静息与感染状态下巨噬细胞和经典树突状细胞的发育及功能研究进展

巨噬细胞(MAC)和经典树突状细胞(cDC)是免疫防御的首要防线,在先天免疫和适应性免疫中扮演着重要角色,它们具有高度组织特异性,能够精确的适应环境变化。MAC在维持组织稳态和免疫监视方面发挥作用,而cDC作为最有效的抗原提呈细胞,在免疫应答中起关键作用。这两种细胞类型之间也存在相似性和相互联系,MAC和cDC都能识别病原体和组织损伤,它们通过分泌细胞因子激活其他先天免疫细胞,并通过与T细胞的相互作用启动或调节适应性免疫。本文总结了静息与感染过程中MAC及cDC的发育及功能的研究进展,阐述了它们在免疫系统中的关系和相互作用,为疾病的深入研究提供了理论基础。

经典Wnt/β-catenin信号在过敏性哮喘中的功能研究进展

过敏性哮喘是一种复杂的呼吸系统异质性疾病,在遗传水平上具有广泛的变异性,并有多种机会改变遗传多样性。越来越多的研究表明,靶向Wnt/β-catenin信号途径可以影响过敏性哮喘的发生发展,但其具体免疫性作用机制尚不明确。本文主要通过介绍Wnt/β-catenin信号及其在过敏性哮喘中的作用和功能,为治疗过敏性哮喘的药物干预提供新靶点。

番茄多胁迫诱导型LeMTshsp启动子的分子克隆及其功能分析

根据Southern杂交结果,选取KpnⅠ与EcoRⅠ双酶切番茄中蔬4号基因组DNA,3kb左右的酶切片段连入pBSⅡKS(+)载体,构建成含有线粒体小分子热激蛋白基因(LeMTshsp)上游2kb左右调控区的质粒文库。通过巢式PCR方法从构建的质粒文库中克隆出LeMTshsp基因上游1915bp的调控区(GenBank登录号为AB239774)。该序列含有TATA box及CAAT box等启动子基本元件,还具有6组典型的HSE元件及多个AT-rich区,另外还有许多逆境反应元件如ABRE,C-repeat—DRE,AP-1。凝胶阻滞结果表明,纯化的HsfA2蛋白与LeMTshsp启动子的HSE元件在体外具有结合活性,且与近端5组HSE的结合活性比与远端HSE的结合活性强。构建该启动子与GUS基因的融合载体,利用农杆菌介导的叶圆盘法转化番茄,GUS组织化学染色结果表明LeMTshsp启动子对热激、低温、外源ABA及重金属胁迫都有应答。

番茄转ER-sHSP基因植株构建及其抗冷性研究

将CaMV35S启动子驱动的内质网小分子热激蛋白基因导入番茄,比较转基因、未转基因和转空载体番茄的抗冷能力。冷胁迫下,同对照相比,转基因番茄的冷害症状轻,叶绿素含量的损失少,体内积累的丙二醛(MDA)含量少,电解质外渗程度低,具有较高的净光合速率和最大光化学效率,并易于恢复由低温所引起的光抑制,表明转基因番茄具有较强的冷胁迫耐性,说明内质网小分子热激蛋白在植物抗冷过程中发挥重要作用。

番茄LeHsp110/ClpB基因的分子克隆及其对植物耐热性的影响

HSP100ClpB是Clp蛋白家族的一员,具有分子伴侣功能,与细胞“获得耐热性(acquiredthermotolerance)”相关。从番茄cDNA文库中筛选到长度达3144bp的cDNA,依据最长的开放读码框推导出的多肽含980个氨基酸残基,分子进化分析结果表明该蛋白属于HSP100ClpB家族,因其计算分子量为110kD,所以命名为LeHSP110ClpB。实验证明,LeHsp110ClpB在番茄叶片中没有组成型表达,为热诱导型基因,其编码蛋白定位于叶绿体基质。利用农杆菌介导法,将CaMV35S驱动的反义LeHsp110ClpBcDNA片段导入番茄,高温下转反义基因的番茄株系中LeHsp110ClpBmRNA水平明显低于对照,转基因株系的PSⅡ对高温胁迫更加敏感,说明HSP110ClpB在植物耐热性方面起重要作用。

