肿瘤免疫治疗疗效评价的新标准

目的:肿瘤免疫治疗近年来发展迅猛,已被越来越多的临床医生所认可,并广泛应用于多种恶性肿瘤的治疗。与传统的化疗不同,免疫治疗发生严重毒性反应的概率更低,患者耐受性更好,尤其对患者生活质量的改善作用更明显。但遗憾的是,目前临床上采用传统的肿瘤治疗评价体系对肿瘤免疫治疗疗效评价时往往不能令人满意,导致部分进入Ⅲ期临床试验的免疫治疗项目最后以失败告终。鉴于现有WHO或RECIST(response evaluation criteria in solid tumor)标准很难对肿瘤免疫治疗的临床疗效进行准确的解读和确切的评价,因此在2009年第23期的Clinical Cancer Research上专门刊载了由纽约Me-morial Sloan-Kettering癌症中心Wolchok教授等撰写的论文——《针对实体瘤免疫治疗疗效评价指南:免疫相关疗效评价标准》,深入探讨了肿瘤免疫治疗疗效评价新标准的意义和应用前景。本文以该论文为主,结合其他相关文献,对"肿瘤免疫疗效评价的新标准"这一肿瘤学界的热点问题作一介绍。

肺癌细胞总RNA转染的DC疫苗体外诱导肺癌患者特异性抗肿瘤免疫的实验研究

目的 :为了探讨肺癌细胞总RNA转染的DC疫苗体外诱导特异性抗肿瘤免疫的能力。方法 :采用分离肺癌患者外周血单核细胞体外诱导DC细胞 ,Trizol法提取肺癌细胞系Calu 6总RNA ,用脂质体包裹总RNA转染DC并诱导特异性CTL的扩增 ,LDH法和ELISA法检测CTL的杀伤活性和IFN γ分泌。结果 :经肺癌细胞总RNA转染的DC特异性表面标志及功能相关分子表达均上调 ,转染后的DC可显著刺激异体 自体T淋巴细胞增殖 ,诱导的特异性CTL对携带Calu 6抗原的靶细胞的杀伤率显著高于LAK细胞 ,再次接触相同抗原时其IFN γ分泌量显著增高。结论 :肺癌细胞总RNA转染的DC疫苗可在体外诱导出特异性抗肿瘤免疫。

外周血造血干细胞动员对循环血管内皮细胞的影响

目的 :探讨自体外周血干细胞动员对循环血管内皮细胞 (CirculatingEndothelialCells ,CECs)和循环血管内皮前体细胞 (CirculatingEndothelialPrecursors ,CEPs)的影响。方法 :采用流式细胞法检测 6 8例肿瘤患者及 15例正常人外周血CECs和CEPs ,其中 11例患者 (4例乳腺癌、7例淋巴瘤 )经造血干细胞动员 (常规化疗 +G CSF)。结果 :肿瘤患者外周血中循环血管内皮及其前体细胞分别为 0 378%± 0 10 3%和 0 0 5 9%± 0 0 13% ,高于正常对照组。经造血干细胞动员后患者外周血CECs和CEPs升高。结论 :G CSF在动员造血干细胞的同时 ,对血管内皮干 /祖细胞亦有动员作用。

