任锋:基于CRISPR/Cas技术的核酸分子临床即时检测

鉴于目前核酸分子检测技术逐步从临床实验室向现场检测转移的发展趋势,急需建立一种高灵敏、高特异、高效和便捷的新型核酸诊断工具来满足临床即时检测(POCT)的需要。基于规律间隔成簇短回文重复序歹U(CRISPR)/CRISPR相关蛋白(Cas)的检测方法是一种有前景的新型核酸检测方法。

一体化与统纪化:“儒法国家”,抑或大国礼治?

“儒法国家”作为概括中国秦汉以后政治系统特质的既有模式,没有充分估量礼治对于中国国家结构的奠基意义,易于呈现为古今断裂的历史政治叙事。周礼所开启的中心统合主义原理展现为一体化与统纪化。一体化包含了统治权力一体化、族群伦理一体化、家国经济一体化,由周礼中的分封、宗法和井田开其端,深刻影响了郡县大一统的制度体系。统纪化是指礼治秩序精神的历史性延续,分别呈现为生统、宗统和治统,三统相系相维而不断推进一体化进程。正是大国礼治所展现出的一体化和统纪化,使我们在面临秩序危机的时候赓续了大一统国家的基本结构,在进一步推进族群、经济和治理层级深度融合的进程中完成了文明古国的现代转化。

超声血流参数对甲状腺癌患者淋巴结转移的诊断价值

目的探讨超声血流参数对甲状腺癌患者淋巴结转移的诊断价值。方法选取110例甲状腺癌患者和110例健康体检者,分别作为观察组和健康组,所有受试者均进行彩色多普勒超声检查。比较观察组和健康组的超声血流参数[收缩期峰值流速(PSV)、阻力指数(RI)、搏动指数(PI)、收缩期峰值流速/舒张末期流速(S/D)]。根据是否发生淋巴结转移将观察组患者分为淋巴结转移组(n=59)和无淋巴结转移组(n=51),比较两组患者的超声血流参数。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,计算曲线下面积(AUC),分析PSV、PI、RI、S/D单独及联合检测对甲状腺癌患者淋巴结转移的诊断价值。结果观察组患者的PSV、S/D均明显高于健康组,PI、RI均明显低于健康组,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。淋巴结转移组患者的PSV、S/D均明显高于无淋巴结转移组,PI、RI均明显低于无淋巴结转移组,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。PSV、PI、RI、S/D联合检测诊断甲状腺癌患者淋巴结转移的AUC、灵敏度、特异度分别为0.905、96.12%、90.64%,均高于各指标单独检测。结论甲状腺癌患者PSV、S/D偏高,PI、RI偏低,PSV、PI、RI、S/D联合检测对甲状腺癌患者淋巴结转移具有较高的诊断价值,可为临床医师制订治疗方案提供科学的参考依据。

