复苏周期单囊胚移植的影响因素分析

目的研究玻璃化复苏囊胚移植后的妊娠结局与冷冻前囊胚质量、发育速度的相关性,探讨单囊胚移植的可能性。方法回顾分析105例复苏周期单囊胚移植患者的临床资料,观察发育速度、囊胚质量、内细胞团(ICM)/滋养外胚层(TE)评分对妊娠结局的影响。结果第5、6天囊胚间复苏后存活率、移植后妊娠率的差异均无统计学意义(98.0%,54.5%vs 97.0%,52.5%)。优质囊胚移植后妊娠率(44/70,62.9%)显著高于非优质囊胚(12/35,34.3%)。ICM评分为A、B级的囊胚移植后妊娠率差异无统计学意义(70.6%vs 58.0%),但均显著高于C级胚胎(21.1%)。TE评分越低,妊娠率有下降趋势但差异无统计学意义。结论复苏周期单囊胚移植妊娠率与囊胚质量有关,与囊胚发育速度无关。ICM评分而非TE评分与妊娠结果显著相关。复苏周期单个优质囊胚移植后妊娠率高,提示单囊胚移植可行。

表皮生长因子受体单克隆抗体抗肺癌作用的研究

目的 实验观察表皮生长因子受体单克隆抗体(EGFR McAb)egf/r3对肺癌的治疗作用。方法 体外细胞增殖抑制实验采用MTT法,裸鼠体内移植瘤采用同时治疗(T1组)与延后治疗(T2组)两种方案。结果 egf/r3 McAb对高表达EGFR的SPC-A1 和A549 肺癌细胞体外均具有增殖抑制作用,并呈剂量依赖性;以SPC-A1 进行裸鼠皮下移植做体内实验,至治疗结束,T1 组50 % 成瘤(3/6),对照组100 % 成瘤(6/6);至实验结束,T1组与T2 组瘤体抑制率分别为75 % 与67 % ,瘤重抑制率分别为65 % 与47 % 。病理切片显示治疗组肿瘤组织局部坏死,电镜示线粒体凝缩、嵴断裂、溶解。结论 egf/r3 McAb 部分抑制肺癌细胞成瘤,明显延缓已成瘤肺癌生长,具有一定的抗肺癌作用。其体内抗瘤效果强于体外。

颗粒细胞在玻璃化冷冻中对卵母细胞的影响

目的 采用开放式拉细麦管(open pulled straws, OPS) 法玻璃化冷冻技术, 探讨卵丘颗粒细胞对未成熟卵母细胞冻融后存活率及其发育能力的影响。方法 小鼠生殖泡期卵丘卵母细胞复合物(COC) 或完全去颗粒细胞后的裸卵(DO) 用OPS法玻璃化冻存, 复苏后行体外成熟培养(IVM); COC直接行IVM作为对照组。结果 COC及裸卵冻融后存活率(分别为69. 49%、77 .90%)、成熟率(分别为56 .10%、56. 74%) 无显著性差异, 但成熟率均显著低于对照组(82. 28%)。结论 在未成熟卵的玻璃化冷冻中颗粒细胞对卵母细胞冻存无保护作用。

针对HER2/neu的siRNA对非小细胞肺癌细胞生长的抑制作用

目的:构建针对HER2/neu的RNA干涉载体,观察对HER2/neu表达抑制及抑制后对非小细胞肺癌生长的影响.方法:设计和合成长度为64nt的脱氧寡核苷酸链,退火互补成双链,克隆至pSUPER质粒载体,转化DH5α菌株,提取质粒,转染过表达HER2/neu的肺腺癌细胞系SPCA1,RTPCR检测HER2/neu的mRNA表达,Westernblot和间接免疫荧光法检测HER2/neu的蛋白表达,FCM分析细胞周期变化,MTT法观察细胞生长.结果:肺腺癌细胞系SPCA1存在HER2/neu过表达;成功构建了HER2/neu特异性RNA干涉载体pSUPERsiHER2;瞬时转染SPCA1细胞,HER2/neu的mRNA及蛋白表达均降低;G1期细胞较亲代增加9.9%;肿瘤细胞增殖速度减慢(P<0.05).结论:成功构建了HER2/neuRNA干涉载体,转染后可有效降低肺腺癌细胞系SPCA1HER2/neu的mRNA转录及蛋白水平表达,阻滞转染细胞于G1期,造成转染细胞生长速度减慢,这有望为肺癌基因治疗提供一种选择手段.

