中药四性的生物热动力学研究 Ⅰ.生晒参和红参药性的微量量热学比较

目的 :从生物物理化学的角度 ,探讨中药药性 (寒、热、温、凉 )的客观真实性。方法 :利用微量量热法 ,测定大肠杆菌分别在生晒参和红参提取物作用下的生长热谱曲线 ,得到了相应的生物热动力学参数如生长速率常数(k)、抑制率 (I)、半抑制率 (IC50 )、热焓 (ΔH)。结合本草文献报道 ,综合分析了生晒参和红参药性的差异所在。结果 :生晒参和红参均能抑制大肠杆菌的正常的生长代谢 ,二者的热谱曲线峰形基本相同 ,随着药物浓度的增加 ,代谢过程的停滞期相应延长 ,即生长代谢峰后移 ;二者的热力学参数热焓 (ΔH)存在较稳定的差异 ,生晒参能减少细菌生长代谢过程中热量的释放 ,而红参能增加细菌生长代谢过程中热量的释放。结论 :利用微量量热法测定生晒参和红参的生物热效应 ,其结果与“红参偏热、生晒参偏凉”的中医传统认识是基本吻合的 ;

中药四性的生物热动力学研究(Ⅱ) 参叶和参花药性的微量量热学比较

目的 从生物物理化学的角度 ,阐明中药四性 (寒、热、温、凉 )的客观真实性。方法 利用微量量热法 ,测定了大肠杆菌在不同条件下的生长热谱曲线 ,得到了相应的生物热动力学参数如生长速率常数 (K)、抑制率 (I)、半抑制率 (IC50 )、热焓 (ΔH )。根据生物热动力学通用数值 ,结合本草文献报道 ,综合分析了参叶和参花药性的差异所在。结果 参叶和参花抑制细菌生长的热谱曲线 ,其形状基本相同 ,随着药物浓度的加大 ,代谢过程的停滞期延长 ,生长代谢峰后移 ;其热力学参数热焓 (Δ H)存在较稳定的差异——参叶降低了细菌生长代谢过程中热量的释放 ,而参花增加了细菌生长代谢过程中热量的释放。结论 微量量热法可作为刻划中药药性的一个新的有效手段 。

中药四性的生物热动力学研究——人参和西洋参药性的微量量热学比较

目的 :从生物物理化学的角度 ,阐明中药四性 (寒、热、温、凉 )的客观真实性。方法 :利用微量量热法 ,测定了大肠杆菌在不同条件下的生长热谱曲线 ,得到了相应的生物热动力学参数 ,如生长速率常数(K)、抑制率 (Ⅰ )、半抑制率 (IC50 )、热焓 (ΔH)。根据生物热动力学参数值 ,结合本草文献报道 ,综合分析了人参和西洋参药性的差异所在。结果 :人参和西洋参抑制细菌生长的热谱曲线 ,其形状基本相同 ,随着药物浓度的加大 ,代谢过程的停滞期延长 ,生长代谢峰后移 ;其热力学参数热焓 (ΔH)存在较稳定的差异———人参和西洋参均降低了细菌生长代谢过程中热量的释放。但相同浓度下 ,人参降低的幅度大于西洋参。结论 :微量量热法可作为刻划中药药性的一个新的有效手段 ,亦可作为中草药活性筛选的新手段。

中药四性的研究进展与展望

目的 :对中药四性的发展进行回顾 ,探讨中药四性研究的新思路与方法。方法 :查阅国内外的有关资料进行综述。结果 :为中药四性的研究提出了新的思路与方法。结论 :中药四性的研究将随着时代的发展而赋予新的科学内涵 。

