基于PARP1信号通路研究芒柄花素对糖氧剥夺/复氧复糖神经元细胞损伤的影响

目的 基于PARP1信号通路研究芒柄花素对糖氧剥夺/复氧复糖神经元细胞损伤的影响,为揭示运用锦鸡儿异黄酮治疗脑缺血再灌注损伤提供理论依据。方法 建立小鼠神经元细胞(HT22)糖氧剥夺/复氧复糖(OGD/R)模型,通过Western blot检测糖氧剥夺/复氧复糖不同时间HT22神经元细胞中PARP1和PARG表达情况,选择通路变化最佳时间点。分别使用芒柄花素、PARP1抑制剂(PJ34)和PARG抑制剂处理OGD/R后的HT22细胞,设置6个组,分别为对照组、对照组+芒柄花素组、OGD/R组、OGD/R+芒柄花素组、OGD/R+PJ34组、OGD/R+PARG抑制剂组。对照组HT22细胞正常培养,不进行OGD/R处理;采用免疫荧光、Western blot法检测各组细胞凋亡因子、相关蛋白表达水平。结果 在糖氧剥夺/复氧复糖3 h后,HT22细胞中PARP1通路激活最明显,在OGD/R 3 h条件下,芒柄花素、PJ34或PARG抑制剂处理后可提高E3泛素连接酶(Iduna),抑制PARP1、PARG通路蛋白表达,并降低AIF和P53表达,提高AKT蛋白磷酸化水平。结论 HT22小鼠神经元细胞在OGD/R条件下,芒柄花素可通过提高Iduna蛋白表达抑制PARP1/AIF/Akt信号通路减轻HT22小鼠神经元细胞损伤。

小半夏加茯苓颗粒抗顺铂所致家鸽呕吐的药效学观察

目的:比较小半夏加茯苓颗粒不同剂量抗化疗呕吐家鸽的药效以及与原方汤剂的药效差异。方法:用顺铂造家鸽急性化疗呕吐模型和延迟性化疗呕吐模型;随机分为空白组Ⅰ、模型组Ⅱ、盐酸昂丹司琼阳性对照组Ⅲ、小半夏加茯苓汤剂组Ⅳ、小半夏加茯苓颗粒抗延迟性化疗呕吐模型组Ⅷ以及小半夏加茯苓颗粒小剂量Ⅴ、中剂量Ⅵ、大剂量Ⅶ组;以呕吐潜伏期、呕吐次数和呕吐频率为指标观察各组的呕吐情况。结果:与Ⅱ组比较,Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅴ组发生呕吐次数最少(P<0.05),Ⅷ组和Ⅵ组较多(P<0.05),Ⅶ组发生呕吐的次数最多(P>0.05)。结论:小半夏加茯苓颗粒和小半夏加茯苓汤小剂量均可显著对抗顺铂所致家鸽急性呕吐,二者药效无显著性差异,其小剂量对延迟性呕吐也有对抗作用。

疏毛吴茱萸提取物缓解家兔离体肠肌痉挛的谱效关系研究

目的研究疏毛吴茱萸提取物指纹图谱特征峰所代表的化学成分与缓解家兔离体肠平滑肌痉挛的相关性,建立"谱-效关系",为中药质量控制方法提供参考。方法用高效液相色谱(HPLC)指纹图谱技术,建立疏毛吴茱萸缓解肠肌痉挛各提取部位的指纹图谱,结合离体肠肌试验观察疏毛吴茱萸各提取部位对家兔离体肠平滑肌运动的影响,揭示其药效物质基础,分析谱效关系。结果建立了疏毛吴茱萸水、醇提取物缓解肠肌痉挛的HPLC指纹图谱,标示出醇提取物指纹图谱中有20个特征峰和水提取物19个特征峰,并且醇提取物保留了传统水煎液的药效,进一步鉴定了醇提取物特征峰中的8个化学成分。结论该研究为疏毛吴茱萸缓解肠肌痉挛有效部位及提取方法质量标准的控制提供了参考,对疏毛吴茱萸缓解肠肌痉挛、达到中医温中止痛的谱效关系进行了初步探索。

