基于创新生态系统理论的公共卫生专业人才培养模式探讨

随着国家医疗卫生体制的改革和我国公共卫生事业的飞速发展,目前形势对公共卫生与预防医学专业的人才培养提出了新的要求。本文分析了公共卫生与预防医学人才培养的现状,并依据创新生态系统理论的指导提出了公共卫生与预防医学专业人才培养的初步模式以及对策、建议,为以后公共卫生与预防医学专业人才培养提供理论基础。

教学团队在创新型公共卫生人才培养中的作用与优化

传统的公共卫生人才培养模式已无法适应现代公共卫生的发展。因此,我国更需要符合时代需求的创新型公共卫生专业人才,公共卫生专业的教学模式应从之前的以教研室为单位组织教学、以教师的个体教学为主导转变为在专业领域内具有专业教学特色、成员之间能够形成知识技能互补的教学团队模式。教学团队的建设有利于提高教师的教学能力,促进教师教学质量与水平的提升,为培养复合型公共卫生创新型人才提供有力保障。

一些化工原料的雌激素样效应

采用雌激素受体阳性乳腺癌细胞株T47D在DMEM培养基 (含 1 0 %小牛血清 )中开放式单层贴壁培养的方法 ,探讨几种常见化工原料壬基酚 (NP)、双酚A(BisA)、邻苯二甲酸酯二丁酯 (DBP)的雌激素效应。于开始实验前将培养细胞用PBS洗涤后改为在无酚红DMEM(含 5 %CDT -FBS)中培养持续 5d ,其目的是耗尽内源性雌激素 ,实验设溶剂对照、雌激素阳性对照及 3种受试物各 4个剂量组 ,采用MTT法、3 H TdR掺入法及流式细胞术对T47D细胞增殖情况进行分析。结果显示NP、BisA和DBP对T47D细胞增殖的影响同雌激素类似 ,可促进T47D细胞增殖和细胞DNA合成 ,并推进G0 G1 期细胞进入S期 ,提高细胞增殖指数 ,随着培养时间 ,延长至 96h ,0 8μmol LNP、32 μmol LBisA和 32 0 μmol LDBP均对T47D细胞有明显促进增殖效果。结果提示这几种化合物具有雌激素效应 ,且其作用效果存在时间 -效应和剂量 -效应关系。由于T47D细胞增殖为雌激素依赖性 。

环境雌激素对乳腺癌细胞株MCF-7凋亡作用的影响

[目的 ]通过观察对 壬基酚 (nonylphenol ,NP)、双酚A(bisphenolA ,BisA)和邻苯二甲酸二丁酯 (dibutylphthalate ,DBP)对乳腺癌细胞株MCF 7凋亡的影响 ,探讨环境雌激素促进MCF 7细胞增殖的生物学机制。 [方法 ]将在DMEM培养液 (含 10 %小牛血清 )中的MCF 7细胞采用开放式单层贴壁培养 ,加受试物前 5d将培养细胞用PBS洗涤后改为在无酚红DMEM(含 5 %经活性碳 葡聚糖苷处理的胎牛血清 ,CDT FBS)中培养连续 5d ,其目的是耗尽细胞内储存的雌激素。实验设溶剂对照组、雌激素对照组、抗雌激素 (它莫西芬 )对照组及三个实验组 ,采用流式细胞术、DNA片段凝胶电泳和细胞苏木素染色 (HE) ,观察环境雌激素对雌激素耗尽所诱导的细胞凋亡作用的影响。 [结果 ] 3 2× 10 -6mol/LNP和 3 2×10 -5mol/LBisA对MCF 7细胞处理 72h ,与对照组相比 ,流式细胞仪分析结果表明 ,二倍体细胞 (G1期细胞 )明显增加 ,亚二倍体细胞峰 (即细胞凋亡率 )消失 ,DNA凋亡片段凝胶电泳不显示典型的凋亡DNA片段梯带 ,细胞苏木素染色结果也显示凋亡细胞明显减少。 [结论 ]与溶剂对照组相比 ,NP和BisA均能够抑制MCF 7细胞的凋亡作用 ,而 3 2× 10 -4mol/LDBP对细胞凋亡的影响作用不明显。这一结果提示 ,该类物质有可能是通过抑制细胞凋亡而?

