家兔脊髓缺血再灌流皮层体感诱发电位的变化及其意义

目的：观察缺血再灌流损伤脊髓感觉传导功能的变化规律。方法：２４只家兔随机化方法分为对照组、缺血３０ｍｉｎ组、缺血６０ｍｉｎ组和缺血９０ｍｉｎ组，以选择性腰动脉阻断法模拟脊髓缺血再灌流损伤，记录各组在伤前、缺血及再灌流时皮层体感诱发电位（ＣＳＥＰ）的变化。结果：缺血（１３．２±４．０）ｍｉｎ时ＣＳＥＰ消失，再灌流时，各组家兔ＣＳＥＰ的Ｎ１和Ｐ１波峰潜时总体变化趋势为缺血９０ｍｉｎ组＞缺血６０ｍｉｎ组＞缺血３０ｍｉｎ组＞对照组。结论：脊髓缺血时间越长，再灌流损伤越重，脊髓的感觉传导功能损害越明显。

脊髓缺血再灌流对其血流量变化及其病理改变关系的研究

目的：研究缺血再灌流损伤脊髓血流量的变化及其与脊髓病理改变间的关系。方法：20只成年日本大耳白家兔随机分为对照组、缺血30min组、缺血60min组和缺血90min组，用氢清除法测定脊髓血流量（SCBF），尼氏染色观察受损脊髓病理变化。结果：完全缺血时SCBF为0ml·100g-1·min-1，再灌流过程中各组SCBF较缺血时有不同程度的恢复，但较伤前仍有不同程度的下降，并以缺血60min、90min组下降明显；脊髓病理改变以灰质受损最明显，病变严重程度为缺血90min组＞缺血60min组＞缺血30min组＞对照组。结论；缺血时间越长，再灌流后SCBF下降越明显，病理损害也越重。

脊髓损伤实验模型的研究概况与应用

脊髓损伤防治与再生修复是当今神经科学的重大难题和研究热点,其突破的基本前提是建立理想的实验模型。自Allen首次建立脊髓打击伤模型以来,脊髓损伤模型的研究一直处于不断发展之中,动物模型总体上可达到不完全损伤、完全性损伤及横断性损伤的要求,基本能反应临床脊髓损伤实际。根据致伤因素、方法的不同,脊髓损伤模型可分为脊髓挫伤、脊髓压迫损伤(背侧压迫、腹侧压迫和纵向压缩损伤)、可调控的挫伤、缺血再灌流损伤、横断损伤、化学损伤和脊髓火器伤等模型。这些脊髓损伤模型的制作原理、方法及特点各有不同,应根据具体研究目的的需要做出科学合理的选择。

缺血再灌流损伤致脊髓传导功能的变化及2氨基膦酸基戊酸的影响

为探讨缺血再灌流损伤脊髓传导功能的变化及２ 氨基膦酸基戊酸（ＡＰＶ）的影响，１２ 只家兔随机均分为缺血６０ｍ ｉｎ 组和缺血６０ｍ ｉｎ＋ ＡＰＶ 治疗组，以选择性腰动脉阻断法模拟脊髓缺血再灌流损伤，观测各组在缺血前、缺血时及再灌流时皮层体感诱发电位（ＣＳＥＰ）和运动诱发电位（ＭＥＰ）的变化。结果：缺血（１３．２±４．０）ｍ ｉｎ、（２０．６±５．７）ｍ ｉｎ 时ＣＳＥＰ、ＭＥＰ分别消失，再灌流８ｈ 后ＡＰＶ 治疗组ＣＳＥＰ和ＭＥＰ的Ｎ１ 和Ｐ１ 波峰潜时较损伤组明显缩短。表明ＣＳＥＰ能更早地反映脊髓损伤情况，ＭＥＰ则对脊髓损伤的预后功能判断更有意义。

