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鸽圆环病毒浙江株△Cap基因的克隆与原核表达 被引量:17
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作者 余旭平 刘晓宁 +3 位作者 郑新添 邬栋栋 刘江梅 竺春 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期680-684,共5页
根据已发表的鸽圆环病毒(PiCV)序列,在V1ORF保守序列部位设计引物(目的片段长度为629bp),对浙江某鸽养殖场的病料进行PCR扩增检测,获得阳性样品;应用设计的删除核定位信号外壳蛋白基因(△Cap)的引物,扩增获得680bp的△Cap基因,克隆于pMD... 根据已发表的鸽圆环病毒(PiCV)序列,在V1ORF保守序列部位设计引物(目的片段长度为629bp),对浙江某鸽养殖场的病料进行PCR扩增检测,获得阳性样品;应用设计的删除核定位信号外壳蛋白基因(△Cap)的引物,扩增获得680bp的△Cap基因,克隆于pMD18-T载体,进行测序;将△Cap基因亚克隆到原核表达载体pET-28a进行融合表达,SDS-PAGE电泳检测发现,△Cap融合蛋白经IPTG诱导后在大肠杆菌中以包涵体形式表达,目的蛋白表达量占菌体总蛋白的22.1%。 展开更多
关键词 圆环病毒 核定位信号 △Cap蛋白 表达
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血清1和3型多杀性巴氏杆菌铁调控外膜蛋白共同抗原的初步分析 被引量:15
2
作者 余旭平 邬栋栋 +3 位作者 刘晓宁 胡东建 杜鑫 陈玉银 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期245-250,共6页
用普通BHI和缺铁BHI培养基培养禽多杀性巴氏杆菌C48-19(血清1型)、P1059株(血清3型),提取外膜蛋白(OMPs),SDS-PAGE电泳比较不同培养条件下两株细菌的外膜蛋白,发现缺铁培养时2株细菌均增加了87、81、79、64、60.5 ku铁调控外膜蛋白(IROM... 用普通BHI和缺铁BHI培养基培养禽多杀性巴氏杆菌C48-19(血清1型)、P1059株(血清3型),提取外膜蛋白(OMPs),SDS-PAGE电泳比较不同培养条件下两株细菌的外膜蛋白,发现缺铁培养时2株细菌均增加了87、81、79、64、60.5 ku铁调控外膜蛋白(IROMPs)。以C48-19株攻毒后耐过的鸡血清作为抗体进行免疫印迹,检测到其中的87、79和60.5 ku蛋白是2株细菌共同的、具有交叉免疫反应性的IROMPs,推测这3种蛋白可能是这2个菌株的共同抗原,并可能在C48-19感染的鸡体内特异表达;对鸡胚尿囊液中培养的C48-19株OMPs的SDS-PAGE电泳和免疫印迹试验,也观察到类似IROMPs的表达。这些IROMPs的发现为亚单位疫苗的研制提供了候选蛋白。 展开更多
关键词 禽多杀性巴氏杆菌 铁调控外膜蛋白 SDS-PAGE 免疫印迹
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猪场空气细菌数量与猪高热综合征的相关性研究 被引量:11
3
作者 余旭平 何世成 +2 位作者 吴海波 金俊杰 朱军莉 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期102-108,共7页
自2001年入夏以来,浙江、上海等许多地区的猪群中流行以持续高热、气喘、皮肤发红为主要特征的猪"高热综合征",给养猪业带来了巨大的损失.但到目前为止,其主要病原依然未被确定.为了研究空气中细菌含量与该病的发生和严重程... 自2001年入夏以来,浙江、上海等许多地区的猪群中流行以持续高热、气喘、皮肤发红为主要特征的猪"高热综合征",给养猪业带来了巨大的损失.但到目前为止,其主要病原依然未被确定.为了研究空气中细菌含量与该病的发生和严重程度之间的关系,我们对浙江省几个不同规模、不同发病情况的猪场的空气细菌含量进行了测试.结果发现:该病的发生及严重程度与猪舍内空气的细菌含量存在着明显的正相关性. 展开更多
关键词 空气 细菌数量 高热综合征
