-RACGAP1在膀胱癌组织中的表达,分析circ-RACGAP1表达与膀胱癌患者临床病理特征的关系。通过实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)法分析细胞系5637、T24、J82、RT-4、UM-UC-3中circ-RACGAP1表达。通过脂质体转染技术将circ-RACGAP1敲降质粒转染T24细胞。克隆形成实验、划痕实验和Transwell实验分别分析敲降circ-RACGAP1对T24细胞增殖、迁移和侵袭的影响。采用deepBase、Circbank、CircInteractome、circRNABase数据库和荧光报告系统验证circ-RACGAP1和miR-4324之间的靶向结合。qPCR检测敲降circ-RACGAP1对T24细胞中miR-4324表达的影响。采用Western blot法检测敲降circ-RACGAP1对T24细胞中Rac-GTP酶激活蛋白1(RACGAP1)蛋白和磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路蛋白表达的影响。结果膀胱癌组织中circ-RACGAP1呈高表达(P<0.01),其表达随着患者临床分期恶性程度增高而升高(P<0.01)。膀胱癌细胞系中circ-RACGAP1表达明显高于人正常膀胱上皮细胞(均P<0.01)。与对照组比较,sh-sh-circ-RACGAP1组T24细胞增殖、迁移和侵袭能力均明显降低(均P<0.01)。circ-RACGAP1可靶向抑制miR-4324的表达(P<0.01)。与对照组比较,sh-circ-RACGAP1组T24细胞中RACGAP1蛋白表达水平降低(P<0.01),PI3K/AKT信号通路蛋白磷酸化磷脂酰肌醇-3-激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、核因子κB(NF-κB)表达水平均降低(均P<0.01)。结论膀胱癌组织和细胞系中circ-RACGAP1呈高表达,敲降circ-RACGAP1能够抑制T24细胞的恶性生物学行为,circ-RACGAP1是通过抑制miR-4324表达激活PI3K/AKT信号通路来发挥作用。

左卡尼汀联合经尿道精囊镜下扩张射精管对梗阻性无精症的应用效果及预后分析

目的探讨左卡尼汀联合经尿道精囊镜下扩张射精管对梗阻性无精症的应用及预后效果。方法梗阻性无精症病人40例。按照简单随机法将病人分为对照组、观察组,每组20例,均行经尿道精囊镜下扩张射精管术。术后对照组予以口服维生素E,观察组予以口服左卡尼汀。比较两组治疗效果,治疗前后活动精子率、前向运动精子率,以及术后配偶妊娠情况。结果对照组治疗有效率为60.00%,观察组为80.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗后活动精子率、前向运动精子率均高于治疗前,观察组病人治疗后活动精子率、前向运动精子率优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组治疗后12例(60.00%)检出精子,观察组18例(90.00%)检出精子;观察组配偶临床妊娠及活产婴儿均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论左卡尼汀联合经尿道精囊镜下扩张射精管对梗阻性无精症临床效果显著,可改善无精症,同时改善治疗后的妊娠结局。

猪粪好氧堆肥过程中重金属污染现状与钝化技术研究进展

概括了因畜禽粪便特别是猪粪的生产量不断增加,且含有Cu、Zn等重金属添加剂的饲料被大量使用,导致的猪粪有机肥产品重金属污染现状,并以生物炭和木醋液这2种重金属钝化材料为研究对象,阐述了在规模化堆肥过程中重金属的钝化机理和钝化技术的研究进展,为我国规模化猪粪堆肥产品质量的提升和重金属钝化研究提供技术参考。

多聚ADP-核糖聚合酶抑制剂联合西地那非改善糖尿病大鼠勃起功能的研究

目的探讨多聚AOP-核糖聚合酶抑制剂（PJ_34）联合西地那非对糖尿病大鼠勃起功能的影响。方法40只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病＋西地那非组、糖尿病＋PJ-34组、糖尿病＋PJ-34＋西地那非组。测定各组大鼠阿扑吗啡诱导下的性行为变化；电刺激盆神经测定各组大鼠阴茎海绵体内压（ICP）及平均周围动脉压（MAP），然后取海绵体组织测定Caspase-3活性。结果Caspase-3活性在糖尿病大鼠中显著升高，PJ-34治疗可有效抑制其活性。糖尿病＋西地那非组、糖尿病＋PJ-34组性行为能力及ICP／MA均低于正常对照组，PJ-34与西地那非联合应用疗效显著高于单一用药。结论PJ-34联合西地那非可以显著改善糖尿病大鼠的勃起功能，为糖尿病性勃起功能障碍治疗方法的探索提供了新的思路。