大鼠星形胶质细胞和少突胶质细胞的纯化培养与鉴定

目的纯化培养并鉴定大鼠脑组织星形胶质细胞和少突胶质细胞。方法根据星形胶质细胞和少突胶质细胞的生长时间差异、细胞生长方式及细胞对培养层粘附等特性的不同，改进ＭｃＣａｒｔｈｙ方法纯化培养星形胶质细胞和少突胶质细胞，用免疫组化法对其鉴定。结果（１）混合培养的星形胶质细胞和少突胶质细胞生长分化状况均优于纯化后的生长，以少突胶质细胞表现更为明显；（２）星形胶质细胞呈向心性生长，细胞相邻的接触面有较多的伪足；（３）传代培养的星形胶质细胞保持较强的分裂增殖能力，可在１周左右生长至完全融合，其纯度可达％％以上。纯化后的少突胶质细胞生长缓慢，抗物理、化学损伤的能力差，收获细胞丰度低，传代效果差。结论（１）星形胶质细胞和少突胶质细胞存在相互促进生长的作用；而少突胶质细胞对损伤因素更敏感。（２）星形胶质细胞纯化培养较易；少突胶质细胞纯化培养较难。（３）改良 ＭｃＣａｒｔｈｙ方法简单可靠。

缺血再灌流对大鼠脊髓神经元放电的影响

成年Ｗｉｓｔａｒ大鼠８６只，于左肾动脉上１ｃｍ处阻断腹主动脉（ＡＡ）血流以模拟腰段脊髓局部缺血和再灌流，其中３６只大鼠随机均分为ＡＡ血流阻断和再灌流２、５、１０ｍｉｎ三组，用氢清除法测定ＡＡ阻断前、阻断时和再灌流时Ｌ２节段灰质脊髓血流量（ｇＳＣＢＦ）；另５０只大鼠用玻璃微电极记录Ｌ２节段脊髓单位放电（ＳＣＵＤｓ），并观测ＳＣＵＤｓ在ＡＡ血流阻断和再灌流２、５、１０ｍｉｎ时的变化，以探讨脊髓缺血再灌流对ＳＣＵＤｓ的影响。结果表明：大鼠脊髓神经元对缺血十分敏感，即使ｇＳＣＢＦ轻微下降，也可引起神经元的放电频率明显增加，神经元兴奋性增强；ＡＡ再灌流缺血程度加重时则其放电频率逐渐减少，神经元兴奋性降低，耐受力减弱。

大鼠脊髓缺血再灌流时脊髓神经元对躯体和内脏传入刺激的反应

５０只大鼠用乌拉坦麻醉，箭毒制动。通过阻断腹主动脉血流以模拟腰段脊髓的局部缺血和再灌流损伤，玻璃微电极记录Ｌ２节段脊髓单位放电（ＳＣＵＤｓ），观察缺血再灌流时脊髓神经元对腓神经刺激（ＰＮＶ），内脏大神经刺激（ＶＬＮＶ）及两者同时刺激（ＳＶ）的反应。结果在缺血前所记录的１３３个自发放电单位中，对３种刺激均产生兴奋（Ｅ）、抑制（Ｉ）及无反应（ＮＲ）３种形式的反应，表明大鼠Ｌ２节段脊髓存在躯体、内脏和躯体内脏反应性神经元，并有会聚和阻塞现象。在脊髓缺血再灌流时，神经元对ＰＮＶ、ＶＬＮＶ、ＳＶ也产生Ｅ、Ｉ、ＮＲ３种形式的反应，提示脊髓缺血再灌流时神经元对躯体和内脏传入刺激的反应形式不受影响；但缺血时ＳＣＵＤｓ对ＰＮＶ、ＶＬＮＶ产生反应的单位数减少，这表明脊髓缺血损伤时神经元对躯体和内脏传入刺激的反应性减弱，随着缺血损伤加重。

兴奋毒性神经损伤学说的新发展

兴奋毒性损伤学说是中枢神经系统疾病与损伤时神经元死亡的重要机制之一。近年大量的实验研究表明 ,兴奋性氨基酸的兴奋毒性作用还与γ 氨基丁酸、神经胶质、谷氨酰胺等密切相关 ,而且除经典的兴奋性氨基酸离子型受体外 ,还有代谢型受体也参与了兴奋毒性作用。

