针对U87-EGFRvⅢ细胞的适配子对胶质瘤荷瘤鼠的抑瘤作用

目的观察应用细胞-配体指数富集的系统进化技术(cell systematic evolution of ligands by exponential enrichment,Cell-SELEX)筛选出的针对稳定过表达表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(epidermal growth factor receptor vari-antⅢ,EGFRvⅢ)的U87-EGFRvⅢ细胞的适配子在荷瘤裸鼠动物模型中的抑瘤作用。方法选用4～6周的雄性裸鼠28只随机分为4组,分别为空白对照组、转染试剂对照组、DNA原库GN对照组、适配子U2治疗组,每组7只。皮下种植U87-EGFRvⅢ细胞悬浮液建立荷瘤裸鼠动物模型,通过in vivojet-PEI TM转染试剂的作用将筛选得到的适配子U2和原库GN分别进行瘤内注射。给药结束1周后,对肿瘤的重量和体积大小进行统计学分析。结果在形体上U2治疗组肿瘤大小明显小于其他组,试剂组与原库GN组均没有明显的差异,统计学分析U2治疗组与其它组的肿瘤重量和体积均有差异(P<0.05)。结论筛选得到的适配子对通过皮下种植U87-EGFRvⅢ细胞悬浮液建立荷瘤裸鼠动物模型中的肿瘤生长有一定的抑制作用,为适配子在荷瘤裸鼠动物模型中的应用提供了一定的技术理论基础。

乌骨藤苷晶体对人宫颈腺癌荷瘤裸鼠肿瘤抑制作用的实验研究

目的研究乌骨藤苷晶体对人宫颈腺癌荷瘤裸鼠肿瘤的抑制作用。方法采用人宫颈腺癌接种裸鼠待长出实体瘤,用第三代实体瘤移植裸鼠皮下建立人宫颈腺癌裸鼠模型;用乌骨藤提取物苷晶体(I、II)(0.24 g/250 m L)分别给实验组裸鼠灌胃0.5 m L/只,对照组给饮用水,每日1次,连续30 d。每周测量体质量和肿瘤大小2次,30 d给药后处死小鼠,解剖,称其肿瘤质量,计算抑瘤率,评价乌骨藤提取物苷晶体(Ⅰ、Ⅱ)对裸鼠荷瘤的抑制作用。结果乌骨藤苷晶体Ⅰ和晶体Ⅱ对人宫颈腺癌荷瘤裸鼠有抑制肿瘤作用,抑瘤率分别88.95%和66.71%,其中晶体Ⅰ和Ⅱ抑制肿瘤作用与对照组比较有显著性差异(晶体Ⅰ,P<0.01;晶体Ⅱ,P<0.05)。结论乌骨藤苷晶体Ⅰ和晶体Ⅱ均有抑制人宫颈腺癌荷瘤裸鼠肿瘤的作用。

蒺藜总螺甾皂苷对人卵巢透明细胞癌荷瘤裸鼠肿瘤抑制作用的实验研究

目的研究蒺藜总螺甾皂苷对人卵巢透明细胞癌荷瘤裸鼠肿瘤的抑制作用。方法采用人卵巢透明细胞癌接种裸鼠待长出实体瘤后,用第二代实体瘤按每鼠约1 mm3瘤组织块移植裸鼠皮下建立人卵巢透明细胞癌裸鼠模型;用蒺藜总螺甾皂苷(高剂量0.42 mg/m L、中剂量0.21 mg/m L)分别给实验组裸鼠灌胃0.3 m L/10 g,对照组只给饮用水,每日1次,连续30 d。每周测量体质量和肿瘤大小2次,给药30 d后处死小鼠,解剖称肿瘤重量,计算抑瘤率,评价蒺藜总螺甾皂苷(高剂量、中剂量)对裸鼠荷瘤的抑制作用;结果蒺藜总螺甾皂苷高剂量和蒺藜总螺甾皂苷中剂量对人卵巢透明细胞癌荷瘤裸鼠有抑制肿瘤作用,抑瘤率分别87.61%和95.26%,其中中剂量抑制肿瘤与对照组比较有显著性差异(P<0.01),高剂量组有统计学意义(P<0.05);结论蒺藜总螺甾皂苷(高剂量、中剂量)均能抑制人卵巢透明细胞癌荷瘤裸鼠肿瘤作用。

