近端胃切除术后程氏Giraffe重建术的疗效分析

目的比较胃食管结合部癌行根治性近端胃切除术后程氏Giraffe重建和双通道重建两种手术方式的近期临床疗效,评价程氏Giraffe重建术的疗效。方法回顾性分析浙江省肿瘤医院胃外科2018年9月1日至2023年9月1日行近端胃切除术125例病人,其中程氏Giraffe重建术91例,双通道重建术34例。观察指标包括:手术情况(手术时间、重建时间、术中出血量)、术后情况(术后住院天数、术后引流时间、检出淋巴结数、Clavien-Dindo≥3级并发症发生率、吻合口漏发生率及吻合口狭窄发生率)以及随访情况(术后胃食管反流发生率、术后1年血红蛋白及血清白蛋白情况)。结果两组病人基线资料的比较,差异无统计学意义(均P>0.05),具有可比性。两组术中出血量、术后住院天数、术后引流时间、检出淋巴结数、Clavien-Dindo≥3级并发症发生率、吻合口漏发生率及吻合口狭窄发生率的比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。与双通道重建组比较,程氏Giraffe重建组重建时间(P<0.001)及手术时间较短(P=0.036)。两组术后1年胃食管反流发生率、术后1年血红蛋白及血清白蛋白差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论近端胃术后行程氏Giraffe重建临床疗效与双通道重建相当,操作简单,是胃食管结合部癌近端胃切除术后较为合理的重建方式之一。

人His6-IFNγ/TNFβ(His6γ-TNFNβ)融合蛋白(包涵体)的分离、纯化与复性研究

应用pET28(含T_7lac启动子和His6-tag)质粒,将人γTNFβ融合基因与之组建成pETγLT表达质粒,并转化于E.coliBL21(DE3).本文对pETγLT/ BL21(DE3)工程菌的His6-γTNFβ重组产物进行了诱导表达,分离纯化的研究.结果表明,该工程菌用LB培养基在37℃扩增至OD_(590)为0.5左右,加IPTG(终浓度为1mmol/L)诱导5小时,此时His6-γTNFβ的表达量可占菌体总蛋白的45%.重组产物绝大多数以IBs形式存在于菌体中.工程菌经反复超声破碎、高速离心,得IBs粗制品后,再经含2mol/L脲的缓冲液洗涤可得到相对纯净的IBs.然后用7mol/L脲变性溶解IBs,离心取上清,进行Ni^(2+)-Sepharose 6B柱一步法亲和层析,可得到电泳纯度为95%的His6-γTNFβ,经稀释复性和用凝血酶切去His6-tag的产物,其细胞毒活性为(1.2～2.0)×10~7U/mgp,抗病毒活性为(6.0～6.6)×10~6U/map.

腹茧症3例

腹茧症(abdominal cocoon)是一种罕见的疾病,国内外对本病报道较少,命名也不一致,如局限性小肠外膜包绕症、包裹性纤维性慢性腹膜炎、先天性小肠禁锢症、小肠节段性纤维包裹症等[1～4].

参黄散敷脐对肿瘤根治术后气滞血瘀型胃肠功能不全的促康复临床初步研究

[目的]评价参黄散敷脐在促进肿瘤根治术后气滞血瘀型胃肠功能不全康复的有效性及安全性。[方法]将浙江省中医院普外科2010年8月至2011年7月间收治的符合纳入标准的胃肠道肿瘤根治手术患者133例随机双盲分为治疗组(参黄散敷脐组)和对照组(安慰剂敷脐组)。评价两组在术后恢复、平均住院天数、住院费用和中医证侯临床疗效的差异。[结果]治疗组术后排气和排便时间、恢复进食时间、住院时间等均好于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组的中医证侯疗效总有效率为91.3%,与对照组70.3%比较,差异有统计学意义(P<0.01)。两组住院费用未见明显差别(P>0.05)。[结论]参黄散敷脐能促进术后气滞血瘀型胃肠功能不全的康复,增加患者舒适度,且安全可行。

