丹酚酸B对糖尿病大鼠肾纤维化的改善作用及其机制

目的观察丹酚酸B对糖尿病大鼠肾纤维化的影响,并探讨其可能机制。方法采用高糖高脂饮食,合并腹腔注射链脲佐菌素(STZ)的方法建立糖尿病大鼠模型。将糖尿病大鼠随机分为模型组、丹酚酸B低、高剂量组(80、160 mg·kg^(-1))。丹酚酸B各组每天灌胃给予相应剂量药物,正常对照组和模型组灌胃相应容量生理盐水,连续6周。实验结束时检测大鼠空腹血糖(FBG)、血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、尿微量白蛋白(UAlb),以及血清丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(TAC)和超氧化物歧化酶(SOD)水平;Masson染色法观察肾组织胶原纤维水平;ELISA法检测肾组织Ⅰ型和Ⅲ型胶原含量;Western blot法检测肾组织转化生长因子β1(TGF-β1)、p-Smad2和Smad7蛋白水平。结果丹酚酸B可明显减少糖尿病大鼠肾组织胶原沉积,降低FBG、BUN、UAlb、SCr、MDA及TGF-β1、p-Smad2蛋白水平,使血清TAC、SOD活性和肾组织Smad7蛋白水平明显升高(P<0.01或P<0. 05)。结论丹酚酸B可明显减轻糖尿病大鼠肾纤维化,改善肾功能,其机制与改善氧化应激状态、调控TGF-β1/Smad信号通路有关。

丹酚酸B对间歇性高糖诱导的JNK活化和INS-1细胞凋亡的影响

目的观察丹酚酸B(Salvianolic acid B,Sal B)对间歇性高糖诱导的大鼠胰岛素瘤细胞(INS-1)c-Jun氨基末端激酶(JNK)活化和细胞凋亡的影响。方法 INS-1细胞与丹酚酸B预孵24 h后暴露于间歇性高糖(11.1 mmol·L^(-1)12 h,33.3 mmol·L^(-1)12 h)72 h。MTT法测定细胞活力,ELISA法测定葡萄糖刺激的胰岛素分泌能力,荧光探针DCFH-DA检测细胞内活性氧(ROS)水平,流式细胞术检测细胞凋亡水平,Western blot法检测胰十二指肠同源盒-1(PDX-1)蛋白表达和JNK活化水平。结果丹酚酸B可明显减轻间歇性高糖诱导的INS-1细胞损伤和凋亡(P<0.05,P<0.01),提高葡萄糖刺激的胰岛素分泌能力(P<0.05,P<0.01);与丹酚酸B预孵可明显降低细胞内ROS水平、抑制JNK活化,并提高PDX-1蛋白表达水平(P<0.05,P<0.01)。结论丹酚酸B可有效减轻间歇性高糖诱导的INS-1细胞损伤和凋亡,提高胰岛素分泌水平,其机制可能与降低细胞内ROS水平、抑制JNK活化和上调PDX-1蛋白表达有关。

丹蛭降糖胶囊对糖尿病血糖波动模型大鼠心肌纤维化的影响

目的:探讨丹蛭降糖胶囊对糖尿病血糖波动模型大鼠心肌纤维化的影响及其可能机制。方法:大鼠腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病模型,并在此基础上通过错时给予胰岛素或葡萄糖建立糖尿病血糖波动模型。在给予丹蛭降糖胶囊治疗6 w后,测定大鼠心脏指数,ELISA法测定心肌组织血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、Ⅰ型和Ⅲ型胶原及转化生长因子β_1(TGF-β_1)水平,Western blot法检测心肌组织Smad3磷酸化水平和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶组织抑制物-2(TIMP-2)蛋白水平,比色法检测心肌组织总抗氧化能力(TAC)和丙二醛(MDA)水平。结果:给予丹蛭降糖胶囊治疗6 w后,模型大鼠心脏指数和心肌组织Ⅰ、Ⅲ型胶原含量较模型组显著降低(P<0.05或P<0.01),心肌组织AngⅡ、TGF-β_1及磷酸化Smad3水平也显著降低(P<0.05或P<0.01);同时丹蛭降糖胶囊能显著升高模型大鼠心肌组织MMP-2蛋白表达水平,降低心肌组织TIMP-2蛋白表达水平,并显著提高心肌组织总抗氧化能力,减少脂质过氧化产物MDA含量(P<0.05或P<0.01)。结论:丹蛭降糖胶囊能显著抑制糖尿病血糖波动模型大鼠心肌纤维化,其机制与增强心肌组织抗氧化能力、抑制心肌局部RAS激活及TGF-β_1/Smad3信号通路活化、调控MMP-2/TIMP-2蛋白表达水平有关。

