熊果酸通过STAT3通路调控胃癌细胞增殖和凋亡

目的研究熊果酸对环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)表达或不表达胃癌细胞增殖和凋亡的影响,探讨信号转导与转录活化因子3(signal transducer and activator oftranscription 3,STAT3)通路在熊果酸调控胃癌细胞增殖和凋亡中的作用。方法 SGC-7901和MGC-803细胞接种于含10%胎牛血清的RPMI 1640培养液中,常规培养24 h后加熊果酸(10、20、40、80μmol.L-1),分别培养24、36和48 h,MTT法检测细胞增殖。Hoechst染色观察细胞凋亡的形态变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率;免疫印迹法检测STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)、COX-2、半胱天冬酶-3酶原(pro-caspase-3)的表达。结果熊果酸剂量和时间依赖性抑制SGC-7901和MGC-803细胞增殖;Hoechst染色显示熊果酸作用两种胃癌细胞后发生了典型的细胞凋亡形态学改变,10、20、40、80μmol.L-1熊果酸作用SGC-7901和MGC-803细胞24 h后的凋亡率分别为:(4.7±0.4)%和(3.3±0.2)%、(6.4±0.5)%和(4.6±0.3)%、(9.9±1.8)%和(6.8±0.5)%、(14.5±1.7)%和(10.3±1.6)%;熊果酸剂量依赖性抑制SGC-7901和MGC-803细胞中STAT3磷酸化,下调SGC-7901细胞COX-2和MGC-803细胞procaspase-3表达。结论熊果酸可能通过阻断STAT3通路下调COX-2或pro-caspase-3表达而抑制胃癌细胞增殖、诱导凋亡。

医学院校基础-临床桥梁学科教学现状与改革

基础-临床桥梁学科是医学生学习基础医学与临床医学之间的衔接阶段,这类学科具有相同的特征即较强的理论性与实践性。就现况而言,这类桥梁学科在教学上存在有学科设置、教师培训、教学效果、考核内容等方面的不足。本文将结合实际阐述桥梁学科的教学现况并提出教学改革的措施,为指导基础-临床桥梁学科的教学实践提供新的思路。

熊果酸通过AMPK/STAT3/COX-2信号通路抑制胃癌细胞增殖

背景:前期研究发现,熊果酸通过下调环氧合酶2(COX-2)表达抑制胃癌细胞增殖,但熊果酸抑制COX-2表达的分子机制尚未完全明确。目的:探讨单磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)/信号转导与转录活化因子3(STAT3)/COX-2信号通路在熊果酸抑制胃癌细胞增殖中的作用。方法:构建AMPK-pLVX、AMPK-shRNA、STAT3-pLVX、STAT3-shRNA质粒,分别转染胃癌细胞株SGC-7901和MKN-45,并给予不同浓度或不同培养时间的熊果酸进行培养。以蛋白质印迹法检测磷酸化AMPK、磷酸化STAT3和COX-2表达,CCK-8法检测胃癌细胞增殖。结果:在SGC-7901和MKN-45细胞中,熊果酸呈剂量和时间依赖性地促进AMPK磷酸化、抑制STAT3磷酸化和COX-2表达。敲除AMPK基因能阻断熊果酸抑制STAT3磷酸化和COX-2表达的作用,过表达STAT3基因能逆转熊果酸抑制COX-2表达的作用。敲除AMPK基因和过表达STAT3基因均可逆转熊果酸抑制胃癌细胞增殖的作用。结论:熊果酸可能通过AMPK/STAT3通路下调COX-2表达而抑制胃癌细胞增殖。