FA-CM-β-CD-CDDP纳米药物对鼻咽癌的体内靶向治疗研究

目的探讨叶酸(folic acid,FA)分子靶向载顺铂(cisplatin,CDDP)羧甲基-β-环糊精(carboxymethyl-β-cyclodextrin,CM-β-CD)纳米药物(FA-CM-β-CD-CDDP)对鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)的体内靶向治疗效应。方法荷叶酸受体(folate receptor,FR)表达阳性的HNE-1瘤和FR表达阴性的CNE-2瘤的同一裸鼠经尾静脉给予FA-CM-β-CD-CDDP纳米药物(按CDDP 10mg·kg-1给药)1.5h后,采用原子吸收光谱法检测2种瘤块组织内的CDDP浓度,分析FA-CM-β-CD-CDDP的体内靶向能力。将20只荷HNE-1瘤裸鼠按随机数字表法分为4组(每组5只),均经尾静脉注射给药0.2mL:对照组注射生理盐水,载体组注射FA-CM-β-CD溶液,CDDP组注射浓度为3mg·kg-1的CDDP溶液,纳米药物组注射FA-CM-β-CD-CDDP溶液(含CDDP浓度3mg·kg-1),给药后21d测量各组HNE-1瘤块体积和质量,并采用免疫组化检测瘤块增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达,分析FA-CM-β-CD-CDDP的体内肿瘤抑制效应。结果 HNE-1肿瘤组织内CDDP含量明显高于CNE-2肿瘤组织(P<0.05)。纳米药物组的HNE-1瘤块体积和质量抑瘤率分别为43.36%、41.67%,较载体组(7.91%、5.56%)和CDDP组(24.51%、22.22%)均明显增加;且HNE-1瘤块PCNA阳性细胞指数为47.75%,表达较对照组(90.83%)、载体组(89.62%)和CDDP组(68.43%)均明显降低。结论构建的FA-CM-β-CD-CDDP纳米药物能够靶向抑制FR阳性的NPC瘤块生长。

乌骨藤皂苷类成分提取及体内抗肿瘤作用

分离纯化乌骨藤提取物成分,通过建立荷人宫颈腺癌裸鼠模型,研究其抗肿瘤生物活性作用。采用硅胶色谱方法从乌骨藤提取物中分离纯化得到两个皂苷晶体,利用光谱方法进行了结构确定。通过裸鼠灌胃方法检测乌骨藤皂苷晶体Ⅰ、Ⅱ对荷人宫颈腺癌裸鼠肿瘤抑制作用。乌骨藤晶体Ⅰ、Ⅱ分别被鉴定为11α-O-顺芷酰-12β-O-乙酰通关藤苷元B-3-β-O-D-葡萄吡喃糖基-(1→4)-6-去氧-3-O-甲基-D-阿洛吡喃糖基-(1→4)-D-夹竹桃吡喃糖苷(Ⅰ)、11α-O-顺芷酰-12β-O-乙酰通关藤苷元B-3-β-O-D-葡萄吡喃糖基-(1→4)-β-O-D-葡萄吡喃糖基-(1→4)-6-去氧-3-O-甲基-D-阿洛吡喃糖基-(1→4)-D-夹竹桃吡喃糖苷(Ⅱ)。通过荷人宫颈腺癌裸鼠的肿瘤抑制实验,显示乌骨藤皂苷Ⅰ、Ⅱ对肿瘤生长具有明显抑制作用(P<0.01)。皂苷类成分具有抑制肿瘤生长功效,该类成分在乌骨藤植物中含量高,具有重要的开发研究价值。