lncRNA CTD-2196E14.5通过海绵吸附miR-744-5p抑制膀胱癌细胞的增殖和侵袭

目的:探讨CTD-2196E14.5通过调控miR-744-5p表达对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响。方法:通过检索TCGA数据库分析膀胱癌组织及癌旁组织中CTD-2196E14.5的表达水平及其与膀胱癌患者总生存期的关系。采用荧光实时定量聚合酶链反应(fluorescence quantitative polymerase chain reaction,qPCR)检测膀胱癌细胞株MGH-U3、T24、253J、J82和正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1中CTD-2196E14.5的表达水平。采用脂质体介导技术将pcDNA-CTD-2196E14.5质粒、pcDNA空载质粒分别转染253J细胞,即CTD-2196E14.5组和NC组。采用MTT法、流式细胞术和Transwell实验检测CTD-2196E14.5对膀胱癌253J细胞增殖、细胞周期和侵袭的影响。应用lncRNA2function软件预测和双荧光素酶报告基因实验验证CTD-2196E14.5与miR-744-5p的靶向关系。qPCR检测miR-744-5p的表达。Western blotting检测AMPK信号通路蛋白和细胞周期蛋白的表达。结果:CTD-2196E14.5在膀胱癌组织中低表达(P<0.01),CTD-2196E14.5表达较高的患者总生存期较长(P<0.01)。CTD-2196E14.5在膀胱癌细胞株MGH-U3、T24、253J、J82中低表达(P<0.05),在253J细胞中表达水平最低(P<0.01)。与NC组相比,过表达CTD-2196E14.5抑制253J细胞的增殖能力(P<0.05)、细胞周期进展(P<0.01)和侵袭能力(P<0.01)。lncRNA2function软件显示,miR-744-5p可能是CTD-2196E14.5的靶基因。双荧光素酶报告基因实验结果显示,CTD-2196E14.5互补结合miR-744-5p(P<0.01)。与NC组相比,过表达CTD-2196E14.5负调控miR-744-5p的表达水平(P<0.01)。与NC组相比,过表达CTD-2196E14.5的253J细胞中AMPK信号通路蛋白p-AMPKα、p-AMPKβ1、p-TSC2、HNF4α、p-mTOR及细胞周期蛋白CDK4、Cyclin D1表达明显降低。结论:CTD-2196E14.5在膀胱癌组织和细胞中表达显著降低,其通过海绵吸附miR-744-5p下调AMPK信号通路蛋白及细胞周期蛋白的表达水平,抑制膀胱癌细胞253J的增殖和侵袭。

试论机械制造工艺与设备应用

随着经济的不断发展,社会在不断的进步,新产品和新的需求的出现,传统机械制造业工艺和设备已经无法满足人们的需求,人们在追求更加创新的产品的同时,选择更好的工艺及其设备成为当下机加工的首要选择.本文试论了机械制造工艺的创新和其设备在实际生活中的应用.

CDKN2A基因座在膀胱癌中的表达及临床意义

目的:探讨CDKN2A基因座两种编码产物p16INK4A和p14ARF在膀胱癌组织中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组织化学技术SP法观察13例正常膀胱组织和52例膀胱尿路上皮癌组织中p16 INK4 A和p14 ARF的表达情况。结果:p16INK4A在正常组织、膀胱癌中阳性表达率分别为84. 62%(11/13)、40. 38%(21/52),两组间差异显著(P <0. 01)。p14ARF在正常膀胱组织、膀胱癌中阳性表达率分别为92. 31%(12/13)、23. 08%(12/52),两组间差异显著(P <0. 01)。p16INK4A和p14ARF的阳性表达率与肿瘤病理分级、临床分期呈负相关(P <0. 05);两者在膀胱癌中的表达没有相关性(P> 0. 05),但他们均与患者的预后正相关(P <0. 05)。结论:p16INK4A和p14ARF在膀胱癌中的表达异常与膀胱癌的发生发展密切相关,但它们所起的生物学作用不尽相同,联合检测两者的表达可能为膀胱癌的早期诊断及预后判断提供帮助。