汉防己甲素联合紫杉醇对胃癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究汉防己甲素(tetrandrine,TET)联合化疗药物紫杉醇(paclitaxel,PTX)对人胃癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:MKN-45细胞常规培养于RPMI-1640培养液中,细胞长至亚单层后加TET和(或)PTX,连续培养48 h。四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法分析细胞增殖情况,DAPI染色和流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果:TET和PTX单药或联合均呈剂量依赖性地抑制MKN-45细胞增殖,两药联合时IC50较两药单用时显著降低(P<0.05)。DAPI染色和流式细胞仪显示TET和PTX联合用药组细胞凋亡率显著高于单药组(P<0.05)。结论:TET联合PTX对胃癌细胞的增殖抑制及凋亡诱导有良好的协同效应。

microRNA-101和环氧合酶-2在胃癌中的表达及其临床意义

背景:microRNAs是一类对靶基因表达具有转录后调控作用的非编码小RNA。microRNA-101(miR-101)在多种恶性肿瘤中呈低表达,而过表达外源性miR-101可发挥肿瘤抑制作用。前期体内、外实验发现外源性miR-101可抑制胃癌细胞增殖和环氧合酶-2(COX-2)表达。目的:检测胃癌组织中的miR-101、COX-2表达并探讨其临床意义。方法:收集手术切除胃癌组织和配对癌旁非癌组织标本30例,以实时荧光定量RT-PCR检测miR-101、COX-2mRNA表达,分析两者间以及两者与胃癌主要临床病理特征的关系。结果:绝大多数胃癌组织中miR-101表达低下,COX-2 mRNA则呈过表达。胃癌组织与癌旁非癌组织间miR-101、COX-2 mRNA表达量差异显著(P<0.01),且两者表达在癌组织和癌旁组织中均呈负相关(癌组织:r=-0.767,P=0.000;癌旁组织:r=-0.718,P=0.000)。TNMⅢ、Ⅳ期胃癌和伴淋巴结转移的胃癌中,miR-101表达分别显著低于TNMⅠ、Ⅱ期病例和无淋巴结转移病例(P<0.05),COX-2 mRNA表达分别显著高于TNMⅠ、Ⅱ期病例和无淋巴结转移病例(P<0.05)。结论:miR-101与COX-2之间的负相关性可能有助于胃癌的临床诊断;miR-101表达低下伴COX-2过表达与胃癌临床进展和转移有关,对预后判断有一定参考价值。

胰腺导管内乳头状肿瘤37例诊治分析

目的分析胰腺导管内乳头状黏液瘤(IPMN)的临床及病理特征,提高其临床诊治水平。方法回顾性分析南京医科大学第一附属医院2010年8月至2015年9月收治的37例IPMN病人的临床资料,分析其临床病理特征。结果 37例IPMN病人中,男24例,女13例,平均年龄(64.13±11.62)岁;最常见的临床表现是上腹部疼痛,共22例(59.5%);其中主胰管型16例(43.2%),分支胰管型13例(35.1%),混合型8例(21.6%);胰腺磁共振/磁共振胆胰管造影(MR/MRCP)的诊断符合率最高,为68.7%(11/16),计算机断层扫描(CT)和超声内镜(EUS)的诊断符合率均为50.0%(15/30,2/4);病理诊断轻度不典型增生9例(24.3%),中度不典型增生20例(54.1%),重度不典型增生6例(16.2%),浸润癌2例(5.4%)。不同恶性程度IPMN病人血清糖类抗原19-9(CA19-9)水平差异有统计学意义(P=0.019)。所有病人均接受手术治疗,术后中位随访时间33月(3~72月),死亡2例,失访13例,5年生存率达94.6%。结论 IPMN在老年人多见,主要表现为非特异性消化道症状,影像学检查阳性率有待提高,手术治疗有效,预后良好。

多层螺旋CT在鉴别胰腺神经内分泌癌和胰腺导管腺癌中的价值

目的:探讨CT扫描在鉴别胰腺神经内分泌癌(pancreatic neuroendocrinecarcinoma,PNEC)和胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC)中的临床应用价值。方法:回顾性分析2014年10月-2018月10月收治的36例PNEC和60例PDAC患者的临床资料和CT特征。结果:PNEC和PDAC患者在年龄上的差异有统计学意义(P <0.001);在CT特征中,PNEC和PDAC在肿瘤边界、胰管扩张、CT平扫密度上差异有统计学意义(P <0.05)。结论:CT扫描在鉴别PNEC和PDAC方面具有重要临床价值。

浅论工程师对管理者的“批判性忠诚”