几种致吐药物比较优选顺铂剂量造家鸽化疗呕吐模型

目的:优选顺铂造家鸽化疗呕吐模型的最佳剂量,确保造模后家鸽能正常存活,为化疗呕吐实验研究提供一种稳定可靠的造模方法。方法:仿文献采用家鸽腹腔注射顺铂的方法,与传统的致吐剂硫酸铜和另一种化疗常用药环磷酰胺比较,优选顺铂剂量进行重复试验,连续观察30天。结果:一次性给予4.5mg·kg-1是顺铂致家鸽化疗呕吐模型的最佳剂量。结论:优选的顺铂剂量4.5mg·kg-1造家鸽化疗呕吐模型能够确保化疗后适宜呕吐,也能使化疗后家鸽正常存活,符合临床上化疗引起呕吐的致病特点。优选剂量致家鸽化疗呕吐模型重复性好、稳定、可靠,这对于化疗呕吐的实验研究有意义。

锦鸡儿总黄酮对大鼠脑缺血再灌注损伤后半暗带区GFAP表达的影响

目的研究锦鸡儿总黄酮(TFC)对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后缺血周边区星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白(GFAP)生长的影响。方法将大鼠随机分为假手术组、模型组、TFC高、中、低剂量(60、30、15 mg/kg)组,采用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,脑缺血1.5 h再灌注3 h后,TFC高、中、低剂量组分别给予TFC 60、30、15 mg/kg灌胃治疗,假手术组及模型组给予等体积生理盐水,每日1次,连续治疗14 d,观察各组大鼠在脑缺血后24 h和治疗第14天后神经功能缺损综合评分,苏木素-伊红(HE)染色观察缺血周边区脑组织形态结构的变化,荧光免疫组织化学染色及Western印迹法检测各组脑缺血边缘区GFAP表达水平。结果脑缺血24 h后,与模型组比较,TFC高、中、低剂量组神经功能缺损评分差异无统计学意义(P>0.05);脑缺血14 d后,与模型组比较,TFC高、中、低剂量组神经功能缺损评分均显著降低(P<0.05,P<0.01),TFC高、中、低剂量组均明显促进脑缺血边缘区神经细胞的修复;模型组和TFC高、中、低剂量组GFAP阳性细胞数及蛋白表达量均显著高于假手术组(P<0.01),TFC高、中剂量组GFAP阳性细胞数及蛋白表达量显著少于模型组(P<0.05,P<0.01),细胞生长形态规则。结论 TFC能改善脑缺血后神经功能缺损症状,可促进神经细胞恢复,其机制可能与抑制缺血半暗带区GFAP的过度生长有关。

多指标评价苦参洗液的提取工艺研究

目的:对苦参洗液提取工艺进行考察。方法:采用单因素考察及正交试验,以蛇床子素、总生物碱提取量及体外抑菌试验为评价指标进行提取工艺考察。结果:通过试验得出苦参洗液提取工艺为:70%乙醇提取3次,提取溶剂量分别为8、8、6倍,提取时间分别为90、60、60 min。结论:该实验结果优选的提取工艺稳定、可靠。

心脑舒通对大鼠脑缺血再灌注损伤缺血周边区微血管新生及Ang/Tie系统表达的影响

目的观察心脑舒通胶囊对大鼠局灶性脑缺血再灌注(I/R)损伤缺血周边区脑组织微血管新生及血管生成素(Ang)/酪氨酸激酶受体(Tie)系统表达的影响。方法随机分为假手术组、脑I/R损伤模型组、心脑舒通胶囊(14、28、56 mg/kg)组,采用线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)缺血再灌注模型,缺血90 min后再灌注,分别于造模前30 min、缺血6 h、缺血24 h,每日给药1次,连续7 d。于灌注24 h、7 d后行神经功能评分,末次给药1 h后用水合氯醛(350 mg/kg)麻醉并断头取脑组织,采用Western印迹法测定I/R大鼠皮层缺血周边区Ang1、Ang2、Tie2表达,激光扫描共聚焦显微镜观察脑组织微血管形态及血流灌注量。结果与模型组比较,心脑舒通组大鼠神经功能改善,皮层缺血周边区微血管的数量较多(P<0.01,P<0.05),Ang1、Tie2蛋白表达量增多(P<0.01,P<0.05),Ang2蛋白表达量较少(P<0.05)。结论心脑舒通可调节大鼠Ang/Tie系统的表达,促进脑缺血后微血管新生,有利于脑缺血后神经功能的恢复。

