CHD1基因在美国王鸽和绿壳蛋鸡性别鉴定中的应用研究

为快速、准确鉴定出美国王鸽和绿壳蛋鸡的性别,本研究基于CHD1基因在不同性别鸟类基因组中的大小差异,建立美国王鸽和绿壳蛋鸡性别鉴定的分子生物学方法。首先提取美国王鸽和绿壳蛋鸡基因组DNA,应用引物对2550F/2718R扩增CHD1基因第17、18外显子及之间的内含子区域,琼脂糖凝胶电泳检测PCR扩增结果并进行测序验证。PCR扩增结果表明,雄性个体只有1条条带,而雌性个体都是2条条带,基于PCR技术的性别鉴定结果与人工鉴定的结果一致。测序结果显示,CHD1基因在美国王鸽基因组上的扩增片段大小分别为593 bp和447 bp;在绿壳蛋鸡基因组上的扩增片段大小分别为682、656 bp和448 bp。目的片段中外显子长度均为169 bp,保守性好,同源性为100%。但内含子序列在2群体间的同源性较低,片段大小差异主要是由Z染色体上CHD1基因内含子区变异引起的。本研究成功建立了基于CHD1基因序列大小差异的肉鸽和绿壳蛋鸡性别鉴定方法,为开展精准选种选配提供了技术指导。

绵羊MYL基因家族的鉴定与组织表达分析

为了解肌球蛋白轻链(myosin light chain,MYL)基因家族在绵羊中的分子进化关系及表达变化,本研究利用生物信息学方法对绵羊MYL基因家族进行鉴定和系统分析。各选取了3只军垦白肉羊、新疆细毛羊和湖羊成年公羊各组织样品,采用qRT-PCR方法验证家族成员MYL1、MYL6B和MYLPF基因的表达情况。结果显示,12个MYL基因分布在9条染色体上,编码由147~211氨基酸组成的亲水性蛋白质,无信号肽和跨膜结构域,二级结构以α-螺旋为主。根据基因结构、保守结构域和基序分布等特征,可以将这些基因家族成员分为3个组。共线性分析结果表明,MYL2和MYL10、MYL2和MYLPF存在片段复制,且这些片段受到较强的选择压力。蛋白互作网络显示MYH10与绵羊MYL家族成员均存在互作关系。MYLs的组织表达模式差异较大,其中MYL1、MYL2、MYL6B和MYLPF在骨骼肌组织中高水平表达。基因克隆测序结果显示,扩增得到目的基因的CDS全长,qRT-PCR结果表明,MYL1、MYL6B和MYLPF在军垦白肉羊肌肉组织中的表达水平显著高于其他组织(P<0.0001),并且在军垦白肉羊骨骼肌中的表达水平显著高于湖羊和细毛羊(P<0.0001)。以上结果为深入研究绵羊MYL基因家族的功能以及优化绵羊肉用性能提供了线索。

新疆地区夏洛莱肉牛遗传育种与繁殖技术发展趋势探讨

夏洛莱肉牛作为一种肉质优良、生长迅速的品种,在新疆地区得到广泛的应用。近年,新疆地区的夏洛莱肉牛育种计划取得了一定的成功,但夏洛莱肉牛种质资源发展存在也存在遗传性状退化、父本品种混乱等问题。为提高其经济效益、适应性以及养殖环境的挑战,新疆地区夏洛莱肉牛的遗传育种与繁殖技术发展日益受到关注。该文简单介绍新疆地区夏洛来肉牛的遗传育种概况,在传统肉牛遗传育种与繁殖技术的基础上,探讨新疆地区夏洛莱肉牛在遗传育种与繁殖技术方面的发展趋势,为推动该地区肉牛产业的升级与发展提供有益的参考。

基于基因组SNP信息分析新疆夏洛莱牛群体的遗传结构和遗传背景初报

近50年来,引入的夏洛莱牛在塔额盆地已初步形成遗传性能稳定、产肉性能好的新类群。然而,在夏洛莱牛的杂交改良和选育过程中,缺乏系统的育种档案资料,存在着群体遗传背景不清、血缘关系不明等问题。本研究利用基因组高通量检测技术,分析新疆夏洛莱杂交新类群核心群中的全基因组水平SNPs变化,样本SNP数据平均检出率(Call Rate值)大于90%(99.40%),检测后分析群体中有效群体含量(Ne)、群体的多态性标记比例(Pn),群体的期望杂合度(He)和观察杂合度(Ho)等数据,得出现有新疆夏洛莱核心群体的纯度较好,有效群体含量为28.69,个体间的亲缘关系呈中等程度、整个群体分为26个家系,个体基于ROH的近交系数值是0.030。结论:基因组分析运用高通量测序,通过关联分析,对新疆夏洛莱肉牛群体明确系谱信息,开展全基因组选育,指导组建核心育种群,为群体的遗传背景和血缘关系提供科学依据,对提高今后新疆夏洛莱群体选种的正确性,缩短世代间隔,建立现代新型良种繁育体系有重要的意义。