基于CRISPR/Cas9联合Cre-LoxP方法的Ddx3x肝脏条件性敲除小鼠模型的构建与鉴定

目的采用CRISPR/Cas9联合Cre-LoxP方法构建DEAD-box RNA解旋酶3X连锁(DEAD-box RNA helicase 3X-linked,Ddx3x)肝脏条件性敲除小鼠。方法设计特异的sgRNA序列,在Ddx3x基因外显子4~10两端插入LoxP序列,构建Ddx3x-flox小鼠。采用PCR方法对F0代和F1代小鼠进行基因鉴定。将Ddx3x-flox F1代小鼠与特异性表达Alb-Cre的工具鼠交配,获得肝脏条件性敲除Ddx3x基因小鼠(Ddx3x^(Δhep))。采用PCR方法和Western blotting方法分别检测Ddx3x^(Δhep)基因小鼠目的基因与蛋白的表达。选取8周龄雄性野生型C57/6J小鼠、Ddx3x^(Δhep)小鼠、Ddx3x^(fl/fl)小鼠,测定血清ALT、AST水平评价肝脏肝损伤情况。结果对F1代小鼠基因PCR鉴定的结果表明,基因型符合Ddx3x^(fl/fl);F1代小鼠与Alb-Cre小鼠杂交,子代与Ddx3x^(fl/fl)小鼠杂交,即获得Ddx3x^(Δhep)小鼠;PCR与Western blotting结果显示,目的小鼠肝组织中Ddx3x基因和蛋白表达显著降低。此外,Ddx3x^(Δhep)小鼠无胚胎致死现象,出生后生理状况良好。正常饲养条件下,Ddx3x^(Δhep)小鼠与Ddx3x^(fl/fl)小鼠及野生型小鼠相比,血清ALT、AST指标及体质量差异均无统计学意义(P>0.05)。结论基于CRISPR/Cas9联合Cre-LoxP方法成功构建了Ddx3x^(Δhep)小鼠动物模型,为后续研究Ddx3x在肝脏中的生物学功能及作用机制奠定了良好的基础。

肝再生在对乙酰氨基酚诱导的肝损伤修复中的作用

肝再生在对乙酰氨基酚(APAP)诱导的肝损伤后恢复中有着至关重要的作用。APAP过量服用后,通常是肝损伤程度越大,再生的程度就越大,从而导致肝损伤的消退和大多数情况下的自发恢复。然而,严重APAP过量会导致肝再生受损和无法控制的肝损伤,导致无法恢复,甚至死亡。在APAP肝损伤后,肝脏中细胞之间的相互作用对再生反应非常重要。肝再生由多种增殖信号通路共同调控,这些通路涉及激酶、核受体、转录因子、转录共激活因子。严重的APAP过量后会抑制增殖信号通路的激活,导致细胞周期停滞和肝再生受损。虽然肝再生在APAP肝损伤后的修复过程中发挥关键作用,但目前其发挥作用的潜在机制尚不明确。本文就已有的相关研究对肝再生在APAP诱导的肝损伤中的作用进行综述,为进一步的基础研究提供参考。

离子型稀土矿山智慧环境管理平台研究

随着我国生态保护制度的日趋完善与加强,离子型稀土开采活动对矿山周边环境的影响也日趋受到环境监管的重视。本文针对离子型稀土矿山的环保管理问题,讨论如何结合GIS、三维建模技术,数据挖掘与分析技术,将污染因子纳入到智慧环境管理平台的统一管理,并在此基础上实现了离子型稀土矿山的污染预警与应急事故响应的数字化,搭建了智慧环境管理平台,为离子型稀土矿山开采过程中的生态环境治理提供参考。

离子型稀土镁盐浸矿开采工艺中环境特征因子控制要求初探

镁盐体系原地浸矿工艺是一种新型离子型稀土矿绿色开采工艺,与传统的硫酸铵浸矿工艺相比,新工艺避免了氨氮污染问题,但伴随镁盐浸矿开采工艺产生的镁、TDS等特征因子同样是环保重点管控的指标,明确其环境控制要求是新工艺环保管理和环境影响评价的前提。本文介绍了国内外有关镁的环境标准,通过文献调研、标准类比、限值反演等方法,综合镁盐浸矿工艺特征、区域水环境质量、特征因子对环境和人体危害程度等因素,初步提出镁盐浸矿工艺相对合理的特征因子控制要求。建议地下水中镁的标准限值参考波兰的标准(取100 mg/L),地表水中镁的标准限值建议取100 mg/L;废水中镁的排放控制限值建议取500 mg/L或不设置排放限值,通过硫酸盐排放管控间接控制镁的排放影响。

