蒽醌修饰物KA-4s抑制SKOV3/DDP细胞增殖并诱导铁死亡

目的:探讨蒽醌修饰物KA-4s在体外对人顺铂耐药卵巢癌SKOV3/DDP细胞增殖的影响和诱导细胞铁死亡的机制。方法:将SKOV3/DDP细胞分为对照组和不同浓度(2μmol/L、5μmol/L和7μmol/L)的蒽醌修饰物KA-4s组。采用MTT法检测单药KA-4s和顺铂(DDP)对SKOV3/DDP细胞活力的影响,划痕实验检测细胞的迁移能力,线粒体绿色荧光探针(Mito-Tracker Green)检测线粒体形态改变,透射电镜观察线粒体超微结构。以铁死亡诱导剂RSL3为阳性对照组,用DCFA-DA荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)水平,比色法检测细胞内总铁蛋白含量,western blotting检测铁死亡相关蛋白GPX4、FSP1的表达情况。结果:KA-4s和顺铂作用48 h后,卵巢癌SKOV3/DDP细胞增殖均明显受到抑制,相比顺铂,KA-4s的抑制作用更强(P<0.001),并能抑制细胞迁移。经KA-4s处理后线粒体受损,线粒体结构改变,膜密度增大,嵴减少甚至消失。与空白对照组相比,阳性RSL3组和KA-4s组SKOV3/DDP细胞内ROS水平升高(均P<0.001),5μmol/L KA-4s组总铁离子含量显著升高(P<0.001),卵巢癌SKOV3/DDP细胞中GPX4、FSP1蛋白的表达均降低(P<0.01),但正常卵巢IOSE80细胞中GPX4表达均无改变。结论:KA-4s能抑制SKOV3/DDP细胞增殖、迁移并诱导细胞铁死亡。

刺激响应型MSNs负载蒽醌修饰物4S对三阴性乳腺癌的体外研究

目的:探讨刺激响应型介孔二氧化硅纳米粒(MSNs-SS-HA)作为药物递送系统是否能提高蒽醌修饰物4S对三阴性乳腺癌(TNBC)细胞的靶向性、生物利用度,并降低对正常细胞的毒性。方法:后修饰法制备功能化的纳米粒MSNs-SS-HA,利用透射电镜、马尔文粒径仪、傅里叶红外光谱和元素分析等对纳米粒进行表征。体外透析实验检测MSNs@4S和MSNs-SSHA@4S在不同浓度的谷胱甘肽缓冲溶液中的释放行为。MTT试验测定游离4S和载药纳米粒对TNBC细胞MDA-MB231、乳腺癌细胞MCF-7和乳腺正常细胞MCF-10A的抑制活性。激光共聚焦显微镜观察蒽醌修饰物4S和载药纳米粒在不同细胞中的摄取情况。结果:成功制备功能化的载药纳米粒MSNs-SS-HA@4S,其载药量和包封率分别为(17.43±1.2)%和(90.56±1.1)%。载药纳米粒MSNs-SS-HA@4S具有还原响应特性,同时具有缓控释药作用。在相同浓度下,MSNs-SS-HA@4S对MDA-MB231细胞的毒性高于MCF-10A细胞,而对MCF-7细胞的抗肿瘤活性较弱(P<0.05)。体外细胞摄取实验表明,MSNs-SS-HA@4S能够靶向CD44受体高表达的TNBC细胞MDA-MB231,可能通过CD44受体介导的内吞作用进入细胞,揭示了MSNs-SS-HA@4S具有肿瘤靶向治疗潜能。结论:MSNs-SS-HA@4S提高了蒽醌修饰物4S增效减毒的功效,为TNBC的靶向治疗提供新思路。

氧化苦参碱诱导卵巢癌SKOV3细胞凋亡作用的实验研究

目的 探讨氧化苦参碱对卵巢癌细胞SKOV3诱导凋亡作用。方法 采用MTT法、DNA凝胶电泳、生长曲线、荧光染色等实验技术研究氧化苦参碱在体外对SKOV3细胞的增殖抑制和诱导细胞凋亡的作用。结果 氧化苦参碱对SKOV3细胞生长有明显的抑制作用 ,且这种抑制作用呈浓度依赖性。细胞经 0 189mmol·L-1和 0 3 78mmol·L-1的氧化苦参碱作用 48h后 ,即呈现典型的细胞凋亡形态学变化和DNA片段的梯形条带。