高危前列腺增生合并膀胱结石行经尿道钬激光碎石及经尿道前列腺电切术的观察

目的探讨高龄高危前列腺增生（BPH）合并膀胱结石的治疗方法。方法采用经尿道前列腺电切术（TURP）联合电切镜钬激光碎石同期治疗高危BPH合并膀胱结石患者84例。即通过电切攀通道置人钬激光光纤行膀胱结石钬激光碎石，再行TURP治疗。结果84例平均年龄78岁患者均一次性手术成功，取石率为100％。手术时间40-120rain，平均约65min，其中碎石时间5～30min，平均15min。术中无出血、穿孔。TURP术后留置导尿管3～6d，术后住院时间为5～9d，平均6．9d。术后随访3～12个月，无结石复发及尿道狭窄等并发症。结论采用TURP加钬激光碎石术治疗高危BPH合并膀胱结石具有手术时间短，创伤小及安全性高等优势。特别是对高危前列腺增生症患者合并膀胱较大结石、多发结石更具优势。

急性胰腺炎患者血清葡萄糖调节蛋白78、miR-181-5p的表达及意义

目的探讨急性胰腺炎(AP)患者血清葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、miR-181-5p的表达水平及其临床意义。方法选取141例AP患者作为研究对象,依据AP严重程度分为轻症组86例和重症组55例。另选取同期体检的健康人员100例纳入对照组。采用实时荧光定量PCR法检测受试者血清miR-181-5p、GRP78 mRNA表达水平。采用Pearson相关分析法分析血清miR-181-5p、GRP78 mRNA表达水平的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-181-5p、GRP78 mRNA表达水平对重症AP的预测价值。结果对照组、轻症组、重症组的血清miR-181-5p表达水平依次升高,GRP78 mRNA表达水平依次降低,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-181-5p与GRP78 mRNA表达水平呈负相关(r=-0.665,P<0.05)。miR-181-5p表达水平偏高、GRP78 mRNA表达水平偏低是重症AP的危险因素(P<0.05)。ROC曲线显示,血清miR-181-5p预测重症AP的曲线下面积(AUC)为0.836,血清GRP78 mRNA预测重症AP的AUC为0.741,二者联合预测重症AP的AUC为0.861。结论AP患者血清miR-181-5p表达水平升高,GRP78 mRNA表达水平降低。miR-181-5p、GRP78与AP严重程度有关,对重症AP具有一定预测价值,可作为重症AP的潜在预测标志物。

miR-124通过调节Jagged1/Notch信号通路影响肾细胞癌OS-RC-2细胞的恶性生物学行为

目的:探讨miR-124通过调节Jagged1(JAG1)/Notch信号通路对肾细胞癌(RCC)细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法:收集2018年6月至2021年10月在武汉市第三医院治疗的38例RCC患者的RCC组织和癌旁组织标本,并体外培养RCC细胞(Caki-2、A498、ACHN、786-O、OS-RC-2)和人正常肾细胞(293T),采用免疫组织化学法、qPCR和WB法检测miR-124和JAG1蛋白在RCC组织和细胞中的表达水平。选择miR-124表达与293T细胞差异最大的OS-RC-2细胞进行转染,按转染物不同分为Control组、NC mimic组、miR-124 mimic组、miR-124 mimic+pcDNA组和miR-124 mimic+pc-JAG1组。采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-124与JAG1的关系;q PCR法检测miR-124、JAG1 mRNA表达;免疫组化法分析JAG1蛋白表达;WB法检测JAG1、凋亡相关蛋白(cleaved caspase-3、BAX和Bcl2)和Notch信号通路相关蛋白(NICD、HES1和HES5)的表达;MTT法检测OS-RC-2细胞增殖;Transwell检测OS-RC-2细胞迁移和侵袭;流式细胞术检测OS-RC-2细胞凋亡。结果:与癌旁组织比较,RCC组织中miR-124表达降低,JAG1 m RNA和蛋白表达均升高(均P<0.01);与293T细胞比较,Caki-2、A498、ACHN、786-O、OS-RC-2细胞中miR-124水平降低,JAG1 m RNA和蛋白表达均升高(均P<0.05);miR-124直接负调控JAG1。与Control组和NC mimic组比较,miR-124 mimic组miR-124表达水平、细胞凋亡率以及cleaved caspase-3和BAX蛋白表达均升高,JAG1 mRNA和蛋白表达均降低,细胞活力(24、48、72 h)下降,迁移、侵袭细胞数减少,Bcl2及NICD、HES1、HES5蛋白表达降低(均P<0.05);与miR-124 mimic+pcDNA组和miR-124 mimic组相比,miR-124 mimic+pc-JAG1组miR-124表达水平、细胞凋亡率以及cleaved caspase-3和BAX蛋白表达均降低,JAG1 m RNA和蛋白表达均升高,细胞活力(24、48、72 h)增加,迁移、侵袭细胞数增多,Bcl2及NICD、HES1、HES5蛋白表达均增加(均P<0.05)。结论:miR-124通过下调JAG1抑制Notch信号通路,降低RCC OS-RC-2细胞的增殖、迁移和侵袭能力,促进细胞凋亡。