大黄素对腹腔感染大鼠血浆白蛋白及TNF-α、IL-6影响的实验研究

目的:探讨大黄素对于腹腔感染大鼠的保护作用。方法:90只大鼠随机分为3组,A组:假手术组;B组:大黄素治疗组;C组:盲肠结扎穿孔模型(CLP)组。造模12h,24h,36h后分别测定血浆白蛋白浓度、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)等并观察肠粘膜损伤程度。结果:CLP后大鼠血浆白蛋白浓度降低,而C组下降较B组明显(P<0.05)。TNF-α、IL-6明显升高,而C组升高较B组明显(P<0.01),肠粘膜损伤评分变化也有相同趋势(P<0.05)。结论:大黄素能减轻CLP所致腹腔感染大鼠的炎症反应和肠粘膜的损伤。

人TNFβ缺失体融合表达及其产物一步纯化法研究

本文将hTNFβN端缺失 2 3aa的缺失体基因克隆于 pET 2 8 C(+ ) 表达载体 ,构建成T7lac启动子控制下His6 TNFβ融合表达质粒 ,转化到E coliBL2 1(DE3) ,经IPTG诱导表达 ,His6 TNFβ表达量约占总菌体蛋白的 2 5 % ,Mr2 0 5 0 0。表达产物大部分以包涵体形式存在。包涵体经过洗涤 ,70mol/L脲变性溶解 ,用Ni2 + 亲和层析一步快速纯化 ,所得His6 TNFβ的纯度达 90 %以上 ,回收率在 90 %左右。纯化产物稀释复性后 ,其细胞毒活性为 (0 5～ 1 0 )× 10 6U/mg蛋白左右。这些研究结果将为制备重组人TNFβ缺失体以及进一步研究其生物学功能奠定了基础。

直肠癌淋巴结转移风险因素分析

目的探讨直肠癌淋巴结转移及其风险因素。方法回顾性分析108例行全直肠系膜切除术患者临床资料,分析淋巴结转移和风险因素的关系。结果全组病例淋巴结转移率38.9%,检出淋巴结8.97±5.067枚,淋巴结阳性率18.8%,分析显示直肠癌的淋巴结阳性率与患者的年龄、性别、肿瘤大小、术式、瘤体位置、GST-π表达均无明显相关(P>0.05),而与肿瘤的大体类型、浸润深度、分化程度、检出淋巴结数目显著相关(P<0.05),其中肿瘤浸润肠壁深度是影响淋巴结转移的最重要风险因素。结论直肠癌淋巴结转移与肿瘤的浸润深度、分化程度、大体类型、检出淋巴结数目显著相关。

人γ干扰素/β肿瘤坏死因子融合蛋白His6融合表达及一步纯化

将人γ干扰素 /β肿瘤坏死因子融合蛋白 ( hγTNF-β)重组基因克隆于表达载体 p ET2 8,构建成T7lac启动子控制下的 His6融合表达质粒 ,转化溶源菌 E.coli BL 2 1 ( DE3 ) .经 IPTG( 1 m M)诱导表达 ,阳性菌在 SDS-PAGE泳图上出现一条粗表达带 ,其分子量 ( 3 2 k Da)与目的蛋白 His6-γ TNF-β)理论分子量相符 .薄层扫描与溶解性分析显示 ,表达产物占菌体总蛋白的 4 5%以上 ,主要为不溶性的包涵体( IBs) .离心分离 IBs产物 ,溶于 7M尿素中 ,然后通过 Ni柱进行亲和层析 ,即可获得一步纯化的表达产物(纯度为 96%、回收率为 91 % ) .纯化产物再经复性缓冲液稀释复性 ,其细胞毒比活性与抗病毒比活性分别达到 1 .2× 1 0 7～ 2 .0× 1 0 7u/m gp和 6.6× 1 0 5～ 7.2× 1 0

IFNγ-LTα与LTα诱导L929细胞凋亡信号转导的初步研究

目的 研究融合蛋白IFNγ LTα诱导L92 9细胞凋亡的信号转导机制 ,并与LTα相比较。方法 用结晶紫染色法观察细胞毒效应 ;用检测试剂盒检测caspase 8和 3活性的变化 ;观察 3种信号转导分子的抑制剂对IFNγ LTα和LTα诱导的细胞毒效应的影响。结果 IFNγ LTα能诱导L92 9细胞凋亡及胞内caspase 8和 3的活性变化 ,但两种caspase产生的时间和幅度有所不同。PKC的抑制剂可促进IFNγ LTα和LTα对L92 9细胞的杀伤 ;而PLA2及Ca2 +通道的抑制剂对杀伤则有明显的阻断作用 ,但对LTα的阻断强于对IFNγ LTα的阻断。结论 IFNγ LTα融合蛋白的抗肿瘤活性强于LTα ,其信号转导特征有别于LTα。信号分子caspase与PKC、PLA2、Ca2