阳雀花根提取物对小鼠抗缺血缺氧能力的影响

为阳雀花根的开发利用提供理论依据,取昆明种小鼠,用阳雀花根提取物15g/(kg.d)、10g/(kg.d)和5g/(kg.d)灌胃给药,每日1次,连续灌胃7d,进行了小鼠在常压缺氧、低压缺氧、亚硝酸钠所致组织中毒缺氧、急性脑缺血和结扎小鼠双侧颈总动脉所致脑缺血试验,观察阳雀花根提取物对小鼠存活时间的影响。结果表明:小鼠连续灌胃15g/(kg.d)、10g/(kg.d)阳雀花根提取物对小鼠在常压缺氧、减压缺氧、亚硝酸钠所致组织中毒缺氧、急性脑和结扎双侧颈动脉缺血条件下的存活时间均有显著或极显著延长作用,即具有显著或极显著的抗缺氧和缺血作用。

小半夏加茯苓汤的急性毒性研究

目的:观察小半夏加茯苓汤对小鼠的急性毒性实验和了解毒靶器官。方法:以最大浓度药液灌胃给药,24h内给药3次,连续观察7天。详细观察记录小鼠行为活动、状态、饮食、大便、小便、毛色、分泌物及死亡等情况。结果:全部动物健存,也无明显中毒反应,测得小半夏加茯苓汤最大受试药物量为267.60grawdrug·kg-1,为临床患者拟用量的382.29倍。结论:小半夏加茯苓汤对小鼠无明显急性毒性反应。

浅述中药归经理论在方剂配伍中的运用

在方剂配伍的过程中,源于《内经》,发展于后世的中药归经理论发挥了重要的指导作用。中药归经理论在方剂配伍中的指导作用,除了"分经用药"、"引经报使"外,还体现在中药归经所属五行生克制化规律的应用方面。运用中药归经理论指导方剂配伍,可合理优选药物,配伍出高效、速效的方剂,既达到有的放矢、提高疗效的目的,又能避免药材浪费。

复方止呕颗粒与昂丹司琼防治化疗呕吐作用的比较

目的:比较中药复方止呕颗粒与西药昂丹司琼防治化疗呕吐的药效。方法:用顺铂造家鸽急性化疗呕吐模型,随机分为空白对照组、模型组、盐酸昂丹司琼组、复方止呕颗粒小、中、大剂量组;以呕吐潜伏期、呕吐次数和呕吐频率为指标观察各组家鸽的呕吐情况。结果:与模型组比较,盐酸昂丹司琼组、复方止呕颗粒小、中剂量组家鸽发生呕吐次数明显减少(P<0.01),但复方止呕颗粒大剂量组家鸽发生呕吐次数较多。结论:复方止呕颗粒与昂丹司琼均具有防治化疗呕吐的作用。

茴楝五苓散治疗小儿水疝17例

目的:探讨治疗小儿水疝的方法。方法:应用茴楝五苓散治疗小儿水疝17例。结果:治愈12例(占70.6%),好转5例(占29.4%),总有效率为100%。结论:茴楝五苓散治疗小儿水疝寒湿型能收到良好的临床疗效。

臭常山根水提物镇痛作用的实验研究

目的通过观察臭常山根(Radix Orixae Japonicae)的镇痛作用,为临床运用臭常山根水提物治疗脘腹痛提供药效学依据。方法应用冰醋酸制备小鼠疼痛模型,以15min内发生扭体次数为疼痛定量指标;将小鼠置于(55±0.5)℃热板上制备小鼠疼痛模型,以小鼠舔后足反应潜伏期为痛阈指标;采用光电辐射热刺激鼠尾制作小鼠疼痛模型,以小鼠甩尾潜伏期为痛阈指标。结果臭常山根水提液能显著抑制醋酸致小鼠扭体反应,可明显延长热板和光电辐射热刺激引起小鼠疼痛反应的痛阈值,与生理盐水组比较,差异具有显著性(P<0.01或P<0.05)。结论臭常山根水提物有明显的镇痛作用,这为民间运用臭常山根治疗脘腹痛提供了药效学依据,为临床推广使用和进一步开发研究该药提供参考。

