过表达miR-144-3p下调感染巨噬细胞 IL-6 mRNA抑制BCG的存活

探究miR-144-3p对巨噬细胞IL-6 mRNA表达量和巨噬细胞免疫能力的影响,为结核诊疗提供理论参考。方法(1)建立BCG感染THP-1巨噬细胞模型,qPCR检测感染不同时间miR-144-3p和IL-6 mRNA表达变化;(2)瞬转miR-144-3p模拟物/抑制剂来过表达/抑制miR-144-3p后,qPCR检测感染不同时间miR-144-3p和IL-6 mRNA表达变化;皮尔森相关系数分析miR-144-3p和IL-6 mRNA的相关性;(3)CCK-8检测瞬转miR-144-3p模拟物/抑制剂后,CCK-8检测BCG感染的巨噬细胞增殖能力;CFU检测BCG存活状态。结果显示:(1)巨噬细胞感染BCG后,miR-144-3p和IL-6 mRNA表达均显著上升(P<0.05),miR-144-3p表达量在12 h达到峰值,IL-6 mRNA表达量在24 h达到峰值;(2)巨噬细胞感染BCG后,过表达miR-144-3p使IL-6 mRNA表达显著下降(P<0.01);抑制miR-144-3p使IL-6 mRNA表达显著上升(P<0.01);皮尔森相关系数分析结果显示两者存在负相关性;(3)过表达/抑制miR-144-3p不影响巨噬细胞增殖能力,但过表达miR-144-3p能抑制巨噬细胞中BCG的存活。结论:BCG感染巨噬细胞后miR-144-3p和IL-6 mRNA表达均显著上升;过表达/抑制巨噬细胞miR-144-3p,miR-144-3p可能负调控IL-6 mRNA表达;过表达miR-144-3p能抑制BCG存活,进而增强巨噬细胞的先天免疫能力。

Hif-1α在斑马鱼吞噬细胞迁移及发育中的生物学功能

探究斑马鱼低氧诱导因子-1α(Hif-1α)基因在中性粒细胞和巨噬细胞的发育和迁移中所起的作用。将斑马鱼分为野生对照组和Hif-1α基因突变组。使用CRISPR/Cas9技术对斑马鱼的Hif-1α基因进行突变。随后,通过苏丹黑B染色法观察了野生对照组和Hif-1α基因突变组中性粒细胞的染色情况,以及通过中性红染色法观察了巨噬细胞的染色情况并对结果进行了统计分析。结果显示成功构建缺失8个碱基的斑马鱼Hif-1α基因突变体,且Hif-1α基因突变的斑马鱼幼鱼发育3 d后,中性粒细胞迁移到急性损伤部位的数量显著减少,突变型斑马鱼后脑室中的小胶质巨噬细胞数量比野生型显著增多。综上,本研究成功构建了斑马鱼Hif-1α基因纯合突变体,同时表明Hif-1α基因具有抑制中性粒细胞向炎症区域迁移的作用,并促进脑室巨噬细胞的生长发育,为后续研究急性损伤模型提供基础。

金银花绿原酸合成代谢途径关键酶的生物信息学分析

4-香豆酸辅酶A连接酶是金银花绿原酸合成途径的关键酶(4CL),本文利用基因组数据库,4CL为研究对象,采用生物信息学的分析方法,分析其理化性质、系统进化、基因结构,并利用MEGA-11软件比对各植物同种酶蛋白氨基酸序列间的相似性及演化距离、构建系统发生树。结果表明:4CL1是由538个氨基酸残基组成,分子量可以测得为58.68 kDa,理论pI值为5.73;4CL2是由540个氨基酸残基组成,分子量可以测得为58.68 kDa,理论pI值为8.49,金银花中绿原酸合成代谢途径的4CL蛋白为不稳定蛋白,它们大多数氨基酸都为亲水性氨基酸。本文研究能为金银花绿原酸的生物合成机制奠定理论基础,也为绿原酸代谢工程的应用提供一定的借鉴。