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鹅圆环病毒浙江永康株全基因组的克隆及序列分析 被引量:29
4
作者 余旭平 郑新添 +2 位作者 何世成 朱军莉 沈琴芳 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期860-864,共5页
为研究水禽流感大规模爆发的机理,进行了水禽流感病例中并发病原,特别是免疫抑制性病原的检测研究。根据已发表的鹅圆环病毒(Goosecircovirus,GoCV)序列,设计了一对检测引物,对浙江永康禽流感病死鹅样品进行PCR扩增,获得与预期552bp大... 为研究水禽流感大规模爆发的机理,进行了水禽流感病例中并发病原,特别是免疫抑制性病原的检测研究。根据已发表的鹅圆环病毒(Goosecircovirus,GoCV)序列,设计了一对检测引物,对浙江永康禽流感病死鹅样品进行PCR扩增,获得与预期552bp大小相符的DNA片段,经测序确认为GoCV特异序列,推测样品中存在GoCV。根据测定的序列进一步设计反向扩增引物,经扩增、测序、拼接后获得GoCV全长基因组序列。基因组序列分析表明,浙江永康株GoCV_yk01全长1821bp,具有圆环病毒共同的与病毒复制相关的茎环结构和Rep蛋白保守基序等特征,它与德国、中国台湾发表的序列在全基因组水平有91%~93%的同源性,在Rep和外壳蛋白的氨基酸水平有94%~97%的同源性。应用ClustalW方法作进化树分析显示,GoCV_yk01序列与德国株及中国台湾株均不在同一分支。圆环病毒可以感染淋巴细胞等增殖快的细胞,引起免疫抑制,从而造成其他病原的并发和继发感染,怀疑GoCV可能在2004年初永康爆发的鹅流感中起到了一定的协同作用。该GoCV_yk01是中国内地首次检测确认并测定全基因组序列的鹅圆环病毒。 展开更多
关键词 圆环病毒 全基因组序列
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鹅圆环病毒重组核衣壳蛋白的原核表达 被引量:8
5
作者 余旭平 胡东建 +3 位作者 郑新添 竺春 刘晓宁 于洪涛 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期505-509,共5页
根据已发表的鹅圆环病毒GoCV-yk1株的序列,设计引物扩增出全长核衣壳蛋白基因(Cap),用BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切后插入到原核表达载体pET-28a中,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行融合表达,经SDS-PAGE电泳检测未见到目的蛋白条带。应用生物信息学... 根据已发表的鹅圆环病毒GoCV-yk1株的序列,设计引物扩增出全长核衣壳蛋白基因(Cap),用BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切后插入到原核表达载体pET-28a中,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行融合表达,经SDS-PAGE电泳检测未见到目的蛋白条带。应用生物信息学分析确定Cap蛋白的核定位信号区域,新设计一对引物扩增出不包含核定位信号序列编码区的核衣壳蛋白基因,将截短Cap基因克隆入pET-28a进行融合表达,经SDS-PAGE电泳和Western blot检测,截短Cap蛋白获得了高效表达,融合蛋白的分子量约为27.6ku,表达产物以包涵体形式存在,其表达量可以达菌体总蛋白的18.3%。截短Cap蛋白的高效表达为鹅圆环病毒ELISA检测方法的建立和进一步开展GoCV致病性及其免疫机制的探索奠定了基础。 展开更多
关键词 圆环病毒 核衣壳蛋白基因 核定位信号 原核表达
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番鸭“新鸭疫”病原中呼肠孤病毒的初步确证 被引量:3
6
作者 余旭平 何世成 +4 位作者 朱军莉 金俊杰 郑新添 沈琴芳 张秀亮 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期846-850,共5页