育儿家庭对普惠性托育服务模式的偏好与支付意愿

推动普惠性托育服务落地,破局入托难问题已成为社会各界的共识。然而作为在政府扶持下自负盈亏的经营性行为,如何吸引社会力量参与托育服务是地方政府首先要面对的问题。育儿家庭对托育服务的需求规模、支付意愿和模式期望等情况是社会力量是否参与托育服务的重要决策依据。为解构家庭托育服务需求的多元性,利用2020年“厦门市0—3岁婴幼儿托育服务需求调查”数据估计了家庭对各类托育服务模式的选择率与支付意愿。采用选择实验法的研究结果显示:总体上厦门市育儿家庭对于将子女送托的态度并不积极,现有服务模式与家庭期望差距较大,可接受当前商业托育服务和非正规小托班的家庭仅占3.42%,而愿意接受潜在普惠性托育服务的家庭比例则高达29.4%。在社区内、公办和提供早教是育儿家庭相对比较青睐的服务属性。而在各服务属性之间,社区化服务是育儿家庭最为看重的服务属性,其次是主办方性质。不接受小托班的主要是不信任个人主办,只要由正规机构开办,育儿家庭对分散化家庭托育点的接受度可达15.17%。家庭对于社区化普惠性服务的支付意愿明显高于各类商业性服务,商业性服务宣扬的豪华环境和早教课程体系并不是家庭所看重的要素,家庭对社区内基本照料服务的支付意愿更高。换言之,如果现有商业托育服务转入社区,不仅省去了高昂的租金和营销成本,还可获得更高的家庭选择率和支付意愿。总之,开展社区化的普惠性托育服务是缓解机构生存压力和提升家庭送托率的双赢策略。

超声造影时间-强度曲线诊断肝硬化伴肝小结节病灶的价值

目的探讨超声造影(CEUS)时间-强度曲线诊断肝硬化伴肝小结节病灶的价值。方法本研究为前瞻性研究,纳入2019年7月至2022年8月在南阳市中心医院超声科接受检查的80例疑似肝硬化伴肝小结节患者,所有患者均接受CEUS时间-强度曲线检查,以病理学检查结果为“金标准”,比较良、恶性结节CEUS时间-强度曲线参数[到达时间(AT)、达峰时间(TTP)、峰值强度(PI)],采用受试者工作特征(ROC)曲线分析检验CEUS时间-强度曲线参数对肝硬化伴肝小结节病灶的诊断价值。结果经病理学活检证实,80例疑似肝硬化伴肝小结节患者中32例为恶性结节,48例为良性结节。CEUS时间-强度曲线检出恶性结节29例,良性结节46例,准确率为93.75%(75/80)。恶性结节组织和良性结节组织AT比较,差异无统计学意义(P>0.05);恶性结节组织TTP低于良性结节组织,PI高于良性结节组织(P<0.05)。绘制ROC曲线显示,TTP、PI单独及二者联合诊断恶性结节的曲线下面积(AUC)均>0.70,预测价值较理想,联合诊断的价值最高。结论CEUS时间-强度曲线可以作为鉴别诊断肝硬化伴肝小结节病灶的良恶性的指标。

参与型公天下:黄宗羲在《明夷待访录》中的宪制筹划

黄宗羲的《明夷待访录》是一部有系统性宪制筹划的立国文献。他所调动的资源除了思想史和制度史以外,还包括历代政治经验。首先,黄宗羲追溯三代圣王之统,从中抽离出公天下并将之作为宪制原则,以反对三代之后私天下的政治格局,从而完成了对政治参与空间的释放;其次,利用公天下这一宪制原则为参与奠基,建构了以责任为中心的职分或资格论,完成了对政治主体的扩大与重塑;最后,将善治分解为复数的治理目标,导向了公天下理想的实化。在此基础上,一个与近世平民化社会转型的参与诉求相适应、道—法—人三维度高度呼应的治体论式政治图景浮现出来,即参与型公天下。其中,学校建制对政治实行全面领导,但在治理意义上又与后者构成一种二元体系,最终形成了以学领政的政教或政学一元而治理二元模式。黄宗羲实现了秩序理念上政治方案的替换以及宪制性调整,而参与型公天下在实践中发生分化,由此酝酿形成了现代共和的积极资源。

