基于雌激素受体探讨梓醇对抗糖剥夺心肌细胞损伤的作用

目的基于雌激素受体,探讨梓醇介导自噬对糖剥夺心肌细胞氧化损伤的作用和机制。方法采用糖剥夺6 h复制大鼠心肌细胞(H9c2)损伤模型,观察中药地黄中有效成分梓醇对其保护作用及机制。将细胞分为5组:对照组、模型组、梓醇(0. 28、2. 8、28μmol·L^(-1))组。检测梓醇对细胞中活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的影响;电镜观察梓醇对细胞自噬的影响。利用雌激素受体(ER)阻断剂,探究梓醇对抗氧化损伤机制是否由ER介导。进一步采用慢病毒转染使ERα低表达后,观察梓醇作用前后氧化损伤、自噬水平的变化。结果与空白对照组相比,模型组ROS、MDA水平升高,SOD水平降低,自噬相关蛋白表达无明显差异;与模型组比较,梓醇能够升高SOD水平降低氧化损伤,升高自噬水平。采用慢病毒转染ERα后,与空载病毒梓醇组相比,梓醇抑制氧化损伤、促进自噬的作用被逆转。结论梓醇能通过上调ERα表达激活自噬,发挥抗氧化损伤、保护心肌的作用。

六味地黄方通过上调肠道雌激素受体改善绝经后ApoE^-/-小鼠脂代谢异常研究

目的应用双侧卵巢去势的ApoE^-/-小鼠建立绝经后脂代谢异常模型,探究六味地黄方(LW)能否通过调节肠道雌激素受体改善绝经后脂代谢异常。方法正常饮食的C57/B6小鼠为对照组(n=6),高脂饮食并接受假手术的ApoE^-/-小鼠为假手术对照组(n=6),高脂饮食并接受双侧卵巢去势的的ApoE^-/-小鼠为模型组(n=6),模型小鼠接受4.5 g/kg(n=6)或9.0 g/kg(n=6)的六味地黄方治疗90 d。生化法检测小鼠血清中总胆固醇(TC)、甘油三酸酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)及高密度脂蛋白(HDL-C)水平,HE染色检测小鼠肝脏脂质损伤,油红染色检测小鼠肝脏脂质堆积,免疫荧光染色检测小鼠空肠雌激素受体α(ERα)、雌激素受体β(ERβ)、ABCG5、ABCG8、PI3K p110β及p-AKT的表达水平,免疫化学染色检测小鼠空肠NPC1L1的表达水平,Western blot法检测小鼠空肠NPC1L1、ABCG5及ABCG8的表达水平。结果六味地黄方可降低模型小鼠血清TC、TG及LDL-C水平,升高HDL-C水平(P<0.05~0.01);同时,六味地黄方可显著降低模型小鼠的肝脏脂质损伤和脂肪堆积(P<0.05~0.01)。六味地黄方显著增加模型小鼠空肠内降低的ERα和ERβ水平(P<0.05~0.01)。六味地黄方显著降低模型小鼠空肠中NPC1L1的表达水平(P<0.05),并上调ABCG5和ABCG8的表达水平(P<0.01)。六味地黄方显著增加模型小鼠空肠内PI3K p110β及p-AKT的表达水平(P<0.05~0.01)。结论六味地黄方可以显著改善绝经后ApoE^-/-小鼠脂代谢异常,其机制与六味地黄方调节肠道胆固醇的吸收和外排有关。上调肠道雌激素受体表达和肠道PI3K/AKT信号可能是六味地黄方调节肠道胆固醇吸收和外排的机制。

Liguzinediol对普罗帕酮诱导的急性心衰大鼠心功能的影响

目的:观察川芎嗪衍生物(Liguzinediol)对普罗帕酮诱导的急性心力衰竭大鼠心脏的保护作用及机制。方法:静脉注射普罗帕酮复制大鼠急性心力衰竭模型,给予不同剂量的Liguzinediol(5.0、10.0、20.0 mg/kg)及阳性药西地兰(Digilanid C0.045 mg/kg),用RM6240多道生理信号采集处理系统记录给药0、5、10、20、40、60、90、120 min时左心室内压最大上升/下降速率(±dp/dtmax)、左心室收缩压(left ventricular systolic pressure,LVSP)、平均收缩压(mean systolic pressure,MSP)、平均舒张压(mean diastolic pressure,MDP)和心率(heart rate,HR)的变化;Western blot、q-PCR检测钙离子(Ca^(2+))转运相关蛋白表达并探索其作用机制。结果:Liguzinediol 5.0、10.0和20.0 mg/kg均能有效升高模型大鼠+dp/dtmax、-dp/dtmax、LVSP、MSP、MDP和HR。Western blot和q-PCR结果显示Liguzinediol可增加钙调素依赖蛋白激酶Ⅱ(Ca^(2+)/calmodulin-dependent protein kinaseⅡ,CAMKⅡ)及其磷酸化蛋白P-CAMKⅡ、肌浆网Ca^(2+)-ATP酶(sarcoplasmic reticulum Ca^(2+)-ATPase2a,SERCA2a)和磷酸化受磷蛋白(P-phos-pholamban,P-PLN)的表达,而兰尼碱受体2(ryanodine receptor 2,RyR2)和FK506结合蛋白12.6(FK506 binding protein 12.6,FK-BP12.6)表达无显著差异。结论:Liguzinediol可明显改善急性心衰大鼠的血流动力学指标,其作用机制可能是通过调控CAMKⅡ改变细胞内Ca^(2+)浓度来增强心肌收缩力,改善心衰。