回肠代膀胱术和乙状结肠直肠膀胱术在尿流改道术中临床应用效果比较

目的 比较回肠代膀胱术和乙状结肠直肠膀胱术在尿流改道术中的临床应用效果.方法 选择我院2003年至2009年行尿流改道手术患者71例,33例实施回肠代膀胱术,38例实施乙状结肠直肠膀胱术.记录两组患者手术时间、术中出血量;记录两组患者贮尿囊容量;观察两组患者术后6个月主要并发症（主要包括尿失禁、代谢性酸中毒、输尿管返流）发生情况.结果 ①两组患者手术时间、术中出血量比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;两组贮尿囊容量比较,差异无统计学意义（P〉0.05）;②两组患者尿失禁发生率比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;两组代谢性酸中毒、输尿管返流发生率比较,差异无统计学意义（P〉0.05）.结论 回肠代膀胱符合生理排尿特点,患者易接受.但是其手术适应范围较小,尿失禁发生率较高.而乙状结肠直肠膀胱术手术过程相对简单,手术适应范围广,尿失禁发生率低.

miR-183通过PI3K/AKT信号通路促进肾上腺嗜铬细胞瘤生长

目的探讨miR-183对肾上腺嗜铬细胞瘤PC-12细胞的影响及其可能的分子机制。方法将PC-12细胞分为对照组、阴性对照(negative control,NC)-mimic组、miR-183-mimic组、NC-inhibitor组和miR-183-inhibitor组。CCK-8法检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞周期及凋亡水平;划痕实验评估细胞的迁移能力;Transwell小室观察细胞侵袭情况;Western blot检测细胞中周期蛋白E1(Cyclin E1)、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax)、磷酸酰肌醇3激酶蛋白(PI3K)和蛋白激酶B蛋白(AKT)表达水平。结果与NC-mimic组比较,miR-183-mimic组细胞活力显著增强(P<0.01),细胞凋亡率显著降低(P<0.05),迁移能力增强且侵袭细胞数显著增多(P<0.01),Cyclin E1、PI3K和AKT蛋白表达显著升高(P<0.01),Bax蛋白表达显著降低(P<0.01)。与NC-inhibitor组比较,miR-183-inhibitor组细胞活力显著减弱(P<0.01),发生G1期阻滞,细胞凋亡率显著升高(P<0.01),迁移能力减弱且侵袭细胞数显著减少(P<0.01),Cyclin E1、PI3K和AKT蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01),Bax蛋白表达显著升高(P<0.01)。结论miR-183在肾上腺嗜铬细胞瘤中发挥癌基因的作用,促进肿瘤细胞的增殖、迁移与侵袭,抑制凋亡,其作用机制与PI3K/AKT信号通路有关。

lncRNA PCGEM1在前列腺癌组织中的表达及其对前列腺癌PC3细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移和上皮间质转化的影响