在工程活动中,企业需要工程师提供高深的工程技术,工程师也需要企业提供资金。工程师对管理者所要遵守的原则就是"忠诚",但同时,工程师还必须坚持自己专业所要求的道德准则。是服从公司的决定还是服从自己的职业良心?这是工程师常常会遇到的两难选择,也是工程伦理学中所讲到的"义务冲突"。面对这种难题,本文提出了一个命题,即"批判性忠诚"。

长链非编码RNA MEG3抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖的研究

目的:探讨长链非编码RNA MEG3在临床胃癌组织及细胞中的表达情况,以及过表达MEG3对人胃癌细胞增殖能力的影响。方法:采用实时定量PCR检测人胃癌组织及细胞系中MEG3的表达,并结合病理资料分析胃癌组织MEG3表达与临床病理特征之间的关系。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和克隆形成实验检测过表达MEG3前后胃癌细胞增殖的变化。结果:相对于正常胃组织及细胞,在胃癌组织和细胞中MEG3的表达水平明显下调。胃癌组织中MEG3表达与组织学分级、肿瘤浸润深度和TNM分期相关,但与年龄、性别及区域淋巴结转移无关。在SGC-7901细胞中转染MEG3过表达质粒后能显著上调MEG3的表达水平。过表达MEG3能明显抑制胃癌细胞的增殖能力。结论:MEG3对胃癌细胞增殖的调控至关重要,过表达MEG3能明显抑制胃癌细胞的增殖能力。提示MEG3的表达下调可能在胃癌的发生、发展中起重要作用。

小麦纤维素辅助老年便秘患者结肠镜前肠道准备的研究

目的:探讨小麦纤维素颗粒(非比麸)联合复方聚乙二醇电解质散(恒康正清)用于患有功能性便秘的老年患者结肠镜检查前肠道准备的临床价值。方法:176例拟行结肠镜检查的患有功能性便秘的老年患者,随机分为研究组(非比麸联合恒康正清)97例和对照组(单用恒康正清)79例。观察两组肠道清洁效果、腺瘤样息肉检出率、肠道准备中的不良反应。结果:研究组患者肠道清洁效果优于对照组,且不良反应率低于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:小麦纤维联合复方聚乙二醇电解质散用于老年人结肠镜检查前肠道准备的效果优于单用复方聚乙二醇电解质散。

胃神经内分泌癌与胃神经内分泌瘤及胃腺癌的CT特征及鉴别

目的探讨胃神经内分泌癌(G-NEC)与胃神经内分泌瘤(G-NET)及胃腺癌(G-ADC)的CT特征,为临床诊治提供参考。方法选取2014年1月至2018年9月于南京医科大学第一附属医院老年消化科就诊的G-NEC、G-NET及G-ADC患者各15例,分别为G-NEC组、G-NET组及G-ADC组,对多个CT特征进行评估,以鉴别G-NEC与G-NET及G-ACD的影像学差异。结果 3组中存在差别的CT特征有肿瘤最大径(P=0.023)、肿瘤位置(贲门、胃底及胃体为上部,胃体中下部及胃窦为下部,P=0.020)、病灶数量(单发、多发及散发,P=0.003)、肿瘤边缘是否清晰(P<0.001)、黏膜是否完整(P<0.001)、淋巴结是否转移(P<0.001)、转移淋巴结最大径(P=0.008)和有无淋巴结的坏死(P=0.006);随后进行G-NEC与G-NET两组间比较,经单因素分析发现G-NEC的病灶更大[(4.72±1.73)cm比(2.08±1.02)cm,P<0.001)],位于胃体中下部及胃窦的概率更高(60.0%比13.3%,P=0.021),单发病例更多(100%比66.7%,P=0.042),更易发生淋巴结转移(93.3%比20.0%,P=0.001)。G-NEC和G-ADC两组间的CT特征的单因素分析显示,G-NEC的转移淋巴结直径比G-ADC的大[(1.82±0.69)cm比(1.23±0.65)cm,P=0.045],G-NEC的肿瘤边缘较G-ADC清晰(60.0%比0,P=0.001), G-NEC的肿瘤黏膜较G-ADC肿瘤黏膜完整(53.3%比66.7%,P=0.014)。结论 CT的特征有助于G-NEC与G-NET及G-ADC的诊断。

