连续性血液净化对脓毒症患者免疫功能及预后的影响

目的:探讨应用连续性血液净化(CBP)对脓毒症患者促炎/抗炎免疫功能及预后的影响。方法:将102例脓毒血症患者分为CBP组(60例)和常规治疗组(42例),在相同的常规治疗基础上,CBP组加用CBP治疗,持续治疗72 h。比较两组急性生理学与慢性健康状况评分系统(APACHE)Ⅱ评分和序贯器官功能衰竭(SOFA)评分;记录28 d生存率和重症病房(ICU)住院时间。分别于治疗前和治疗后24、48、72 h各时点抽取静脉血,应用流式细胞仪检测血中辅助性T细胞1/2(Th1/Th2)比值;酶吸附法测定白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-10(IL-10)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)。结果:治疗后CBP组APACHEⅡ、SOFA评分均下降(P<0.05)。两组28 d生存率差异无统计学意义(P>0.05),但CBP组ICU住院时间短于常规治疗组(P<0.05)。治疗72 h后,CBP组患者外周血IL-1、IL-10、TNF-α较治疗前明显下降,Th1/Th2较治疗前明显升高,与同期常规治疗组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:CBP能通过清除炎症介质,增加机体的细胞免疫功能,恢复Th1/Th2的平衡,从而改善脓毒血症患者的总体病情。

血必净注射液联合血液净化治疗对脓毒血症疗效及免疫调节影响

目的探讨血必净注射液联合血液净化治疗脓毒血症对患者免疫功能的影响。方法选取2011年3月至2013年3月我院收治的96例严重脓毒血症患者,随机分为治疗组和对照组两组,每组各48例,对照组采取集束化治疗。治疗组在此基础上,采取血必净注射液联合血液净化治疗。对两组患者的疗效及免疫功能进行评定。结果治疗组患者的住院时间、机械通气时间、28天死亡率等情况均优于对照组。差异均有统计学意义(P<0.05)。72h内对Treg%进行监测发现,两组的Treg%36h时对照组为25.2%,治疗组为15.6%,治疗组明显低于对照组;72h时,治疗组为6.9%,明显低于对照组的24.8%。差异均有统计学意义差异均有统计学意义(P<0.05)。结论血必净注射液联合血液净化治疗脓毒血症在免疫调节方面具有显著的优越性。

离子液体1-烷基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐在水溶液中的聚集行为

采用等温滴定量热法、静态荧光猝灭法和电导法系统研究了典型离子液体1-烷基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐([Cnmim][BF4])在水溶液中的聚集行为,获得了胶束形成的临界胶束浓度(cmc),摩尔焓变(ΔHmic),摩尔吉布斯自由能变(ΔGmic),摩尔熵变(ΔSmic)以及不同浓度时[Cnmim][BF4]胶束的平均聚集数等基本参数.发现这类离子液体的聚集为熵驱动,阳离子的烷基链越长,ΔGmic越负,聚集更容易发生.此外,结合[Cnmim]X(X=Cl-,Br-)的相关研究发现,阳离子相同时,体积越大和疏水性越强的阴离子与头基的结合能力越强,能有效地降低头基之间的静电排斥,降低cmc,利于胶束的形成.对于[C12mim][BF4],添加剂β-环糊精(β-CD)的加入可使cmc增大,ΔHmic和ΔSmic减小,而KBF4则可使cmc和ΔHmic减小,ΔSmic增大.