植物雌激素对乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响

目的 : 探讨植物雌激素大豆异黄酮 (genistein,GS)和玉米赤霉烯酮 (zearalenone,ZEA)对乳腺癌细胞株 MCF- 7增殖的影响。方法 : 雌激素依赖性 MCF- 7细胞在 DMEM培养液(含小牛血清 1 0 % )中采用开放式单层贴壁培养 ,于加受试物前 5 d将细胞用 PBS洗涤后改为无酚红高糖 DMEM(含 5 %经活性碳 -葡聚糖苷处理的胎牛血清 ,CDT- FBS)培养 ,实验设溶剂对照、雌激素对照、抗雌激素对照及两种受试物各四个剂量组 ,采用噻唑蓝 (MTT)法、3H- Td R掺入法及流式细胞术对 MCF- 7细胞的增殖情况进行分析。结果 : 与溶剂对照组相比较 ,GS(96μmol/ L,2 4h)可明显抑制 MCF- 7细胞增殖和细胞 DNA合成 ,并将细胞周期阻滞在 G2 / M;8μmol/ L GS处理96 h也能产生类似的抑制效果。 96 nmol/ L ZEA处理 2 4 h可明显促进 MCF- 7细胞增殖和细胞DNA合成 ,并将细胞周期由 G0 / G1向 S期推进 ,提高细胞分裂增殖指数。结论 : ZEA和 GS均属环境雌激素 ,但对乳腺癌细胞 MCF- 7增殖产生的影响不同 ,ZEA可促进 MCF- 7增殖 ,而 GS能够抑制 MCF- 7细胞的增殖 ,即

三种环境雌激素对卵巢癌PEO4细胞增殖及凋亡相关基因表达的影响

目的 探讨几种常见的环境类雌激素壬基酚 (NP)、双酚A(BisA)和邻苯二甲酸二丁酯 (DBP)对人雌激素受体阳性卵巢癌细胞PEO4增殖和凋亡相关基因PCNA ,bcl 2和baxmRNA及相应蛋白质表达的影响。方法 PEO4细胞在DMEM培养液 (含 1 0 %小牛血清 )中进行常规传代培养 ,实验前将细胞转移至无酚红DMEM(含 5 %活性碳葡聚糖苷处理过的FBS)中继续培养 5d ,收集细胞 ,PBS洗涤后接种于内置血盖片的六孔板或 75ml培养瓶 ,32× 1 0 - 7mol LBisA和NP及 32× 1 0 - 6 mol LDBP对PEO4细胞分别处理 72h ,用半定量RT PCR技术观察其对核增殖抗原PCNA、bcl- 2及baxmRNA表达的影响 ,并用免疫组化方法对结果进行验证。结果 与溶剂对照组相比 ,32× 1 0 - 7mol LNP和BisA对PEO4处理 72h可促进核增殖抗原PCNA和抗凋亡基因bcl 2mRNA表达 ,但对baxmRNA的表达没有影响 ;DBP可促进PCNA的表达 ,但对bcl 2和bax的表达均没有明显的影响。随后进行的免疫组化实验结果显示 ,NP和BisA可促进Bcl 2蛋白的表达 ,并抑制Bax蛋白的表达。结论 对PCNA和bcl 2表达的影响可能是环境类雌激素调节卵巢癌细胞PEO4增殖和凋亡的重要机制之一。