STAT4基因单核苷酸多态性与系统性红斑狼疮关系的研究

系统性红斑狼疮（Systemic lupus erythematosus，SLE）是一种累及多脏器的慢性炎性自身免疫性疾病，遗传因素、环境因素、免疫因素在该病的发生中发挥重要作用。最近国外多项研究表明STAT4 rs7574865SNP与多种自身免疫性疾病如类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）、SLE、

组成型表达的ClpB基因提高番茄植株的耐冷性

用农杆菌介导法将CaMV35S启动子驱动的ClpB cDNA导入番茄,并比较了转基因和未转基因番茄的抗冷能力。当受冷胁迫后,转基因番茄比未转基因番茄表现出较轻的冷胁迫症状,并维持较高的PSII水平。

热激蛋白对细胞凋亡的调节作用

细胞凋亡是生物发育过程中或在正常生理状态下清除衰老及受损细胞的一种普遍现象。细胞凋亡的发生受胞外或胞内的多种刺激源所诱导,其中热激蛋白是细胞凋亡的调控因子之一。本文着重讨论了热激蛋白在细胞凋亡调节中所发挥的作用。

番茄金属蛋白酶基因LeftsH6的克隆和分子特性(英文)

从热处理的番茄叶cDNA文库中分离到一个全长为2213-bp的ftsH基因。该基因包括一个2019-bp的读码框,推测的蛋白前体定位到叶绿体中,序列中存在AAA结构域和Zn2+结合结构域等已知的金属蛋白酶FtsH家族的特征结构域。在已克隆的基因中,该ftsH与拟南芥ftsH6最近源,被命名为LeftsH6(Lycopersiconesculentumfilamentationtemperature-sensitiveH6)。体外蛋白酶活性分析结果表明,纯化的FtsH具有蛋白水解活性,能降解酪蛋白但不降解BSA;突变的FtsH(Zn2+结合结构域中的谷氨酸Glu472突变为谷氨酰胺Gln)失去了体外蛋白酶活性。Southern杂交结果表明,该基因在番茄基因组中是单拷贝;Northern和Western杂交均表明该基因表达被热诱导,但其表达不被低温、干旱、盐胁迫、高光等胁迫调节。首次证明了高等植物中存在能被热诱导表达的ftsH基因。

泰山赤灵芝多糖缓解大鼠动脉粥样硬化的分子机制研究

目的:研究泰山赤灵芝多糖处理动脉粥样硬化大鼠前后血脂的变化和胸主动脉细胞差异表达的基因,了解泰山赤灵芝多糖治疗动脉粥样硬化的分子机制。方法:全自动生化分析仪测定泰山赤灵芝多糖处理动脉粥样硬化大鼠前后血清TG、TC、HDL-C含量的变化;通过差异显示逆转录PCR(DDRT-PCR)技术研究泰山赤灵芝多糖处理动脉粥样硬化大鼠前后胸主动脉细胞的基因表达差异,并用反向Northern证实差异显示基因片段。结果:泰山赤灵芝多糖处理动脉粥样硬化大鼠后,TG、TC含量均明显下降,而HDL-C和HDL-C/TC百分比明显升高;胸主动脉细胞出现一些表达上调和下调的基因片段。上调基因有细胞色素B561、ERP72、nitric oxide synthase 2和Gpx1;下调基因有胸腺素β4、FGFRI原癌基因伴随蛋白、FK506结合蛋白、ICAM-1、c-myc和TNF-α。结论:泰山赤灵芝多糖可减轻动脉粥样硬化风险,降低血脂。