腹腔镜联合内镜治疗胃肠道占位性病变的临床应用

目的 探讨腹腔镜联合内镜手术治疗胃肠道占位性病变的临床应用价值.方法 近5年来对51例胃肠道占位性病变(包括早期胃癌13例、胃息肉6例、胃间质瘤9例、十二指肠腺瘤3例、结肠息肉5例、横结肠癌4例、降结肠癌8例、乙状结肠癌3例)实施腹腔镜联合内镜手术治疗.手术方式根据病灶部位,病变性质等情况.综合运用腹腔镜和内镜,以期达到最佳治疗效果.结果 手术均获成功,未发生手术并发症,手术时间60～230min,术中出血15～100ml.术后12～36h患者可下床活动,12～72 h肛门排气、拔胃管开始流质饮食,2～5 d拔除引流管,6～14d出院.术后随访1～45个月,患者术前症状消失,内镜复查未见病变复发.结论 腹腔镜联合内镜手术治疗胃肠道占位性病变具有定位准确、创伤小、痛苦轻、术后恢复快等突出优点,在严格把握适应证的前提下可推广应用.

人His6-TNF-β融合表达质粒的构建及其产物一步纯化法研究

人β-肿瘤坏死因子（tumor mecrosis factor beta,TNF-β）又称淋巴毒素（lymphotoxin,LT）、是最早发现的细胞因子之一.研究表明,它不仅对多种肿瘤细胞具有细胞毒作用,而且参与免疫和炎症反应的调节,并能诱导多种分化细胞抗原的表达.成熟的人TNF-β由171个aa组成,其N端为非功能区,研究发现若N端缺失25个aa,仍可保持其细胞毒活性;若缺失24个aa,则该缺失体的细胞毒作用可提高2～6倍,而对小鼠致死率却降低5倍.TNF-βC端结构的完整性对保持细胞毒活性是必需的,因此可通过构建N端的不同缺失体来重组高抗癌效应和低毒副作用的生物制剂.本文选用融台表达载体来组建人N端缺失体的表达质粒,并且借T（?）-lac启动子、His6-tag等元件,以期获得高效表达和利用Ni2+螯合树脂柱来亲和纯化,为进一步研究TNF-β缺失体的生物学活性和TNF-β的开发利用打下基础.

经腹肛拖出式直肠癌根治术后肠段坏死回缩治疗体会

目的:观察治疗经腹肛拖出式直肠癌根治术后肠段坏死回缩的效果。方法:综合治疗拖出式术后并发拖出肠段坏死或回缩5例。结果:4例治愈,1例行永久结肠造瘘。结论:拖出肠管坏死或回缩是经腹肛拖出式直肠癌根治术的严重并发症,术中术后多因素综合处理可有较好效果。

直肠子宫内膜异位症误诊1例并文献复习

病例：患者女，48岁，因“反复腹泻十余年，加重2周”于2009年6月26日入院。十余年前无明显诱因下出现排便习惯和性状改变，排便次数2～3次/d，水样带黄色黏液，便前腹痛，便后缓解，无里急后重，无血便，无长期低热，无明显消瘦。平素经期规律，有痛经史十余年。

过敏性紫癜合并腹腔囊性淋巴管瘤1例

病例：患者男．16岁．因“反复发热伴腹痛2个月”于2011年2月26日入住浙江中医药大学附属第一医院消化内科。患者本次入院前2月余感冒后出现颜面、手足浮肿，尿量减少。2010年12月19日于外院就诊．行肾脏穿刺．病理检查诊断为“肾病综合征”．予泼尼松治疗。

对1例腹膜假黏液瘤诊断的复习与思考

病例：患者女,65岁,因＂反复腹痛、腹胀2年余＂于2016年6月1日收治入院。患者2年前无明显诱因下出现腹部隐痛不适,右上腹明显,伴有腹胀、便秘,于外院行腹部CT检查诊断为不全性肠梗阻,对症治疗好转后出院。此后症状反复发作,多次于多家医院就诊,但均未能明确病因。期间肿瘤指标反复偏高,CEA 50～60 ng/m L,CA125 30～40 U/m L。此次因症状再发入院.