A so called "new duck disease" with the character of necrosis of spleen and pancreas broke out in flocks of muscovy ducks at the end of 1999 in Zhejiang province. Viruses with different conformation and size... A so called "new duck disease" with the character of necrosis of spleen and pancreas broke out in flocks of muscovy ducks at the end of 1999 in Zhejiang province. Viruses with different conformation and size, one of which was similar to reovirus were found under electronic microscope in allantoic fluid for virus isolation. Three pairs of primers were designed and synthesized based on the published S1 sequences of muscovy duck reovirus (mDRV). Specific RT-PCR products were obtained from both diseased tissues and allantoic fluid for virus isolation. Cloning and sequencing of the fragment and BLAST analysis result further verified the existence and participation of mDRV in the disease. A 1 260 bp S1 full-length sequence of the virus (ZJ99) was further amplified and sequenced. Phylogenic analysis result based on S1 sequences showed that the ZJ99 was in the same group with mDRVs of the French strain and the Fujian strain, while it had some distance to the group of the chicken reoviruses and was far more distant to that of mammalian. On the other hand, the nucleotide sequence of S1 of the ZJ99 strain had a homology of 98% with that of Fujian strain (300 bp partial sequence), while only had 90% homology to that of French strain. It was speculated that mDRVs isolated from different area of China, which had some differences with French strains, were the same strain but spreading in different area. 展开更多
关键词 番鸭 “新鸭疫” 病原 呼肠孤病毒 S1基因 症状 病理变化
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甲鱼病原性豚鼠气单胞菌的分离鉴定 被引量:22
7
作者 余旭平 马有智 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第5期460-462,共3页