^(99)Tc^m标记EGF受体单抗肺癌放免显像的实验研究

目的 研究99Tcm 标记表皮生长因子受体 (EGFR)单克隆抗体 (MAb)egf/r3在裸鼠体内的肺癌放射免疫显像 (RII)。方法 99Tcm 标记的还原型抗体egf/r3尾静脉注入荷瘤裸鼠 ,于不同时间行系列显像 ,采用感兴趣区法计算各时相T/NT值。于注射药物后 30h处死动物 ,计算抗体的生物分布、T/NT及NT/B值。结果 标记率为 99% ,胶体放射性为 3.87% ,放射性比活度为 34 8MBq/mg。注药后 3h瘤块显影 ,15～ 2 5h达浓聚高峰 ,T/NT比值最高达 4.5 9。除肝、脾及肾外 ,其他脏器放射性分布均较低。结论 99Tcm egf/r3显像时间早 ,T/NT比值高 ,图像清晰。

3株人肺癌细胞系表皮生长因子受体的表达及其意义

３株人肺癌细胞系表皮生长因子受体的表达及其意义任新玲１沈丽英１贾卫２苏丽２金伯泉２（１第四军医大学西京医院呼吸内科西安７１００３３２第四军医大学免疫学教研室）关键词肺肿瘤受体，表皮生长因子流式细胞仪中图号Ｒ７３４．２肿瘤细胞的无限增殖分化是一个复杂的...

抗表皮生长因子受体单克隆抗体抑制和杀伤肺癌细胞的机理

探讨表皮生长因子受体（EGF）单克隆抗体（egf／r3McAb）抑制和杀伤肺癌细胞机理．方法：细胞毒活性检测采用MTT法，移植瘤膜表面EGFR的检测采用免疫组化法．结果：egf／r3McAb可介导补体依赖的细胞毒作用（CDC），未能诱导出ADCC作用；egf／r3McAb致使肿瘤细胞表面EGFR下调，但抗体作用消失后，EGFR又恢复至原水平．结论：egf／r3McAb的抗瘤机理可能是多方面的：①下调EGFR表达水平；②抑制EGF与EGFR结合，降低EGFR介导的信号传导；③CDC的溶解瘤细胞作用．

肺癌细胞系表皮生长因子的自分泌调节作用

肺癌细胞系表皮生长因子的自分泌调节作用①７１００３３西安第四军医大学西京医院任新玲沈丽英金伯泉②马进③关键词肺肿瘤；表皮生长因子；自分泌环中国图书资料分类号Ｒ７３４．２细胞信号传导异常与肿瘤发生、发展有密切关系，表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）介导的细胞...

Egf/r3单克隆抗体治疗肺腺癌的实验研究

目的非小细胞肺癌(NSCLC)存在表皮生长因子受体(EGFR)过度表达。Egf/r3为EGFRMcAb,属IgC2a亚型,具有一定的治疗肺癌作用,但其机理尚不完全清楚。为更进一步全面了解Egf/r3对肺癌的治疗作用,本文以高表达EGFR的SPC-A-1和A549肺腺癌细胞系做为靶细胞,观察Egf/r3对肺腺癌细胞周期的影响、Egf/r3与CDDP和8-Mop是否存在协同抗肺癌作用。方法细胞周期检测采用流式细胞仪PI染色法分析,协同作用采用MTT法。结果SPC-A-1和A549G1期细胞分别增加5·0%和7·8%,S期分别减少5·6%和8·6%,G2-M期变化不明显。Egf/r3分别与CDDP和8-Mop联用,对SPC-A-1和A549杀伤率分别达到35%、39%和36%、39·5%。结论Egf/r3阻抑G1期癌细胞进入S期,使细胞同步化,增加了靶细胞对化疗药物的敏感性,减少癌细胞化疗后损伤修复,与CDDP、8-Mop存在协同抗肺腺癌作用。

如何准备一堂生动有趣、记忆深刻的临床医学精品课

课堂教学是教学工作中极为重要的一环,是精品课程建设中的主要内容之一。本文针对课堂教学的各个环节,总结了笔者在实施课堂教学过程中的做法,提出预先精心设计、开场亮点吸引、课堂内容丰富、结合实际工作、人文医德贯穿及重视课堂总结等措施,以确保授课质量。

军医大学本科生内科实习中的教学困境与对策探讨

对当前军医大学临床本科实习生实习、教学和管理中存在的一些问题进行了归纳和总结,对其产生的原因进行了分析,结合《本科医学教育全球标准》和2004年9月我国颁布的第一部《中国医学本科教育标准》（草案）和实际教学经验,提出军医大学本科生内科实习教学需要改革和完善的方面.