基于数据驱动的光纤通信链路状态监测

为提升光纤通信可靠性,掌控光纤通信链路状态变化情况,提出了基于数据驱动的光纤通信链路状态监测方法。首先采集光纤通信链路状态信号,并对光纤通信链路状态信号进行噪声去除操作,然后利用小波算法提取链路状态特征,运用改进概率神经网络依据链路状态特征设计光纤通信链路状态监测模型,最后进行了链路状态监测仿真测试,结果表明:该方法可以有效去除光纤通信链路状态信号噪声,监测出各种光纤通信链路状态,光纤通信链路状态识别正确率超过95%,光纤通信链路状态偏差小于5%,识别时间控制在6 s以内,完全可以满足光纤通信的实际应用要求。

ITGB2在斑马鱼中性粒细胞迁移和巨噬细胞 发育的作用机制初探

通过构建ITGB2(整合素β2亚基)瞬时敲除斑马鱼模型,探讨ITGB2在中性粒细胞的迁移与巨噬细胞的发育中发挥的作用。使用CRISPR/Cas9技术设计敲除斑马鱼的ITGB2,然后利用苏丹黑染色观察瞬时敲除组和正常斑马鱼的全身中性粒细胞的分布情况及切尾后中性粒细胞的迁移情况;进一步采用中性红染色观察瞬时敲除组和正常斑马鱼脑室巨噬细胞的早期发育情况及永久造血后脑室巨噬细胞的发育情况。结果显示:敲除斑马鱼的ITGB2后,会使全身的中性粒细胞在尾部造血循环中表达增加,急性损伤后中性粒细胞迁移到伤处的数量减少;发育3 d后脑室巨噬细胞的数量比正常斑马鱼少,永久造血后脑室巨噬细胞的数量依旧比正常斑马鱼少。由此可认为,ITGB2对于斑马鱼的中性粒细胞和脑室巨噬细胞十分重要,会影响中性粒细胞的迁移情况以及脑室巨噬细胞的发育情况。

水下材料吸隔声性能测试近场长脉冲传递函数法

为消除有限空间壁面反射对大样水下材料声学性能测试的影响,利用传递函数法和脉冲法测试原理,建立声波垂直入射情况下水下材料吸隔声性能测试近场长脉冲传递函数法,10 mm均匀钢板模型声学性能试验表明,压力环境下钢板反射及隔声性能测试值与理论值基本一致,反射系数测试偏差小于0.1,隔声量测试偏差小于1 dB,采用近场长脉冲传递函数法测量声波垂直入射情况下材料声学性能,可有效克服边界反射对测试的影响。

颅脑降温仪对重症颅脑损伤患者颅内压和脑损伤程度及脑血流动力学的影响

目的探讨颅脑降温仪对重症颅脑损伤(STBI)患者颅内压、脑损伤程度及脑血流动力学的影响。方法选择2021年4月至2023年5月医院收治的80例STBI患者,采用随机数字表法分为对照组和试验组,每组40例。两组均给予降颅内压、营养神经、改善脑循环及抗生素预防感染等基础治疗,有手术指征者给予开颅手术治疗。对照组术后采用冰袋或冰帽等常规降温措施进行亚低温治疗,试验组采用颅脑降温仪进行亚低温治疗。比较两组治疗前和治疗5 d后的神经功能指标[包括改良爱丁堡-斯堪纳维亚评分量表(MESSS)评分和格拉斯哥昏迷量表(GCS)评分]、颅内压、脑损伤程度指标[神经元特异性烯醇化酶(NSE)]和脑血流动力学指标[包括大脑中动脉收缩期峰流速、脉搏波波速和搏动指数(PI)]。结果治疗5 d后,两组MESSS评分均低于治疗前,GCS评分均高于治疗前,且试验组MESSS评分低于对照组,GCS评分高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);两组颅内压及血清NSE水平均低于治疗前,且试验组低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);两组大脑中动脉收缩期峰流速、脉搏波波速均高于治疗前,PI低于治疗前,且试验组大脑中动脉收缩期峰流速、脉搏波波速均高于对照组,PI低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论颅脑降温仪亚低温治疗用于STBI患者较冰袋或冰帽等常规降温措施更有优势,不仅可减轻脑损伤程度,保护神经功能,而且可减轻继发性脑水肿,降低颅内压,改善脑血流动力学指标。