自杭州市郊某甲鱼场送检的病死甲鱼中分离到22株细菌,在与嗜水气单胞菌抗血清不产生凝集的多株细菌中挑选3株作进一步鉴定,生理生化特性显示它们均属豚鼠气单胞菌。小鼠试验显示有毒力,用其中1株回归本动物发病死亡,并出现与自... 自杭州市郊某甲鱼场送检的病死甲鱼中分离到22株细菌,在与嗜水气单胞菌抗血清不产生凝集的多株细菌中挑选3株作进一步鉴定,生理生化特性显示它们均属豚鼠气单胞菌。小鼠试验显示有毒力,用其中1株回归本动物发病死亡,并出现与自然病例类似症状。用1株分离菌制备的抗血清与其他21株分离菌株进行玻板凝集试验,其中11株有毒力菌株都出现凝集反应,显示豚鼠气单胞菌为本病的主要病原。 展开更多
关键词 甲鱼 豚鼠气单胞菌 病原性
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鸡新城疫病毒V4株一些特性的研究 被引量:6
8
作者 余旭平 应琦华 +1 位作者 纪素华 徐仲均 《浙江农业大学学报》 CSCD 北大核心 1997年第5期567-569,共3页
对鸡新城疫病毒(NDV)V4株的毒价、血凝(HA)稳定性和致病指数进行了研究,结果显示NDVV4株的毒价(EID)为10-8.3~10-10.1/0.1mL,25℃存放28d、37℃存放12d及反复冻融7次HA滴度不... 对鸡新城疫病毒(NDV)V4株的毒价、血凝(HA)稳定性和致病指数进行了研究,结果显示NDVV4株的毒价(EID)为10-8.3~10-10.1/0.1mL,25℃存放28d、37℃存放12d及反复冻融7次HA滴度不变,其1日龄雏鸡脑内接种、6周龄鸡静脉接种发病指数和鸡胚平均致死时间分别为:ICPI=0.00,IVPI=0.00。 展开更多
关键词 新城疫病毒 V4株 特性 鸡病 疫苗 免疫
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番鸭呼肠孤病毒ZJ99株σC基因在甲醇酵母中的表达 被引量:2
9
作者 余旭平 刘慧芳 +4 位作者 何世成 郑新添 沈琴芳 张秀亮 刘江梅 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2006年第12期15-18,共4页
将番鸭呼肠孤病毒ZJ99株σC基因插入到酵母表达载体pPIC9K内,转化大肠杆菌TG1,挑取阳性克隆,获得酵母表达重组质粒pPIC9K-σC。用DraⅠ酶切线性化重组表达质粒pPIC9K-σC和对照质粒pPIC9K,电转化至甲醇酵母GS115感受态细胞内,经G418抗... 将番鸭呼肠孤病毒ZJ99株σC基因插入到酵母表达载体pPIC9K内,转化大肠杆菌TG1,挑取阳性克隆,获得酵母表达重组质粒pPIC9K-σC。用DraⅠ酶切线性化重组表达质粒pPIC9K-σC和对照质粒pPIC9K,电转化至甲醇酵母GS115感受态细胞内,经G418抗性筛选和PCR鉴定,获得了2株pPIC9K-σC酵母阳性整合子和2株pPIC9K空载体对照酵母阳性整合子。分别挑取1株进行甲醇诱导表达,SDS-PAGE检测发现pPIC9K-σC酵母整合子在不同时段的诱导表达上清液中均有可见的目的蛋白条带,分子质量与预计大小相符,而对照pPIC9K酵母整合子的诱导表达上清液中没有相应的蛋白条带。说明番鸭呼肠孤病毒ZJ99株σC基因真核甲醇酵母表达体系构建成功,目的σC蛋白在酵母中能够有效地分泌表达。 展开更多
关键词 番鸭 呼肠孤病毒 σC蛋白 甲醇酵母 真核表达
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耐热鸡新城疫V4苗对高母源抗体雏鸡的口服免疫试验 被引量:2
10
作者 余旭平 朱凤君 +2 位作者 纪素华 陈亚香 徐仲均 《浙江农业大学学报》 CSCD 北大核心 1997年第6期703-706,共4页
用两个剂量分别以拌料和连续添加的方式,对具新城疫高母源抗体的雏鸡进行耐热新城疫弱毒V4苗的口服免疫试验,并用Ⅳ系苗滴鼻滴眼免疫作对照.血清HI抗体测定结果显示,4个试验组的HI抗体水平在全程的8次测定中均较低且消长平... 用两个剂量分别以拌料和连续添加的方式,对具新城疫高母源抗体的雏鸡进行耐热新城疫弱毒V4苗的口服免疫试验,并用Ⅳ系苗滴鼻滴眼免疫作对照.血清HI抗体测定结果显示,4个试验组的HI抗体水平在全程的8次测定中均较低且消长平缓,攻毒试验显示试验组与对照组相当,均具有较高的保护率.在进行免疫试验的同时,对试验鸡进行称重,经V4苗免疫的试验组的体重比对照组增加. 展开更多
关键词 鸡病 新城疫疫苗 V4株 口服免疫
