菟丝子水煎液对大鼠肝微粒体细胞色素P450亚型酶活性的影响

目的观察菟丝子对大鼠肝细胞色素P450酶系统中CYP1A2,2D6以及3A4 3种亚型活性的影响。方法对照组和实验组大鼠分别经口给予生理盐水和菟丝子水煎液2周,差速离心分离肝微粒体,HPLC法分别测定大鼠肝微粒体中CYP1A2,2D6以及3A4探针药物的代谢率;通过Western blot测定大鼠肝微粒体中CYP1A2,2D6以及3A4蛋白的相对含量。结果①实验组探针药物非那西丁代谢率高于对照组(P<0.05),Western blot分析显示实验组CYP1A2蛋白表达略高于对照组;②实验组探针药物右美沙芬的代谢率明显高于对照组(P<0.05),CYP2D6蛋白表达亦明显高于对照组;③两组间探针药物咪哒唑仑代谢率及CYP3A4蛋白表达无明显差异。结论中药菟丝子水煎液可诱导大鼠肝微粒体中的CYP2D6和CYP1A2,而对CYP3A4无影响。

北京市17～30岁健康人血清铜、铁、锌、镁、钙五元素参考范围研究

目的初步研究北京市17-30岁健康人血清铜、铁、锌3种微量元素和镁、钙2种常量元素的参考范围,为临床诊断提供参考值和相关依据。方法采用原子吸收光谱法分别测定北京市300名17-30岁健康人血清铜、锌、镁、钙、铁5种元素含量,研究其性别和年龄的差异性,考察其分布状态。结果以上5种元素血清含量均呈正态分布;钙、铁含量在性别上有差异,具有统计学意义（P〈0.05）;钙含量在不同年龄组差异有统计学意义（P〈0.01）。结论北京市17-30岁健康人血清5种元素中铁含量男性高于女性,钙元素在女性中含量高于男性,且钙含量随年龄增长有下降趋势。人体血清必需元素含量参考范围的制定须充分考虑地域、年龄和性别的因素。

血清唾液酸与羟脯氨酸联合检测在恶性肿瘤诊断中的临床价值

目的探讨血清唾液酸与羟脯氨酸联合检测在恶性肿瘤诊断中的临床价值。方法选取共296例标本,其中肿瘤患者142例、非肿瘤类疾病患者55例、健康人99例,比色法检测血清唾液酸与羟脯氨酸浓度。比较在不同疾病下该指标的检测结果,统计分析各组间结果差异,探讨其对肿瘤的诊断价值。结果肿瘤组唾液酸与羟脯氨酸浓度明显高于非肿瘤疾病组和健康组,且差异具有统计学意义(P<0.05)。结论测定血清中唾液酸与羟脯氨酸浓度,有利于临床上恶性肿瘤的辅助诊断。

柴胡注射液对大鼠细胞色素P450各亚型活性的影响

目的:观察柴胡注射液对大鼠细胞色素P450各亚型活性的影响。方法:24只Wistar大鼠,随机分成3组:对照组,柴胡注射液低、高剂量组。3组分别腹腔注射生理盐水、0.36、0.72mL/kg(相当于原药材0.72、1.44g/kg)柴胡注射液诱导两周后,于d15清晨灌胃给予探针药物咖啡因(10mg/kg),6h后处死。用HPLC法观察探针药物代谢率的变化来反映柴胡注射液对大鼠CYP1A2活性的影响;West-ernbloting测定大鼠肝微粒体CYP1A2、3A4、4A1蛋白的相对含量。结果:体内、外探针药物代谢率在各剂量组及对照组间均无统计学差异(P>0.05),CYP1A2在各剂量组中表达亦无统计学差异。CYP3A4在柴胡注射液高剂量组中表达明显增多(P<0.05),CYP4A1在柴胡注射液低、高剂量组表达均明显减少(P<0.05)。结论:柴胡注射液对大鼠CYP1A2亚型没有影响,但在蛋白质水平,可抑制大鼠肝CYP4A1表达。高剂量柴胡注射液可诱导大鼠肝CYP3A4表达。