肿瘤免疫中Wnt/β-catenin信号通路的研究进展

Wnt/β-catenin信号通路是一条高度保守的通路,可以起到调节细胞的增殖、分化、凋亡,干细胞的自我更新,组织稳态和创伤愈合的作用。几乎所有肿瘤的发生发展均与Wnt通路的失调有关。Wnt/β-catenin信号转导的异常激活,可以通过对免疫细胞的直接或间接作用,促进免疫排斥,进而阻碍T细胞介导的抗肿瘤免疫反应。本文对Wnt/β-catenin信号影响肿瘤进展和免疫监视的过程,以及靶向该信号通路治疗癌症的策略作一综述。

过敏性哮喘中肺部树突状细胞体内趋化实验研究

目的研究过敏性哮喘中DC与CD4^+T淋巴细胞的相互作用,探讨过敏性哮喘中DC在体内是否可以直接趋化CD4^+T细胞,从而为哮喘治疗提供新的方向。方法分选C57BL/6哮喘模型小鼠肺部DC注射到小鼠后背气泡中,细胞注射12 h后,流式细胞仪检测气泡内CD4^+T淋巴细胞数目。结果与仅注射PBS的对照相比,注射DC组趋化至气泡内的CD4^+T细胞显著上升。结论本研究表明过敏性哮喘中DC在体内可以直接趋化CD4^+T细胞。

混合教学法在生物化学与分子生物学教学中的应用

以我校2016级临床医学专业学生为研究对象,在生物化学与分子生物学教学中践行混合教学法,通过期末考试及调查问卷分析探讨学生理论知识和主动学习能力的提高情况,以评价该教学法在提高教学质量中的可行性。

番茄Lehsp23.8启动子的热诱导表达调控序列鉴定

番茄线粒体小分子热激蛋白(Lehsp23.8)启动子是典型的热诱导启动子。为了研究热激条件下该启动子的调控序列,本研究将不同长度的Lehsp23.8启动子序列与gus基因融合,构建5′缺失植物表达载体。然后用农杆菌介导法转化烟草,PCR及Southern blotting结果表明融合基因已经整合到烟草基因组中。GUS组织化学染色结果表明:不同长度Lehsp23.8启动子转基因植株热激处理后,在幼苗根、茎、叶以及花和果实中均表现出GUS活性,只是染色强弱有差异。叶片中GUS荧光活性测定结果表明:在热激处理条件下,565bp的Lehsp23.8启动子介导的GUS表达最强;而255bp的Lehsp23.8启动子介导的GUS表达最弱。说明Lehsp23.8启动子中255bp的序列即能满足该启动子的热激表达,-565bp～-255bp之间存在明显的增强子元件,而-871bp～-565bp之间的片段具有一定的抑制作用。

六年制临床医学与英语专业生物化学双语教学探讨

为了深化医学教育改革,进一步提高生物化学教学质量,我们教学团队从2003年开始在6年制临床医学与英语专业试行双语教学,从教学大纲制定、教材选择与编写、教学方法改革等多方面进行了尝试。通过近10年的尝试和努力,我们根据学生专业特点和专业基础形成了该专业学生的双语教学模式。抽样问卷调查显示学生对生物化学双语教学满意者达29%,基本满意达56%,不满意者为15%。而且在学校组织的教学效果评价中,成绩逐年提高。

紫草提取物抗肿瘤的作用机制

紫草(Lithospermum erythrorhizon Sieb.et Zucc.)作为传统中药,其化学成份复杂,具有广泛的药理作用,抗肿瘤作用是其中之一。紫草提取物能抑制多种肿瘤细胞生长增殖,导致肿瘤细胞凋亡。其作用机制包括:下调癌基因在癌细胞中的表达、抑制基因转录、抑制DNA拓扑异构酶(DNA topoisomerase)和DNA合成、抗有丝分裂和抗血管发生、诱导活性氧(reactive oxygen species,ROS)产生、调节促分裂原活化的蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路、引起Bcl-2蛋白家族表达变化进而促进细胞色素C(cytochrome C)的释放、激活胱天蛋白酶(caspase)家族启动凋亡、致肿瘤细胞周期阻滞、影响死亡受体家族及其相关蛋白活性等。