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高母源抗体雏鸡对鸡新城疫V4苗的免疫应答 被引量:1
11
作者 余旭平 朱凤君 +3 位作者 纪素华 陈亚香 应琦华 徐仲均 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1997年第3期15-16,共2页
高母源抗体雏鸡对鸡新城疫V4苗的免疫应答余旭平朱凤君纪素华陈亚香应琦华徐仲均(浙江农业大学动物科学学院,杭州310029)新城疫病毒V4株是澳大利亚学者于1967年自健康鸡群中分离到的自然无毒株[1],该株病毒的一个... 高母源抗体雏鸡对鸡新城疫V4苗的免疫应答余旭平朱凤君纪素华陈亚香应琦华徐仲均(浙江农业大学动物科学学院,杭州310029)新城疫病毒V4株是澳大利亚学者于1967年自健康鸡群中分离到的自然无毒株[1],该株病毒的一个显著特点是它的热稳定性,经进一步选... 展开更多
关键词 高母源抗体 雏鸡 新城疫 疫苗 免疫应答
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呼吸、肾病变兼型鸡传染性支气管炎的临床诊断和病原分离 被引量:1
12
作者 余旭平 陈亚香 朱凤君 《中国畜禽传染病》 CSCD 1996年第4期12-14,共3页
杭州某牧场一鸡群发生具强烈呼吸症状的传染病,对病死鸡剖检见明显肾肿大、出血、花斑等肾病变,在临床初步诊断的基础上进行了病原分离及病原特性的初步测定,进一步证实该鸡群发生了具有明显呼吸症状及肾病变二种病型的呼吸、肾病变兼... 杭州某牧场一鸡群发生具强烈呼吸症状的传染病,对病死鸡剖检见明显肾肿大、出血、花斑等肾病变,在临床初步诊断的基础上进行了病原分离及病原特性的初步测定,进一步证实该鸡群发生了具有明显呼吸症状及肾病变二种病型的呼吸、肾病变兼型传染性支气管炎。 展开更多
关键词 鸡病 传染性支气管炎 呼吸症状 肾病变 病原分离
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PCR检测猪应激综合症应用 被引量:1
13
作者 余旭平 徐士清 +1 位作者 王伦雄 王松均 《浙江农业大学学报》 CSCD 1996年第1期105-106,共2页
PCR检测猪应激综合症应用余旭平,徐士清,王伦雄,王松均(浙江农业大学动物科学学院,杭州310029;浙江省农业科学院畜牧兽医研究所,杭州310021;杭州市种猪试验场,杭州311115)APreliminaryRe... PCR检测猪应激综合症应用余旭平,徐士清,王伦雄,王松均(浙江农业大学动物科学学院,杭州310029;浙江省农业科学院畜牧兽医研究所,杭州310021;杭州市种猪试验场,杭州311115)APreliminaryReportonPorcineStre... 展开更多
关键词 猪病 应激综合症 聚合酶链反应 检测
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鳖的嗜水气单胞菌的分离及其特性鉴定 被引量:2
14
作者 余旭平 马有智 《浙江农业大学学报》 CSCD 1996年第5期464-466,共3页
从杭州市某甲鱼养殖场发生的一种持续性慢性不明传染病病死甲鱼中,分离到多株细菌,用玻板凝集试验筛选出与嗜水气单胞菌抗血清发生强阳性反应的两株细菌,经形态、染色、生长特性研究及生化反应鉴定,确定这两株细菌均为嗜水气单胞菌... 从杭州市某甲鱼养殖场发生的一种持续性慢性不明传染病病死甲鱼中,分离到多株细菌,用玻板凝集试验筛选出与嗜水气单胞菌抗血清发生强阳性反应的两株细菌,经形态、染色、生长特性研究及生化反应鉴定,确定这两株细菌均为嗜水气单胞菌,但其中一株具毒力,在血琼脂上呈β-溶血,能在4小时内致死小白鼠,而另一株无毒力。 展开更多
关键词 嗜水气单胞菌 病原菌
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新城疫V_4病毒和耐热鸡新城疫V_4疫苗 被引量:4
15
作者 余旭平 陆国林 金美玲 《浙江畜牧兽医》 1996年第3期16-18,共3页