siRNA抑制HER2/neu过表达肺腺癌细胞生长和增殖

背景与目的:30%NSCLC存在HER2/neu过表达,与肿瘤发生、转移、肿瘤血管形成、抗凋亡及化疗耐药等有关。本文通过RNA干涉抑制肺腺癌细胞SPC-A-1 HER2/neu过表达,观察肿瘤细胞周期、增殖及集落形成能力的变化。方法:构建针对HER2/neu的siRNA重组质粒,稳定转染SPC-A-1,通过RT-PCR和W esternB lot检测HER2/neu表达;FCM分析细胞周期;MTT法观察细胞增殖,绘制细胞生长曲线;平板集落形成实验检测肿瘤细胞的集落形成能力。结果:成功构建了HER2/neu的siRNA重组质粒,稳定转染靶细胞后可显著降低HER2/neu表达;与亲代细胞相比,G0/G1期细胞增加17.1%,S期细胞减少12.8%;细胞生长速度减慢,集落S1抑制率达到49.0%。结论:针对HER2/neu的siRNA可以显著降低肺腺癌细胞过表达HER2/neu,肿瘤细胞阻滞于G0/G1期,造成细胞增殖减慢,集落形成能力明显下降。因此,siRNA对过表达HER2/neu肺癌的治疗具有潜在应用价值。

玻璃化溶液EG5.5对小鼠未成熟卵发育能力的影响

目的研究玻璃化溶液EG5·5对未成熟卵母细胞成熟、受精和发育能力的影响。方法小鼠成熟卵母细胞经玻璃化溶液EG5·5暴露处理但不予以冷冻保存,然后行体外成熟、体外受精和胚胎培养;新鲜的未成熟卵直接行体外成熟和受精作为对照组,比较两组卵母细胞的成熟率、受精、卵裂率和囊胚形成率。结果EG5·5暴露组卵母细胞的成熟率、受精率、卵裂率和囊胚形成率与对照组均无显著差异。结论EG5·5不影响未成熟卵的成熟、受精和进一步发育能力。

强化基本功训练,全面提高呼吸内科进修医师水平

我国现有从业医师整体质量不高，资源分配不合理，进修医师培训应主要定位于毕业后医学教育阶段，强调基本知识、基本技能的掌握，这对提高基层医疗单位诊疗水平，提高我国整体医师队伍素质具有重要意义。

微滴无保护剂玻璃化法冷冻附睾微量精子的研究

目的:探讨微滴无保护剂的玻璃化法冷冻经皮附睾穿刺抽吸术(PESA)所获微量精子的可行性及安全性。方法:通过比较微滴法冷冻(微滴组)和常规慢速冷冻(冷冻管组)这两种冷冻方法的复苏率、回收率及精子核DNA断裂发生率,评价两种冷冻方法的冷冻效果。结果:22例患者附睾精子标本经两种方法冷冻后,仅冷冻管组中有1例患者附睾精子标本中未见活动精子,余均有活动精子,冷冻管组与微滴组的复苏率均低,分别为(18.16±9.38)%和(21.99±10.95)%,两者差异无显著性(P>0.05)。冷冻管组与微滴组的回收率分别为(58.39±12.67)%和(70.82±14.94)%,两者差异有显著性(P<0.01)。22例患者附睾精子冷冻前都存在一定比例核DNA断裂,经单细胞凝胶电泳后出现典型的彗星精子,精子核DNA断裂发生率为(26.68±9.45)%。复苏后冷冻管组和微滴组精子核DNA断裂发生率分别为(28.68±12.54)%和(27.64±10.70)%,与冷冻前比较均未增加,差异均无显著性意义(P>0.05)。结论:微滴可作为微量精子冷冻的合适载体,并且微滴法无保护剂的玻璃化冷冻附睾微量精子可能是一种简单、安全而行之有效的冷冻方法。

卵裂期胚胎中的凋亡征象及其与胚胎形态的关系

目的评估体外授精的人卵裂期胚胎中是否存在凋亡,探讨卵裂期胚胎的凋亡征象与胚胎形态之间的关系。方法结合末端脱氧核苷酸转移酶介导dUTP缺口末端标记法(TUNEL)原位检测DNA凋亡和测定Caspase 3的表达水平,检测人卵裂期胚胎中的凋亡。并分析卵裂期胚胎中胞质碎片占胚胎总体积的比例和发育速度与TUNEL阳性率和Caspase 3的表达强度之间的关系。结果碎片比>20%组胚胎的凋亡率明显高于碎片比≤20%的胚胎(P<0.01),Caspase 3平均荧光强度在碎片比>50%组明显升高(P<0.05)。发育正常、迟缓和停滞胚胎之间胚胎凋亡率差异无显著性意义,发育停滞组的Caspase 3平均荧光强度高于发育正常和迟缓组(P<0.05)。结论人体外授精的卵裂期胚胎中存在凋亡征象,凋亡主要与胞质碎片有关,胚胎发育停滞可能是胚胎凋亡的早期表现。