环境干扰物对卵巢癌细胞株PEO_4增殖的影响

目的 观察环境干扰物壬基酚 ( 4 -n -nonyphenol,NP)、双酚A (bisphenolA ,BisA)、邻苯二甲酸酯二丁酯(DibutylphthalateDBP)对卵巢癌细胞株PEO4 增殖的影响。方法 PEO4 细胞在DMEM培养基 (含 1 0 %小牛血清 )中采用开放式单层贴壁培养。试验前 5d将细胞用PBS洗涤 ,改为在无酚红DMEM培养基 (含 5%活性碳 -葡聚糖处理过的胎牛血清 )中继续培养 ,以耗尽细胞内储存的雌激素 ,实验设溶剂对照、雌激素对照及 3种受试物各 4个剂量组 ,采用MTT法、3H -TdR掺入法及流式细胞术对PEO4 细胞的增殖情况进行分析。结果 3 2 μmol/LNP、32 μmol/LBisA和 96 0 μmol/LDBP对PEO4 细胞处理 72h可产生与雌激素类似的效果 ,即促进PEO4 细胞增殖和细胞DNA合成 ,并推进G0 /G1期细胞进入S期 ,提高细胞增殖指数 ,且其促进增殖作用存在时间 -依赖和剂量 -依赖关系。结论 对 -壬基酚、双酚A和邻苯二甲酸酯二丁酯均能促进雌激素受体阳性卵巢癌细胞株PEO4 增殖 ,提示近几年环境污染加剧可能与女性生殖肿瘤发病率增高有关。

三种环境内分泌干扰物对前列腺癌细胞PC-3增殖的影响

[目的 ]通过观察环境内分泌干扰物对 壬基酚 (n 4 noniphenol,NP)、双酚A(bisphenolA ,BisA)和邻苯二甲酸二丁酯 (dibutylphthalate ,DBP)对前列腺癌细胞PC 3增殖的影响 ,探讨近几年来前列腺癌发病率增加的原因。 [方法 ]前列腺癌细胞株PC 3在RPMI 164 0培养液中采用开放式单层贴壁培养 ,培养条件为 3 7℃ ,5 %CO2 ,10 0 %相对饱和湿度 ,采用MTT法、3 H TdR掺入法及流式细胞术对PC 3细胞的增殖情况进行分析。实验设溶剂对照组及每种受试物各四个剂量组。 [结果 ]NP、BisA和DBP均可促进PC 3细胞增殖和细胞DNA合成并推进G0 /G1期细胞进入S期 ,提高细胞增殖指数 ;随着培养时间的延长至 96h ,在较低浓度条件下 ,0 5 μmol/LNP、0 .5 μmol/LBisA和 2 5 μmol/LDBP也能明显促进PC 3细胞增殖 (P <0 0 5 ) ,且其促进PC 3细胞增殖效应存在剂量 效应关系和时间 效应关系。 [结论 ]NP、BisA和DBP可促进前列腺癌细胞株PC 3的增殖 ,提示环境中内分泌干扰物污染增加 ,可能是近几十年来前列腺癌发病率上升的原因之一。

环境雌激素对卵巢癌细胞PEO4凋亡的影响

目的探讨膳食中的环境雌激素大豆异黄酮(genistein,GS)及玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEA)对卵巢癌细胞PEO4凋亡的影响。方法将PEO4细胞在DMEM培养液(含10%小牛血清)中采用开放式单层贴壁培养,开始试验前将培养细胞用磷酸盐缓冲溶液洗涤后改为在无酚红DMEM培养液(含5%CDT-FBS)中继续培养5d,其目的是耗尽细胞内储存的雌激素。实验设溶剂对照、雌激素对照、抗雌激素对照及2个试验组。观察指标包括亚二倍体细胞的峰高及位置,DNA断裂片段及凋亡小体的形成情况。结果雌激素耗尽能够明显诱导PEO4细胞发生凋亡,在这时候往培养液中分别加入32×10-9mol/L及96×10-9mol/L的ZEA可抑制细胞的凋亡作用;而分别加入32×10-6mol/L及96×10-6mol/LGS对细胞处理72h可加重细胞的凋亡现象。结论ZEA具有雌激素效应,可模拟雌二醇抑制细胞的凋亡作用;GS具有抗雌激素效应,在较大剂量范围内可促进细胞的凋亡。