婴儿肠吻合术后早期喂养有效性及安全性的随机对照研究

目的探讨婴儿肠切除和吻合术后早期喂养的有效性及安全性。方法本研究为前瞻性随机对照研究,收集2018年9月至2021年4月深圳市儿童医院胃肠外科、新生儿外科收治的86例行关瘘手术的患儿作为研究对象,其中包括新生儿期因先天性肛门闭锁(congenital anal atresia,CAA)行造瘘手术的患儿(为CAA组)和因新生儿坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis,NEC)行造瘘手术患儿(为NEC组)。将CAA组及NEC组分别按照随机原则划分为早期喂养组(CAA早期喂养组、NEC早期喂养组)及延迟喂养组(CAA延迟喂养组、NEC延迟喂养组)。比较CAA早期喂养组、CAA延迟喂养组与NEC早期喂养组、NEC延迟喂养组患儿的年龄、体重、手术时间、出血量等一般基础信息及术后住院时间、首次肛门排气排便时间、并发症发生率等资料。结果CAA组共44例,其中CAA早期喂养组23例,CAA延迟喂养组21例。CAA早期喂养组较CAA延迟喂养组的平均术后首次肛门排气时间缩短[(2.65±0.65)d比(3.24±0.63)d,t=3.049,P<0.05];术后首次排便时间缩短[(3.17±0.71)d比(4.00±1.00)d,t=3.123,P<0.05];术后住院时间缩短[(8.30±1.66)d比(11.86±3.86)d,t=4.024,P<0.05];平均住院费用减少[15870.68(13536.84,19023.80)元比18001.86(16466.08,23405.25)元,Z=-2.549,P<0.05]。CAA早期喂养组术后发生并发症2例,无一例吻合口瘘发生;CAA延迟喂养组术后发生并发症3例,吻合口瘘1例;两组术后并发症发生率差异无统计学意义(χ2=0.012,P>0.05)。NEC组共42例,其中NEC早期喂养组20例,NEC延迟喂养组22例。NEC早期喂养组较NEC延迟喂养组的术后首次肛门排气时间缩短[(2.45±0.76)d比(3.95±0.72)d,t=6.581,P<0.05];术后首次排便时间缩短[(3.40±0.88)比(4.77±0.42)d,t=6.311,P<0.05];术后住院时间缩短[(9.55±1.67)d比(12.77±2.56)d,t=4.871,P<0.05];住院费用减少[17100.53(14193.25~22249.19)元比25024.26(19887.00~28680.01)元,Z=-3.072,P<0.05]。NEC早期喂养组术后发生并发症1例,无一例吻合口瘘发生;NEC延迟喂养组术后发生并发症4例,吻合口瘘1例;两组术后并发症发生率差异无统计学意义(χ^(2)=0.706,P>0.05);NEC早期喂养组发生喂养不耐受6例,NEC延迟喂养组发生喂养不耐受1例,差异有统计学意义(χ^(2)=4.887,P<0.05)。结论婴儿肠吻合术后早期喂养可缩短住院时间,减少住院费用,且不会增加术后并发症(特别是吻合口瘘)的发生率。因此婴儿行肠吻合术后无需长期禁食,但早期喂养时间应根据患儿具体手术情况制定,以降低术后喂养不耐受的发生率。