新城疫V_4病毒和耐热鸡新城疫V_4疫苗余旭平,陆国林,金美玲(浙江农业大学)(浙江省农业厅畜牧管理局)新城疫V4病毒是Simmons于1966年从澳大利亚昆士兰分离得到的,研究证实对鸡和鸡胚无或仅有极弱的病原性,具有... 新城疫V_4病毒和耐热鸡新城疫V_4疫苗余旭平,陆国林,金美玲(浙江农业大学)(浙江省农业厅畜牧管理局)新城疫V4病毒是Simmons于1966年从澳大利亚昆士兰分离得到的,研究证实对鸡和鸡胚无或仅有极弱的病原性,具有较好的免疫原性,能在鸡群中传播,通... 展开更多
关键词 鸡病 新城疫 病毒 疫苗
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捕获输出蛋白编码基因的小分子量质粒载体的构建与验证
16
作者 余旭平 朱军莉 +2 位作者 姚学萍 何世成 牛冬 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期127-132,共6页
自行设计一对引物,从质粒pUC18上扩增一段无启动子和信号肽的β-内酰胺酶基因(△P△SPAmp),经pGEM-T-EASY载体克隆到pET-28衍生质粒pKan的EcoR 和Xba 间,得到在Kan平板中生长而在Amp和Kan双抗平板中不能生长的转化子pMBL-E质粒.经部分... 自行设计一对引物,从质粒pUC18上扩增一段无启动子和信号肽的β-内酰胺酶基因(△P△SPAmp),经pGEM-T-EASY载体克隆到pET-28衍生质粒pKan的EcoR 和Xba 间,得到在Kan平板中生长而在Amp和Kan双抗平板中不能生长的转化子pMBL-E质粒.经部分酶切补平自连,筛选得到消除Hind 位点端EcoR 位点的质粒,即为用于输出信号基因片段捕获的目的载体pMBL,大小为3.46kb.经酶切鉴定和测序分析,表明构建的载体与预期设计的一致,并应用四环素抗性基因(Tetr)对载体的有效性进行了验证,证明构建的载体pMBL能有效捕获含启动子和信号肽序列的输出蛋白编码基因. 展开更多
关键词 质粒载体 克隆 信号肽 输出蛋白编码基因 细菌 启动子
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跨膜蛋白基因克隆载体pMBL的构建及验证
17
作者 余旭平 朱军莉 +4 位作者 姚学萍 何世成 金俊杰 牛冬 阮辉 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第8期730-736,共7页
自行设计一对引物 ,从质粒pUC18上扩增一段无启动子和信号肽的β 内酰胺酶基因 (△P△SPAmp) ,以作为最终构建的载体克隆到带跨膜信号基因片段的报告基因。所设计的上游引物中依次带有分别处于 3个不同阅读框架、且形成匹配粘性末端的 ... 自行设计一对引物 ,从质粒pUC18上扩增一段无启动子和信号肽的β 内酰胺酶基因 (△P△SPAmp) ,以作为最终构建的载体克隆到带跨膜信号基因片段的报告基因。所设计的上游引物中依次带有分别处于 3个不同阅读框架、且形成匹配粘性末端的 3个酶切位点BglⅡ、BclⅠ、BamHⅠ ,以便最终构建的载体捕获基因时的对位融合和表达。pET 2 8经BglⅠ、Bst110 7Ⅰ双酶切 ,去除约 2 5kb的lacⅠ等基因的冗余片段 ,保留Kan抗性基因、复制原点、多克隆位点等结构 ,并消除BglⅡ位点 ,获得作为最终构建载体的抗性基因和基本骨架的过渡质粒pKan。△P△SPAmp基因经pGEM T EASY载体 ,克隆到pKan的EcoRⅠ和XbaⅠ间 ,得到在Kan平板中生长而在Amp和Kan双抗平板中不能生长的转化子pMBL E质粒 ;经部分酶切补平自连 ,筛选得到消除HindⅢ位点端EcoRⅠ位点的质粒 ,即得到用于跨膜蛋白信号基因片段捕获克隆的目的载体pMBL ,大小为 3 4 6kb。经酶切鉴定和测序 ,证明构建的载体与预期设计的一致。应用四环素抗性基因 (Tet)片段对构建的跨膜蛋白基因克隆载体pMBL的有效性进行了验证 ,在克隆入EcoRⅠ和BglⅡ双酶切 (0位 )的载体中 ,Kan和Amp双抗平板筛选到阳性克隆子 ,经酶切和测序均显示Tet基因已对位插入 ,并启动了 β 展开更多
关键词 细菌 跨膜蛋白编码基因 信号肽 克隆载体
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浙江省地方鸡种的遗传多样性研究 被引量:31
18