芝麻素含药血清对血管紧张素Ⅱ诱导大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的:观察芝麻素含药血清对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导大鼠心肌细胞凋亡的影响,并探讨其可能机制。方法:培养H9C2大鼠心肌细胞,与芝麻素含药血清或空白血清预孵12 h后,加入AngⅡ孵育24 h。MTT法检测心肌细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot法检测BCL-2、BAX、Caspase-3、SOD和p47phox蛋白表达水平,比色法测定细胞总抗氧化能力、细胞内活性氧(ROS)水平和丙二醛(MDA)含量。结果:芝麻素含药血清预孵可显著改善AngⅡ诱导的心肌细胞凋亡和活力损伤(P<0.05或P<0.01),下调BAX、Caspase-3及p47phox蛋白表达,上调BCL-2、SOD蛋白表达水平(P<0.05或P<0.01)。此外,芝麻素含药血清可显著提高心肌细胞总抗氧化能力降低细胞内ROS和培养上清MDA含量(P<0.05或P<0.01)。空白血清对上述指标均无显著影响。结论:芝麻素可显著抑制AngⅡ诱导的心肌细胞凋亡和活力损伤,其机制与改善氧化应激状态、调节BCL-2/BAX蛋白表达水平,进而下调Caspase-3蛋白表达有关。

丹酚酸B对波动高糖诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的影响

目的:观察丹酚酸B对波动高糖诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡的影响,并探讨其可能机制。方法:HUVECs与丹酚酸B孵育24 h后暴露于波动高糖(5.5 mmol/L 12 h,33.3 mmol/L 12 h)72 h。MTT法检测HUVECs活力,比色法检测NO、细胞总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)及Caspase-3水平,流式细胞术检测细胞凋亡,荧光显微镜观察细胞内活性氧(ROS)水平,Western blot法检测NOX4、p-e NOS、BAX及BCL-2蛋白水平。结果:丹酚酸B可显著抑制波动高糖诱导的HUVECs凋亡,增强细胞活力,上调p-e NOS蛋白水平,促进NO释放,上调BCL-2蛋白表达,下调BAX蛋白水平,降低Caspase-3活性,提高细胞总抗氧化能力,降低NOX4蛋白表达水平,降低细胞内ROS水平和MDA含量(P<0.05或P<0.01)。结论:丹酚酸B可显著减轻波动高糖诱导的HUVECs损伤与凋亡,其机制与改善氧化应激状态、调节BCL-2/BAX蛋白表达水平,进而下调Caspase-3活性有关。

丹蛭降糖胶囊对波动高糖诱导的INS-1细胞凋亡和胰岛素分泌的影响

目的探讨丹蛭降糖胶囊(丹皮、太子参、生地黄、水蛭等)对波动高糖诱导的大鼠胰岛素瘤细胞(INS-1)凋亡和胰岛素分泌功能的影响,并探讨其可能机制。方法 INS-1细胞与丹蛭降糖胶囊含药血清和对照血清预孵24 h后暴露于波动高糖(11.1 mmol/L 12 h,33.3 mmol/L 12 h)72 h。MTT法测定INS-1细胞活性,ELISA法测定胰岛素释放水平,流式细胞术检测细胞凋亡及细胞内活性氧(ROS)水平,Western blot法检测胰十二指肠同源盒基因-1(PDX-1)蛋白表达水平,比色法测定细胞总抗氧化能力(TAC)和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果含丹蛭降糖胶囊血清可明显减轻波动高糖诱导的INS-1细胞损伤、凋亡和胰岛素分泌功能障碍(P<0.05或P<0.01),上调PDX-1蛋白表达水平(P<0.01),并能显著提高细胞内SOD活性和总抗氧化能力,降低细胞内ROS水平。结论丹蛭降糖胶囊可有效减轻波动高糖诱导的INS-1细胞损伤和凋亡,改善胰岛素分泌功能,其机制与提高细胞抗氧化能力、降低细胞内ROS水平,进而上调PDX-1蛋白表达水平有关。