IL-2短期活化的HLA半相合的外周血单个核细胞治疗晚期恶性实体瘤初步观察

目的:初步探讨IL-2短期活化的HLA半相合的异体外周血单个核细胞(allo-mPBMCs)治疗晚期转移性/化疗抗性实体瘤的可行性。方法:11例晚期转移性/化疗抗性恶性实体瘤患者,供者为与患者HLA半相合直系亲属。供者经10μg/kg·dG-CSF动员3天后采集PBMC,体外用大剂量rhIL-2培养后回输患者。观察治疗后临床反应,采用流式细胞仪、LDH和ELISA试剂盒检测动员、活化前后表型,IL-2短期活化前后的非特异性杀瘤活性以及患者回输前后血清中各种细胞因子的含量变化。结果:11例患者回输的HLA半相合allo-mPBMCs总数达(2.5～4.3)×1010。体外经G-CSF动员后T细胞,尤其是CD4+T细胞显著下降,而NK细胞比例显著上升;经大剂量IL-2短期活化后,各种细胞亚群比例未见改变,但活化细胞(包括CD69+和CD25+细胞)亚群比例显著升高。体外实验中可观察到IL-2短期活化的allo-mPBMCs具有类似LAK样的较高的非特异性杀瘤活性。经过治疗,11例患者血清中Th1类细胞因子,如IL-2、IL-12、IFN-γ、TNF-α含量明显升高,而Th2类细胞因子,如TGF-β含量明显下降。治疗后8例观察到临床症状的缓解,或肿瘤标志物的降低,或影像学资料的改善,其中1例治疗后4个月达到部分缓解,而3例出现进展,其中2例死亡。结论:IL-2短期活化的HLA半相合的allo-mPBMCs具有明显的抗肿瘤效应,为治疗晚期转移性/化疗抗性实体瘤提供了新的希望。

关于肿瘤免疫治疗疗效评价的思考

肿瘤免疫治疗有着与传统治疗方式不同的作用机制和疗效表现形式,因此该治疗的疗效评估是否能沿用传统治疗的评估体系是值得思考的问题,其中主要包括以下三方面的问题:一是免疫反应评价是否应被列入免疫治疗疗效评价体系?二是免疫治疗疗效评价的时间点应如何确定?三是新型免疫治疗疗效评价体系应包括哪些主要评价指标?免疫治疗在肿瘤治疗中具有越来越重要的地位,因此,尽快建立科学的评价体系对于肿瘤免疫治疗的发展和临床应用具有重要意义。

晚期胰腺癌化疗和生物治疗现状及展望

胰腺癌是人类恶性程度最高的实体肿瘤之一，生长迅速，转移早。根据美国最新统计资料，胰腺癌死亡人数在恶性肿瘤总死亡人数中排名第四位。80％以上患者在诊断时已是晚期，且不能行手术切除治疗。5年生存率不足5％。我国最新统计资料显示，胰腺癌年发病率为5．1／10万人，较二十年前大幅增长，患者5年生存率仅4％，病死率接近100％。本文主要论述晚期胰腺癌化疗和生物治疗现状，并展望未来的发展方向。

T细胞过继免疫治疗技术的研究进展

随着科学技术的发展和治疗理念的转变，以免疫治疗为基础的肿瘤生物疗法作为现代肿瘤治疗的笫四种模式，越来越受到重视，应用前景广阔。相比起传统的手术和放化疗，这种方法毒副作用小、安全稳定，

肺癌的生物治疗

肺癌是目前世界上发病率和死亡率最高的恶性肿瘤,每年新发病例160万,死亡140万,分别占全部恶性肿瘤的13%和18%[1].近年来,随着前列腺癌疫苗（DC Provenge）和CTIA-2抗体（Ipilimumab）先后被美国以及欧盟批准上市,肿瘤的生物治疗倍受关注.目前肺癌的生物治疗,尤其是对非小细胞肺癌的治疗（non-small-cell lung cancer,NSCLC）进展比较缓慢,且有一定的免疫源性,如常存在p53、K-ras、EGFR等突变,异常表达MAGE-3、NY-ESO-1、CEA等肿瘤抗原,比较适于免疫治疗[2].

