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一种新型疟疾核酸疫苗生产工艺的初步研究 被引量:3
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作者 胥全彬 任冽 +8 位作者 张艳红 黄维 靳彦文 李晓荣 李平 钟辉 刘传暄 马清钧 曹诚 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期75-79,共5页
疟疾是危害人类健康和生命的主要寄生虫病之一,寻找合适的疫苗一直是该病控制的重要方向。在疟疾核酸疫苗方面作了系列尝试,取得较好研究结果,并最终构建了以胸腺嘧啶合成酶基因为筛选标记的、具有大肠杆菌平衡致死特征的新一代疟疾核... 疟疾是危害人类健康和生命的主要寄生虫病之一,寻找合适的疫苗一直是该病控制的重要方向。在疟疾核酸疫苗方面作了系列尝试,取得较好研究结果,并最终构建了以胸腺嘧啶合成酶基因为筛选标记的、具有大肠杆菌平衡致死特征的新一代疟疾核酸疫苗pThyAAWTE。对影响工程菌高密度发酵的几个因素进行了分析,所优化程序可使工程菌发酵密度达OD60 0 60以上;此外,还对质粒初步纯化过程中的几个重要参数进行了分析,初步结果表明,悬浮液体积(ml) :菌体湿重(g)在2 :1以上,对质粒的得率没有明显影响;碱裂解时间在一定范围内不影响质粒的质量;合适的悬浮液体积/裂解液/中和液比能明显提高质粒产量;用优化程序所提取的质粒其产量与试剂盒提取的量相当。为pThyAAWTE的大规模纯化打下了基础。 展开更多
关键词 疟疾 核酸疫苗 生产工艺 胸腺嘧啶合成酶基因 高密度发酵 质粒纯化
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临床应用重组SARS病毒双抗原夹心诊断试剂盒的检测效果评价 被引量:1
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作者 刘萱 李平 +7 位作者 石玉玲 易艳萍 任冽 匡铁吉 段昭辉 王云龙 马清钧 曹诚 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期172-174,共3页
It is necessary to establish a rapid and accurate diagnostic method for controlling the epidemic of severe acute respiratory syndrome (SARS). Cooperating with Henan Bioengineering Research Center, we developed a new d... It is necessary to establish a rapid and accurate diagnostic method for controlling the epidemic of severe acute respiratory syndrome (SARS). Cooperating with Henan Bioengineering Research Center, we developed a new diagnostic kit for antibodies to SARS virus based on antigen-capturing ELISA. Here we report the clinical detection results obtained from several hospitals which used this diagnostic kit for SARS diagnosing. Comparing with other detection kits now used, the antigen-capturing ELISA has stronger specificity and higher sensitivity, and more fits for rapid confirming and diagnosing of SARS cases, SARS epidemiological investigation and SARS epidemic source research. 展开更多
关键词 严重急性呼吸综合征 SARS 病毒 双抗原夹心法 诊断试剂盒 血清标本
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羊抗人IgG的纯化及其在抗-HCV检测中的应用 被引量:3
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作者 陈竞新 唐立君 +2 位作者 张立新 任冽 淡志毅 《生物技术通讯》 CAS 2001年第2期109-111,共3页
单独或联合应用辛酸沉淀、饱和硫酸铵沉淀、阴离子交换等方法对羊抗人IgG进行纯化 ,对纯化前后抗体的纯度和免疫学活性进行比较 ,并与辣根过氧化物酶连接 ,作为二抗用于抗 HCV的ELISA检测。结果表明 ,不同方法纯化的抗体其纯度和免疫... 单独或联合应用辛酸沉淀、饱和硫酸铵沉淀、阴离子交换等方法对羊抗人IgG进行纯化 ,对纯化前后抗体的纯度和免疫学活性进行比较 ,并与辣根过氧化物酶连接 ,作为二抗用于抗 HCV的ELISA检测。结果表明 ,不同方法纯化的抗体其纯度和免疫学活性具有一定程度的差别 ,其中经辛酸 +饱和硫酸铵沉淀纯化的抗体为最佳 ,凝胶扫描纯度为 98.0 5 % ,比活性近 180 0 ,为纯化前的 6.8倍。用辣根过氧化物酶标记后 ,作为酶标二抗检测HCV阴性和阳性标准血清各 4 0份 ,阴性符合率为 97.5 % ,阳性符合率为 95 % ,可用于抗 HCV的ELISA检测。 展开更多
关键词 抗体 纯化 标记 丙型肝炎病毒抗体 酶联免疫吸附分析 免疫检测
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鼠抗人内皮抑素单克隆抗体的制备与鉴定
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作者 冯玉梅 冯怡 +3 位作者 张艳红 任冽 曾昭淳 马清钧 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期580-581,共2页
目的:制备抗人内皮抑素的单克隆抗体(mAb),为深入研究内皮抑素的作用机制提供一种有用的试剂。方法:以毕赤酵母表达的内皮抑索为免疫原免疫BALB/c小鼠,采用B细胞杂交瘤技术,以间接ELISA法筛选分泌抗人内皮抑素的特异性mAb的杂交瘤细胞株... 目的:制备抗人内皮抑素的单克隆抗体(mAb),为深入研究内皮抑素的作用机制提供一种有用的试剂。方法:以毕赤酵母表达的内皮抑索为免疫原免疫BALB/c小鼠,采用B细胞杂交瘤技术,以间接ELISA法筛选分泌抗人内皮抑素的特异性mAb的杂交瘤细胞株,并诱生腹水。腹水中的mAb采用 Protein A Sepharose CL-4B进行纯化。以标准的抗Ig血清做ELISA,鉴定mAb的Ig类、亚类及型;用免疫印迹法鉴定mAb的特异性。结果:获得1株可分泌抗人内皮抑素mAb的杂交瘤细胞株4E7,该株杂交细胞分泌的mAb属于IgGl(λ型)。腹水mAb的效价为1×10-4-1×10-6,纯化后大于1×10-10。免疫印迹结果显示,mAb 4E7可特异性地与酵母及大肠杆菌表达的内皮抑素起反应,而与bFGF等其他细胞因子不发生交叉反应。结论:分泌抗人内皮抑素mAb杂交瘤细胞株的建立,为进一步研究奠定了基础。 展开更多
关键词 内皮抑素 单克隆抗体 杂交瘤
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