板蓝根高级不饱和脂肪酸对耐药肝癌细胞株BEL-7404/ADM逆转作用实验

目的 :板蓝根高级不饱和脂肪酸对肝癌耐药细胞株BEL 740 4/ADM耐药逆转作用及机制研究。方法 :MTT法观察药物对细胞的生长抑制作用 ;免疫组化法检测细胞P 糖蛋白 (P gp)和多药耐药相关蛋白 (MRP)的表达 ;采用高效液相色谱法(HPLC)测定细胞内ADM的浓度。结果 :耐药肝癌细胞株BEL 740 4/ADM对多种化疗药物产生多药耐药性 ,耐药细胞P gp和MRP的阳性率显著高于亲本细胞 (P <0 .0 1) ;板蓝根高级不饱和脂肪酸在非细胞毒剂量时与ADM合用后能逆转BEL 740 4/ADM对ADM的耐药性 ;ADM与板蓝根高级不饱和脂肪酸合用时 ,其细胞内ADM的含量较单独使用明显增高。结论 :肝癌细胞株BEL 740 4/ADM对多种化疗药物具有多药耐药性 ,其多药耐药性与P gp和MRP过量表达有关 ;板蓝根高级不饱和脂肪酸在非细胞毒剂量时能逆转BEL 740 4/ADM对ADM的耐药性 ,其逆转作用可能与降低P gp药物外排功能。

银杏叶多糖在肿瘤放射、化学治疗中的增敏作用研究

目的 :探索银杏叶多糖对鼻咽癌细胞、宫颈癌细胞放射和化学治疗敏感性的影响。方法 :采用 MTT比色法和台盼蓝拒染法 ,观察鼻咽癌细胞 CNE- 2、宫颈癌 Hela细胞株经过药物作用后其放射敏感性的变化以及银杏叶多糖与多种抗癌药物合用后对鼻咽癌细胞、宫颈癌细胞的生长抑制的作用。结果 :银杏叶多糖与 CNE- 2细胞、Hela细胞混合培养后进行照射 ,其作用效果与药物浓度存在良好的相关性。同时银杏叶多糖与环磷酰胺、卡铂、顺铂、5 - Fu、盐酸阿霉素等药物合用 ,其抑制鼻咽癌细胞、宫颈癌细胞的生长能力强于各药物单独使用的抑制率。结论 :银杏叶多糖可增加化疗药物对鼻咽癌细胞、宫颈癌细胞的治疗敏感性 ,是一种有希望的放射增敏剂。

阿霉素联合Mcl-1抑制剂Marinopyrrole A对肝癌细胞耐药和凋亡蛋白表达的影响

目的:探究阿霉素(ADM)与髓样细胞白血病-1(Mcl-1)选择性抑制剂Marinopyrrole A联合使用抗肝癌活性及相关分子机制。方法:以肝癌Huh7细胞和HepG2细胞为研究对象,采用MTT法检测ADM、Marinopyrrole A及两者联用对肝癌细胞的抑制作用;光学显微镜下观察细胞形态学变化;流式细胞仪检测不同处理组细胞的凋亡率,蛋白质免疫印迹(western blotting)法检测细胞多药耐药蛋白1(MDR1)、穹窿主体蛋白(MVP)、Mcl-1、剪切型多聚ADP核糖聚合酶(Cleaved-PARP)/PARP、Bcl-2、Bax等耐药和凋亡相关蛋白的表达。结果:ADM对HepG2和Huh7细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为(3.557±0.640)μmol/L、(1.178±0.127)μmol/L,HepG2细胞对ADM的敏感性低于Huh7细胞(P<0.01)。HepG2细胞的MDR1、MVP和Mcl-1蛋白表达水平均高于Huh7细胞(均P<0.01);与control组和单独ADM处理组比较,Marinopyrrole A联合ADM可使HepG2细胞密度减少,细胞皱缩变小,细胞凋亡率显著升高,MDR1、MVP、Mcl-1蛋白表达下调,Bcl-2/Bax比值减小,Cleaved-PARP/PARP比值增加(均P<0.05)。结论:Mcl-1抑制剂Marinopyrrole A可增加肝癌细胞对ADM的敏感性,可能与下调耐药相关蛋白MDR1、MVP和抗凋亡蛋白Mcl-1的表达有关。

