吴茱萸碱联合RO3306对人肝癌细胞HepG2的协同抑制

【目的】探讨吴茱萸碱(EVO)联合细胞周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)的特异抑制剂RO3306对人肝癌细胞HepG2的生长抑制、诱导凋亡是否具有协同增效作用。【方法】采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法、碘化丙啶(PI)单染流式细胞术检测EVO诱导不可逆凋亡的时间转折点;采用MTT法、集落形成法、PI单染流式细胞术检测EVO和RO3306联合用药与单独用药比较是否具有协同增效作用(q>1.15为协同作用)。【结果】MTT法结果显示:作用16 h起,再撤药培养12 h与撤药前比较抑制率明显上升。流式细胞术检测表明:细胞同步化处理后吴茱萸碱作用12 h大部分细胞发生M期阻滞(M-arrest);作用20 h细胞发生M期滑移(M-slippage)。MTT法检测2μmol/L吴茱萸碱、2μmol/L RO3306及两者联合作用的抑制率分别是33.64%、6.10%和52.74%,q值为1.32。集落形成法显示:1μmol/L吴茱萸碱、2μmol/LRO3306和两者联合作用的抑制率分别是48.21%、11.13%和78.13%,q值为1.83;2μmol/L吴茱萸碱、2μmol/LRO3306和两者联合作用的抑制率分别是9.75%、66.8%和91.2%,q值为1.3。流式细胞术显示:2μmol/L吴茱萸碱、2μmol/L RO3306和两者联合作用的抑制率分别是23.7%、6.6%和44.8%,q值为1.31。【结论】吴茱萸碱诱导M-arrest发生于12 h左右,诱导不可逆凋亡的时间转折点为20 h左右,吴茱萸碱联合RO3306对HepG2具有明显的协同抑制作用。

人参总皂苷对黑色素瘤自杀基因治疗的增效作用

【目的】观察人参总皂苷联合自杀基因HSV-tk/GCV治疗系统对小鼠黑色素瘤的生长抑制效应,探讨人参总皂苷对黑色素瘤自杀基因治疗的增效作用。【方法】选用85只C57BL/6J雄性小鼠,除正常组5只外其他均接种含20%B16tk+细胞的tk+和tk-混合细胞,造模成功后随机分为模型组、人参总皂苷组、tk/GCV组、人参总皂苷联合tk/GCV组(联合治疗组),每日腹腔注射给药,连续治疗7 d后检测瘤块质量,计算抑瘤率并进行常规组织病理学检查。以不同浓度人参总皂苷与更昔洛韦(GCV)分别或共同作用于B16tk-细胞,以及含20%B16tk+细胞的tk+和tk-混合细胞,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测各组存活率,用金正均q值法分析人参总皂苷与自杀基因系统联合的相互作用是否具有协同性。【结果】各治疗组瘤块质量均较模型对照组低,联合治疗组的抑瘤率最高(32.29%),该组瘤体质量与模型组比较差异具有显著性意义(P<0.05);人参总皂苷、tk/GCV组的抑瘤率次之,其瘤体质量与模型组比较差异无显著性意义(P>0.05);MTT检测结果显示:单独人参总皂苷对B16细胞的抑制程度不高,各浓度人参总皂苷联合tk/GCV作用72 h所得的金正均q值均小于1.15;肿瘤组织的病理切片结果显示人参总皂苷组和联合治疗组的淋巴细胞浸润程度明显高于模型组。【结论】人参总皂苷能够提高自杀基因系统对黑色素移植瘤的旁杀伤效应,其增效机制可能是通过机体的免疫调节途径实现。

参环毛蚓对土壤含水量及pH值因子的选择研究

目的考察参环毛蚓对土壤含水量、pH值二因子的选择性，建立其生活所需要的土壤含水量、pH值单因子数学模型。方法在养殖槽内设置不同土壤含水量、pH值区域，由参环毛蚓选择适宜的生活区域。结果参环毛蚓生活适宜的土壤含水量为18.2%-24.6%，pH值为3.7-5.5。结论参环毛蚓选择在湿度适中，偏酸性的土壤中生活；高湿及较干燥，强酸性和碱性的土壤不适宜其生活。

新课标背景下提高思政课教学实效性的教学策略研究——以哲学与人生课程为例

中职阶段是人生的“拔节孕穗期”,处于价值观、人生观和世界观形成的关键时期,需要精心引导和栽培。思政课是引导学生树立正确的“三观”的主要渠道,也是落实立德树人根本任务的关键课程,作用不可替代。《中等职业学校思想政治课程标准(2020版)》(以下简称新课标)于2020年2月颁布,并于2020年秋季学期正式实施。