推拿对坐骨神经慢性压迫损伤大鼠脊髓背角小胶质细胞P2Y12/RhoA/ROCK2通路及c-Fos蛋白表达的影响

目的观察推拿对坐骨神经慢性压迫损伤大鼠脊髓背角小胶质细胞P2Y12/RhoA/ROCK2通路及c-Fos蛋白表达的影响,探讨推拿治疗腰椎间盘突出症的作用机制。方法采用右侧坐骨神经慢性压迫损伤模拟腰椎间盘突出症神经性疼痛。将24只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组和推拿组,每组8只。造模后第4日,推拿组以按揉法干预,连续14 d。测量造模前及造模后第4、10、17 d大鼠机械缩足阈值(PWT)、热痛阈值(PWL),免疫荧光染色检测大鼠右侧脊髓背角Iba1、P2Y12蛋白表达,Western blot检测右侧脊髓背角RhoA、ROCK2蛋白表达,免疫组化检染色测右侧脊髓背角c-Fos阳性细胞数量。结果与空白组比较,模型组大鼠造模后第4、10、17日PWT、PWL明显降低(P<0.001),右侧脊髓背角Iba1、P2Y12、RhoA、ROCK2蛋白表达明显升高(P<0.001,P<0.05),c-Fos阳性细胞数明显增加(P<0.001);与模型组比较,推拿组大鼠造模后第10、17日PWT、PWL明显升高(P<0.05,P<0.01,P<0.001),右侧脊髓背角Iba1、P2Y12、RhoA、ROCK2蛋白表达明显降低(P<0.001,P<0.01,P<0.05),c-Fos阳性细胞数明显减少(P<0.001)。结论推拿可能通过调控脊髓背角P2Y12/RhoA/ROCK2通路及c-Fos表达抑制小胶质细胞激活,降低神经元兴奋性,对腰椎间盘突出症发挥镇痛作用。

推拿对神经病理性疼痛大鼠脊髓背角中IL-1β、IL-6及c-Fos表达的影响

目的观察推拿对神经病理性疼痛(NP)大鼠机械缩足反射阈值(PWT)、热缩足反射潜伏期(PWL)、脊髓背角白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)及c-Fos蛋白表达的影响,探讨推拿疗法缓解NP的作用机制。方法将36只SPF级雄性SD大鼠随机分为空白组、坐骨神经慢性压迫性损伤(CCI)组、CCI+推拿组,每组12只。采用铬肠线结扎一侧坐骨神经干制作大鼠CCI模型。CCI造模后第4天,CCI+推拿组予推拿按揉造模侧“委中”穴,每次10 min,每日1次,持续14 d。检测造模前及造模后第4、10、14、17天各组大鼠PWT、PWL;干预取材后,采用ELISA法检测大鼠造模侧脊髓背角IL-1β、IL-6含量,尼氏染色观察大鼠造模侧脊髓背角神经元组织形态,免疫荧光染色法检测大鼠造模侧脊髓背角c-Fos蛋白表达。结果与空白组比较,造模后第4、10、14、17天CCI组PWT降低(t=27.52、21.80、14.36、16.23,P均<0.05);与CCI组比较,造模后第10、14、17天CCI+推拿组PWT升高(t=-13.58、-6.83、-8.40,P均<0.05)。与空白组比较,造模后第4、10、14、17天CCI组PWL降低(t=16.61、27.22、24.55、27.21,P均<0.05)。与CCI组比较,造模后第10、14、17天CCI+推拿组PWL升高(t=-9.35、10.79、-21.86,P均<0.05)。与空白组相比,CCI组大鼠造模侧脊髓背角神经元结构受损,尼氏小体减少。与CCI组相比,CCI+推拿组大鼠造模侧脊髓背角神经元结构受损改善,尼氏小体增加。与空白组比较,CCI组大鼠造模侧脊髓背角组织中IL-1β、IL-6含量升高(t=-13.97、10.89,P均<0.05);与CCI组比较,CCI+推拿组大鼠造模侧脊髓背角组织中IL-1β、IL-6含量降低(t=2.98、6.36,P均<0.05)。与空白组比较,CCI组大鼠造模侧脊髓背角中c-Fos蛋白表达增多(t=-7.97,P<0.05);与CCI组比较,CCI+推拿组大鼠造模侧脊髓背角中c-Fos蛋白表达减少(t=7.14,P<0.05)。结论推拿可以有效升高CCI大鼠PWT、PWL,改善脊髓背角神经元组织结构形态,缓解NP,其作机制可能与减少IL-1β、IL-6等炎症因子的表达水平,从而抑制脊髓背角神经元的活化相关。