p38磷酸化与K562细胞红系分化的关系

目的探讨p38丝裂原活化的蛋白激酶(p38MAPKs)信号通路直接持续活化在γ-珠蛋白基因转录激活和胎儿血红蛋白(HbF)合成中的作用,为阐明p38磷酸化与K562细胞红系分化的关系提供直接依据。方法经脂质体介导将pCDNA 3.1-MKK3(Glu)和pCDNA3.1-MKK3(Ala)重组质粒转染人红白血病细胞株K562,经G418筛选,反转录(RT)-PCR和Western blot鉴定获得p38持续高磷酸化和低磷酸化的稳定细胞株K562-MKK3(Glu)和K562-MKK3(Ala)。通过RT-PCR和联苯胺染色观察不同细胞模型中γ-珠蛋白基因的表达和HbF的合成。采用SPSS 11.5软件进行统计学分析。结果不同细胞模型中p38mRNA和蛋白水平表达均无明显变化。但与K562亲本细胞、K562-vect和K562-MKK3(Ala)细胞比较,K562-MKK3(Glu)细胞中p38蛋白磷酸化水平、γ-珠蛋白表达均显著增加。联苯胺染色结果显示,K562亲本细胞、K562-vect、K562-MKK3(Ala)、K562-MKK3(Glu)和SB203580处理的K562-MKK3(Glu)细胞中联苯胺阳性细胞百分率分别为(3.2±1.4)%、(3.7±1.2)%、(2.8±0.9)%、(32.6±5.3)%和(7.8±2.3)%(q=7.56P<0.01)。结论p38MAPKs信号通路直接持续活化可激活γ-珠蛋白基因的转录,并促进HbF的合成。p38磷酸化在K562细胞红系分化中起重要作用。

丁酸钠对K562细胞系γ珠蛋白基因表达的诱导作用及机制

目的:研究丁酸钠对K562细胞系γ珠蛋白基因表达和胎儿血红蛋白合成的诱导作用及机制。方法:以丁酸钠(0.5 mmoL/L)诱导72h的K562细胞为实验组,设K562亲本细胞和SB203580(10μmol/L)处理1h后用丁酸钠(0.5 mmoL/L)诱导72h的K562细胞为阴性对照组,设羟基脲(100μmol/L)诱导72h的K562细胞为阳性对照。分别提取细胞总RNA和总蛋白。采用RT-PCR、Western blotting和联苯胺染色方法检测γ珠蛋白基因、胎儿血红蛋白和p38表达及p38磷酸化水平。结果:与K562亲本细胞和SB203580处理后丁酸钠诱导的K562细胞相比,丁酸钠诱导的K562细胞中G-γ珠蛋白、A-γ珠蛋白和胎儿血红蛋白的表达均明显上调(P<0.05),p38 mRNA和蛋白水平表达均无明显变化(P>0.05),但p38蛋白磷酸化水平显著增加(P<0.05)。K562亲本细胞、SB203580处理后丁酸钠诱导的K562细胞和丁酸钠诱导的K562细胞中联苯胺阳性细胞百分率分别为(3.2±0.4)%、(12.7±0.2)%和(36.3±0.8)%(P<0.05)。结论:丁酸钠可以诱导K562细胞高表达γ珠蛋白基因、合成胎儿血红蛋白,p38MAPKs的激活在丁酸钠诱导K562细胞高表达γ珠蛋白基因中发挥重要作用。

同步间歇指令通气在新生儿呼吸衰竭中的临床疗效分析

目的探讨同步间歇指令通气(SIMV)在新生儿呼吸衰竭中的临床效果。方法应用SIMV治疗45例新生儿呼吸衰竭患儿,并观察上机后的临床表现、动脉血气的变化及并发症的发生情况。结果36例于实施SIMV 30 min后,呼吸困难、紫绀减轻或消失(80.0%),应用SIMV 6h内动脉血氧分压由(5.74±1.16)kPa升高至(8.25±2.12)kPa,动脉血二氧化碳分压由(7.35±1.78)kPa降低至(5.61±1.52)kPa,血氧饱和度由65.87±12.75升高至87.67±7.25,pH值由7.23±0.19升高至7.35±0.05。45例中完全缓解37例(82.2%),改善5例(11.1%),无效3例(6.7%),总有效率达93.3%。结论SIMV 治疗新儿呼吸衰竭临床效果显著且安全。