高盐高蛋白饮食对Dah1/SS大鼠血压、肾脏和消化道病理变化的影响

目的探讨高盐高蛋白饮食对Dah1/SS大鼠血压、肾脏和消化道病理变化的影响。方法将30只SPF级雄性Dah1/SS大鼠随机分为3个组,即对照组、高盐组和高蛋白组,分别给予0.4%Na Cl普通低盐饲料、8%Na Cl高盐饲料和2.4%蛋氨酸饲料,喂养2个月,每周测量体质量及收缩压1次。实验结束,取大鼠肾脏、食管、胃、小肠、直肠及胰腺经HE染色后进行病理学观察。结果高盐、高蛋白组大鼠体质量增长明显低于对照组;高盐组大鼠收缩压高于对照组和高蛋白组大鼠,差异有统计学意义,高蛋白组大鼠未见血压升高;高盐及高蛋白组大鼠出现了不同程度的肾功能损伤,高盐组大鼠出现了肾脏病理性损伤;高盐和高蛋白饮食未见消化道及胰腺损伤。结论 Dah1/SS大鼠高盐饮食可成功建立盐敏感性高血压模型,且高盐高蛋白饮食对肾脏会造成不同程度的损伤,而对消化道及胰腺未造成损伤。

c-Met siRNA对U87-EGFRvⅢ胶质瘤细胞凋亡和增殖的影响

目的:合成针对c-Met的小干扰RNA(siRNA),研究其对U87-EGFRvⅢ(表皮生长因子受体Ⅲ型突变体)胶质瘤细胞凋亡和增殖的影响。方法:用脂质体转染合成的c-Met siRNA入U87-EGFRvⅢ细胞,未转染组为对照组,荧光实时定量PCR和Western blotting分别检测c-Met基因和蛋白的表达,MTT和Annexin V-FITC/PI法检测细胞增殖和凋亡情况。结果:c-Met siRNA明显抑制c-Met表达(P<0.05);明显增加细胞凋亡率(P<0.05)。同时,c-Met siRNA单独或协同EGFRvⅢsiRNA可抑制胶质瘤细胞增殖(P<0.05)。结论:c-Met siRNA可抑制U87-EGFRvⅢ胶质瘤细胞增殖、诱导其凋亡,为研究c-Met基因在胶质瘤中的作用及其靶向联合治疗提供了理论基础。

铁树雄花提取物对鼻咽癌的抑制作用研究

目的观察铁树雄花水提和水提醇沉提取物对荷鼻咽癌裸鼠抑制作用。方法对铁树雄花分别水提和水提醇沉(醇沉)进行提取有效成份,采用鼻咽癌细胞接种裸鼠待长出实体瘤,将实体瘤移植裸鼠皮下建立荷鼻咽癌裸鼠模型,用铁树雄花提取物(水提取物、水提醇沉提取物)分别给实验组裸鼠灌胃0.3ml/10g,对照组给饮用水,阳性对照组给予去氧氟尿苷,每日1次,连续30d。每周测量体质量和肿瘤大小2次,30d给药后处死小鼠,解剖称肿瘤重量,体积计算公式V=a*b*c*π/6,计算抑瘤率,对肿瘤行组织免疫组化(TUNEL)进行凋亡检测,评价铁树雄花提取物(水提取物、醇沉提取物)对裸鼠荷瘤的抑制作用。结果醇沉组对肿瘤的抑制作用明显,与阴性对照组和水提组比较均有统计学差异(P<0.05);水提组对肿瘤抑制与阴性对照组有统计学差异(P<0.05),但抑制作用没有醇沉组明显;TUNEL结果显示,铁树雄花提取物对肿瘤的凋亡具有很大促进作用,与动物实验结果相吻合。结论铁树雄花水提和醇沉提取物对荷鼻咽癌裸鼠肿瘤具有抑制作用,为铁树雄花开发成抗肿瘤药物研究提供了实验基础。