芝麻素对大鼠心肌缺血再灌损伤的保护作用

目的:探讨芝麻素对缺血再灌所致大鼠心肌损伤的保护作用及其可能机制。方法:SD大鼠50只随机分为正常对照组、模型组、假手术组、芝麻素低剂量组[80 mg/(kg·d)]及芝麻素高剂量组[160 mg/(kg·d)],每组10只。芝麻素组灌胃给予芝麻素7 d,每日1次,结扎冠状动脉左前降支建立心肌缺血再灌模型;假手术组大鼠只穿线,不接扎。HE染色观察心肌病理学变化,比色法测定血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平及心肌组织MDA、SOD水平。结果:芝麻素明显改善缺血再灌所致大鼠心肌损伤,减轻细胞水肿、变性、坏死及心肌间质炎症细胞浸润,降低血清CK、LDH水平(P<0.05或P<0.01)。芝麻素显著提高大鼠血清和心肌组织SOD活力,降低MDA水平(P<0.05或P<0.01),改善缺血再灌诱导的氧化应激。结论:芝麻素可明显改善缺血再灌所致大鼠心肌损伤,其机制与提高机体抗氧化能力、减轻缺血再灌所致氧化应激损伤有关。

芝麻素含药血清对血管紧张素Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞增殖和胶原分泌的影响

目的观察芝麻素含药血清对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌成纤维细胞增殖及胶原分泌的影响,探讨其可能机制。方法应用血清药理学方法制备大鼠含药血清,采用复合酶消化和差速贴壁法原代培养心肌成纤维细胞,MTT法测定芝麻素对AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞增殖的影响,ELISA法测定Ⅰ、Ⅲ型胶原含量与转化生长因子β1(TGF-β1)水平,比色法测定细胞总抗氧化能力(T-AOC)及丙二醛(MDA)含量,Western blot法测定Smad3活化水平。结果芝麻素含药血清可明显抑制AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞增殖及胶原分泌(P<0.05,P<0.01),降低TGF-β1含量及Smad3活化水平(P<0.05,P<0.01)。此外,芝麻素含药血清可明显提高成纤维细胞抗氧化能力,减少脂质过氧化产物MDA生成(P<0.05,P<0.01)。对照血清对上述各项指标均无明显影响。结论芝麻素含药血清可明显抑制AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞增殖与胶原分泌,其机制可能与改善氧化应激状态、调节TGF-β1/Smad信号通路有关。

新形势下遗体捐献接受站“五位一体”的发展方向

根据目前的社会发展状况,从社会经济和人文等方面对遗体捐献接受站设立地点及其中几所接受站的接受数量变化特点进行分析,探讨遗体捐献接受站的发展方向。我国大部分省市都建立了遗体捐献接受站,而绝大部分遗体捐献接受站设立在医学院校。遗体捐献接受站的遗体捐献登记数量呈递增趋势,部分遗体捐献接受站近3年的登记数超过前10年的总捐献量,为医学院校的发展提供了有力的基础教学和科研保障资源。随着21世纪高等医学院校的发展,国家对临床医疗体系人员的培养要求更高更严。遗体捐献接受站在教学、科研、临床医学转化、人文素质教育、社会公益五个方面发挥着重要作用,接受站未来将形成"五位一体"的发展趋势。遗体捐献接受站的宣传、服务和制度建设是促进发展的前提。

丹酚酸B对糖尿病大鼠血管舒张功能、NF-κB活化及炎症因子表达的影响

目的:研究丹酚酸B对糖尿病大鼠血管舒张功能的改善作用及其可能机制。方法:SD大鼠40只,采用高糖高脂饮食联合腹腔注射链脲佐菌素方法建立糖尿病大鼠模型(随机血糖>16.7 mmol/L)。将糖尿病大鼠随机分为模型组、Sal B高剂量(160 mg·kg^(-1)·d^(-1))组和Sal B低剂量(80 mg·kg-1·d-1)组,另取10只正常大鼠作为对照组。丹酚酸B组每日灌胃给予相应剂量丹酚酸B,共6周。采用离体动脉环实验检测血管舒张功能,HE染色观察大鼠主动脉病理学变化,ELISA法测定血清白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及C反应蛋白(CRP)水平,比色法测定血管组织中总抗氧化能力、丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)水平,Western blot法检测主动脉细胞间黏附分子1(ICAM-1)和单核细胞趋化因子1(MCP-1)的蛋白表达水平以及核因子κB(NF-κB)的活化水平。结果:丹酚酸B明显减轻糖尿病大鼠主动脉病变,改善血管舒张功能,提高血管组织总抗氧化能力和NO水平,降低组织MDA以及血清IL-6、TNF-α和CRP水平(P<0.05或P<0.01),并减少主动脉NF-κB p65亚基核转位及ICAM-1和MCP-1蛋白表达水平(P<0.05或P<0.01)。结论:丹酚酸B可明显改善糖尿病大鼠血管舒张功能,其机制可能与改善机体氧化应激状态、抑制NF-κB活化而减轻血管炎性病变有关。