目的探究lncRNA PCGEM1在前列腺癌组织中的表达情况及lncRNA PCGEM1对前列腺癌PC3细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭和上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)的影响。方法选取2018年1月—2020年12月在武汉市第三医院确诊的前列腺癌患者35例,分别取其癌组织和癌旁组织,检测其lncRNA PCGEM1表达情况;体外培养前列腺癌PC3细胞并构建lncRNA PCGEM1沉默细胞系(siPCGEM1)、过表达lncRNA PCGEM1细胞系(lncRNA PCGEM1)和阴性对照(NC);采用克隆形成实验检测各组细胞增殖并用蛋白质印迹法检测增殖蛋白Ki67和PCNA表达情况;采用流式细胞术检测细胞凋亡率,采用蛋白免疫印迹(Western blot,WB)检测检测凋亡蛋白Bcl-2和Bax表达情况;采用Transwell小室实验检测各组细胞侵袭情况并用WB检测E钙粘蛋白(E-cadherin)及波形蛋白(Vimentin)的表达情况。结果35例患者的癌组织中lncRNA PCGEM1表达水平显著高于癌旁组织(P<0.05);与siPCGEM1组比校,lncRNA PCGEM1和NC组细胞中lncRNA PCGEM1水平、Ki67蛋白相对表达水平、PCNA蛋白相对表达水平、克隆形成率、Bcl-2蛋白相对表达水平、Vimentin蛋白相对表达水平、单位面积侵袭细胞数目显著升高(P<0.05),E-cadherin蛋白相对表达水平和Bax蛋白相对表达水平显著降低(P<0.05);与lncRNA PCGEM1组比较,NC组细胞lncRNA PCGEM1水平、Ki67蛋白相对表达水平、PCNA蛋白相对表达水平、克隆形成率、Bcl-2蛋白相对表达水平、Vimentin蛋白相对表达水平、单位面积侵袭细胞数目显著降低(P<0.05),E-cadherin蛋白相对表达水平和Bax蛋白相对表达水平显著升高(P<0.05)。结论前列腺癌组织中lncRNA PCGEM1表达水平会异常升高,降低其表达水平可以有效抑制前列腺癌PC3细胞增殖、侵袭并促进其凋亡,同时通过调控EMT过程降低PC3细胞的侵袭能力。

自噬调控对小鼠精原细胞缺氧/复氧损伤的影响研究

目的研究自噬调控对小鼠精原细胞缺氧/复氧损伤(H/RI)的影响,探讨自噬对小鼠睾丸组织缺血再灌注损伤(IRI)的影响。方法以小鼠精原细胞系GC1 spg为研究对象构建H/RI模型,雷帕霉素(RAPA)和3-甲基腺嘌呤(3-MA)分别作为自噬激动剂和抑制剂,设置对照组、模型组(H/RI)、自噬激动剂干预组(H/RI+自噬激动剂)、自噬抑制剂干预组(H/RI+自噬抑制剂)。用噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞增殖能力,流式细胞术检测各组细胞活性氧(ROS)释放水平和凋亡水平,实时荧光定量PCR(qPCR)检测各组细胞自噬相关基因Beclin1和凋亡相关基因Bcl-2、Bax mRNA的表达水平,Western blot检测各组细胞自噬相关蛋白LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、Beclin1、p62和凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、caspase-3的表达水平。结果与对照组比较,模型组增殖能力、Beclin1和Bcl-2 mRNA表达水平明显下降(P<0.01),p62和Bcl-2蛋白表达水平明显下降(P<0.01),ROS水平、细胞凋亡率、Bax mRNA相对表达水平明显上升(P<0.01),Beclin1、Bax、caspase-3蛋白表达水平和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白比值明显上升(P<0.01)。与模型组比较,自噬激动剂干预组细胞增殖能力、Beclin1和Bcl-2 mRNA表达水平明显上升(P<0.01),Beclin1、Bcl-2蛋白表达水平和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白比值均明显上升(P<0.01),ROS水平、细胞凋亡率、Bax mRNA表达水平明显下降(P<0.01),p62、Bax、caspase-3蛋白表达水平明显下降(P<0.01)。与模型组比较,自噬抑制剂干预组细胞增殖能力、Beclin1和Bcl-2 mRNA表达水平明显下降(P<0.01),Beclin1、Bcl-2蛋白表达水平和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白比值明显下降(均P<0.01),ROS水平、细胞凋亡率、Bax mRNA表达水平明显上升(P<0.01),p62、Bax、caspase-3蛋白表达水平明显上升(P<0.01)。结论增强自噬能抑制小鼠精原细胞凋亡,修复H/RI,为治疗睾丸组织IRI提供了理论基础。

泌尿外科急症的病种类型及回顾性分析

目的总结本院收治的泌尿外科急症的病种类型、诊治特点及预后,以期为更好地应对泌尿外科各种急症提供临床治疗经验。方法回顾性分析本院在2018年5月至2020年12月行急诊手术的181例急症患者的临床资料,总结分析所有急诊患者的疾病种类及构成比、急诊治疗方式与预后。结果181例急症患者的疾病种类以上尿路结石并感染占比最高[49.2%(89/181)]。在181例急症患者中,179例(98.9%)行外科手术治疗,2例(1.1%)行介入手术治疗。所有患者预后良好。结论泌尿外科急症的临床表现特点为起病急、进展快、术前诊断较明确,科学而有原则性的诊疗措施能有效提高治疗效率,提高患者的生活质量。