左金方体内外抑制幽门螺杆菌的实验研究

目的:探讨左金方在体内外抑制幽门螺杆菌(hlicobacter pylori,Hp)生长繁殖的作用。方法:采用琼脂稀释法测定左金方和克拉霉素对Hp最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)。60只BALB/c小鼠雌雄各半,按体质量分层随机分为正常组、模型组、胃三联组(0.351 mg·g^(-1))及左金方低、中、高剂量组(0.364,0.728,1.456 g·kg^(-1)·d^(-1))6组,采用抗生素加Hp的方法连续灌胃7 d建立Hp感染动物模型。从第11天开始连续灌胃给药8周后处死小鼠,进行血清尿素酶抗体检测以及病理切片检查。结果:琼脂稀释法测得左金方最小MIC值为200μg·mL^(-1),克拉霉素最小MIC值为0.5μg·mL^(-1)。血清幽门螺杆菌抗体检测、小鼠胃黏膜病理切片结果均提示Hp感染动物模型复制成功,与正常对照组比较差异有统计学意义。胃三联组、左金方高、中、低剂量组均能有效抑制体内Hp的生长,与模型对照组比较差异有统计学意义。结论:左金方在体内体外均能有效地抑制幽门螺杆菌的生长。

医学临床技能实验中心建设与管理的思考

医学临床技能实验中心的建设一项系统工程,其中包括场地建设、教学设备的配套、课程体系、教学方法、教学内容等诸多环节的有机结合,而利用医学临床技能实验中心应用模拟教学的方法是体现现代教育理念,实现实践教学改革目标的有效手段。文章主要介绍我院根据高等医学教育国际化发展趋势,按国际标准建设医学技能培训场所,拟引进生理驱动模拟技术和配套课程,从教学组织模式、教学内容、教学方法等方面对临床教学模式进行的系列改革和尝试,结合先进的管理方法,不断提高临床医学教学水平的思路。

姜黄素对MPP^+诱导PC12细胞凋亡的影响

目的观察姜黄素对MPP+诱导的PC12细胞凋亡的影响。方法采用透射电镜,hoechst染色和流式细胞仪(FCM)观察PC12细胞凋亡,间接免疫荧光流式细胞术检测PC12细胞bcl2的表达。结果PC12细胞自然凋亡率为(15±01)%,05mmol·L-1、1mmol·L-1和2mmol·L-1MPP+作用24h后,PC12细胞凋亡率分别为(441±38)%、(549±21)%和(822±26)%;20μmol·L-1和40μmol·L-1姜黄素对PC12细胞作用24h后无明显凋亡诱导作用,但可分别使05mmol·L-1MPP+处理组细胞凋亡率由(441±38)%下降到(341±38)%和(179±15)%(P<001);PC12细胞经20μmol·L-1姜黄素处理24h后,其bcl2表达率由正常对照的(3643±790)%增加到(7673±860)%(P<001)。结论姜黄素可以抑制MPP+诱导的PC12细胞凋亡,其作用机制之一可能与促进bcl2的表达有关。

姜黄素对MPP^+诱导PC12细胞凋亡的保护作用及其与iNOS的关系

【目的】观察姜黄素(curcumin,Cur)对MPP+诱导的PC12细胞凋亡的保护作用,并且探讨其与iNOS关系。【方法】采用碘化丙啶(PI)染色流式细胞术(FCM)检测PC12细胞凋亡,间接免疫荧光FCM检测PC12细胞iNOS的表达。【结果】PC12细胞自然凋亡率为(1.5±0.1)%,0.5mmol·L-1MPP+作用24h后,PC12细胞凋亡率为(59.5±2.7)%;20μmol·L-1Cur和0.1mmol·L-1特异性iNOS抑制剂氨基胍(aminoguanidine,AG)对PC12细胞作用24h后无明显凋亡诱导作用,但分别使0.5mmol·L-1MPP+处理组细胞凋亡率由(59.5±2.7)%下降到(15.9±5.3)%和(39.7±8.7)%(P<0.01);PC12细胞经0.5mmol·L-1MPP+处理24h后,其iNOS表达率由正常对照的(13.5±1.5)%增加到(71.9±4.0)%(P<0.01),加入20μmol·L-1Cur同时处理24h后,其iNOS蛋白表达率由(71.9±4.0)%下降到(40.0±3.0)%(P<0.01)。【结论】Cur可以抑制MPP+诱导的PC12细胞凋亡,其作用机制之一可能与抑制iNOS高表达有关。