斑点叉尾鮰暴发性海豚链球菌病的研究

于2006-2007连续两年在广西横县、邕江及合浦等网箱养殖的斑点叉尾鲴Ictalurus punctatus中暴发一种流行性传染病，该病波及面广、传染性强，死亡率为30％～100％。鱼的主要发病症状为：浮头、转圈、狂游，发病后期鱼的单边眼睛浑浊、突出，且全身大面积弥漫性出血。作者先后从症状较为典型的斑点叉尾鱼心的脑、肝脏、脾脏和。肾脏组织等部位取样，分离到7株代表性菌株（CMS003～CMS005、CMS009～CMS012）。人工感染试验结果表明，分离菌株对健康斑点叉尾鲴具有很强的致病力，发病症状与自然发病斑点叉尾鲴的症状相同。采用常规形态、生理生化及海豚链球菌Streptococcus iniae特异性PCR诊断和16S rRNA基因序列系统发育进化分析的方法，对分离菌株进行分类鉴定，结果表明，分离的7株细菌均为海豚链球菌。目前，海豚链球菌已成为广西斑点叉尾鲴网箱养殖的高致病性病原菌。

罗非鱼海豚链球菌疫苗及其免疫效果的研究

用筛选到的海豚链球菌（Streptococcus iniae）临床分离菌株CMS005,甲醛灭活制备成疫苗并对其进行了注射、浸泡和口服免疫奥尼罗非鱼的效果研究。结果显示：实验室水族箱试验的注射、浸泡和口服免疫的最佳免疫保护率分别为90.5%、61.9%和14.3%,水泥池小网箱试验的最佳免疫保护率分别为100%、86.1%和66.7%。免疫剂量对浸泡免疫效果的影响大于注射和口服免疫,加强免疫可显著提高浸泡和口服免疫效果,超声波处理可以提高浸泡免疫效果。注射和口服免疫7 d和15 d后均可控制罗非鱼海豚链球菌病的继续发生;未免疫组罗非鱼月累计死亡率为4%～16%,而免疫组罗非鱼月累计死亡率低于0.5%;疫苗产生的免疫保护力可持续2～3个月。

二氯异氰尿酸钠对鱼虾类的急性毒性试验

二氯异氰尿酸钠是一种有机氯消毒剂，可用于水体消毒。

鲢鱼嗜水气单胞菌PCR检测方法的建立

根据基因库中嗜水气单胞菌16S rRNA基因序列,设计并合成一对特异性引物,用PCR方法对从病死鲢鱼体内分离到的1株嗜水气单胞菌进行扩增,并对PCR反应条件进行优化,同时测试了该方法的特异性和敏感性。特异性试验结果显示,该引物能扩增出680bp的嗜水气单胞菌特异基因片段,与鳗弧菌、溶藻弧菌、副溶血弧菌、温和气单胞菌、迟缓爱德华氏菌鱼、回爱德华氏菌及海豚链球菌无交叉反应;敏感性试验结果显示,该方法最低检测量为10pg嗜水气单胞菌基因总DNA。表明该实验所建立的PCR检测方法可用于鲢鱼嗜水气单胞菌的快速诊断,对有效治疗和控制鱼类嗜水气单胞菌病的流行具有重要意义。

细胞生物学教学改革与实践

21世纪是生命科学的世纪,细胞生物学课程教学应该进行完善和提高,以培养新世纪合格人才。从教学内容、教学手段、成绩考核标准和教学方法等四个方面进行了探讨,为细胞生物学教学改革提供了新思路。

黄刺玫基因组DNA提取方法的研究

以黄刺玫的嫩叶为材料,比较了改良SDS法、CTAB法和陈大明法等3种方法对其基因组DNA的提取效果。结果表明:采用裂解前加入不含SDS的缓冲液,提取过程中用4%β-巯基乙醇的改良SDS法,可有效地控制材料的褐变及DNA污染。提取的DNA纯度和产率均较高,可完全满足RAPD扩增的需要。