大肠癌发生发展中cyclinD_1和P_(16)的表达及意义

目的 探讨cyclinD1和P16在大肠癌癌变过程中的表达和意义。方法 应用免疫组化染色法检测大肠癌手术切缘粘膜上皮、癌旁组织、大肠腺瘤及大肠癌中cyclinD1和P16的表达。结果 cyclinD1表达在大肠癌发生发展中呈增高趋势,P16表达呈下降趋势,二者在癌旁、腺瘤和癌组织中的表达与手术切缘粘膜上皮相比均有显著性差异(P<0.01或0.05),cyclinD1和P16的表达与癌的淋巴结转移密切相关(P<0.05),cyclnD1还与癌浸润深度有关(P<0.05)。结论cyclinD1和P16在大肠癌癌变过程中起重要作用,并有促进肿瘤转移的效应,可作为大肠癌早期诊断和判断预后的重要分子指标。

胎粪吸入性肺炎幼兔外周血及支气管肺泡灌洗液中IL-1β的表达

目的探讨IL-1β在胎粪吸入性肺炎中的意义。方法将20只日龄21～30 d日本大耳白新生兔随机分为两组,一组经气管导管注入胎粪悬混液复制胎粪吸入性肺炎模型,即模型组;一组作正常对照为对照组。酶联免疫检测两组幼兔外周血和支气管肺泡灌洗液中IL-1β表达水平,并对比分析。结果模型组幼兔肺组织出现炎性损伤表现,模型组外周血IL-1β水平为(12.26±1.21)pg/mL,高于对照组IL-1β水平[(6.47±0.87)pg/mL],差异有统计学意义(P<0.05);模型组支气管肺泡灌洗液中IL-1β水平为(7.06±0.13)pg/mL,高于对照组IL-1β水平[(3.51±0.15)pg/mL],差异有统计学意义(P<0.05)。结论 IL-1β参与了胎粪吸入性肺炎的炎症反应,外周血和支气管肺泡灌洗液中IL-1β水平检测可以反映肺损伤程度。

血必净治疗腹腔间隔室综合征合并多器官功能障碍30例疗效观察

目的观察血必净治疗腹腔间隔室综合征(ACS)合并多器官功能障碍综合征(MODS)的效果。方法选择我院收治的ACS合并MODS患者61例,随机分为对照组(31例)和治疗组(30例)。对照组患者给予对症、抗生素及常规营养支持治疗,如病情需要则使用呼吸机和血液透析;治疗组患者在对照组治疗的基础上加用血必净注射液100 ml静脉滴注,1次/12 h,两组疗程均为14 d。观察两组患者治疗前后血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-6、IL-8、腹腔内压(IAP)的变化。结果治疗前两组患者的IAP、血清TNF-α、IL-6、IL-8水平间差异均无统计学意义(P>0.05);治疗后两组患者的IAP、血清TNF-α、IL-6、IL-8间差异均有统计学意义(P<0.05)。两组患者临床疗效间差异有统计学意义(P=0.02)。结论加用血必净注射液可显著降低ACS合并MODS患者的炎性递质释放及提高患者的疗效。

血必净注射液对复苏后的多器官功能障碍患者脏器保护作用的研究

[目的]评价血必净注射液治疗复苏后多器官功能障碍的临床效果。[方法]采用随机分组方法,将98例确诊复苏后多器官功能障碍患者分为治疗组和对照组。观察治疗前后主要临床症状、体征变化、血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)以及多器官功能变化。[结果]与对照组比较,血必净治疗后,血清TNF-α、IL-6和相关指标均有明显改善(P<0.05)。血必净治疗后第3天和第7天肝脏功能、心肌酶、凝血指数、动脉血气分析等也改善更明显(P<0.05)。[结论]血必净注射液治疗复苏后多器官功能障碍综合征可缩短病程,改善症状,防止多器官功能障碍加重。