西洋参水提物对Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用

目的:探究在以SH-SY5Y细胞作为神经元代表,β淀粉样蛋白(Aβ25-35)诱导凋亡的阿尔茨海默症(Alzheimer′s Disease,AD)体外细胞模型中,西洋参水提物(water extracts of American Ginseng,WEAG)对神经元的保护作用。方法:流式细胞仪(FCM)检测确定Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞凋亡的最佳浓度和时间,以及WEAG抗凋亡的浓度,MTT法检测细胞存活率,Hoechst33258染色观察细胞形态的变化。结果:50μmol/L Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞72 h后,细胞变圆,聚集,Hoechst33258染色可见明显的颗粒状和固缩状荧光,FCM检测凋亡率达(37.30±0.69)%,与对照组(1.56±0.80)%比较,差异具有显著性意义(P<0.05)。而Aβ25-35和不同浓度的WEAG(0.5、1、5 mg/ml)同时孵育后,细胞形态明显改善,MTT值显著高于Aβ25-35处理组(P<0.01),凋亡率分别降低到(16.71±1.08)%、(10.52±2.11)%和(3.39±1.65)%,与Aβ25-35损伤组(37.30±0.69)%相比,差异具有统计学意义(p<0.05),并呈现出剂量依赖关系。结论:西洋参水提物对Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞凋亡有显著的保护作用。

人参水提物对β淀粉样蛋白诱导SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用

目的研究人参水提物(water extracts of Ginseng,WEG)对β淀粉样蛋白(Aβ25-35)诱导SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用。方法用Aβ25-35诱导体外培养的SH-SY5Y细胞凋亡,并用WEG进行保护。MTT法检测细胞存活率,Hoechst33258染色观察细胞形态的变化,流式细胞仪分析亚二倍体峰和DNA含量,检测细胞凋亡。结果Aβ25-3550μmol/L诱导SH-SY5Y细胞72 h后,镜下观察到细胞变圆,损伤并聚集,Hoechst33258染色可见明显的颗粒状和固缩状荧光,流式细胞仪检测到明显的亚二倍体峰,凋亡率达(37.30±0.69)%。而Aβ25-35和不同浓度的WEG(1,5,10,15 mg/ml)同时处理后,细胞形态明显改善,MTT值显著高于Aβ25-35处理组(P<0.01),流式细胞仪检测凋亡率分别降低到(14.70±3.18)%,(7.23±1.51)%,(6.14±0.40)%,(5.88±1.33)%,呈现剂量依赖关系。结论人参水提物对Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞凋亡有显著的保护作用。

红参水提物对Aβ_(25-35)诱导SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用

目的探讨红参水提物对Aβ25-35诱导人神经瘤母细胞SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用。方法用Aβ25-35处理SH-SY5Y细胞,模拟阿尔茨海默病患者脑内神经元的病理损伤模型,以不同浓度的红参水提物进行干预;用倒置显微镜观察其形态学的变化;MTT法测定细胞的存活率;流式细胞技术检测细胞的凋亡率以及线粒体膜电位的变化。结果50μmol·L-1Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞72h后,细胞变圆、聚集,其存活率为39.26%±3.16%、凋亡率为37.30%±0.69%,线粒体红绿荧光强度比值为0.45±0.10;而Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞与不同浓度(1、5、10mg·ml-1)红参水提物同时孵育后,明显减少了细胞损伤,升高了细胞存活率、降低了凋亡率,并升高了线粒体红绿荧光强度比值。结论红参水提物对Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞凋亡有显著的保护作用。

散血明目片抑制积血所致PVR的实验研究

目的 :研究散血明目片对兔玻璃体积血所致PVR的影响。方法 :采用自体血造兔右眼玻璃体积血模型 ,分别于造模后 4周、8周观察增殖膜分级 ,采用酶联免疫双抗体夹心法 (ELISA)检测积血玻璃体中TNF α、IL 6含量。结果 :玻璃体积血 4周 ,玻璃体内增殖不明显 ;TNF α、IL 6含量 :散血明目片治疗组与血塞通对照组之间有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,与模型组之间TNF α有显著性差异 (P <0 .0 1)、IL 6无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ,与空白组有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,维持了TNF α、IL 6的高表达 ;8周 ,散血明目片组增殖最轻 ;TNF α、IL 6含量明显降到低水平 ,与血塞通对照组有显著性差异 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ,与模型组之间有显著性差异 (P <0 .0 1) ,与空白组无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 :散血明目片在玻璃体积血的早期能维持玻璃体内TNF α、IL 6的高表达 ,在积血的中晚期能够降低玻璃体内的TNF α、IL 6的含量。因此 ,散血明目片不仅可以加速玻璃体积血的清除 ,并且可以抑制玻璃体内细胞增生的启动、细胞的移行和增殖 ,从而预防PVR的发生发展。