松针对体外瘤胃发酵特性的影响

试验采用体外产气法探讨松针对体外瘤胃发酵的影响。以松针和玉米青贮作为瘤胃体外发酵底物,按干物质基础计,松针在发酵底物中所占比例分别为0(对照组)、5%(试验Ⅰ组)、10%(试验Ⅱ组)、15%(试验Ⅲ组),培养48 h后,测定瘤胃发酵参数。结果显示,各处理组间发酵液pH值差异不显著(P>0.05);试验Ⅲ组氨态氮、微生物蛋白浓度显著低于其他组(P<0.05)。试验Ⅲ组的总挥发性脂肪酸、乙酸和丙酸浓度均显著低于其他组(P<0.05);各组乙酸/丙酸在2.38~2.49。试验Ⅲ组产气量显著低于对照组(P<0.05);干物质降解率显著低于其他组(P<0.05)。研究表明,松针占发酵底物15%时,发酵液中氨态氮浓度、挥发性脂肪酸浓度、产气量和干物质降解率显著降低。

新疆夏洛莱肉牛种质资源现状及保护利用措施

夏洛莱牛是我国引入新疆地区进行繁育的优良肉牛新品种,以其出色的肉质和生长性能而闻名于世。经过50多年的遗传繁育改良,已经基本适应当地优良的放牧条件,形成具备本土特色的生产性能优良、遗传性能稳定的夏洛莱牛杂交新类群。然而也存在遗传性状退化、父本品种混乱等问题。该文通过对新疆夏洛莱肉牛种质资源现状进行分析,分析存在的问题和挑战,提出一系列保护和利用措施,以促进夏洛莱肉牛的可持续发展。

PolⅡ型启动子K14实现组织特异RNAi

RNAi(RNA interference,RNAi)是继基因打靶技术后的一种高效的研究基因功能的方法。细胞学实验和小鼠模型的研究结果表明,PolⅡ型启动子可以实现组织特异的RNA干扰,从而为鉴定基因在特定组织中的功能及作用机理提供了一个强有力的研究方法。为了能将这种方法用于转基因绵羊生产,探讨基因与绵羊毛囊发育的关系及其作用机制等,文章利用PolⅡ型CMV启动子和毛囊组织特异表达的人角蛋白14(K14)基因的启动子驱动eGFP-shRNA融合转录本的生成,从而实现敲低目的基因的表达。体外基因表达沉默效率分析(pEGFP-C1-shRNA和psiCHECK-BMP4双质粒共转染Hela细胞)结果表明,6个干扰序列均能有效地抑制BMP4基因的表达,抑制效率达到60%以上;体内表达沉默分析(只转染pEGFP-K14-shRNA质粒转染小鼠皮肤细胞系JB6-C41)的实验结果与体外分析结果相似,除3#序列外,其余干扰序列对BMP4基因的抑制效率都在60%以上,其中5#序列的效率达到80%以上。siRNA诱导的目标基因沉默中mRNA和蛋白水平的下降显著正相关。结果表明,设计构建的由PolⅡ型启动子K14驱动eGFP-shRNA融合转录本的形成,从而实现RNAi的研究方法是可行的,利用这种方法可以实现在特定细胞中敲低目的基因的表达水平。为在大家畜特别是绵羊中应用RNAi的方法分析目的基因在毛囊发育、对不同类型毛囊生长发育的诱导和调节等作用机理的研究提供一个参考方法。

老年性痴呆中β淀粉样肽的研究进展

老年性痴呆(阿尔茨海默病,Alzheimerdisease,AD)患者脑内老年斑的主要成分为β淀粉样肽(β-AmyloidPeptide,Aβ),其生理功能以及合成和代谢的过程中相关基因和酶的作用近年来的研究有了许多新的进展,揭示了Aβ与AD病的内在联系及其在治疗方面的一些新的方法,抑制毒性Aβ的合成聚集是治疗AD的一个新的突破。

