长链非编码RNA RP11-497E19.1对胃癌细胞增殖和侵袭的影响及机制实验研究

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)RP11-497E19.1对胃癌细胞增殖和侵袭的影响及其机制。方法:实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测胃癌HS-746T、BGC823、NCI-N87、SGC7901、AGS细胞和永生化胃上皮细胞GES-1中RP11-497E19.1表达水平,筛选表达最高的细胞进行后续实验。将HS-746T细胞分为si-NC组和si-RP11-497E19.1组,分别转染阴性对照寡核苷酸或RP11-497E19.1小干扰RNA。集落形成实验和Transwell实验分析转染HS-746T细胞的增殖、侵袭能力。双荧光素酶报告基因实验验证RP11-497E19.1与微小RNA(miR)-545-5p的靶向关系。RT-qPCR检测转染HS-746T细胞miR-545-5p的表达。Western blot检测转染HS-746T细胞间质表皮转化因子(c-Met)/胆绿素还原酶(BVR)/活化复制因子2(ATF-2)分子通路相关蛋白的表达。结果:与GES-1细胞比较,HS-746T、BGC823、NCI-N87、SGC7901、AGS细胞中RP11-497E19.1表达水平均上升,且HS-746T细胞RP11-497E19.1表达水平最高(均P<0.05)。与si-NC组比较,si-RP11-497E19.1组HS-746T细胞活力和细胞侵袭数降低(均P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验证实RP11-497E19.1靶向结合miR-545-5p,可负向调控miR-545-5p表达(P<0.05)。与si-NC组比较,si-RP11-497E19.1组HS-746T细胞c-Met/BVR/ATF-2分子通路蛋白c-Met、BVR、p-ATF-2、锌指蛋白1(Snail1)、锌指蛋白2(Snail2)表达降低(均P<0.05)。结论:胃癌细胞中RP11-497E19.1呈高表达,沉默RP11-497E19.1通过靶向miR-545-5p/c-Met/BVR/ATF-2分子通路抑制胃癌HS-746T细胞的增殖及侵袭。

EVL联合生长抑素治疗肝硬化EGVB患者的临床疗效分析

分析EVL联合生长抑素治疗肝硬化EGVB患者的临床疗效。方法 选取我院的60例肝硬化EGVB患者,随机分为观察组和对照组,各30例,对照组采用生长抑素治疗,观察组采用EVL联合生长抑素治疗,对比两组效果。结果 观察组治疗效果明显优于对照组(P<0.05)。结论 EVL联合生长抑素治疗肝硬化EGVB患者的具有良好的效果。

GK-IT1抑制JAK信号通路对胃癌细胞增殖和侵袭迁移的影响

目的研究长链非编码RNA GK内含子转录本1(GK-IT1)通过Janus激酶(JAK)信号通路对胃癌细胞生物学活性的影响。方法UALCAN平台分析胃癌组织中GK-IT1的表达。通过实时定量PCR(qPCR)评估GK-IT1在人胃癌细胞中的表达。BSG-823细胞进行GK-IT1干扰片段si-GK-IT转染或si-GK-IT转染与JAK2信号通路激活剂Coumermycin A1两者联合处理,分为阴性对照组、si-GK-IT1组和si-GK-IT1+JAK2组。通过CCK-8、划痕和Transwell实验评估细胞增殖、迁移和侵袭情况。qPCR或Western blot检测B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(CCP3)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和磷酸化Janus激酶2(p-JAK2)的表达。结果GK-IT1在胃癌组织中表达上调,且与肿瘤分期和分级有关(P<0.05)。与胃黏膜上皮细胞RGM-1相比,胃癌细胞中GK-IT1表达水平更高(P<0.05)。与阴性对照组相比,si-GK-IT1组细胞增殖、迁移和侵袭能力减弱;si-GK-IT1+JAK2组逆转了上述结果(P<0.05)。与阴性对照组相比,si-GK-IT1组Bcl-2、MMP-9和p-JAK2的表达降低,而CCP3的表达升高(P<0.05);与si-GK-IT1组相比,除CCP3表达降低外,si-GK-IT1+JAK2组的其余因子表达增加(P<0.05)。结论GK-IT1通过JAK信号通路抑制来调控胃癌细胞的增殖和迁移侵袭过程,有望成为胃癌的潜在靶点。

TIPS感染研究现状

TIPS感染是TIPS患者术后的并发症,影响感染发生的因素很多。目前对TIPS感染的定义尚不十分明确。TIPS感染的发生主要与操作、分流、支架植入等因素相关。本文主要从引起TIPS感染的方面进行综述,旨在探讨TIPS感染的防治,为临床提供参考。

RNA干扰ACLY表达对结肠癌SW480细胞周期、凋亡和AKT信号通路的影响

目的探讨RNA干扰ATP-柠檬酸裂解酶(ACLY)表达对结肠癌SW480细胞周期和凋亡的影响及其机制。方法将体外培养的SW480细胞分为Ctrl组、NC-siRNA组和ACLY-siRNA组,采用Western blot检测各组细胞中ACLY蛋白和蛋白激酶B(AKT)信号通路相关蛋白细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达以及AKT鳞酸化水平,噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞周期分布和凋亡率。结果与Ctrl组相比,ACLYsiRNA组细胞中ACLY、CyclinD1、Bcl-2蛋白的表达水平、细胞存活率、细胞在S期和G2/M期百分比以及AKT鳞酸化水平均明显降低,而细胞在G0/G1期百分比、细胞凋亡率和Bax蛋白的表达水平均明显升高(P<0.05);NC-siRNA组与Ctrl组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论RNA干扰ACLY表达可诱导结肠癌细胞周期阻滞和凋亡,其作用机制可能与抑制AKT信号通路的活化有关。

NDRG-1异常甲基化及对胃癌细胞恶性生物学行为影响的研究

目的:探讨N-myc下游调节基因1(NDRG-1)甲基化对胃癌细胞恶行生物学行为的影响。方法:用免疫组织化学法检测NDRG-1在胃癌组织及癌旁组织中的表达;qRT-PCR与Western blot检测胃癌细胞SGC7901及胃正常黏膜上皮细胞RGM-1中NDRG-1的表达,MSP法检测胃癌组织及癌旁组织、胃癌细胞及正常胃上皮黏膜细胞中NDRG-1的甲基化状态。MSP法检测5-Aza-CdR处理的SGC7901细胞的甲基化水平;应用qRT-PCR、Western blot及免疫荧光染色与Transwell、划痕闭合实验和流式细胞术检分别检测5-Aza-CdR处理的SGC7901及si-NDRG-1转染5-Aza-CdR处理的SGC7901细胞中NDRG-1表达水平与细胞侵袭、迁移及凋亡能力变化。结果:胃癌组织及细胞中NDRG-1低表达,且NDRG-1甲基化。与对照组相比,5-Aza-CdR组SGC7901细胞NDRG-1甲基化消除,NDRG-1表达升高,侵袭细胞数与划痕闭合率降低,细胞凋亡能力升高。与5-Aza-CdR+si-NC组比较,5-Aza-CdR+si-NDRG-1组SGC7901细胞NDRG-1表达降低,侵袭细胞数与划痕闭合率升高,细胞凋亡能力降低。结论:胃癌细胞NDRG-1甲基化可促进细胞增殖,抑制细胞凋亡。