金雀异黄素的抗雌激素效应

应用雌激素耗尽的方法诱导乳腺癌细胞株MCF - 7和T47D发生凋亡 ,从而探讨金雀异黄素(genistein ,GS)对凋亡的影响作用。结果表明 ,同抗雌激素药物它莫西芬类似 ,3 2× 10 - 6 mol L及 96× 10 - 6 mol LGS可加剧雌激素耗尽所诱导的细胞凋亡作用 ,且这种效应存在着良好的剂量 -效应关系。

锌对骨发育影响的体外研究

目的 研究锌对骨发育的影响。方法 将 1 6 d孕龄的小鼠 (每组 1 2只 )脱颈椎处死 ,无菌条件下切下胎鼠的前肢分 5组 ,分别在基础培养基 (Zn2 + 浓度为 2 0 μmol/L)及基础培养基中加终浓度为 2 0 μmol/L的 Zn2 +络合剂 (TPEN) ,及基础培养基中加 Zn SO4 至 Zn2 +浓度分别为45 μmol/L、70 μmol/L、1 2 0 μmol/L的培养基中培养 6 d。结果 1 .培养后的胎鼠右肢与未培养左肢相比 ,其长骨长度、骨组织密度均有所增加 ;组织学分析显示 :骨组织呈活跃增殖分化相 ,骨小梁增加 ,骨基质深染。2 .生化指标及 4 5Ca示踪显示 :培养基中缺锌和在培养基中补充 Zn2 + 至 Zn2 + 浓度1 2 0μmol/L时 ,骨组织中骨钙素 (OC)和 4 5Ca含量减少 ,碱性磷酸酶 (AKP)活性降低 (P<0 .0 5 ) ;当在培养基中补充 Zn2 + 至 Zn2 + 浓度 45μmol/L、70μmol/L时 OC合成量 ,骨组织对钙的吸收及AKP活性增加 (P<0 .0 5 )。 3 .形态学指标 :X- ray显示 ,培养液中缺锌和锌浓度为 1 2 0 μmol/L时 ,长骨长度和密度与对照组相比 ,长骨长度较短 ,骨密度降低 ;当在培养液中 Zn2 +浓度分别为 45μmol/L和 70 μmol/L时 ,与对照组相比 ,长骨长度及其骨密度有所增加。结论 锌参与骨组织发育的生理和生化过程 ,锌缺乏

视黄酸阻滞胎鼠腭间质细胞周期进程并诱导凋亡

目的探讨全反式视黄酸(atRA)对小鼠胚胎腭间质细胞(MEPM)细胞增殖和细胞周期的影响及其分子生物学作用机制.方法MEPM细胞取材于孕13 d胎鼠腭组织.MTT比色法检测atRA对MEPM细胞增殖活力的影响;流式细胞术分析atRA对细胞周期分布的影响,并同时观察有无细胞凋亡现象发生;Western-blot检测atRA对细胞周期蛋白D和E表达的影响,并观察对视网膜母细胞瘤蛋白(Rb)磷酸化的影响.结果与溶剂对照组相比,在5～10μmol/L浓度范围内,atRA能够显著性抑制MEPM细胞增殖活力(P＜0.05),并将细胞周期滞留在G0/G1期(P＜0.05).atRA对细胞周期蛋白D和E的表达及相应酶活性均表现为抑制效应.观察Rb的变化也显示,atRA降低Rb的磷酸化作用.结论atRA对腭器官发育敏感期腭间质细胞增殖活力及细胞周期的抑制作用可能是atRA诱导诱导唇腭裂的机制之一.

