恒温荧光扩增法快速检测食品中金黄色葡萄球菌

目的建立恒温荧光扩增法快速检测食品中的金黄色葡萄球菌.方法基于重组酶介导链替换核酸扩增技术针对金黄色葡萄球菌nuc基因的保守区域设计特异性引物和探针,建立了检测金黄色葡萄球菌的恒温荧光扩增检测方法,并评价其敏感性、特异性、重复性和符合率.结果该方法可在常温(37~42℃)实现核酸快速扩增,20 min即可完成反应;敏感性较高,金黄色葡萄球菌的检出限为9.12×10^(2) CFU/mL;特异性强,与大肠埃希氏菌O157∶H7、大肠埃希氏菌、单核细胞增生李斯特菌、鼠伤寒沙门氏菌、副溶血性弧菌的核酸均无交叉反应;不同稀释度菌液检测阈值时间的变异系数为5.78%~5.93%,重复性较好;采用该方法与荧光聚合酶链反应方法同时对50份临床样品进行检测,总符合率均为100%,差异不显著(P>0.05).结论本研究建立的金黄色葡萄球菌恒温荧光扩增检测方法具有敏感性高、特异性强、时间短的特点,可用于金黄色葡萄球菌的快速检测.

靖安注重城乡居民医保整合后的参保缴费

2017年是江西省全面整合城乡居民基本医疗保险制度后开展参保缴费的第一年，靖安县医保局加大工作力度，确保应保尽保，应收尽收。一是建立责任制，县、乡镇、村，层层有人负责；二是加大政策宣传力度，要求各乡镇和社区劳动保障平台悬挂横幅、开设专栏和张贴宣传资料，编印《医保便民手册》向群众发放。三是要求经办人员学懂弄清城乡居民医保整合的相关政策，提升服务质量和效率。据了解，全县已有131015人城乡居民参保缴费，参保率达到99．3％，实现了应保尽保和应缴尽缴。

胶体金免疫层析技术在鸡蛋中喹诺酮类药物残留快速检测中的应用

由于抗生素的大量使用尤其是广谱抗菌喹诺酮类药物的广泛应用在鸡的养殖上,造成了喹诺酮类药物在鸡肉产品和鸡蛋中的残留。胶体金免疫层析技术以快速、简便、灵敏、易保存、稳定性好等特点,弥补了传统方法的不足,适应于流通中的快速现场筛查。本文主要介绍了胶体金免疫层析技术在鸡蛋中喹诺酮类药物残留的现场快速筛查方法的应用及发展前景。

基于实时荧光聚合酶链式反应快速检测食源性大肠埃希氏菌O157:H

目的 建立一种快速、灵敏、特异、高效的食源性大肠埃希氏菌O157:H7型实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测方法。方法 针对大肠埃希氏菌O157:H7型的O抗原特异基因rfbE保守区域设计特异性引物和探针,合成基因片段绘制标准曲线,在菌液基因组DNA和质粒双层面调试优化以完成方法的初步建立。其后,对该方法的特异性、敏感性、重复性等进行全面的质量评估验证。结果 该方法特异性100%;基因组DNA检测敏感性为7.11×10^(2)fg/μL;纯培养物水平检测敏感性为1.0×10^(2)CFU/mL;重复性变异系数在0.10%~1.00%之间;标准曲线相关系数r^(2)为0.9994。结论 成功建立了一种性能良好的大肠埃希氏菌O157:H7型实时荧光探针PCR快速检测方法,该方法具有灵敏度高、特异性强、扩增时间短,仅为35 min的特点,可用于疑似大肠埃希氏菌O157:H7型污染样品的快速诊断检测。

荧光免疫定量法即时检测谷物中黄曲霉毒素B1

目的建立荧光免疫定量法即时检测谷物中黄曲霉毒素B1的含量。方法以荧光微球为标记物,采用2,4二硝基苯酚独立质控体系和竞争法检测原理,构建谷物中黄曲霉毒素B1荧光免疫定量即时检测方法。评价其准确度、重复性、特异性、稳定性及与仪器确证方法符合度。结果该方法最适条件为:pH 7.8硼酸盐缓冲液活化、pH 7.5磷酸缓冲液偶联、微球抗体质量比为5:4、抗原抗体反应质量比为50:1。试纸条检出限为0.299~0.997μg/kg,定量限为0.544~2.663μg/kg。代表性样本准确度为92.20%~111.80%,重复性为3.2%~10.6%。除与黄曲霉毒素B2有交叉反应(6.1%),与其他类似物无交叉反应(<0.1%)。该法检测结果与超高效液相色谱法结果一致性好,相关系数(r^(2))为0.997。结论该方法准确、快速、灵敏、便捷,适合于现场即时检测谷物中黄曲霉毒素B1的含量。

呕吐毒素荧光免疫层析检测卡在谷物产品快速检测中的应用

对呕吐毒素荧光免疫层析检测卡在谷物产品快速检测中的应用进行了评价,确定呕吐毒素荧光免疫层析检测卡的检出限和定量限,同时对检测卡的重复性、准确度、特异性和大型仪器确证方法检测结果的一致性进行了试验。结果显示,检测卡检测面粉、玉米面、大米基质中呕吐毒素的检出限分别为18.89、 19.65、 21.39μg/kg,定量限分别为20.09、20.77、 24.12μg/kg;批内回收率为89.65%~105.94%,批内变异系数为1.07%~9.96%,批间回收率为90.67%~101.64%,批间变异系数为4.94%~9.45%,与玉米赤霉烯酮、黄曲霉毒素B_(1)、赭曲霉毒素A、伏马毒素、 T-2毒素交叉反应率分别为0.26%、 0.15%、 0.05%、 0.01%、 0.09%;与免疫亲和层析净化高效液相色谱法(GB 5009.111-2016 《食品安全国家标准食品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇及其乙酰化衍生物的测定》第二法)相比,两种方法检测结果相对误差≤16.28%。结果表明,呕吐毒素荧光免疫层析检测卡具有检测快速、灵敏度高、准确性高等特点,且操作简单、省时省力、经济便携,能满足市场快速检测的需求,为谷物产品的安全监测提供保障和便利,具有广阔的应用前景。