橘红素经PI3K/Akt/mTOR信号通路调控胃癌细胞BGC-823和SGC-7901的增殖和凋亡

目的探讨橘红素对胃癌细胞BGC-823和SGC-7901的自噬作用及其机制。方法不同浓度橘红素(7.5、15、30、60、120μmol/L)处理两株细胞后,CCK-8法检测其吸光度值,计算细胞增殖抑制率;流式细胞仪检测细胞凋亡水平;用60μmol/L浓度的橘红素处理后通过细胞划痕法检测两种细胞迁移能力;Western blotting法检测自噬相关蛋白p62、凋亡蛋白Bax、Bcl-2及PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白表达的影响。结果与对照组相比,橘红素处理组增殖、迁移能力显著下降(P<0.01),细胞凋亡数增加,自噬蛋白p62的表达浓度依赖性升高(P<0.05),凋亡蛋白Bax表达增加(P<0.05),Bcl-2表达下降(P<0.05),磷酸化的p-Akt和p-mTOR的表达水平显著降低(P<0.05)。结论橘红素可通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路调控SGC-7901和BGC-823细胞的增殖和凋亡,并可抑制其自噬。

多层螺旋CT在胃神经内分泌癌与胃间质瘤中的鉴别诊断价值

目的探讨胃神经内分泌癌(G-NEC)与胃间质瘤(GST)在多层螺旋CT下的影像特征。方法回顾性分析2010年5月至2019年7月在南京医科大学第一附属医院住院治疗的G-NEC和GST患者的临床资料。依据病理结果分为2组:G-NEC组(n=21)和GST组(n=34)。对比2组的临床资料及CT特征,包括肿瘤位置、肿瘤最长径、肿瘤生长方式、肿瘤数量、肿瘤形态等。采用SPSS 22.0软件进行统计分析。2组间比较采用t检验或χ^2检验。采用logistic回归分析筛选GST和G-NEC的独立鉴别因子。结果在一般资料中,G-NEC在男性多见,而GST在女性中多见,性别可以作为GST和G-NEC的独立鉴别因子(OR=0.02,P=0.015)。G-NEC组(60.9±10.7)岁和GST组(60.5±13.3)岁在年龄上差异并无统计学意义(P>0.05)。通过对两组患者的CT表现分析,两组患者在肿瘤位置(P<0.001)、淋巴结转移(P=0.012)、肝转移(P=0.006)、肿瘤生长方式(P=0.014)、肿瘤形态(P<0.001)、黏膜完整性(P=0.001)和肿瘤边界(P<0.001)是否清晰上的差异均有统计学意义,随后对以上特征进行多因素分析,性别(OR=0.02,P=0.015)和肿瘤形态(OR=18.61,P=0.022)可作为GST和G-NEC的独立鉴别因子,其中肿瘤形态是GST和G-NEC最显著的鉴别因子。结论CT对于G-NEC和GST的鉴别诊断有一定的临床意义。

miR-29a通过调控PTEN/AKT信号通路对CCl4诱导的肝纤维化大鼠的影响

目的探究miR-29a对四氯化碳(CCl 4)诱导的肝纤维化大鼠的保护作用及机制。方法通过腹腔注射40%的CCl 4橄榄油溶液构建大鼠肝纤维化模型,将造模成功的30只大鼠随机分为3组:肝纤维化组(B组)、NC-miRNA+肝纤维化组(C组)和miR-29a+肝纤维化组(D组),每组10只,采用胰岛素注射器通过尾静脉注射注入质粒。另取8只大鼠设为正常组(A组)。采用HE染色评估大鼠肝组织的损伤情况。酶联免疫法(ELISA)检测各组血清中天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)的含量。采用实时定量PCR法(Real-time PCR)检测大鼠肝脏组织中miR-29a mRNA、张力蛋白同源第10染色体丢失的磷酸酶基因(PTEN)mRNA苏氨酸激酶(AKT)mRNA表达水平,采用Western blot法检测PTEN和磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)蛋白的变化情况。结果B、C组大鼠肝细胞坏死及空泡变性,有炎性细胞浸润,明显病理性改变。D组大鼠肝小叶内偶见肝细胞坏死,有少量炎性细胞浸润。D组ALT、AST水平、p-AKT的蛋白表达水平明显低于B、C组,而miR-29a mRNA、PTEN mRNA和PTEN的蛋白表达水平明显高于B、C组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论miR-29a过表达可抑制肝纤维化大鼠的肝损伤,其机制可能与调控PTEN/AKT信号转导通路有关。