膳食雌激素影响乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的机制探讨

目的:探讨膳食中常见的两种环境类雌激素大豆异黄酮(genistein,GS)、玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEA)影响人乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的分子生物学作用机制。方法:MCF-7细胞在DMEM培养液(含10%胎牛血清)中进行常规传代培养,实验前将细胞转移至无酚红DMEM(含5%活性碳葡聚糖苷处理过的FBS)中继续培养5d,收集细胞,PBS洗涤后接种于内置血盖片的六孔板或75ml培养瓶,32×10-9mol/LZEA和75×10-6mol/LGS对细胞分别处理72h,用半定量RT-PCR技术观察GS对核增殖抗原PCNA、bcl-2及baxmRNA表达的影响,并用免疫组化方法对结果进行验证。结果:与溶剂对照组相比,75×10-6mol/LGS对MCF-7细胞处理72h可显著提高baxmRNA表达而抑制bcl-2和PCNAmRNA的表达,随后的免疫组化实验也证实了这一结果;ZEA的作用效应则与GS相反。结论:膳食雌激素GS和ZEA可通过影响细胞增殖和凋亡相关调节基因PCNA、bcl-2和bax表达而调节人乳腺癌细胞MCF-7的增殖和凋亡作用。

金雀异黄酮对人成骨细胞增殖及分化的影响

目的 观察金雀异黄酮 (GS)对人成骨细胞增殖及分化的影响。方法 在加入受试物前 4天 ,将本实验室所建立的第 4代成人骨膜成骨细胞接种于无酚红高糖DMEM培养液中 (含5 %经活性炭 -葡聚糖苷处理的胎牛血清 ) ,实验设溶剂对照、雌激素 (E2 )对照、抗雌激素它莫西芬 (TAM)对照及三个GS剂量组 ,观察指标包括细胞DNA合成、细胞周期分布、细胞胶原蛋白的合成和碱性磷酸酶 (AKP)活性的测定。结果 10 - 8mol LE2、10 - 7mol LGS和 10 - 6 mol LGS对人成骨细胞处理 4 8h ,细胞DNA合成量明显增加 ,细胞增殖指数呈上升趋势 ,S期和M期细胞分布比例较溶剂对照组相明显提高 ,细胞胶原蛋白合成及细胞内碱性磷酸酶的活性增加 ;10 - 7mol LTAM可结抗GS及E2对细胞所产生的这些生物学效应。结论 GS可促进人成骨细胞增殖及细胞合成和分泌胶原蛋白 ,并提高成骨细胞AKP活性 ,这些结果提示 ,在雌激素缺乏的条件下 ,GS对成骨细胞来说具有雌激素效应 ,可刺激成骨细胞的增殖及分化作用。由于这些效应可被雌激素受体拮抗剂TAM所抑制 。

异黄酮对PC-3细胞凋亡的诱导作用

目的 : 通过观察染料木素 (genistein,GS)、大豆甙元 (daidzein,DA)和黄豆黄素(glycitein,GL)对前列腺癌细胞 (PC- 3 )凋亡的影响 ,探讨通过膳食途径预防前列腺癌发生危险性的可行性。方法 : 将 PC- 3细胞在 RPMI1 6 4 0培养液 (含 1 0 %小牛血清 )中采用开放式单层贴壁培养。实验设溶剂对照及三种受试物各三个剂量组 ,采用流式细胞术 ,DNA凋亡片段凝胶电泳和细胞 HE染色法分析三种常见异黄酮类物质对 PC- 3细胞凋亡的影响。结果 : 与对照组相比 ,流式细胞仪分析结果表明 ,5 0μ mol/L GS、75μ mol/L DA和 75μ mol/L GL对 PC- 3细胞处理 72 h,二倍体细胞 (G1期细胞 )相对减少 ,亚二倍体细胞峰 (即细胞凋亡率 )逐渐增多 ,即凋亡细胞比例逐渐增多 ;DNA凋亡片段凝胶电泳和细胞苏木素染色结果也显示 ,三种受试物能够诱导 PC- 3细胞凋亡 ,且这种作用存在剂量 -效应关系。结论 : 异黄酮类化合物染料木素、大豆甙元和黄豆黄素均具有诱导 PC- 3细胞凋亡的作用 ,这一结果提示 ,该类物质是可通过诱导细胞凋亡而发挥其抗肿瘤作用的。