蒺藜对卵巢癌裸鼠生长的实验研究

目的:观察蒺藜螺甾皂苷对卵巢癌动物模型肿瘤生长的抑制影响。方法:采用BALB/c小鼠接种人卵巢癌实体瘤方法建立卵巢癌模型,用蒺藜螺甾皂苷灌胃0.5ml/只,每日1次,连续30天。每周连续测量体重和肿瘤大小2次,计算瘤体的体积,观察裸鼠的生存时间,观察蒺藜螺甾皂苷对肿瘤生长的影响。结果:蒺藜螺甾皂苷对裸鼠荷瘤有明显的抑制作用;蒺藜螺甾皂苷能延长荷瘤裸鼠的生存期。结论:经初步研究,蒺藜螺甾皂苷有抑制人卵巢癌肿瘤生长作用,可延长生存期,值得进一步探讨。

苄达赖氨酸滴眼液实验兔眼刺激性试验研究

[目的]观察给予苄达赖氨酸滴眼液对实验兔眼所产生的刺激性反应;[方法]采用自身对照法进行实验兔眼刺激性试验,在给药前、给药期间、停药后1、2、4、24、48和72小时,双眼滴1%荧光素钠并用裂隙灯对家兔双眼角膜、虹膜、结膜进行观察,对损失程度按评分标准进行评分。[结果]苄达赖氨酸滴眼液经眼给药后对实验兔眼角膜、虹膜、结膜等均无刺激性,各组平均积分均为0。[结论]苄达赖氨酸滴眼液对实验兔眼无刺激性。

适配子在肿瘤研究中的应用进展

在20世纪90年代初,美国的Tuerk等在实验室中发明了一种叫做指数富集配基的系统进化（systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX）技术,由此技术筛选出来的寡核苷酸命名为适配子（aptamers）。适配子可以和抗体媲美,甚至优于抗体。

达立通提取液颗粒、达立通提取液及回收液颗粒灌胃给药安全性评价

目的:观察达立通提取液颗粒、达立通提取液及回收液颗粒灌胃给药长期毒性反应,比较二者的毒性情况,为临床安全用药及资源再利用提供参考。方法:将SD大鼠分为7组:阴性对照组,达立通提取液颗粒35.01、17.51、8.75 g·kg^(-1)剂量组和达立通提取液及回收液颗粒35.01、17.51、8.75 g·kg^(-1)剂量组。连续灌胃给药3个月,恢复期观察1个月,观察各组大鼠的生长、发育、血液学、血清生化学及病理组织变化,比较二者的毒性反应情况。结果:两种颗粒剂雄性大鼠体重高于阴性对照组,雌性大鼠体重低于阴性对照组,一些时间点体重与对照组差异均有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,随给药时间的延长,给药组大鼠摄食量呈减少趋势,恢复期呈增加趋势;给药末期两种颗粒雄性大鼠高剂量组中性粒细胞百分比(Neu%)减少、淋巴细胞百分比(Lym%)增加(P<0.05),雌性大鼠高剂量组大鼠血小板(PLT)计数均减少(P<0.05),恢复期恢复正常水平;给药末期雄性大鼠达立通提取液颗粒高剂量组丙氨酸转氨酶(ALT)和各剂量组天冬氨酸转氨酶(AST)均减少,达立通提取液及回收液颗粒低中剂量组ALT和AST均减少(P<0.05),恢复期无异常;达立通其提取液及回收液颗粒低中剂量组甘油三酯(TG)增加(P<0.05);给药末期雄性大鼠中高剂量组、雌性大鼠高剂量组肝系数均增加(P<0.05),恢复期无异常;给药后组织病理学检查显示主要病变为肝点状坏死,但与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:经过3个月长期毒性比较研究发现,达立通提取液颗粒和达立通提取液及回收液颗粒无明显毒性区别,无毒反应剂量均为8.75 g·kg^(-1),相当于体重60 kg成人临床用药剂量的16.7倍,毒性反应轻。