小半夏加茯苓颗粒对胃癌SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响

目的观察小半夏加茯苓颗粒含药血清对胃癌SGC-7901细胞增殖、凋亡及凋亡相关基因Bcl-2表达的影响。方法选用SD大鼠制备小半夏加茯苓颗粒及原方汤剂、环磷酰胺(CTX)含药血清。①用MTT法检查细胞增殖抑制率。②FCM法观察细胞生长凋亡情况。③采用ELISA法检测细胞凋亡相关基因Bcl-2表达。结果①与空白对照组比较,环磷酰胺组、汤剂组、颗粒组细胞OD值均显著下降(P<0.01),细胞生长增殖抑制率明显升高(P<0.01)。②与同时段内空白对照组比较,含药血清作用18h,36h后,环磷酰胺(CTX)组、汤剂组、颗粒剂组细胞存活率均显著下降(P<0.01)。③与空白对照组比较,颗粒剂和汤剂组细胞液中Bcl-2含量均显著降低(P<0.01)。结论小半夏加茯苓颗粒含药血清可下调SGC-7901细胞Bcl-2基因表达,抑制细胞生长增殖,其作用机制可能与诱导细胞凋亡或细胞毒作用有关。

疏毛吴茱萸醇提取物对家兔离体胃、肠平滑肌活动的影响

目的:研究疏毛吴茱萸醇提取物对家兔离体胃、肠平滑肌活动的影响。方法:采用家兔离体胃、肠平滑肌运动实验,观察疏毛吴茱萸醇提取物对家兔离体胃、肠平滑肌收缩活动的影响。结果:疏毛吴茱萸醇提取物低、中、高浓度(平滑肌槽内终浓度为0.001、0.0025、0.005g/mL)对家兔离体胃、肠平滑肌舒缩活动均有显著抑制作用,对氯化乙酰胆碱引起的胃、肠平滑肌兴奋有显著拮抗作用,与阿托品有协同作用,且呈剂量依赖性。结论:疏毛吴茱萸醇提取物对家兔胃、肠运动有显著抑制作用,其作用途径不仅与M胆碱受体有关,还可能与其他因素有关。

阳和汤含药血清体外对肝癌细胞SMMC-7721生长增殖的影响

目的:采用血清药理学的方法,观察阳和汤对SMMC-7721细胞生长增殖的影响,探索该复方对肝癌SMMC-7721细胞的抑制作用。方法:设空白对照组、阳性对照组、阳和汤组,分别制备成含药血清与体外培养的肝癌SMMC-7721细胞共孵,采用倒置显微镜观察各组SMMC-7721细胞生长形态变化以及用MTT法检测各组含药血清作用24h、48h、72h后对肝癌SMMC-7721细胞的增殖影响情况和抑制率。结果:与同时段内空白对照组比较,阳性对照组以及阳和汤组均使SMMC-7721细胞生长形态发生明显改变,细胞呈现生长不良状态,数量减少;MTT实验结果显示阳性对照组、阳和汤组含药血清对体外培养的SMMC-7721细胞作用24h、48h、72h后,与同时段内空白对照组比较,细胞OD值均显著下降(P<0.01),细胞生长增殖抑制率分别为18.65%、27.40%和30.88%(P<0.01)。结论:结果表明阳和汤含药血清对体外培养的肝癌SMMC-7721细胞具有明显的抑制作用,其抑制作用呈现时间-效应关系。