牛FABP基因家族鉴定与生物信息学分析

本研究系统分析牛FABP基因家族序列信息,为阐明FABP在脂肪合成与代谢中的作用奠定基础。运用生物信息学方法通过保守结构域搜索鉴定了牛的FABP基因,分析FABP基因理化性质、基因结构、系统进化关系和表达情况等。鉴定到11个FABP基因家族成员,分布在牛的第2、6、7、9、11和14号染色体上,由2或4个外显子组成,编码由127~175个氨基酸残基组成的蛋白质。FABPs不存在信号肽和跨膜结构域,属于亲水性蛋白。进化分析表明家族中同一成员的基因结构和结构域相对保守,氨基酸序列同源性高。蛋白互作分析显示FABPs与PPAR家族、LIPE和NCMAP等与脂肪酸及其衍生物代谢相关的蛋白质联系紧密。FABP家族中各成员的组织表达模式差异较大,其中FABP2、FABP9和FABP12基因表达具有组织特异性。牛FABP基因具有保守的基因结构和蛋白结构,它们可能在脂肪(酸)合成代谢中起着重要作用。

HPA轴抑制大鼠感染性休克模型的建立及四逆汤对该模型的作用

目的:复制HPA轴抑制大鼠感染性休克模型,探讨四逆汤对该模型的影响。方法:观察四逆汤对皮质酮致HPA轴抑制大鼠模型的影响,测定血清CORT、ACTH含量、肾上腺指数。取大鼠肾上腺做组织学病理检查,在HPA轴抑制模型基础上用LPS(4mg/kg)造成感染性休克模型,观察四逆汤的作用,记录休克前后血压变化。结果:每天1次,连续14d,皮下注射10mg/kg皮质酮,血清CORT含量低于正常组(P<0.05);与模型组比,四逆汤高、低剂量组大鼠血清CORT含量升高(P<0.05,P<0.01),四逆汤高剂量组血清ACTH含量升高(P<0.05),肾上腺重量增加(P<0.05),四逆汤高、低剂量组均能改善HPA轴抑制大鼠肾上腺被膜皱缩,球状带细胞、束状带细胞体积缩小、数目减少,胞质内脂滴空泡增多的状况;与模型组相比,阳性组(5mg/kgDEX)、四逆汤预防给药、治疗给药组,能抑制LPS(4mg/kg)致感染性休克大鼠的血压下降(P<0.01)。结论:四逆汤能改善HPA轴抑制状态,能减轻长期外源性GC造成肾上腺萎缩程度;改善HPA轴抑制感染性休克模型大鼠血压的下降。

角蛋白启动子荧光素酶表达载体的构建及其表达活性分析

角蛋白14(K14)和角蛋白5(K5)主要在毛囊基质和复层鳞状上皮基底层的角质细胞里表达。这两个启动子已被广泛应用于毛囊特异表达外源基因的转基因小鼠模型的研究中,为了能将其应用于转基因绵羊生产,探讨基因对绵羊毛囊发育的影响,从人基因组中克隆得到K14和K5启动子,利用不同的报告基因在细胞水平分析各启动子的表达活性。结果表明,这两个启动子在不同细胞系中都能驱动外源基因的表达,而且K14启动子在小鼠皮肤细胞系JB6-C41中的表达活性高于其他细胞。

药物的毒性反应与镇痛作用假阳性关系的探讨

目的：探究药物毒性在镇痛实验热板法中出现假阳性反应剂量与半教致死量（1ethal dose 50，LD。）之间的关系，为镇痛药的筛选提供依据。方法：选取敌敌畏、四氯化碳叉硫酸阿托品3种具有毒性但无中枢镇痛作用的受试物，采用改良寇氏法测定其半数致死量（1ethal dose 50，LDs。），同时用热板法检测3个受试物的痛阅值，分析其LD50与“镇痛”剂量之间的关系。结果：当3个受试物的“镇痛”剂量为其LD50的15～～10^-1时，能显著提高热板致小鼠痛觉反应的痛闽值（P〈0．05，P〈0．01），从而出现镇痛作用假阳性结果。结论：药物的毒性与镇痛假阳性反应有一足的相关性，用热板法筛选镇痛药物时，若药物剂量在其LD50的15～10^-1区间时所出现的镇痛作用有可能是因为药物的毒性反应造成的镇痛实验假阳性结果。