1例心源性缺血性脑卒中患者个体化治疗方案的制订及分析

目的:为心源性缺血性脑卒中患者个体化治疗方案的制订提供参考。方法:针对1例心源性缺血性脑卒中患者,临床药师结合缺血性脑卒中、心源性缺血性脑卒中的治疗原则,依据患者病情进展调整降脂方案,依据患者个体情况推荐二级预防,并协助临床医师调整抗感染治疗方案;当患者出现肝功能损伤时,建议停用可能引起肝功能减退的药物;及早发现肾功能损伤,并分析出是因液体循环不足所引起的肾功能损伤,建议及时补液,从抗凝、降脂、抗感染治疗等多方面全程实施药学监护。结果:临床医师采纳药师建议,共同为该心源性缺血性脑卒中患者制订了其个体化治疗方案,患者病情好转,肝、肾功能恢复正常,出院时国际标准化比值(INR)为1.8,控制较好,同时临床药师对其进行出院教育。结论:临床药师参与心源性缺血性脑卒中患者治疗全过程,可依据患者病情变化情况协助医师优化治疗方案,当发生不良反应时,及时更改方案,保证了患者用药的安全性和有效性。

脂肪乳注射液致肌痛不良反应1例

脂肪乳注射液系由注射用大豆油经注射用卵磷脂乳化并加注射用甘油制成的灭菌乳状液体,多用于肠内营养不良患者的支持治疗[1]。其不良反应主要有过敏反应、静脉炎、短暂的肝功能指标异常、中枢神经系统异常、脂肪超载综合征等[2]。本报道发现其有肌痛的风险,现报道如下。1临床资料患者,患者,男性,70岁,因胃癌术后反复胸闷3月余,再发2d于2015年10月8日入院。

临床药师参与帕金森病伴高同型半胱氨酸血症患者的药学监护

探讨临床药师在帕金森病伴高同型半胱氨酸血症患者的药物治疗中的作用。通过对帕金森药物、高同型半胱氨酸血症治疗及药物不良反应等方面全程实施药学监护,向医师提出合理建议。临床药师在参与患者诊疗过程中,从药学角度协助医师优化用药方案,能一定程度提高临床药物疗效,改善了临床用药的合理性。

ICP-AES法测定麻杏石甘汤杏仁剂量变化对微量元素的影响

目的观察麻杏石甘汤中杏仁剂量变化对Ca、Mg、Fe、Mn和Cu微量元素溶出的影响,为随证施量提供理论参考。方法改变麻杏石甘汤中杏仁剂量,固定其他药材(麻黄、石膏、甘草)剂量,利用电感耦合高频等离子体原子发射光谱(ICPAES)测定各水煎液中5种微量元素的溶出总量。结果元素Ca、Mg、Fe、Mn、Cu的回收率分别100. 67%,98. 17%,99. 84%,98. 83%,97. 72%;精密度试验结果分别为0. 91%,0. 97%,1. 04%,1. 09%,1. 07%。Ca的溶出总量与杏仁剂量及加水量均呈现正相关(r均为0. 992,P均为0. 000)。Mg、Fe、Mn的溶出总量与杏仁剂量呈现负相关(r分别为0. 957,0. 944,0. 944,P均为0. 000)。Cu与杏仁剂量的相关性不显著(r=0. 489,P=0. 229)。结论 ICP-AES法具有良好的准确度和精密度。Ca的溶出总量受加水量影响,Mg、Fe、Mn的溶出总量随着杏仁剂量增加而减少,Cu的溶出总量与杏仁剂量变化无关。