芝麻素预处理激活Akt/eNOS通路减轻大鼠心肌缺血-再灌注损伤

目的:观察芝麻素对大鼠心肌缺血-再灌注损伤的改善作用,并探讨其可能机制。方法:将50只大鼠随机分为正常对照组、假手术组、模型组及芝麻素高(160 mg/kg)、低(80 mg/kg)剂量组,每组10只,连续给药7 d。采用冠状动脉左前降支结扎40 min再灌注120 min的方法建立大鼠心肌缺血-再灌注损伤模型,比色法检测血清心肌肌钙蛋白Ⅰ(c TnⅠ)、乳酸脱氢酶(LDH)及血清和心肌组织总抗氧化能力(TAOC)、一氧化氮(NO)水平,并检测心肌组织Caspase-3活性;TUNEL染色法检测心肌细胞凋亡水平;Western blot法检测心肌组织内皮型一氧化氮合酶(eNOS)磷酸化水平、蛋白激酶B(Akt)蛋白磷酸化水平及超氧化物歧化酶(SOD)蛋白表达水平。结果:芝麻素预处理能明显改善缺血-再灌注所致大鼠心肌损伤,降低血清c TnⅠ、LDH水平,提高血清及心肌组织总抗氧化能力和NO水平(P<0.05或P<0.01),并能显著提高心肌组织SOD蛋白表达及Akt、eNOS蛋白磷酸化水平,降低Caspase-3活性,减少心肌细胞凋亡(P<0.05或P<0.01)。结论:芝麻素预处理能减轻缺血-再灌注所致大鼠心肌损伤,其机制与增强机体抗氧化能力、激活Akt/eNOS信号通路、增加NO合成,进而抑制心肌细胞凋亡有关。

芝麻素对AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞增殖和胶原分泌的影响

目的:观察芝麻素对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌成纤维细胞(CF)增殖及胶原分泌的影响,并探讨其可能机制。方法:应用双酶消化和差速贴壁法获得纯化的心肌成纤维细胞,采用MTT法测定芝麻素对AngⅡ诱导的成纤维细胞增殖的影响,羟脯氨酸法测定胶原含量,ELISA法测定转化生长因子β1(TGF-β1)水平,比色法测定细胞总抗氧化能力(T-AOC)及丙二醛(MDA)含量。结果:芝麻素可显著抑制AngⅡ诱导的成纤维细胞增殖和胶原分泌,抑制TGF-β1表达(P<0.05或P<0.01),同时可提高细胞抗氧化能力,减少脂质过氧化产物MDA含量(P<0.05或P<0.01)。结论:芝麻素可明显抑制AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞增殖和胶原合成,其机制可能与提高成纤维细胞的抗氧化能力、减少氧化损伤、下调TGF-β1蛋白表达有关。

丹酚酸B抑制波动高糖诱导的糖尿病大鼠心肌细胞凋亡

目的观察丹酚酸B对波动高糖诱导的糖尿病大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法采用高糖高脂饮食合并一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)的方法建立大鼠糖尿病模型,通过错时给予胰岛素或葡萄糖建立血糖波动模型,给药组大鼠按照160 mg/kg及80 mg/kg的剂量给予丹酚酸B 6周。实验结束前一天检测大鼠空腹血糖及血糖波动情况。TUNEL法观察大鼠心肌细胞凋亡情况,ELISA法检测血清肌酸激酶同工酶(CK⁃MB)以及心肌组织天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶3(caspase⁃3)表达,免疫印迹法检测心肌组织Bcl⁃2、Bax蛋白表达。结果丹酚酸B能够降低糖尿病大鼠空腹血糖(P<0.05,P<0.01),减轻波动高糖诱导的糖尿病大鼠心肌细胞凋亡,降低血清CK⁃MB水平(P<0.01)。丹酚酸B上调Bcl⁃2蛋白表达(P<0.05,P<0.01),抑制Bax(P<0.05,P<0.01)、caspase⁃3蛋白表达(P<0.01)。结论丹酚酸B可能通过调节凋亡相关蛋白表达抑制波动高糖诱导的糖尿病大鼠心肌细胞凋亡。