造血干细胞移植支持下大剂量化疗对高危乳腺癌患者血清细胞因子的影响

目的:观察造血干细胞移植支持下的大剂量化疗对高危乳腺癌患者Th1、Th2类细胞因子(IFN-γ、IL-2,IL-10)的影响。方法:应用ELISA方法测定14例高危乳腺癌患者大剂量化疗前后血清IFN-γ、IL-2、IL-10的变化。结果:14例患者大剂量化疗前后血清中IFN-γ、IL-2、IL-10的水平分别为12.79±4.60pg/ml、6.55±5.42pg/ml、9.04±8.28pg/ml及12.38±3.23pg/ml、6.16±2.84pg/ml、9.00±6.85pg/ml,前后对比无统计学意义(P>0.05)。不同病理类型患者大剂量化疗前后血清细胞因子亦无显著差异(P>0.05)。转移淋巴结数大于50%与少于50%组相比,IL-10水平在大剂量化疗前两组有显著差异(P<0.05),但化疗后这种差异消失(P>0.05)。结论:大剂量化疗对Th1及Th2类细胞因子无影响,而对淋巴结转移数大于50%者的Th2类细胞因子有调节作用。

MAGE在5种上皮性肿瘤中的表达特点

目的:为探讨MAGE(melanomaantigensgene)肽疫苗在消化系统肿瘤生物治疗的应用前景,本文对消化系统中的5种上皮性肿瘤的MAGE表达进行了检测,并对其分布特点进行了分析。方法:本研究采用RT-PCR法检测了111例消化系统不同肿瘤的MAGE基因的表达。结果:MAGE-1、MAGE-2、MAGE-3的阳性率分别为7.01%、14.91%、37.71%。48.65%的消化系统上皮性肿瘤表达MAGE-1、-2、-3其中的一种。结论:MAGE家族中以MAGE-3在消化系统上皮性肿瘤的表达最高。

乳腺癌疫苗研究面临的机遇和挑战

免疫治疗作为一种极具发展前景的治疗方式给乳腺癌的治疗带来了新的希望。近年来,关于乳腺癌疫苗的研究已陆续开展,将这些研究成果合理、快速地用于临床,为乳腺癌的免疫治疗提供了机遇与挑战。本文重点阐述乳腺癌治疗性疫苗的一些设计策略、临床应用情况,以及未来乳腺癌疫苗研究的发展和应用趋势。随着对肿瘤特异性免疫应答的深入了解、肿瘤特异性抗原的不断发现和鉴定,以及对肿瘤微环境的深入认识,乳腺癌疫苗的研发水平必将得到进一步提高,更好地服务于临床。

胃癌患者术后化疗联合CIK免疫治疗的临床疗效

目的:评价胃癌患者术后化疗联合细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer cell,CIK)治疗的临床疗效。方法:收集1999年3月至2007年12月在天津医科大学附属肿瘤医院65例胃癌术后化疗联合CIK治疗的患者(化疗联合CIK治疗组)及同期对照130例术后单纯化疗的胃癌患者(单纯化疗组),比较两组的生存率及生存时间;分析受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线,确定化疗周期数与CIK治疗次数的分组点;Kaplan-Meier法绘制两组患者的生存曲线,Log-rank法检测两组患者的生存差异。结果:化疗联合CIK治疗组胃癌患者的3、5年总生存率稍高于单纯化疗组,但差异无统计学意义(60%vs 47%,55%vs 23%,P>0.05)。化疗联合CIK治疗组胃癌患者的3、5年无进展生存率明显高于单纯化疗组(48%vs 31%,47%vs 20%,P<0.05)。化疗联合CIK治疗组患者的中位生存时间(overall survival,OS)为96个月,明显高于单纯化疗组的32个月(P=0.001);化疗联合CIK治疗组患者的中位无病进展时间(progression-free survival,PFS)为36个月,高于单纯化疗组的23个月(P=0.011)。单因素分析发现,TNM分期、化疗周期数和CIK治疗周期数与胃癌患者的OS相关;TNM分期、手术方式和CIK治疗周期数与患者的PFS相关。多因素结果显示,化疗周期数是影响OS的独立危险因素,CIK治疗周期数不仅是影响OS,也是影响PFS的独立危险因素。结论:与术后单纯化疗相比,化疗联合CIK治疗明显延长胃癌患者的OS,而且CIK治疗次数增加,临床疗效会更显著。