间苯三酚治疗肾绞痛的多中心随机对照临床研究

目的 通过多中心随机对照临床研究,评估注射用间苯三酚对肾绞痛的治疗效果和安全性.方法 选取2013年6月至2014年7月在5家医疗机构就诊的肾绞痛患者作为研究对象.纳入标准：年龄18～70岁;临床确诊为泌尿系结石引起的肾绞痛患者;无相关药物过敏史;无严重肝、肾、心脏及造血系统疾病.排除标准：严重感染患者;妊娠期及哺乳期妇女;伴有无法控制的高血压、心肌梗死、心律失常,需药物治疗者;消化道溃疡、酗酒、药物滥用或其他可能影响研究进行者.采用随机数字表法将受试患者按1∶1比例纳入研究组或对照组,所有患者均给予解痉药联合非甾体类镇痛药物治疗.解痉药研究组给予间苯三酚120 mg静脉滴注,对照组给予山莨菪碱注射液20 mg静脉滴注.镇痛药物统一采用双氯芬酸钠栓50 mg.观察并记录72 h内患者肾绞痛的疼痛程度、缓解时间、发作次数、结石排出情况及不良反应.结果 200例肾绞痛患者参加并完成本试验,研究组和对照组各100例.两组患者性别、年龄、结石位置、结石大小和肾积水程度比较差异均无统计学意义（P＞0.05）.对照组患者肾绞痛发作次数为（4.2±2.5）次,疼痛指数为7.8±1.1,疼痛缓解时间（21.7±8.2） min;研究组肾绞痛发作次数为（4.0±2.2）次,疼痛指数为7.7±1.3,疼痛缓解时间（19.3±7.6） min;组间比较差异均无统计学意义（P＞0.05）.对照组结石排出率为3％（3/100）,研究组为11％（11/100） （P＜0.05）.对照组总的不良反应发生率为71％（71/100）,其中口干发生率高达67％（67/100）,头晕发生率15％（15/100）,皮肤潮红发生率22％ （22/100）,排尿困难发生率8％（8/100）,尿潴留发生率6％（6/100）.间苯三酚治疗组不良反应发生率为4％（4/100）,显著低于对照组,组间比较差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 注射用间苯三酚治疗肾绞痛安全有效.间苯三酚在治疗肾绞痛的同时有助于结石排出.

达泊西汀联合坦索罗辛治疗早泄的应用效果及安全性研究

目的:探讨达泊西汀联合坦索罗辛治疗早泄(PE)的临床疗效及安全性。方法:选择我院2016年1月1日~2016年12月31日收治的PE患者120例,随机数字法将所有患者分为对照组与观察组,其中观察组60例,患者给予达泊西汀联合坦索罗辛治疗;对照组60例,单纯给予达泊西汀治疗。分别于治疗前及治疗后1、3、6个月比较两组患者阴道射精潜伏期(IELT)、临床总体印象变化(CGIC)、PE评估量表(PEP)、不良反应发生率的差异。结果:治疗前两组患者各项指标比较差异均无统计学意义(P>0.05),治疗后1、3、6个月,两组患者的平均IELT均较治疗前明显增加(P<0.05),且观察组IELT明显高于对照组(P<0.05);观察组CGIC的总有效率明显高于对照组(93.3%vs.71.7%,P<0.05);观察组治疗后6个月控制射精能力、性交满意度、PE相关苦恼及PE相关夫妻沟通困难评分均高于对照组(P<0.05);观察组的不良反应发生率明显低于对照组(9.94%vs.21.67%,P<0.05)。结论:达泊西汀联合坦索罗辛治疗PE疗效显著,能够延长IELT,提高性生活质量,且不良反应较少,适宜临床推广。

小学低年级阅读教学中的情境创设初探

课标指出:“语文教学应激发学生的学习兴趣,注重培养学生自主学习的意识和习惯,引导学生掌握语文学习的方法,为学生创设有利于自主、合作、探究学习的环境。”低年级阅读教学必须从激发学生阅读兴趣开始。小学低年级学生仍带有一些学前阶段的特点,以形象思维、无意注意、无意记忆为主,注意力保持时间较短,他们更容易被有趣、新奇的学习内容和教学方式所吸引。