异黄酮类化合物对前列腺癌细胞PC-3增殖的抑制

[目的 ]通过观察金雀异黄素 (genistein ,GS)、大豆苷元 (daidzein ,DA)和大豆黄素 (glycitein ,GL)对前列腺癌细胞 (PC 3 )增殖的影响 ,探讨通过膳食干预途径预防前列腺癌发病的可行性。 [方法 ]将PC 3在PRMI 164 0培养液 (含10 %小牛血清 )中采用开放式单层贴壁培养。实验设溶剂对照组、顺铂阳性对照组及三种受试物各三个剂量组 (5× 10 -6mol/L ,2 5× 10 -6mol/L ,75× 10 -6mol/L) ,采用MTT法、3 H TdR掺入法及流式细胞术对PC 3的增殖情况进行分析。 [结果 ]与溶剂对照组相比 ,2 5 μmol/LGS、75 μmol/LDA和 75 μmol/LGL对PC 3处理 72h可抑制PC 3增殖 ,抑制率分别为42 %、5 0 %及 3 9%。三种受试物均可抑制细胞DNA合成并推进G0 /G1期细胞进入S期 ,降低细胞增殖指数。 [结论 ]大豆异黄酮类化合物GS、DA和GL均具有明显抑制前列腺癌细胞PC 3增殖效应 ,并呈现剂量 效应和时间 效应关系 。

玉米赤霉烯酮对MCF-7细胞肿瘤相关基因表达的影响

目的观察真菌类环境雌激素玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEA)对雌激素依赖性乳腺癌细胞MCF-7肿瘤相关基因表达的影响,初步探讨ZEA与乳腺癌发生、发展的关系及其作用机制。方法在同等条件下,溶剂对照组(ethanol,EtOH)和32×10-9mol/L ZEA对MCF-7细胞分别处理72h,收集细胞并提取细胞总mRNA,用Cy5和Cy3两种不同荧光染料通过逆转录反应将mRNA分别标记成两种探针,并与载有一组靶基因的人肿瘤相关基因表达谱芯片进行杂交,经计算机扫描分析得出这些基因在经ZEA处理前后的表达差异。结果筛选出包括与细胞增殖、细胞凋亡、细胞转化、应激反应、肿瘤逃逸等相关表达差异的基因共15条,其中4条基因下调(主要是抑癌基因和调节细胞增殖、凋亡相关的基因等),11条基因上调(主要是热休克蛋白基因、雌激素反应基因、内源性逆转录病毒基因、HPK/GCK激酶基因及与肿瘤发生、发展密切相关的原癌基因等)。结论ZEA上调基因数目多于下调基因数目,且上调基因多数是促进细胞增殖的基因,还有两个是与肿瘤发生有关的基因,提示ZEA对相关肿瘤的发生发展起着促进作用并具有一定的致癌性。

染料木黄酮对骨形成的促进作用研究

目的:用成年人成骨细胞体外培养的方法,观察染料木黄酮(genistein,GS)对骨形成的影响。方法:将生长状态良好的第三代成骨细胞用PBS洗涤后接种于无酚红高糖DMEM培养液中(含5%经活性碳-葡聚糖苷处理的胎牛血清),实验设二甲基亚砜溶剂对照、雌二醇对照(E2)、抗雌激素它莫西芬对照(TAM)及三个GS剂量组,观察指标包括细胞增殖,碱性磷酸酶活性及细胞骨钙蛋白合成量。结果:与溶剂对照组相比,10-8mol/L E2、10-7mol/L GS和10-6mol/L GS对人成骨细胞处理48h,能够明显促进成骨细胞的增殖作用,使细胞骨钙蛋白合成量显著增加,细胞内碱性磷酸酶活性明显提高;同时,GS可保护因雌激素耗尽所造成的成骨细胞内Ⅰ型胶原蛋白降低。10-7mol/L TAM可拮抗GS对成骨细胞所产生的这些生物学效应。结论:GS具有雌激素效应,可模拟E2而刺激骨形成并保护成骨细胞因雌激素缺乏所造成的细胞内Ⅰ型胶原蛋白降低。由于这一效应可被TAM拮抗,此结果提示,GS的促进骨形成作用是通过与雌激素受体结合产生的。