基于卷积神经网络的肠息肉分类方法的初步研究

目的通过开发一种基于卷积神经网络(convolutional neural network,CNN)的人工智能诊断模型,用于自动识别腺瘤和增生性息肉,以增加结直肠镜检查的统一性和客观性。方法回顾性收集南京医科大学第一附属医院内镜中心的白光内镜图像1796张,其中正常结直肠图像692张,增生性息肉608张,腺瘤496张。在我们的分类系统上提出双流网络(dual-stream network),包括原始流和检测流,原始流的输入是完整的预处理肠镜图像,以用来学习全局特征,检测流重点关注病灶的局部特征。我们将数据集分为训练集、测试集和验证集进行10次交叉验证,以评估该方法的有效性。结果CNN方法的正确率(accuracy)、准确率(precision)、召回率(recall)分别为96.9%、96.6%、96.7%,在正常肠镜图片、增生性息肉、腺瘤三类图像中的正确识别率分别为100%、95.1%和95.0%。结论CNN系统对结直肠息肉的识别具有较高的特异性和灵敏性,可以帮助临床内镜医师快速诊断和识别结直肠息肉的类型。这表明我们的方法在临床上能够对肠息肉病变进行有效、准确、可靠的诊断。

内镜下氩离子凝固术治疗老年人大肠息肉

目的探讨内镜下氩离子凝固术（APC）治疗老年人大肠息肉的安全性和有效性。方法采用德国ERBE公司生产的APC（VIO200D型）内镜专用氩气刀对电子肠镜检查发现的大肠息肉进行内镜下治疗。结果258例老年患者共检出525枚息肉全部使用APC治愈，根据息肉大小和形态，使用APC灼除302枚（57．5％），APC切除89枚（17％），黏膜下注射后APC切除134枚（25．5％），局部渗血者行APC电凝或钛夹止血。术后2例（0．8％）出现少量便血，予药物治疗后出血停止，无穿孔和大出血等严重并发症。结论APC可作为老年人大肠息肉的首选治疗，安全性高，并发症少。

乳香通过PTEN/Akt/COX-2通路诱导胃癌细胞SGC7901凋亡

目的研究乳香对人胃癌细胞SGC7901增殖、凋亡和迁移的影响及其可能的作用机制。方法不同浓度乳香处理SGC7901细胞不同时间,噻唑兰比色法检测乳香对SGC7901细胞增殖的影响,流式细胞术分析乳香对SGC7901细胞凋亡的影响,蛋白质印迹法(Western blotting)分析乳香对SGC7901细胞中同源性磷酸张力蛋白(PTEN)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、蛋白激酶B(PKB,亦称Akt)和环氧化酶2(COX-2)蛋白表达影响,划痕实验检测细胞迁移能力,裸鼠移植瘤实验验证乳香在裸鼠体内抑制肿瘤的效果。采用Graphpad Prism 6.0统计软件对数据进行分析。结果乳香能够抑制SGC7901细胞的增殖和迁移能力,呈现剂量依赖和时间依赖性。乳香诱导SGC7901细胞的凋亡,呈现剂量依赖性。乳香能够诱导SGC7901细胞中PTEN的表达,抑制p-Akt和COX-2的蛋白表达。此外,乳香能够抑制裸鼠体内胃癌移植瘤的生长。结论乳香可以抑制胃癌细胞SGC7901的增殖和迁移,诱导细胞凋亡,这可能与PTEN/Akt/COX-2信号通路相关。