傣药“雅解沙把”对醉酒小鼠平衡失调的影响

目的:观察"雅解沙把"对小鼠醉酒平衡失调的改善作用。方法:采用转棒法和爬杆法建立小鼠醉酒平衡失调模型,观察"雅解沙把"对模型小鼠转棒时间、转棒圈数、爬杆时间及爬杆时行为学等级评分的影响。结果:小鼠以15mL/kg.bw的容量灌胃给予56°酒精可造成平衡失调,"雅解沙把"3.51g生药/kg剂量灌胃给药,能明显延长小鼠在转棒上的停留时间,增加滚棒圈数;能不同程度降低酒后30,60,90min爬杆行为障碍的评分等级。结论:"雅解沙把"能明显改善醉酒小鼠的平衡失调状态。

1例头孢哌酮钠他唑巴坦钠过敏性休克病人的急救护理

头孢哌酮钠他唑巴坦钠为临床常用抗生素之一,常见不良反应为胃肠道反应、皮肤反应等,停药后即可消失.该药引起过敏性休克者罕见报道,以“头孢哌酮钠他唑巴坦钠”和“过敏”为关键词在万方医学网上未搜索到相关文献,在中国医院知识总库（CHKD）搜索到相关文献仅2篇[1,2].近期我院成功抢救1例由该药引起的过敏性休克.现报道如下.

地震伤员骨折早期运动疗法康复

目的探讨地震中骨折伤员的早期康复方法。方法对11例地震中骨折伤员的康复进行回顾性分析。结果11例伤员康复效果满意。结论地震伤员骨折早期运动疗法康复治疗取得了良好的效果。

电针结合运动疗法对急性脑卒中患者肢体功能的影响

目的探讨电针结合运动疗法对急性脑卒中患者肢体运动功能的影响。方法 63例急性脑卒中偏瘫患者随机分成治疗组32例和对照组31例,治疗组给予电针和运动疗法;对照组仅给予运动疗法。2组患者均常规行药物治疗,分别于治疗前及治疗后1个月评定2组患者的运动功能。结果治疗后,2组患者的肢体Fugl-Meyer运动功能积分、Barthel指数均有改善,但治疗组疗效优于对照组(P<0.01)。结论电针结合运动疗法可更好地促进急性脑卒中患者肢体运动功能的恢复。

维生素E对鼠海马神经元细胞的抗氧化损伤作用(英文)

目的观察维生素E对老年痴呆(Alzheimer'sdisease)的治疗作用,研究氧化损伤对鼠海马神经元细胞的损伤作用及维生素E对其氧化损伤的保护作用。方法用氧化(H2O2)、维生素E处理后氧化的方法对鼠海马神经细胞(HT-22)进行分组处理。用二维电泳法、蛋白银染法及特殊氧化蛋白免疫染色法探测被氧化的蛋白。结果氧化处理12h后出现细胞生存率明显下降31.19%;经维生素E处理后再氧化处理的细胞生存率几乎达到正常组水平。经H2O2氧化处理的鼠海马神经元细胞的氧化蛋白数目增加了,而维生素E提前处理过的那组没有增加。结论维生素E对鼠神经元细胞的氧化损伤起保护作用,是有效的抗氧化治疗剂。

解虑安神汤提取部位抗焦虑作用的研究

目的:筛选解虑安神汤抗焦虑作用的提取部位。方法:采用小鼠高架十字迷宫和爬梯实验筛选解虑安神汤抗焦虑作用的提取部位。结果:在小鼠高架十字迷宫实验中,解虑安神汤及其乙酸乙酯提取部位、正丁醇提取部位均能增加小鼠进入开臂百分比及开臂停留时间百分比,但对总入臂数无明显影响;在小鼠爬梯实验中,解虑安神汤及其乙酸乙酯提取部位、正丁醇提取部位在不减少小鼠爬梯数的情况下,能明显减少小鼠举前足次数。结论:解虑安神汤乙酸乙酯提取部位、正丁醇提取部位有抗焦虑的作用,在抗焦虑剂量下,对小鼠运动活力无影响。

芪花降糖方对四氧嘧啶致小鼠糖尿病模型的影响

目的:研究民族药芪花降糖方对四氧嘧啶小鼠糖尿病模型的影响。方法:小鼠尾静脉注射四氧嘧啶复制糖尿病小鼠模型,以二甲双胍为阳性对照,研究芪花降糖方灌胃给药对糖尿病小鼠血糖的影响。结果:芪花降糖方对糖尿病小鼠有明显降血糖作用,与模型组比较差异有显著性意义(P<0.05)。结论:芪花降糖方能降低糖尿病小鼠的血糖,值得进一步深入研究。