四种NK细胞体外扩增方案的比较

目的:通过对4种NK细胞体外培养方案扩增后产物的细胞免疫表型、扩增倍数以及杀伤活性进行比较,确定一种高效的NK细胞体外扩增方案。方法:建立4种NK细胞体外培养方案:方案1为经典的NK细胞体外扩增方案(IL-2+IL-15);方案2为IL-2+IL-15+IL-18;方案3为IL-2+IL-15+IL-7;方案4为新型NK培养基(IL-2+OKT3)。收集天津医科大学附属肿瘤医院生物治疗科2012年2月至2012年4月间10例晚期实体瘤患者的PBMC,按照4种方案进行体外扩增。在体外扩增的0、5、10、15 d,采用流式细胞仪检测各淋巴细胞亚群(尤其是NK细胞)的比例;比较各方案体外扩增15 d后的NK细胞的扩增倍数、淋巴细胞亚群比例变化,并采用LDH法检测各方案扩增产物对人白血病K562细胞的杀伤活性。结果:上述4种NK细胞培养方案体外扩增15 d后,细胞总数分别扩增(40.1±20.00)、(44.08±22.09)、(44.82±23.67)、(46.82±25.02)倍,其中NK细胞的扩增倍数分别为(75.86±28.57)、(93.32±32.16)、(88.66±24.94),(58.88±41.53)倍。NK细胞比例由0 d的(20.44±2.23)%分别扩增至15 d的(48.30±13.90)%、(54.72±12.25)%、(55.94±12.70)%和(54.5±14.93)%;各培养方案组在总细胞扩增倍数、NK细胞扩增倍数上的差异均无统计学意义(P>0.05)。前3种培养方案体外扩增产物的杀伤活性明显高于方案4[(63.40±5.00)%、(77.30±9.40)%、(62.17±5.60)%vs(37.39±10.42)%,均P<0.05],而方案1、2、3之间体外扩增产物杀伤活性的差异则无统计学意义(P>0.05)。结论:细胞因子组合对于体外大规模培养NK细胞有着一定的优势,但不同的细胞因子组合(方案1中是否加入IL-18或IL-7)对NK细胞体外大规模扩增的影响差异并不显著;但前3个方案扩增产物对K562细胞的杀伤活性明显强于方案4。

探讨PET/CT原发灶SUVmax在肺鳞癌患者术后预后中的意义及与临床病理特征的关系

背景与目的肺癌居于全球男性及女性癌症相关死亡原因的首位,大多数患者在确诊时已属晚期,5年生存率仅为18%。肺癌可分为非小细胞肺癌(non-small cell lung carcinoma,NSCLC)和小细胞癌(small cell lung carcinoma,SCLC),其中NSCLC占肺癌的80%-85%,NSCLC根据组织学可主要分为腺癌(约占40%),鳞状细胞癌(20%-30%)和大细胞癌(10%),针对驱动基因的靶向治疗在肺腺癌中取得一定成绩,但在肺鳞癌的治疗中收效甚微,肺鳞癌的诊治更需得到关注,18F-脱氧葡萄糖(fluorodeoxyglucose,FDG)正电子发射断层扫描/计算机体层摄影(positron emission tomography/computed tomography,PET/CT)越来越多地应用于肺癌的诊断与分期中,本研究旨在探讨18F-FDG PET/CT原发灶最大标准摄取值(maximum standardized uptake value,SUVmax)在肺鳞癌患者术后预后中的意义及与临床病理特征的关系。方法回顾分析2005年5月-2014年10月收治的182例初治、接受PET/CT检查、行根治术的原发肺鳞癌患者的临床影像病理及随访资料。采用Kaplan-Meier法及Cox模型分析患者生存情况,并分析原发灶SUVmax与各临床病理因素的关系。结果 182例肺鳞癌患者原发灶SUVmax以13.0为界分为两组,SUVmax>13.0组与≤13.0组患者的中位总生存期分别为56个月和87个月,差异具有统计学意义(P=0.022)。原发灶SUVmax与性别、肿瘤最大径、肿瘤-淋巴结-转移(tumor-node-metastasis,TNM)分期、中性粒细胞、中性粒细胞/淋巴细胞比例(neutrophil-lymphocyte ratio,NLR)存在正相关性,与血红蛋白呈负相关(P<0.05)。Cox多因素分析显示SUVmax(HR=1.714,95%CI:1.021-2.876,P=0.042)、TNM分期(HR=1.677,95%CI:1.231-2.284,P=0.001)均为患者生存的独立预后影响因子,提示SUVmax有独立于病理TNM分期之外的预后价值。而且,SUVmax在I期肺鳞癌患者的预后中有意义(P=0.045)。结论 PET/CT SUVmax对肺鳞癌患者术后生存的预测有重要的价值,是独立于TNM分期之外的一个重要预后因素,并且原发灶SUVmax与多个临床病理因素间存在相关性。