深度学习方法应用于食管疾病分类和识别的现状

目的通过深度学习方法对食管癌前病变和食管癌进行自动检测和分类。方法收集我院2011年5月至2019年5月食管癌前病变和食管癌图像,且经过病理学确诊,共从832例患者中选取1572张食管白光图像,包括食管癌、正常食管、食管癌前病变,同时进行标记和筛选图像。深度学习框架训练其中的1337张食管白光图像,其余235张图像进行卷积神经网络(convolutional neural network,CNN)目标检测。CNN是由两个子网组成,分别是O-流和P-流。O-流的主要作用是原始图像的输入,负责提取原始图像的全局特征和颜色。P-流的主要作用是输入预处理后的食管图像,提取原始图像的细节特征和纹理。结果双流CNN系统敏感度为95.64%,特异度为95.96%,总体准确度为86.74%。食管癌的检出率为78.72%,癌前病变的检出率为83.4%,正常食管的检出率为95.32%。其中47例食管癌患者中有10例被误诊为癌前病变,误诊率为21.28%。与正常食管相比,食管癌的诊断精确率相对较低。在数据集相同的情况下,将传统学习方法局部二值模式(local binary pattern,LBP)+支持向量机(support vector machine,SVM)和SVM+方向梯度直方图(histograms of oriented gradients,HOG)与本研究方法进行比较,结果表明深度学习方法准确度、敏感度、特异度均高于其他方法。结论双流CNN系统在图像识别上具有较高的特异度和敏感度,与目前较为传统的机器学习方法相比,此方法更胜一筹,因此,在帮助内镜医师诊断食管疾病上具有很大的应用前景。

术前外周血中性粒细胞和淋巴细胞比值与中老年结直肠癌患者临床病理特征及预后的关系

目的探讨术前外周血中性粒细胞与淋巴细胞比值（NLR）与中老年结直肠癌患者临床病理特征及预后的关系。方法回顾性分析2011年1月至2013年6月南京医科大学第一附属医院212例接受外科手术，且术后病理诊断为结直肠癌的中老年患者临床资料。根据年龄将患者分为46～65岁组130例和66～89岁组82例，采用受试者工作特征（ROC）曲线确定NLR最佳截点，将两组患者分别分为高NLR（〉3．13）组和低NLR（≤3．13）组，比较两组间的临床病理特征并进行预后分析。结果46～65岁组和66～89岁组患者中，高NLR组与低NLR组比较，性别、肿瘤生长部位、浸润深度、癌栓、淋巴转移、远处转移、TNM分期等差异无统计学意义（均P〉0．05）。66～89岁患者中，高NLR组与低NLR组合并糖尿病的差异有统计学意义（均P〈0.05）。212例患者的1、2、3年生存率分别为96．2％（204例）、87．7％（186例）、74．5％（158例）。46～65岁组低NLR组1、2、3年生存率分别为98．8％（85／86）、90．7％（78／86）、84．9％（73／86），高NLR组1、2、3年生存率分别为95．5％（42／44）、84．1％（37／44）、72．7％（32／44），差异有统计学意义（均P〈0．05）。66～89岁组低NLR组1、2、3年生存率分别为95．7％（44／46）、89．1％（41／46）、73．9％（34／46），高NLR组1、2、3年生存率分别为91．7％（33／36）、83．3％（30／36）、52．8％（19／36），差异有统计学意义（P〈0．05）。Cox多因素预后分析结果表明，NLR和TNM分期为影响中老年结直肠癌患者预后的独立危险因素（P〈0．05和P〈0.01）。结论术前NLR〉3．13提示中老年结直肠癌患者的预后较差。

熊果酸和紫杉醇对胃癌细胞增殖和凋亡的影响

化学疗法是中晚期胃癌治疗的主要手段之一。近年来研究发现，新一代广谱抗癌药物紫杉醇（paclitaxel）治疗中晚期胃癌单药有效率为¨％23％，而联合用药有效率为50％60%。