奥扎格雷钠对大鼠CYP2D6亚型酶的影响

目的通过奥扎格雷钠的大鼠体内、外实验,观察奥扎格雷钠对大鼠CYP2D6亚型酶的影响。方法对照组和奥扎格雷钠诱导组大鼠分别经口给予生理盐水和奥扎格雷钠1wk,HPLC法测定大鼠尿样及肝微粒体中CYP2D6的探针药物右美沙芬的代谢率,观察奥扎格雷钠对CYP2D6活性的影响。结果①大鼠给予奥扎格雷钠(37mg·kg-1),其尿样中右美沙芬的代谢率明显高于对照组(P<0·01);②奥扎格雷钠诱导组大鼠肝微粒体中加入右美沙芬(0·324mmol·L-1),其右美沙芬的代谢率明显高于对照组(P<0·01);③奥扎格雷钠与CYP2D6特异性抑制剂西米替丁可明显降低右美沙芬的代谢率(P<0·01),并且奥扎格雷钠组其右美沙芬的代谢率低于西米替丁组(P<0·05);④奥扎格雷钠IC50=26·5μmol·L-1,西咪替丁IC50=86·3μmol·L-1,奥扎格雷钠诱导组肝微粒体Km=0·67mmol·L-1,Vmax=2·13nmol·min-1·g-1protein;对照组肝微粒体Km=0·29mmol·L-1,Vmax=0·91nmol·min-1·g-1protein;⑤体内和体外相应实验数据具有很好的相关性(r=0·9811)。结论奥扎格雷钠可诱导CYP2D6酶的活性。

北京地区成人全血及血浆微量元素水平调查

目的 研究北京地区成人微量元素营养状况,探讨北京地区正常成人微量元素正常参考区间.方法 采集437名首都医科大学在校学生的血浆及全血标本,其中男233名,女204名,用原子吸收分光光度法检测铜（Cu）、锌（Zn）、钙（Ca）、镁（Mg）、铁（Fe）五种微量元素含量.结果 实验结果正常成人全血微量元素参考区间男、女间的差异有统计学意义.不同性别正常成人血浆标本微量元素Ca,Mg的参考区间差异无统计学意义,Cu,Zn,Fe男女间差异有统计学意义.而现有厂家提供的全血、血清参考区间未分男女,且与本次实验测定结果有一定差异.结论 微量元素异常可导致成人诱发多种临床常见疾病,因此应尽快建立不同地区成人全血、血浆或血清微量元素的参考区间.

保存条件对糖化血红蛋白测定值影响的探讨

目的了解全血标本的储存温度、相应温度下的储存时间对糖化血红蛋白测定结果的影响,探讨高效液相色谱(HPLC)技术测定HbA1c标本的最佳保存方法。方法随机选取2组共30个研究对象,抽取的标本分为6个模式进行储存,在设定的时间点用HPLC技术测定HbA1c值,测定结果用统计学软件SPSS 18.0进行分析。结果样品测定值随时间延长而降低。结论 2周内,同样的保存时间下,4℃的保存效果比-20℃好。

细胞色素P450 CYP4A的组织和细胞表达特异性

目的确定细胞色素P450 CYP4A在组织和细胞水平表达是否具有特异性。方法采用Western印迹法分析细胞色素P450 CYP4A蛋白在培养的牛肺动脉内皮细胞、平滑肌细胞及牛肾动脉内皮细胞的表达;采用原位杂交法检测细胞色素P450 CYP4A mRNA在大鼠肺支气管内皮和血管内皮细胞的表达;以14C标记的花生四烯酸(AA)作为反应底物,用荧光高效液相色谱法(HPLC)通过检测牛肺动脉内皮细胞催化外源性AA生成20-羟基廿碳四烯酸(20-HETE)的反应,确定肺动脉内皮细胞是否存在细胞色素P450 CYP4A;将肺动脉内皮细胞破碎并用乙酸乙酯萃取,用荧光物质标记萃取物,用荧光HPLC检测内源性20-HETE,从代谢产物水平确定细胞色素P450 CYP4A的功能蛋白质表达。结果①Western印迹法分析结果表明,细胞色素P450 CYP4A蛋白在牛肺动脉内皮细胞和平滑肌细胞中均有表达,在肺动脉内皮细胞中的表达明显高于平滑肌细胞(积分吸光度值分别为10182±279,5249±167);在牛肾动脉内皮细胞中也有表达,但明显低于肺动脉内皮细胞的表达(积分吸光度值分别为12173±171,17863±207)。②原位杂交结果显示,细胞色素P450 CYP4A mRNA可在大鼠肺支气管内皮细胞和大鼠肺血管内皮均有表达。③用HPLC在牛肺动脉内皮细胞中检测到20-HETE,表明细胞色素P450 CYP4A在肺动脉内皮细胞存在。结论细胞色素P450 CYP4A有其特定的组织和细胞分布,在牛和大鼠肺脏动脉内皮细胞有高表达。