莪术醇对HNE1鼻咽癌细胞荷瘤鼠的抑瘤作用

目的考察研究莪术醇对HNE1鼻咽癌细胞荷瘤鼠的抑瘤作用。方法体外通过细胞划痕试验,考查莪术醇不同浓度(12.5μg/mL、25μg/mL、50μg/mL、100μg/mL)对HNE1鼻咽癌细胞迁移能力的影响,计算细胞迁移率(细胞迁移率(%)=(0 h划痕距离-12 h//24 h/48 h划痕距离)/0 h划痕距离×100%);体内采用HNE1鼻咽癌细胞接种裸鼠待长出实体瘤,将实体瘤移植裸鼠皮下建立HNE1鼻咽癌荷瘤鼠模型,用莪术醇分别给实验组裸鼠灌胃0.79 mg/10 g,对照组给灭菌蒸馏水,阳性组给予去氧氟尿苷,每日1次,连续30 d。每周测量体质量和肿瘤大小2次,第30天给药后处死小鼠,解剖称肿瘤质量,体积计算公式V=a×b×c×π/6,计算抑瘤率,评价莪术醇对HNE1鼻咽癌荷瘤鼠的抑制作用。结果与对照组比较,体外试验证明莪术醇100μg/mL对HNE1鼻咽癌细胞迁移性有统计学意义(P<0.05),体内试验证明莪术醇组对HNE1鼻咽癌细胞荷瘤鼠肿瘤的抑制作用明显,抑瘤率为34.04%,肿瘤质量与对照组比较有统计学意义(P<0.05),与对照组和去氧氟尿苷组比较,肝脏和脾脏系数均有统计学意义(P<0.05),且与去氧氟尿苷组比较,肝脏系数有统计学意义(P<0.05)。结论通过实验得出莪术醇能降低HNE1鼻咽癌细胞迁移能力并对荷瘤鼠肿瘤具有抑制作用,为莪术醇对肿瘤的抑制作用研究提供了实验基础。

钠钾镁钙葡葡糖注射液致腹泻1例

钠钾镁钙葡葡糖注射液为电解质补充剂,用于补充水分与维持体内电解质平衡。其主要组分为每1 000 ml中含氯化钠6.372 g,氯化钾0.30 g,氯化镁0.204 g,醋酸钠2.052 g,枸橼酸钠0.588 g,葡萄糖酸钙0.672 g,葡萄糖10 g。临床中发现其有致泻风险,现报道如下,从而为临床用药监护提供参考。

临床药师参与化脓性脑膜炎患者使用万古霉素引起粒细胞减少伴发热的药学监护

临床药师参与化脓性脑膜炎患者使用万古霉素引起粒细胞减少伴发热治疗,通过分析用药,建议停用万古霉素,加用利可君片、退热对症处理,临床医师采纳,患者粒细胞恢复,未再出现发热。保证了患者临床用药的安全性和有效性,为临床药师参与化脓性脑膜炎患者使用万古霉素引起粒细胞减少伴发热治疗开展药学服务提供参考。

右旋糖酐铁注射液对雌雄性新西兰家兔注射部位吸收效果的比较

目的考查右旋糖酐铁注射液对雌、雄家兔铁的吸收度,并对测定结果进行比较和评价。方法选用新西兰家兔右后腿进行股内肌注射,采用自身空白对照法设置对照组,肉眼观察肌肉着色情况,用紫外分光光度法测定铁的吸收度,分别计算出雌雄新西兰家兔未吸收铁的含量;对家兔每日的饮食量进行称量,所有数据采用平均值±标准差(x珋±s),组间比较采用t检验。结果雌性新西兰家兔比雄兔对右旋糖酐铁的铁吸收更好,而且注射部位染色能力及在组织中扩散均小,对雌性家兔日均饮食量无显著影响;雄性家兔在第5天、第6天饮食量与雌性差异有统计学意义。结论不同性别的家兔对右旋糖酐铁注射液的铁的吸收度存在明显的差别,雌性新西兰家兔铁吸收优于雄性新西兰家兔,两者有统计学差异(P<0.05),与雌性家兔日均饮食量比较,右旋糖酐铁对雄性家兔饮食的作用差异有统计学意义(P<0.05)。提示右旋糖酐铁的疗效与动物性别有关,临床上应加强对铁注射液的合理选择及应用。