家兔缺血再灌流损伤脊髓的病理学研究

目的 探讨缺血再灌流损伤脊髓的病理变化特征及其意义。方法 用 30只成年家兔 ,随机均分为正常组、对照组、缺血 30分钟组、缺血 6 0分钟组和缺血 90分钟组 ,以选择性腰动脉阻断法制备腰髓缺血再灌流损伤模型 ,术后 1、3、7、14天时 ,取腰髓进行HE和Holmes还原银染色以观察其病理学改变。结果 (1)受损脊髓组织早期即发生出血、水肿、变性坏死 ,伤后 7天时可见明显的炎性细胞浸润 ,伤后 14天炎性反应减轻 ;(2 )脊髓灰质的病理损害明显重于白质 ;(3)再灌流脊髓病理损伤程度依次为缺血 90分钟组 >缺血 6 0分钟组 >缺血 30分钟组 >对照组 >正常组。结论 缺血时间越长 ,再灌流脊髓病理损害越重 ,表现为急性进行性。

神经生长因子促进周围神经血管形成的实验研究

[目的]探讨神经生长因子(nerve growth factor,NGF)在大鼠坐骨神经再生过程中促进血管形成的作用。[方法]利用自行研制的梭形双通道桥接管桥接36只SD大鼠坐骨神经长10mm缺损。将动物随机分为2组,A组:医用几丁糖凝胶组;B组:医用几丁糖凝胶+NGF和医用几丁糖凝胶+睫状神经营养因子(ciliary neurotrophic factor,CNTF)。术后4、8、16周观察再生神经的大体形态,并用HE染色和透射电镜观察再生神经的束间及束内血管分布。[结果]A组2支管内再生神经大体观察无明显差异,B组NGF侧再生神经外观呈粉红色或淡红色,质脆,弹性差;CNTF侧再生神经呈淡黄性,质韧,弹性佳。HE染色见NGF侧再生神经较CNTF侧再生神经排列紊乱,其束间及束内的血管较多见;超微结构示:B组NGF侧再生神经较少,但可见较多的成纤维细胞和丰富的新生血管。[结论]虽然NGF对周围神经再生的促进作用不及CNTF,但其在神经再生的早、中、晚期均具有较为明显的血管形成作用,其作用机制可能与成纤维细胞增殖密切相关。

三七总皂甙对脊髓损伤后脊髓血流量和感觉诱发电位的影响

目的 探讨脊髓损伤后三七总皂甙 (totalsaponinsofpanaxnotoginseseng ,PNS)对脊髓血流量及神经功能的影响。方法 Wistar大鼠 2 0只 ,随机分为生理盐水对照组 (NS组 )和PNS治疗组 (PNS组 )。Allen’s打击法 5 0gcm ( 5g× 10cm)致伤大鼠L1 L2 段脊髓 ,立即腹腔注射PNS(生理盐水配制 ,10ml kg ,2 0mmol L) ,于伤前、伤后即刻、1、3、6、2 4h分别记录T13段脊髓血流量、脊髓感觉诱发电位。结果 与盐水对照组比较 ,应用PNS后 ,大鼠SCBF、SEP明显优于生理盐水对照组 (P <0 0 5 )。结论 大剂量PNS能有效改善损伤早期脊髓微循环 。

内毒素肝损伤过程中枯否细胞NF-κB和AP-1活性变化及其生物学意义

为探讨内毒素肝损伤过程中 ,枯否细胞 (Kupffercells,KCs)内主要转录因子Nuclearfactor kappaB(NF κB)、Activatorprotein 1 (AP 1 )活性的动态变化规律 ,采用健康昆明种小鼠 ,随机分组如下 :Lipopolysaccharide(LPS)尾静脉注射 3h的量效关系 :正常对照组和低 ( 1mg kg)、中 ( 5mg kg)、高 ( 1 0mg kg) 3个内毒素剂量组 ;注射 5mg kgLPS的时效关系 :正常对照、0 .5、1、3、5、8h组 .Electrophoreticmobilityshiftassay(EMSA)法检测KCs中NF κB、AP 1活性 .结果发现 ,内毒素肝损伤过程中 ,KCs中NF κB、AP 1在不同时效和量效均不同程度活化 .提示 ,二者的活化与炎症反应的调控机制紧密相关 。