精子冷冻环无保护剂玻璃化冷冻方法的初步研究

目的探讨精子冷冻环无保护剂玻璃化冷冻方法的可行性。方法正常精液标本上游处理后,进行常规冷冻和冷冻环无保护剂的玻璃化冷冻,复苏后分别从活力参数及电镜下超微结构等指标比较两种冷冻方法的效果。结果两种方法冷冻后精子存活率、活动率之间差异无显著性(48%∶48%;44.5%∶43.5%,P>0.05),但均较未冷冻的89%和88.5%明显下降(P<0.001)。超微结构亦较未冷冻时发生了一定的改变,但核结构基本保持完整。结论精子冷冻环无保护剂的玻璃化冷冻是一种简单、方便而行之有效的冷冻方法。

结合珠蛋白和铁蛋白在急性肺栓塞中的表达变化

目的研究急性肺栓塞时结合珠蛋白和铁蛋白的表达变化。方法采用RT-PCR方法检测急性肺栓塞大鼠模型肺组织中结合珠蛋白和铁蛋白mRNA水平的变化;采用Westernblot技术检测急性肺栓塞大鼠血清中结合珠蛋白和铁蛋白蛋白水平的变化;采用免疫散射比浊法测定58位肺栓塞/深静脉血栓(PE/DVT)患者和40例对照(对照组)血清中的结合珠蛋白和铁蛋白的蛋白水平。结果急性肺栓塞后大鼠肺组织中结合珠蛋白和铁蛋白mRNA水平逐渐升高,血清中结合珠蛋白和铁蛋白的蛋白水平也逐渐升高。PE/DVT病人血清中结合珠蛋白的蛋白浓度为2063·48±425·38mg/L,对照组为824·37±235·24mg/L(P<0·01);PE/DVT患者血清中铁蛋白的蛋白浓度为554·43±136·18μg/L,对照组为79·42±31·57μg/L(P<0·01)。结论急性肺栓塞后肺组织细胞增加了结合珠蛋白和铁蛋白的合成,导致这两种蛋白的血清水平明显升高,表明结合珠蛋白和铁蛋白对PE/DVT病人具有一定的诊断价值。

经皮附睾穿刺取精精子冷冻复苏后卵细胞胞质内单精子注射治疗无精子症的初步研究

目的:回顾性分析27例无精子症患者经皮附睾穿刺取精术(PESA)所获精子冷冻复苏后行卵细胞胞质内单精子注射(ICSI)治疗后的效果及妊娠结局。方法:将诊断性附睾穿刺以及PESA治疗周期ICSI后所剩余活精子以常规方法加以冷冻,将复苏后找到了足量活精子并行ICSI的病例归为冻精组,而采用新鲜PESA活精子ICSI的病例则归为对照组。比较冻精组与对照组的受精率、种植率、临床妊娠率,同时分析两组间的妊娠并发症、新生儿出生及畸形等情况。结果:冻精组15个周期、对照组100个周期分别注射MⅡ期成熟卵子163、1 157个,受精率冻精组显著高于对照组(84.05%vs73.29%,P<0.05),种植率、临床妊娠率则两组间差异无显著性(23.07%vs15.73%;53.33%vs37.00%,P>0.05),新生儿出生体重差异亦无显著性(P>0.05)。冻精组共妊娠8例,已分娩5例,继续妊娠3例。对照组妊娠37例,已分娩30例,1例死胎;继续妊娠3例;流产4例。两组均未出现重大的妊娠并发症及新生儿畸形。结论:采用PESA冷冻精子ICSI是治疗男性无精子症的一种经济、有效、安全的方法;但PESA冻精复苏率有待于进一步提高。

D2胚胎核状态影响胚胎质量和着床潜能

目的：研究第2d（D2）胚胎核状态对D3胚胎质量和胚胎着床潜能的影响，以评估其在体外受精-胚胎移植（IVF-ET）中的临床应用价值。方法：回顾性分析本院生殖中心2006年7-10月的409例常规IVF-ET／ICSI移植周期的胚胎。评估D2胚胎卵裂球的核特征，将胚胎分为A级（胚胎的每个卵裂球内均可见单核）、B级（胚胎至少有1个卵裂球内未见核）和C级[胚胎至少有1个卵裂球内见多核（≥12个核）]，比较各级胚胎的D3停滞胚胎率和优质胚胎率。并比较移植胚胎来自同-D2核类型的周期的临床妊娠率和着床率。结果：A级胚胎的D3停滞胚胎率低于B级和C级，优质胚胎率高于B级和C级（P〈0．01）。B级胚胎的停滞胚胎率低于C级，优质胚胎率高于C级（P〈0．01）。移植胚胎的D2核类型相同的周期共234例，其中移植胚胎均为A级胚胎的周期（A组）51例，移植胚胎均为B级胚胎的周期（B组）183例。A、B组间临床妊娠率差异无统计学意义（P〉0．05），但A组的着床率高于B组（P〈0．05）。结论：对D2胚胎进行核评估可预测胚胎的继续发育能力和着床潜能，将其与D3形态评估相结合，将有助于识别有活力的胚胎，减少移植胚胎数。