黄连与吴茱萸药对配方颗粒、单煎与共煎对幽门螺杆菌抑制作用的研究

目的比较黄连-吴茱萸药对配方颗粒、单煎与共煎体外抑制幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)的作用,探讨药对配方颗粒与传统煎煮的等效性。方法采用麦氏比浊仪测定细菌浓度,绘制细菌生长曲线;采用琼脂稀释法制备含药血平板,测定黄连-吴茱萸不同配比(6∶1、5∶2、4∶3、3∶4、2∶5、1∶6)的配方颗粒剂和共煎液、黄连配方颗粒剂、吴茱萸配方颗粒剂、黄连单煎液及吴茱萸单煎液对H.pylori的最小抑菌浓度(MIC)。结果分别作用H.pylori 48 h后,琼脂稀释法测得黄连颗粒剂对Hp SS1的MIC是0.900 mg·mL^(-1),单煎液为0.869 mg·mL^(-1);吴茱萸配方颗粒剂对Hp SS1的MIC为1.140mg·mL^(-1),单煎液为1.118 mg·mL^(-1);黄连、吴茱萸配方颗粒剂与单煎(传统煎煮)对H.pylori生长的抑制作用差异没有统计学意义(P> 0.05);黄连∶吴茱萸=6∶1的配方颗粒剂对Hp SS1的MIC为0.810mg·mL^(-1),相应共煎液的为0.396 mg·mL^(-1);1∶6配方颗粒剂的MIC为1.800 mg·mL^(-1),相应共煎液的为0.818 mg·mL^(-1),提示黄连、吴茱萸不同配比的配方颗粒剂与共煎液中,黄连∶吴茱萸=6∶1对H.pylori的抑制作用最强,且共煎液抑制H.pylori的作用明显优于相应的配方颗粒剂,差异有统计学意义(P <0.01)。结论黄连-吴茱萸不同配比颗粒剂、单煎液和共煎液均能有效抑制H.pylori的生长,黄连∶吴茱萸=6∶1的抑制作用最强,共煎液抑制作用明显优于相应配比的颗粒剂,本实验为配方颗粒剂与共煎的等效性研究和临床应用提供了一定的实验依据。

中药治疗帕金森病的体外实验研究进展

帕金森病(Parkinson’s disease,PD)为常见的神经退行性疾病,在老年人中的发病率居高不下,给社会和家庭带来了沉重的负担。中药由于在防治帕金森病等神经退行性疾病等方面有较丰富的实践经验及多靶点作用途经、毒性相对小等潜在优势,在临床上的应用越来越广泛,近年来对中药作用机理研究力度加大、水平渐高,已达细胞、分子水平。该文对近十年来中药治疗帕金森病的体外实验研究进行了综述。

抗病毒茶治疗流感的实验研究

结果表明抗病毒茶对甲1 型流感病毒FM1 株感染小鼠具有明显保护作用 ,有显著的解热、抗炎作用 ,对机体免疫功能有一定的促进作用 ,还有一定的镇痛作用。

左金方通过上调Bax/Bcl-2下调MMP诱导人胃癌细胞SGC-7901的凋亡

目的研究左金方诱导人胃癌细胞SGC-7901凋亡的作用机制。方法采用MTT比色法观察左金方对SGC-7901的生长抑制情况;流式细胞仪PI单染亚二倍体峰分析细胞凋亡率;Hoechst 33258染色观察细胞形态学变化;Western blot方法检测Bcl-2、Bax蛋白表达以及JC-1试剂盒测定细胞膜电位。结果左金方能抑制细胞活性,与时间-剂量呈依赖关系。0.1、0.5和1.0 mg·m L-1左金方作用于SGC-7901细胞48 h后,细胞凋亡率分别为(11.60±1.24)%、(21.80±0.28)%、(36.40±1.59)%,与对照组(2.66±1.33)%比较差异均有统计学意义(P<0.01);Hochest染色细胞出现核固缩状和颗粒状荧光等典型的凋亡学特征;左金方可降低SGC-7901细胞Bcl-2基因表达和增加Bax基因表达;左金方作用SGC-790l 4 h后,可以明显引起细胞MMP的下降;1.0 mg·m L-1左金方组的作用尤其明显。结论左金方通过上调Bax/Bcl-2比率,下调MMP诱导了人胃癌细胞SGC-7901的凋亡。