肿瘤患者外周血循环血管内皮细胞数量与血清VEGF水平的关系

目的 :分析实体瘤患者外周血中的循环血管内皮细胞 (circulatingendothelialcells,CECs)及血管内皮前体细胞 (cir culatingendothelialprecursors ,CEPs) ,并比较与正常人的差异。 方法 :流式细胞法检测 5 7肿瘤患者及 15例正常人外周血中的CECs和CEPs ,ELISA法检测血清中血管生成相关因子VEGF和bFGF的表达水平。结果 :肿瘤患者外周血CECs及CEPs分别为 (0 .378± 0 .0 4 7) %和 (0 .0 5 9± 0 .0 13) % ,血清VEGF ,bFGF分别为 (2 95 .5 8± 5 9.5 6 )ng/L和 (2 8.73± 7.4 0 )ng/L ,均高于正常对照组 (P <0 .0 5 )。血管内皮及其前体细胞的数量与血清VEGF ,bFGF水平相关。结论 :实体瘤患者外周血中循环血管内皮及其前体细胞、血管内皮生长因子均高于正常人 ;VEGF和bFGF可能参与了血管内皮干 /祖细胞的动员过程。

检测血清胆碱酯酶对肝病诊断的临床意义分析

胆碱酯酶(CHE)是反映肝合成代谢功能的敏感指标,其升降幅度与血清白蛋白高低相平行,与γ-球蛋白呈负相关,本文对288例不同肝病患者和100例健康供血员,检测血清CHE,其结果显示,CHE是反映肝细胞损害的敏感指标,随病情好转而上升,随病情恶化而下降,对肝病的早期诊断,了解病情进展及预后判定有临床意义。

不同输注途径对CIK细胞治疗后的体内分布的影响

目的探讨经不同途径输注后CIK细胞的体内分布和代谢情况。方法分别以同位素32P-αdATP和荧光染料CM-DiI标记CIK细胞,而后经尾静脉途径和腹腔途径注射入裸鼠体内,用放射性定量检测方法和荧光显微镜检测方法分析CIK细胞在各器官的动态分布。结果CIK细胞输入裸鼠体内后,迅速分布至肝、脾、肾、肺、胃、肠等器官,其中肝、脾、肾的分布浓度最高;CIK细胞输入体内的早期,尾静脉注射途径中肺最先达到分布高峰,而腹腔注射途径中腹腔内器官率先达到分布高峰;CIK细胞在肝、脾的存活可达2周以上。结论CIK细胞体内分布的广泛性表明它可以用于身体各部位恶性肿瘤的治疗;血管输入途径可能更适于血供丰富器官肿瘤的治疗,而体腔输入途径也许更适合于体腔内恶性渗液或局限病灶的治疗。