作者 傅衍 牛冬 +4 位作者 阮晖 罗静 陈功 余旭平 张亚平 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第7期606-613,共8页
测定了浙江省5个地方鸡种及来航鸡(对照)线粒体D-环区的部分序列(539bp),构建了鸡种的分子系统树。在所测序列中共有24个变异位点,变异率为4.45%。结果显示,浙江省地方鸡种分为两支,有两个母系来源,一支为仙居... 测定了浙江省5个地方鸡种及来航鸡(对照)线粒体D-环区的部分序列(539bp),构建了鸡种的分子系统树。在所测序列中共有24个变异位点,变异率为4.45%。结果显示,浙江省地方鸡种分为两支,有两个母系来源,一支为仙居鸡,它和外来品种来航鸡关系较近,有共同的母系祖先。另一支为灵昆鸡、白银耳鸡、乌骨鸡和萧山鸡,它们有着共同的母系祖先,其中灵昆鸡,白银耳鸡、乌骨鸡关系较近,萧山鸡与此3种鸡关系较远。 展开更多
关键词 地方鸡种 线粒体DNA D-环区序列 遗传多样性 浙江
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中华鳖白底板病病原的分析 被引量:32
19
作者 沈锦玉 潘晓艺 +3 位作者 余旭平 尹文林 曹铮 吴颖蕾 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期815-822,共8页
从患白底板病的中华鳖(Trionyx sinensis)肾、肝、脾分离出致病力较强的细菌TS6-1和TS6-2。同时样品经超薄切片,电子显微镜观察,在脾、肝、肾组织细胞质中观察到直径为30 nm病毒样颗粒。经人工感染试验证实,分离菌株及患病鳖内脏组织过... 从患白底板病的中华鳖(Trionyx sinensis)肾、肝、脾分离出致病力较强的细菌TS6-1和TS6-2。同时样品经超薄切片,电子显微镜观察,在脾、肝、肾组织细胞质中观察到直径为30 nm病毒样颗粒。经人工感染试验证实,分离菌株及患病鳖内脏组织过滤液均可导致中华鳖发病死亡,TS6-1和TS6-2的LD50分别为3.2×107CFU/mL和1.0×108CFU/mL。以患病鳖肝、脾组织的过滤液注射健康鳖后,3~5天内所有鳖全部死亡。通过对细菌形态、生理生化特性的测定,判定TS6-2属于嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)。同时对TS6-1进行了16S rRNA分子鉴定,将测定的序列递交NCBI进行BLAST同源序列比对,与迟缓爱德华氏菌的16S rRNA基因具有较高的同源性(99%),该序列在GenBank上的登录号为DQ884466。结合细菌的生理生化特性,判定TS6-1属于迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tard)。由此认为中华鳖白底板病由病毒和嗜水气单胞菌、迟钝爱德华氏菌混合感染引起。药敏试验结果表明,TS6-1对先锋V、丁胺卡那敏感,TS6-2对卡那霉素、庆大霉素、丁胺卡那敏感。 展开更多
关键词 中华鳖 白底板病 病毒 迟缓爱德华氏菌 嗜水气单胞菌
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牛蛙无乳链球菌病病原的分离鉴定 被引量:16
20
作者 杭小英 周冬仁 +3 位作者 叶雪平 余旭平 罗毅志 施伟达 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期361-364,共4页
牛蛙,原产北美洲,是一种大型的食用蛙。牛蛙具有适应性广,抗病力强,生长速度快,养殖周期短,经济效益高等特点,近年来随着零售价格回升,已成为目前广大养殖户的主要养殖品种之一。随着牛蛙养殖产业的蓬勃发展,新的病害不断出现,2009、201... 牛蛙,原产北美洲,是一种大型的食用蛙。牛蛙具有适应性广,抗病力强,生长速度快,养殖周期短,经济效益高等特点,近年来随着零售价格回升,已成为目前广大养殖户的主要养殖品种之一。随着牛蛙养殖产业的蓬勃发展,新的病害不断出现,2009、2010年在浙江养殖牛蛙地区发生一种新的流行病,其病症为:口腔偶见血丝, 展开更多
关键词 牛蛙 无乳链球菌 病原 16S RRNA
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