基于MAPK信号转导通路探究异甘草酸镁对刀豆蛋白A诱导小鼠急性肝损伤的保护机制

目的 探讨异甘草酸镁(magnesium isoglycyrrhizinate,MgIG)在刀豆蛋白A(concanavalin A,Con A)诱导的小鼠急性肝损伤中的作用及机制。方法 按照简单随机分组法将20只无特定病原体(specific pathogen free,SPF)级Balb/c小鼠分为正常对照组(4只)、MgIG组(4只)、Con A组(6只)、Con A+MgIG干预组(6只)。小鼠Con A(25 mg/kg)尾静脉注射12 h,构建急性肝损伤模型,干预组提前1 h给予MgIG(30 mg/kg)腹腔注射。检测丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)和天门冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)水平、白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor α,TNF-α)、干扰素诱生蛋白10(interferon-inducibleprotein-10,IP-10)水平,检测IL-6、IL-1β、TNF-α、IP-10的mRNA相对表达量。体外实验中小鼠腹腔单核巨噬细胞用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS,200 ng/ml)分别处理30 min、1 h、2 h和4 h,干预组小鼠腹腔单核巨噬细胞用MgIG(25μg/ml)预处理1h,检测IL-6、IL-β、TNF-α、IP-10炎症因子及磷酸化-p38丝裂原活化蛋白激酶(phospho-p38 mitogen activited protein kinase, p-p38)、磷酸化-cJun氨基末端激酶(phospho-c-JunN-terminalkinases,p-JNK)、磷酸化-细胞外调节蛋白激酶(phospho-extracellular regulated protein kinases,p-Erk)蛋白表达。结果 与Con A组相比,Con A+MgIG干预病理切片炎性细胞浸润明显减少,血清炎症因子[IL-6:(10695.71±4861.94)pg/ml vs (27650.88±5701.79)pg/ml;IL-1β:(13.37±8.18)pg/ml vs (56.55±9.29)pg/ml;IP-10:(3298.43±534.95)pg/ml vs (7413.38±1497.78)pg/ml;TNF-α(63.27±13.97)pg/ml vs (97.06±21.26)pg/ml]及mRNA相对表达量(IL-6:5.23±1.63 vs 16.06±4.55;IL-1β:0.88±0.45 vs 5.44±0.94;IP-10:126.24±29.54vs 454.40±114.81;TNF-α:9.55±2.75 vs 16.46±3.98)均显著降低(P均<0.05)。体外实验表明,与LPS诱导的模型组相比,MgIG干预组p-p38、p-Jnk、p-Erk蛋白水平明显降低,同时炎症因子mRNA相对表达量(IL-6:3627.91±1491.16 vs 6630.40±1149.59;IL-1β:259.92±49.47 vs 658.06±95.06;IP-10:4088.38±790.20 vs 7762.08±1007.42;TNF-α:117.09±15.29 vs 194.56±25.14)也显著降低(P均<0.05)。结论MgIG通过MAPK信号转导通路降低炎症反应显著改善Con A诱导的小鼠急性肝损伤,为MgIG在改善肝损伤的功能提供了理论支持。

基于AHP-ABC分类模型的海事公务船舶备件管理策略研究

针对目前海事公务船舶备件管理中存在的备件重要程度不一、船舶设备服役时间较长、设备“预检预修”效能欠佳、设备维修预算“吃紧”等问题,通过对海事公务船舶备件开展AHP-ABC分类,明确影响船舶管理的备件重要性、备件价格、备件更换周期、备件到货周期四个因素,以分级赋值的方式,制定船舶备件管理策略,减少相关备件准备时间,保障船舶设备的长期安全运行,为海事业务工作的顺利开展提供坚实支撑。

风力及光伏发电技术接入电网电压控制方法分析

在电力行业中,使用风力发电和光伏发电技术,能够有效缓解能源危机,因风能和光能本身属于可再生资源,能够有效减少不可再生资源的消耗。因此,本文就风力和光伏发电技术接入电网的电压控制方法展开研究,无论对风力和光伏发电技术深入推广,还是促进电力事业发展来说,都有一定现实意义。