真菌毒素胶体金检测试剂条质量研究

目的研究真菌毒素胶体金检测试剂条的质量。方法应用胶体金免疫层析技术开发一种快速检测饲料谷物中黄曲霉毒素B1(AFB1)检测试剂条。为使该检测试剂条质量性能指标满足GB 2761-2011《食品中真菌毒素限量》及《饲料卫生标准》要求,通过灵敏度、特异性、实验室高效液相色谱法(HPLC)一致性分析,评价真菌毒素胶体金检测试剂条的质量性能。结果研制的检测试剂条灵敏度99%、特异性97%、假阴性率1%、假阳性率3%、与实验室HPLC法显著性差异分析χ~2<3. 84,灵敏度高,特异性好。结论研究中的真菌素胶体金检测试剂条能满足食品安全相关国标要求,可用于谷物、饲料中真菌毒素的现场检测。

超高效液相色谱串联质谱法测定水产品中孔雀石绿和地西泮的含量

目的:建立超高效液相色谱串联质谱法同时测定水产品中孔雀石绿和地西泮含量的方法。方法:样品经1%甲酸乙腈提取,正离子扫描,内标法或外标法定量。结果:孔雀石绿、地西泮在0.5~20.0 ng·mL^(-1)线性关系好,回收率在82.1%~96.1%,精密度在2.9%~7.8%,检测低限为0.5 ng·mL^(-1)。结论:本方法准确度高、灵敏度高、稳定性好,可以同时有效地测定水产品中孔雀石绿和地西泮的含量。

谷物中玉米赤霉烯酮高灵敏时间分辨荧光免疫层析定量法的建立

建立了一种快速检测谷物中玉米赤霉烯酮的时间分辨免疫层析定量检测方法。对荧光微球与抗体制备过程、抗原抗体反应比例、样本前处理过程等实验条件进行优化,在最佳实验条件下,评价试纸条的检测限、准确度、重复性、特异性及稳定性。试纸条最佳研制条件:活化缓冲液为pH5.0 MES,标记缓冲液为pH7.2 HEPES,EDC用量为100μg,抗体标记量为100μg,膜T线0.6 mg/ml,C线0.25 mg/ml包被,微球偶联物稀释6倍。确定60%甲醇水和样本按质量体积比1∶5混匀提取时间5 min。通过Logistic曲线四参数拟合,R^(2)均为0.99,在5~200 ng/g范围内具有较好的线性关系,玉米、小麦、小米、大米样本的检出限分别为4.24、1.28、1.63、1.49 ng/g。回收率在82.00%~113%,变异系数均小于15%。与其他真菌毒素的交叉反应率均小于1%,37℃放置21 d基本稳定。选择20份样本与仪器确证方法比较,结果一致性好。所制备的试纸条具有较好准确性、重复性、特异性及热稳定性,该方法操作简单、快速,结果准确、可视化,适合于大批量样本的快速筛查。

一种基于荧光探针技术的鸭坦布苏病毒核酸检测方法的建立

为建立一种鸭坦布苏病毒荧光RT-PCR核酸检测方法,特针对鸭坦布苏病毒E基因的保守片段设计特异性引物和探针,在鸭坦布苏病毒核酸层面和合成基因质粒层面,经一系列优化调试完成方法初步建立。其后,对该方法的特异性、敏感性、重复性、标准曲线、扩增效率等方面进行了验证。结果显示:该方法特异性100%;敏感性为10copies/μL;重复性CV值在0.07%~0.65%区间;标准曲线相关系数为0.9995,扩增效率为99.0%。综上所述,本试验成功建立了一种性能良好的鸭坦布苏病毒荧光探针RT-PCR核酸检测方法,可为DMTUV的临床诊断和流行性病学调查提供一种技术支撑。

猪繁殖与呼吸综合征病毒ELISA抗体检测中包被抗原的研究

目的研究不同的猪繁殖与呼吸综合征病毒抗原性蛋白对PRRSV抗体ELISA检测效果的影响。方法将PRRSV重组N蛋白、M蛋白和CGP5蛋白3种蛋白抗原单独包被,灵敏度分别为85.0%、60.0%、50.0%。为进一步优化ELISA检测方法 ,以N蛋白为主包被蛋白,M蛋白和GP5蛋白以不同的比例混合包被,研究最佳包被条件。结果当N蛋白、M蛋白和GP5蛋白以5ng:5ng:5ng/孔包被时,敏感性和特异性均达到100%,混包效果优于抗原性蛋白单独包被。为今后PRRSV抗体ELISA检测试剂的进一步研制奠定了基础。

靖安“三措施”加大对定岗医师管理

江西省靖安县医保局三项措施加大对定岗医师管理。一是加大政策宣传力度。让每位定岗医师熟悉基本医疗保险政策、业务，掌握基本医疗保险药品、诊疗项目、服务设施范围规定，约束规范医师的从业行为；二是加大信息核实力度。