反式脂肪酸对肥胖大鼠氧化还原态的影响

目的:利用高脂饲料建立大鼠肥胖模型,通过对添加不同剂量反式脂肪酸(TFAs)喂养的大鼠脑及血液氧化损伤相关指标比较,探讨TFAs对肥胖大鼠脑和血液抗氧化系统的影响机制。方法:健康雄性SD大鼠40只,随机分为4组:对照组(CON组)、喂饲基础饲料、饮食诱导的肥胖组(DIO组),喂饲高脂饲料,1%及8%反式脂肪酸组(1%TFAs、8%TFAs组)喂饲添加1%TFAs及8%TFAs的高脂饲料。8周后,心脏取血后,处死动物,留取脑组织及血液以检测相关指标。结果:不同饲料喂养8周后,8%TFAs组大鼠脑丙二醛(MDA)含量明显高于CON组、DIO组与1%TFAs组(P<0.01);CON组、DIO组、1%TFAs及8%TFAs组大鼠脑还原型谷胱甘肽(GSH)含量依次显著下降,差异有统计学意义(P<0.01);1%TFAs组大鼠血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活力低于DIO组、CON组(P<0.05);与CON组相比,8%TFAs组大鼠脑核因子E2相关因子2(Nrf2)mRNA表达水平显著上调(P<0.01);8%TFAs组血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白表达水平显著高于CON组(P<0.05)、DIO组(P<0.05)及1%TFAs组(P<0.01)。结论:高含量TFAs摄入可引起肥胖大鼠血液和脑发生氧化损伤,上调氧化损伤相关基因和蛋白表达。

大豆卵磷脂联合大豆异黄酮改善大鼠学习记忆损伤及脑血管保护作用

目的观察大豆卵磷脂(soy lecithin,SL)和大豆异黄酮(soy isoflavone,SIF)改善大鼠学习记忆损伤及脑血管保护的联合作用,探讨二者的最佳联合剂量,为明确大豆活性物质的神经保护作用及其联合效应提供科学依据。方法本研究使用SPF级的成年雄性Wistar大鼠,采用两因素三水平正交实验设计分为对照组、β淀粉样肽(β-amyloid,Aβ)模型组和9个不同的SL+SIF剂量组合干预组。应用水迷宫、脑血管HE染色、酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)以及酶法试剂盒等方法,对大鼠学习记忆能力、脑血管病理损伤、体内氧化损伤水平以及氧化还原平衡体系等相关指标进行检测。结果Aβ模型组大鼠逃避潜伏期显著延长(P<0.05),脑血管组织形态异常改变明显,并且伴有体内丙二醛(malondialdehyde,MDA)和3-硝基酪氨酸(3-nitrotyrosine,3-NT)显著上升(P<0.05),谷胱甘肽与氧化型谷胱甘肽的比值(ratio of glutathione/oxidized glutathione,GSH/GSSG)显著下降(P<0.05)。相反,SL+SIF各干预组与Aβ模型组比较,二者对上述改变均有不同程度的保护作用。SL(40 mg·kg^(-1)·d^(-1))+SIF(50 mg·kg^(-1)·d^(-1))是改善大鼠学习记忆、保护脑血管以及调节体内氧化还原平衡体系的最佳联合剂量。结论SL+SIF可以显著改善Aβ介导的大鼠学习记忆损伤,其神经保护作用可能与二者发挥抗氧化活性拮抗Aβ介导的脑血管损伤有关。二者的神经保护作用具有协同效应,SL(40 mg·kg^(-1)·d^(-1))+SIF(50 mg·kg^(-1)·d^(-1))是大鼠神经保护的最佳联合剂量。