丹酚酸B改善糖尿病血糖波动模型大鼠心肌损伤的作用

目的观察丹酚酸B(salvianolic acid B,Sal B)对糖尿病血糖波动模型大鼠心肌损伤的改善作用,并探讨其可能机制。方法采用高糖高脂饮食合并腹腔注射链脲佐菌素(STZ)的方法建立大鼠糖尿病模型,在此基础上通过错时给予胰岛素或葡萄糖建立糖尿病血糖波动模型,治疗组分别给予丹酚酸B 160 mg/kg和80 mg/kg。6周后,检测大鼠血糖水平,HE染色法观察大鼠心肌组织病理学改变,ELISA法检测心肌组织白介素-1β(IL-1β)、白介素-18(IL-18)、天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶1(Caspase-1)以及血清白介素-6(IL-6)、乳酸脱氢酶(LDH)水平,比色法检测心肌组织总抗氧化能力(TAC),Western blot法检测心肌组织核转录因子-κB(NF-κB)活化、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白-3(NLRP3)蛋白表达水平。结果丹酚酸B降低糖尿病血糖波动模型大鼠空腹血糖(P<0.05),减轻心肌损伤,提高心肌组织抗氧化能力(P<0.01)。丹酚酸B降低糖尿病大鼠LDH、IL-6、IL-1β、IL-18水平(P<0.01),抑制NF-κB活化、NLRP3蛋白表达及Caspase-1水平(P<0.05或P<0.01)。结论丹酚酸B能够改善糖尿病血糖波动模型大鼠心肌损伤,其机制可能与抑制NF-κB/NLRP3/Caspase-1通路,改善心肌炎症状态有关。

番红花酸对人脐静脉内皮细胞VCAM-1表达和单核-内皮细胞黏附的影响

番红花酸为天然类胡萝卜素类化合物,具有抗氧化、抗动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)等多种药理作用,但其抗AS作用机制未明。本研究采用体外培养人脐静脉内皮细胞,观察番红花酸(0.1、1、10μmol·L-1)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ,0.1μmol·L-1)诱导的血管细胞黏附分子-1(vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)表达和单核内皮细胞黏附的影响,并观察番红花酸对核转录因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)活化的影响。结果显示,番红花酸可明显减少AngⅡ诱导的VCAM-1表达及单核-内皮细胞黏附(P<0.05,P<0.01),降低细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平和NF-κB活化水平(P<0.05,P<0.01)。番红花酸还可明显增强内皮细胞总抗氧化能力(P<0.01)和超氧化物歧化酶活性(P<0.05,P<0.01)。这些结果提示,番红花酸可有效抑制VCAM-1表达和单核-内皮细胞黏附,其机制可能与番红花酸增强内皮细胞抗氧化能力、减少细胞内ROS水平,进而抑制NF-κB活化有关。

丹酚酸B对糖尿病血糖波动模型大鼠胰岛细胞的保护作用

目的观察丹酚酸B对糖尿病血糖波动模型大鼠胰岛细胞的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法采用高糖高脂饮食合并ip链脲佐菌素(STZ)的方法建立大鼠糖尿病模型,并在此基础上通过错时给予胰岛素或葡萄糖建立糖尿病血糖波动模型,丹酚酸B各组分别给予丹酚B 160、80 mg/kg。血糖波动6周后,检测大鼠空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)和糖化血红蛋白(GHb)水平,并检测大鼠血清和胰腺组织总抗氧化能力(TAC)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平,HE染色法观察大鼠胰岛组织病理学改变,TUNEL染色法检测大鼠胰岛细胞凋亡情况,Western blotting法检测胰腺组织胰十二指肠同源盒-1(PDX-1)蛋白表达水平。结果糖尿病大鼠FBG、GHb及血清和胰腺组织MDA水平较对照组明显升高,而FINS水平及血清和胰腺组织TAC、SOD活性显著下降(P<0.01)。同时,糖尿病大鼠胰岛数量减少,胰岛体积缩小,胰岛细胞凋亡明显增多(P<0.01),胰腺组织PDX-1蛋白表达水平显著下降(P<0.01)。给予丹酚酸B 6周后,大鼠FINS水平,血清及胰腺组织中TAC、SOD活性均明显升高,而FBG、GHb、血清及胰腺组织中MDA水平明显下降(P<0.05、0.01)。丹酚酸B明显改善大鼠胰岛病理学改变,减少胰岛细胞凋亡,增加PDX-1蛋白表达水平(P<0.05、0.01)。结论丹酚酸B可明显减轻糖尿病血糖波动模型大鼠胰岛病变,改善胰岛功能,其作用机制可能与改善氧化应激、上调PDX-1蛋白表达水平,进而抑制胰岛细胞凋亡有关。