白木香离体培养及高频率植株的再生

以野生白木香Rosa banksiaevar.normalis茎段为外植体,探讨了不同生长调节物质对外植体分化、增殖和生根的影响,并对栽培基质与移栽技术进行研究。结果表明,利于白木香分化的诱导培养基为MS+2.0 mg.L-16-BA+0.1 mg.L-1NAA;MS+2.0 mg.L-16-BA+0.05mg.L-1NAA作增殖培养基效果最好,增殖率为5.5;利于生根的培养基为1/2MS+0.2 mg.L-1IBA+0.2 mg.L-1NAA;移栽基质为蛭石+珍珠岩+腐叶土(1∶1∶1)效果最好,成活率98%,且苗生长健壮。建立了白木香高效再生体系。

绿化中应用树状花木的构想

针对目前行道树种类不够丰富 ,美化、香化环境树种缺乏的现状 ,认为未来园林绿化应加大彩乔、花乔和绿乔行道树的应用 ,并归纳了地栽树状花木的造型设计及园林应用。

野生黄蔷薇离体培养再生体系的建立

就野生黄蔷薇的离体培养再生体系进行了研究,结果表明,适于黄蔷薇分化的诱导培养基为改良MS附加AgNO33.0 mg/L、6-BA1.5 mg/L、NAA0.5 mg/L、琼脂6.5g/L、蔗糖30 g/L,最高分化率达94%,以改良MS附加AgNO33.0 mg/L、6-BA1.5 mg/L、NAA0.05 mg/L、琼脂6.5 g/L、蔗糖30 g/L作增殖培养基效果最好,增殖倍数为4.5;适于生根的培养基为改良1/2MS附加AgNO34.5 mg/L、IBA 0.2 mg/L、0.2%活性炭、琼脂4.0 g/L、蔗糖20 g/L,生根率达90%。

木香基因组DNA的提取方法

以木香作为实验材料,利用简单提取法、改良CTAB法、改良SDS法、改良CTAB-SDS法和高盐低pH值法对木香基因组DNA进行提取,并对其基因组DNA的纯度和含量进行测定。结果表明:利用以上5种方法提取的木香基因组DNA,在纯度和含量上以改良CTAB法效果最好,其它依次是改良SDS法、简单法、高盐低pH法和改良CTAB-SDS法。

狗蔷薇茎尖再生体系的优化

采用正交设计及方差分析对影响狗蔷薇植株再生体系的因素进行了优化研究,结果表明:影响狗蔷薇植株再生的最主要因素是NAA和BAP,其次为AgNO3和蔗糖.适宜狗蔷薇茎尖再生的培养基为:MS+BAP1.5mg.L-1+NAA0.1mg.L-1+AgNO33.5mg.L-1+蔗糖40g.L-1+琼脂6.0g.L-1,植株再生频率高达96.3%,增殖系数为6.5.

提高狗蔷薇离体培养植株再生频率

以狗蔷薇(RosacaninaInermis)为材料,以MS为基本培养基,通过对不同植物生长调节剂的组合,大幅度提高了狗蔷薇离体培养植株再生频率。结果表明,2.0mgL6BA+0.3mgL2,4D的组合较为适宜,其不定芽再生率为87%,增殖率为3.0;而CPPU和2,4D的适宜组合为1.5mgL+0.3mgL,其不定芽再生率高达93%,增殖率为5.0。同时,研究结果显示,以MS+40gL蔗糖+6.0gL琼脂粉+3.5mgLAgNO3+1.5mgLCPPU+0.1mgL2,4D+0.05mgLGA3作增殖培养基效果最好,不定芽诱导率为89%,增殖率为5.5;利于生根的培养基为14MS+20gL蔗糖+3.5gL琼脂+0.3%活性碳+0.1mgLIBA+0.1mgLNAA,生根率为91%。

分子生物学教学改革与实践

针对分子生物学课程教学存在的问题,提出分子生物学教学改革遵循的原则,按照这一原则,制定分子生物学教学内容的改革方案和分子生物学教学内容体系的设置。