大鼠坐骨神经离断后功能和超微病理变化

目的应用神经营养因子(NGF)观察大鼠坐骨神经离断再吻合后运动功能和病理变化,验证外周神经损伤后的NGF对神经元存活及再生的促进作用。方法采用大鼠右侧坐骨神经在梨状肌下缘10mm处完全切断,将两断端用10-0无损伤缝线,缝合神经外膜对称缝合4针,实验分为NGF组和生理盐水对照组。损伤后,每日给肌注NGF(5mg/L共20μl)和生理盐水(20μl)。结果诱发电位判断运动电位(MEP)损伤后30d观察,治疗组(5.8±1.7)ms,对照组(17.5±2.4)ms,治疗组比生理盐水对照组潜伏期缩短(P<0.05,t=43.5)。感觉电位(SEP)损伤后30d观察,治疗组(9.4±2.8)ms,对照组(19.1±2.7)ms,治疗组比对照组潜伏期缩短(P<0.05,t=5.1)。光镜观察髓鞘肿胀变性,炎细胞浸润再生纤维增多。电镜:损伤组脱髓鞘变化轴浆基质变性,线粒体肿胀较重,治疗组比对照组病理变化程度减轻,但仍有脱髓鞘和结构排列紊乱等变化。结论NGF可促进神经膜细胞增殖分化,为神经再生提供有效的微环境。

肌萎缩侧索硬化发病机制的研究进展

肌萎缩侧索硬化(ALS)是最常见的一种运动神经元疾病,分为家族性和散发性。一般认为,ALS的发病机制主要包括基因突变、氧化应激、兴奋毒性、线粒体异常和免疫炎症反应等。这些发病机制之间相互联系,相互影响,最终引起了以运动神经系统为主的多系统病变。

蛇毒神经生长因子对大鼠坐骨神经损伤功能修复的时效作用研究

目的 :研究蛇毒神经生长因子 (SNGF)对大鼠坐骨神经损伤修复的时效作用。方法 :建立大鼠坐骨神经钳夹模型 ,局部滴加药物和术后肌注 90 0Bu/kg的SNGF ,分别给药 14、2 1和 2 8d。通过展爪反射、趾间距、脊髓诱发电位(SEP)、运动诱发电位 (MEP)观察 ,评定蛇毒神经生长因子对大鼠坐骨神经损伤修复的时效作用。结果 :蛇毒NGF以90 0Bu/kg剂量 ,每天于伤侧肌肉注射一次 ,分别给药 14、2 1、2 8d均有促进伤侧神经功能恢复的作用 ,且具有一定的时效关系 ,给药 2 1、2 8d组治疗效果较给药 14d组效果好 (P <0 .0 5 )。 2 1d组与 2 8d组间无明显差别。结论 :SNGF对大鼠坐骨神经损伤的修复作用具有一定的时效作用。

NGF与CNTF促进周围神经轴浆运输功能恢复的比较研究

目的: 比较神经生长因子 (nervegrowthfator, NGF) 与睫状神经营养因子 (cili aryneurotrophicfactor, CNTF) 对周围神经轴浆运输功能恢复的促进作用。方法: 利用自行研制的梭形双通道桥接管桥接 32只SD大鼠坐骨神经长 10mm缺损。将动物随机分为 2组。A组: 医用几丁糖凝胶组; B组: 医用几丁糖凝胶+NGF和医用几丁糖凝胶 +CNTF。术后 12、16周对再生神经行辣根过氧化物酶和核黄逆行示踪, 并取再生神经行Holmes银染。结果: 术后 12、16周, Holmes银染观察到A组两支管内再生纤维无明显差异, B组CNTF侧再生纤维较NGF侧再生神经外膜薄, 排列整齐, 粗细均匀; 辣根过氧化物酶和核黄显示: 与NGF侧相比,CNTF侧再生神经示踪后, 脊髓内被标记的阳性神经元数目多, 分布稠密。结论: CNTF对周围神经再生纤维形态结构和轴浆运输功能的恢复均优于NGF。