皂角刺总黄酮对肝癌HepG2细胞增殖、凋亡和侵袭能力影响的实验研究

目的:研究皂角刺总黄酮对肝癌HepG2细胞增殖、凋亡和侵袭的影响,探讨其抗肿瘤作用机制.方法:通过体外培养人肝癌HepG2细胞,用不同浓度的皂角刺总黄酮处理后,采用WST-1法检测皂角刺总黄酮对人肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用,琼脂糖凝胶电泳检测DNA片段化,流式细胞仪AnnexinV/PI双染法检测细胞的凋亡率,划痕实验和Transwell小室检测皂角刺总黄酮对HepG2细胞侵袭、转移的影响.结果:不同浓度的皂角刺总黄酮作用于细胞48 h后,能显著抑制HepG2细胞的增殖,随着药物浓度的增加,抑制作用增强,IC50为(190.62±0.89)mg/L;流式AnnexinV/PI双染法检测显示,不同浓度的皂角刺总黄酮均可诱导HepG2细胞凋亡;不同浓度的皂角刺总黄酮处理组发现凋亡细胞所特有的DNA ladder条带;皂角刺总黄酮可降低HepG2细胞的黏附能力,使Tr-answell小室膜上的肝癌细胞明显减少,并且呈剂量依赖性.结论:皂角刺总黄酮能明显抑制肝癌HepG2细胞的增殖、侵袭能力和诱导其凋亡.

小半夏加茯苓汤的研究概况

小半夏加茯苓汤由半夏、生姜、茯苓组成,主治痰饮所致的呕眩悸证。近年来,有关小半夏加茯苓汤的临床与实验研究已取得了一定进展,对该方单味药化学成分的研究为复方化学成分研究奠定了基础,有利于该复方药效物质基础筛选;另外研究表明组成该复方的单味药均具有不同程度的抗肿瘤及提高免疫力作用,目前正在进行该复方抗肿瘤作用的研究。此外该方当用生半夏还是制半夏入药等问题也有待进一步深入研究。

注射用丹参多酚酸治疗糖尿病大鼠脑卒中的基因芯片表达谱分析

目的研究注射用丹参多酚酸对糖尿病大鼠脑卒中脑组织基因表达谱的影响。方法将Wistar大鼠随机分为假手术组(DM+Sham)、糖尿病脑缺血/再灌注损伤模型组(DM+MCAO/R)、依达拉奉组(6 mg·kg^(-1),ED)、丹参多酚酸治疗组(5.25、10.5、21 mg·kg^(-1),SLI),每组13只。缺血/再灌注3 h后尾静脉注射给药,每日1次,连续给药14d。末次给药30 min后,分别用TTC染色和基因芯片技术检测梗死体积和脑组织中相关基因表达。结果给药14 d后,与假手术组相比,模型组筛选出67个差异基因,其中41个上调,26个下调;丹参多酚酸(21 mg·kg^(-1))治疗组与模型组比较差异基因有59个,其中45个上调,14个下调,由聚类分析可得糖尿病局灶性脑缺血/再灌注损伤恢复期有多种基因如Ly6i、Pax7、Irx2发现明显变化,通路分析发现,主要涉及凝血止血、炎症、氧化应激、物质代谢、神经血管新生及信号传导等。结论丹参多酚酸治疗糖尿病脑卒中主要通过干预凝血止血、炎症、氧化应激、物质代谢、神经血管新生及信号传导等达到治疗目的。

小半夏加茯苓汤对H22荷瘤小鼠的抑瘤及免疫调节作用

目的:探讨小半夏加茯苓汤对H22肿瘤的抑制作用及其对荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法:建立H22荷瘤小鼠模型,观察小半夏加茯苓汤的抑瘤作用及瘤组织中增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达情况;同时检测免疫器官指数、T淋巴细胞增殖功能和血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。结果:小半夏加茯苓汤高剂量对小鼠H22移植瘤有明显抑制作用,抑瘤率为13.7%,PCNA蛋白表达与对照组比较差异有显著性,同时脾脏指数、脾细胞刺激指数和血清中TNF-α等指标均显著高于对照组。结论:小半夏加茯苓汤可以抑制模型鼠肿瘤的生长,增强荷瘤小鼠的免疫功能。其机制可能是通过激活免疫细胞、调节机体的免疫功能达到有效控制肿瘤细胞增殖的作用。