27-羟基胆固醇对神经细胞和星形胶质细胞溶酶体胆固醇转运相关因子表达的影响

目的探讨27-羟基胆固醇(27-hydroxycholesterol,27-OHC)在神经细胞(SH-SY5Y)和星形胶质细胞(C6)共培养体系中对细胞溶酶体胆固醇转运相关因子表达的影响。方法采用Trans-well小室进行SH-SY5Y细胞和C6细胞共培养,使用不同剂量的27-OHC对共培养体系下细胞进行处理,分为对照组(DMEM组)、低剂量组(27-OHC 5μmol/L)、中剂量组(27-OHC 10μmol/L)及高剂量组(27-OHC 20μmol/L)。采用COD-PAP法检测两种细胞中的总胆固醇浓度;采用Real-time PCR和Western blotting检测两种细胞溶酶体内特异性胆固醇转运蛋白质——尼曼匹克蛋白质1(Niemann-Pick C protein 1,NPC1)、NPC2的基因表达水平和蛋白质表达水平。结果随着27-OHC处理浓度的升高,SH-SY5Y细胞内胆固醇浓度逐渐上升(P <0. 05),C6细胞内胆固醇浓度逐渐降低(P <0. 05); SH-SY5Y细胞溶酶体内NPC基因及蛋白质表达水平显著下调(P <0. 05); C6细胞内溶酶体NPC基因及蛋白质表达水平显著上调(P <0. 05)。结论 27-OHC可引起神经细胞及星形胶质细胞溶酶体内胆固醇转运障碍,使胆固醇在神经细胞溶酶体内蓄积。

儿童肠道菌群与食物过敏关系的研究进展

食物过敏(food allergy,FA)在儿童中的发生率逐年升高,严重影响其生活质量,已经成为全球面临的公共卫生问题之一。近年来,人们发现FA儿童的肠道菌群组成与健康儿童有显著差异。深入研究发现,肠道菌群可通过调节树突状细胞、辅助性T细胞、调节性T细胞、肥大细胞和粒细胞等免疫细胞维持免疫平衡,也可通过多种方式增强肠道屏障功能,抑制FA的发生。在已有研究基础上,益生菌和益生元在治疗儿童FA方面也得到了一定应用,但目前的应用效果并不明确。本文以婴幼儿FA在全球范围内患者规模日益扩大为背景,综述了肠道菌群影响FA的部分机制,总结了近年部分益生菌和益生元在治疗和预防婴幼儿FA方面的应用,并为肠道菌群在FA发生和发展中的作用机制研究和益生菌及其相关代谢产物在儿童FA治疗和预防中的应用提出了新思路,对促进婴幼儿FA治疗方法和策略的研究有重要意义。

多索茶碱对大鼠肝CYP2D6酶的影响

目的:通过体内、体外实验观察多索茶碱对大鼠肝CYP2D6酶的影响。方法:取16只大鼠随机均分为对照Ⅰ组和实验组,分别灌胃给予生理盐水1mL和多索茶碱50mg·kg-1·d-1,连续1周,第8天时均灌胃给予探针药物右美沙芬(6mg·kg-1),收集8h尿液后处死大鼠,测定大鼠尿样及肝微粒体中右美沙芬浓度并计算其代谢率;实验组肝微粒体再分为对照Ⅱ组、多索茶碱组和CYP2D6特异性抑制剂西咪替丁组,分别加入相应药物孵育后测定并计算右美沙芬的代谢率;将体内、体外实验得到的右美沙芬的代谢率进行相关性分析。结果:以右美沙芬的代谢率为指标,体内实验中2组比较无明显差别(P>0.05);体外试验中,与对照Ⅱ组比较,多索茶碱组未见明显降低(P>0.05),西咪替丁组明显降低(P<0.01);体内和体外实验数据具有很好的相关性(r=0.9537)。结论:多索茶碱对大鼠肝CYP2D6酶无诱导或抑制作用。