HDV RNA检测的研究现状

HDV感染导致的丁型肝炎是最严重的肝炎类型。由于缺乏精准HDV RNA检测方法,HDV的流行率被严重低估。HDV RNA是诊断HDV感染的金标准,在HDV的诊断、筛查和指导治疗方面具有重要意义。但因HDV基因型多、二级结构牢固,导致HDV RNA检测困难。本文就HDV RNA诊断方法的进展进行综述,阐述了HDV RNA检测方法从定性到定量检测的进展,为了解HDV RNA检测重要意义以及促进HDV RNA检测新方法的研发提供新思路。

如何理解大一统:比较历史视野中的汉政典制化与罗马帝国困境

传统中国的国家形态并非帝国,而是大一统。相比罗马帝国代表的军事统治主导与政治裂变性,大一统更具文治精神与政治聚合性。经过西汉前期的政治更化,郡县制大一统得到巩固更新,汉政典制成为中国后世政治的范型,而唐宋分别代表了强弱两类外向性的大一统模式。相比政体论和国家论,治体论重在揭示大一统与大国礼治的关联,后者透过中心与四方、政府与社会、文教与多种信仰、华夏诸族群的开放融合,发展出古今通贯、政治和经济、文教一体化的中心统合主义机制。大一统国家形态历经封建、郡县和现代共和的政制演变而得以维系,有赖于中心统合主义机制的返本开新。

基于就业稳定性差异的农民工创业影响因素研究

从就业稳定性差异的视角,基于不同就业特征农民工群体进入自雇创业因果机制的差异,对人力与社会资本在稳定就业与不稳定就业农民工自雇创业中的作用进行比较研究。利用实地调查数据的检验,发现人力与社会资本对不同就业特征农民工群体自雇创业的作用方式不同:不稳定就业群体人力资本中的教育程度越低,社会资本桥梁性越高,越可能进入自雇创业;稳定就业群体人力资本中的城市工作时间越长,社会资本内聚性特征越强,越有可能进入自雇创业。

民本与民主：当代中国政治学理论的话语重建

2015年4月20日,弘道书院和中国人民大学国家治理研究院联合举办了一场以“民本与民主”为主题的思想对话,这也是弘道书院今年着力推广的“儒学与政治学系列对话”的第三场。此次对话的四位嘉宾分别是儒学、政治学、法学领域的资深学者和新生代表。围绕这一主题,四位嘉宾展开了一场跨学科、多视角的精彩对话。从国本论、天人之道和先民论重新理解民本任锋：今天的主题是“民本与民主”,我们这几次系列对话背后有一个想法,如果大家熟悉近代史会发现今年是新文化运动一百年。新文化运动有一个核心的口号是“科学与民主”,

荧光光谱法研究芘与β-环糊精、羟丙基β-环糊精的相互作用

用荧光光谱法,通过考察β 环糊精(β CD)和单 [2 氧 (2 羟丙基)] β 环糊精(HPCD)水溶液中芘的I1/I3值的变化、芘与上述两种环糊精结合常数的大小,以及pH值对两种环糊精水溶液中芘的I1/I3影响的不同,研究了芘/β CD、芘/HPCD作用方式的差别.结果表明芘与β CD形成1∶2夹心式的包络物后,两个β CD分子大端口羟基间形成氢键,使芘与β CD形成的包络物更加稳定.而HPCD由于二位上取代基的位阻效应,与芘只能形成1∶1的包络物.

农民工机会性与必要性创业的个人资本差异

目前农民工创业扶助政策效果不理想的问题,在于大多数政策是从机会利用方面帮助农民工将已经认知到的创业机会尽快转化为创业行为。而农民工创业的难点就在于如何认知到有价值的创业机会。从对机会性与必要性创业者的个人资本分析结果发现,创业机会认知过程与农民工个人资本存量与类型有关。内聚型社会资本与隐性知识可以帮助农民工识别市场需求,而桥梁型社会资本与显性知识可以促进农民工定义价值创造能力。但是,一般农民工很难同时具有两方面的能力来识别出完整的创业机会。因而,农民工的创业扶助政策不能只关注机会的利用方面,应该设法在机会的认知过程中予以针对性的扶持。