应用高频通气辅助治疗小儿重症肺炎疗效分析

目的探讨应用高频通气辅助治疗小儿重症肺炎临床疗效。方法 122例小儿重症肺炎患儿分为高频组69例和对照组53例。2组患儿均采用综合治疗,高频组在综合治疗的基础上同时使用高频喷射呼吸机,经鼻导管喷射供氧,对照组采用常频通气普通鼻前庭供氧,比较2组患儿临床疗效。结果高频组患儿平均住院时间(9.58±5.80)d,对照组患儿平均住院时间(17.13±10.93)d,高频组患儿平均住院时间短于对照组(P<0.01)。高频组患儿中治愈67例,死亡2例,对照组患儿中治愈45例,死亡8例,高频组疗效优于对照组(P<0.05)。结论应用高频通气辅助治疗小儿重症肺炎可显著提高临床治愈率,缩短疗程,是小儿重症肺炎临床治疗中有效的辅助治疗措施。

血必净注射液治疗重症急性胰腺炎凝血功能障碍临床观察

重症急性胰腺炎（SAP）患者常伴有严重凝血功能障碍，予以对症支持及保护各脏器功能治疗的同时加用血必净注射液可取得良好疗效，报告如下。

血必净注射液对严重多发伤患者脏器功能损害的保护作用

目的观察血必净注射液对严重多发伤患者脏器功能损害的保护作用。方法将邢台市人民医院ICU 2007年5月—2013年11月收治的76例严重多发伤患者随机分为对照组(38例)和观察组(38例)。两组均给予急诊多学科救治,观察组加用血必净注射液100 ml加生理盐水100 ml静脉滴注,2/d,疗程7 d,观察两组治疗前后凝血功能、С-反应蛋白含量、肝肾功能变化。结果与治疗前比较,治疗第7天观察组凝血功能、肝肾功能明显改善,С-反应蛋白含量显著降低(P<0.05),且观察组上述指标改善优于对照组(P<0.05)。结论血必净注射液通过改善凝血功能、降低炎性介质的释放来保护、改善严重多发伤患者重要脏器的功能。

针刺、按摩与智力训练对小儿脑性瘫痪运动功能及智力的提高作用

目的探索系统综合疗法在小儿脑性瘫痪(脑瘫)康复治疗中的作用。方法对41例痉挛型脑瘫患儿进行针刺、推拿按摩、功能训练、高压氧等综合康复治疗。结果41例患儿,其中基本治愈5例(占12%),显效20例(占49%),有效14例(占34%),无效2例(占4%),总有效39例,总有效率为95%。结论系统综合康复治疗,能提高治疗效果,改善脑瘫患儿脑功能。

转GM-CSF基因瘤苗治疗白血病的实验研究

目的由于白血病细胞的不局限性,其治疗方法受到很大的限制。本研究旨在探讨转粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF)基因瘤苗在白血病免疫治疗中的有效性和可行性。方法通过细胞生长曲线和动物致瘤性实验检测GMCSF基因对红白血病细胞系FBL3细胞生物学特性的影响;用丝裂霉素灭活FBL3GMCSF细胞制备转GMCSF基因瘤苗,通过转基因瘤苗免疫预防和免疫治疗动物实验探讨其预防和治疗白血病的可行性。结果FBL3GMCSF细胞体外生物学特性与FBL3vect和FBL3细胞相比没有明显差异。细胞形态和生长速度均无差别。动物致病等实验显示,分别接种FBL3GMCSF、FBL3vect和FBL3细胞,各组肿瘤均持续生长,但同一接种数量间相比,FBL3GMCSF平均出瘤时间比FBL3vect和FBL3晚,肿块平均体积也相应较小。丝裂霉素灭活FBL3GMCSF细胞后作为瘤苗,免疫小鼠产生的免疫保护力明显强于灭活的FBL3vect和FBL3。FBL3GMCSF组与FBL3vect、亲本FBL3细胞和PBS对照组相比出瘤时间晚、肿瘤生长速度慢、小鼠生存期延长,其中有4/10的小鼠长期存活(超过60天)。另外,转基因瘤苗免疫治疗动物实验结果也显示:与FBL3vect、亲本FBL3细胞和PBS对照组相比FBL3GMCSF组肿瘤生长速度受到明显抑制,其中2/10只小鼠肿瘤完全消失;小鼠生存期延长,其中有2/10的小鼠长期存活(超过60天)。结论丝裂霉素灭活FBL3GMCSF后作为瘤苗可有效对白血病进行免疫治疗,有良好的临床研究和应用前景。

转粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子基因真核表达质粒的构建及生物学活性鉴定

目的 构建小鼠转粒细胞 巨噬细胞集落刺激因子 (mGM CSF)真核表达质粒 pcDNA3 GM CSF ,转染红白血病细胞系FBL 3,并鉴定其活性。方法 采用分子克隆技术 ,构建mGM CSF真核表达质粒 pcDNA3 GM CSF ,电穿孔法将其导入红白血病细胞系FBL 3,G4 18筛选G4 18抗性细胞 ,限制性稀释法筛选G4 18抗性细胞克隆。PCR和RT PCR方法鉴定GM CSF基因整合和稳定表达。骨髓造血祖细胞增殖实验和骨髓造血祖细胞集落刺激实验鉴定其生物学活性。结果 采用PCR方法扩增mGM CSFcDNA序列 ,BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切后装入 pcDNA3质粒 ,构建真核表达质粒 pcDNA3 GM CSF ,酶切和测序结果与预期相符 ,无插入、丢失、突变 ,方向正确。PCR和RT PCR结果显示 ,GM CSF基因整合到受体细胞染色体中并稳定表达。表达GM CSF的FBL 3 GM CSF细胞培养上清可明显刺激小鼠骨髓单个核细胞增殖 ,并能刺激干细胞形成克隆 ,形成克隆数为 (5 4 .6 7± 4 .83)个 ,形成率为 0 .5 4 7%。结论 构建mGM CSF真核表达质粒pcDNA3 GM CSF ,获得稳定表达该基因并具有生物学活性的细胞克隆 ,为制备转GM CSF基因瘤苗 。

持续性肾脏替代治疗联合血必净对脓毒症患者炎症反应水平、免疫状态及疾病严重程度的影响

目的探讨持续性肾脏替代治疗(CRRT)联合血必净治疗对脓毒症患者炎症反应水平、免疫状态及疾病严重程度的影响。方法选择诊断为严重脓毒症或感染性休克且合并急性肾损伤2期或以上患者共73例,依据治疗措施不同分为血必净组23例及联合治疗组50例,血必净组依据《拯救脓毒症患者行动:国际严重脓毒症和脓毒症休克治疗指南:2012》给予治疗,并给予血必净注射液100 m L静脉滴注,2次/d。联合治疗组在血必净组治疗基础上,给予CRRT连续5 d以上,每天12 h以上。以同期我院健康体检者15例作为健康对照组。检测患者治疗前,治疗第3、5天时以及健康对照组的hs-CRP、TNF-α、HMGB1浓度,检测淋巴细胞亚群计数、HLA-DR表达率,患者行APACHEⅡ评分、MODS评分,记录28 d死亡情况。结果两组患者治疗后hs-CRP、TNF-α、HMGB1浓度均较治疗前显著下降(P<0.05),联合治疗组比血必净组下降更为明显(P<0.05)。治疗后淋巴细胞计数、HLA-DR、CD4+较治疗前显著升高(P<0.05),CD8+无明显改变。联合治疗组较血必净组改变更为明显(P<0.05)。治疗后APACHEⅡ评分、MODS评分均逐渐下降,第5天时均显著低于治疗前,联合治疗组较血必净组下降更为明显(P<0.05)。两组各脏器功能不全例数均有所减少(联合治疗组血液系统除外)。联合治疗组28d病死率(24.0%)与血必净组(39.1%)差异无统计学意义(P>0.05)。结论给予脓毒症患者CRRT联合血必净治疗后可显著降低炎性介质的浓度,改善免疫状态,减轻疾病严重程度,但对28 d病死率的影响不明显。