人参水提物对MPP^+诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用

目的研究人参水提物(WEG)对四氢吡啶离子(MPP+)诱导SH-SY5Y细胞凋亡的影响。方法体外培养SH-SY5Y细胞,建立MPP+致SH-SY5Y细胞凋亡的模型,同时给予WEG干预。应用MTT比色法检测细胞活力;Hoechst33258染色观察细胞形态学变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果0.5mmol·L-1MPP+作用于SH-SY5Y细胞60h,MTT值降低到(51.97%±2.46%)(P<0.01),Hoechst 33258染色可见明显的颗粒状和固缩状荧光,凋亡率增加到(40.52%±1.68%)(P<0.01),而WEG则能明显改善SH-SY5Y细胞的凋亡特性,显著升高其MTT值,降低凋亡率(P<0.05)。结论人参水提物对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞凋亡具有显著的保护作用。

左金方及其组方成分对人胃癌细胞SGC-7901凋亡及膜电位的影响

目的比较左金方及其组方成分(黄连、吴茱萸及巴马汀、小檗碱、药根碱、吴茱萸碱、吴茱萸次碱)对人胃癌细胞SGC-7901生长的活性抑制、凋亡诱导和膜电位的影响。方法采用MTT比色法观察受试药物对SGC-7901的生长抑制情况;流式细胞仪PI单染亚二倍体峰分析细胞凋亡率;以及JC-1试剂盒测定细胞膜电位。结果左金方、黄连、巴马汀和小檗碱分别作用SGC-7901细胞后,均能抑制细胞活性,且呈时间依赖性;1.0 mg·m L-1左金方和对应浓度的黄连(0.857 mg·m L-1)、巴马汀(9.19μg·m L-1)、小檗碱(39.85μg·m L-1)作用于SGC-7901细胞48 h,细胞凋亡率分别为(36.40±1.59)%,(21.90±0.27)%,(9.32±2.58)%和(13.89±3.56)%,与对照组(1.69±1.91)%比较差异均有统计学意义(P<0.01),左金方与黄连、巴马汀、小檗碱组间比较差异亦具有统计学意义(P<0.01)。对应浓度的吴茱萸(0.143mg·m L-1)、药根碱(4.86μg·m L-1)、吴茱萸碱(0.17μg·m L-1)与吴茱萸次碱(0.19μg·m L-1)几乎无作用。JC-1染色检测结果显示,左金方及相应浓度的黄连、巴马汀和小檗碱作用SGC-790l细胞4 h后,可以明显引起细胞线粒体膜电位的下降,实验结果与凋亡检测结果相一致。结论左金方、黄连、巴马汀和小檗碱均能通过降低细胞线粒体膜电位,诱导胃癌细胞的凋亡,且左金方的作用优于黄连、小檗碱和巴马汀,但吴茱萸及其有效成分几乎无作用。

左金方联合5-FU抑制人胃癌细胞RF-48的增殖作用研究

目的:研究左金方联合5-FU抑制胃癌RF-48细胞增殖,探讨其协同增效作用。方法:Cell Counting Kit-8检测细胞增殖率的变化,流式细胞仪检测细胞凋亡,Hoechst 33258染色观察细胞形态学变化。结果:左金方对HFE145细胞活力的影响很小,而小剂量的5-FU会引起较大的细胞毒性,不同浓度左金方、5-FU均能诱导RF-48细胞的凋亡;左金方联合5-FU后对HFE145细胞存活率的影响,以及对RF-48细凋亡率的影响,与单独用药组比较差异有统计学意义,Hochest染色RF-48细胞出现核固缩状和颗粒状荧光等典型的凋亡学特征。结论:左金方与5-FU联合用药大幅降低了5-FU的细胞毒性作用,显著提高了HFE145细胞的存活率,促进了人胃癌细胞RF-48的凋亡,比左金方或者5-FU单独用药对胃癌的治疗效果更好。