板蓝根高级不饱和脂肪组酸体内抗肿瘤实验研究

目的观察板蓝根高级不饱和脂肪组酸体内抗肿瘤作用。方法采用S180肉瘤、H22肝癌作为实验瘤株,对S180肉瘤进行抑瘤率研究,对H22腹水型肝癌进行肿瘤生存期试验。结果板蓝根高级不饱和脂肪组酸对小鼠S180肉瘤抑制率略小于环磷酰胺,能延长荷瘤小鼠的生存期,与对照组相比有显著性差异(P<0.05)。

几种天然药物提取物抗氧化活性和对肿瘤细胞杀伤作用的比较研究

目的 :研究天然药物提取物大黄素、欧芹酚、花椒毒素、次黄芩素的抗氧化活性及对肿瘤细胞杀伤作用。方法 :应用过硫酸铵 /N ,N ,N’N’ -四甲基乙二胺体系测定其抗氧化活性 ,用MTT法测定几种抗氧化剂对肝癌细胞BEL - 74 0 4和卵巢癌细胞SKOV3的生长抑制作用。结果 :大黄素、欧芹酚、花椒毒素、次黄芩素等物质的抗氧化能力及对肿瘤细胞杀伤能力呈现良好的量效关系。在相同浓度下 ,次黄芩素的抗氧化能力最强 ,欧芹酚、花椒毒素次之 ,大黄素最弱。对于肿瘤细胞 ,次黄芩素的半数抑制率最高 ,花椒毒素、欧芹酚次之 ,大黄素最低。结论 :大黄素、欧芹酚、花椒毒素、次黄芩素具有一定的抗氧化活性 ,其抗氧化活性与对肿瘤细胞的杀伤力具有一致性。

氧化苦参碱对卵巢癌HO8910细胞凋亡影响的血清药理学研究

目的探讨氧化苦参碱体内生物转化及含氧化苦参碱血清对人卵巢癌细胞HO8910的诱导凋亡作用机制。方法采用中药血清药理学实验方法,获得大鼠含氧化苦参碱血清,通过HPLC测定含药血清中氧化苦参碱的生物转化情况,通过MTT法、荧光显微镜、DNA琼脂糖凝胶电泳测定含药血清对人卵巢癌HO8910细胞的诱导凋亡作用,流式细胞术检测含药血清作用后细胞周期时相分布。结果给药大鼠血清中出现保留时间为10.8m in的氧化苦参碱峰图,且血清提取液中氧化苦参碱的浓度为40μg/mL,含氧化苦参碱血清能抑制HO8910细胞生长,经含药血清处理的细胞48h出现典型的细胞凋亡形态学变化和DNA片段的梯形条带,HO8910细胞被阻滞在G0-G1期。结论氧化苦参碱经肌注体内生物转化后,血清中的主要代谢成分仍保持不变,含氧化苦参碱血清也具有诱导HO8910细胞凋亡的作用。

黄芩黄酮A对人肝癌细胞7402的抑制能力及体外增效作用

目的 :测定黄芩黄酮 A抗人肝癌细胞 BEL - 740 2体外活性及对常用抗癌药物的体外增效作用。方法 :以 MTT法测定黄芩黄酮 A的细胞毒作用及与多种抗癌药物合用后对肝癌细胞 BEL - 740 2的生长抑制作用 ,以软琼脂集落形成实验观察药物的诱导分化作用 ,以 PCR- EL ISA试剂盒测定细胞的端粒酶活性。结果 :黄芩黄酮 A能抑制肝癌细胞 BEL - 740 2的增殖 ,其IC5 0 为 180μg/ ml;黄芩黄酮 A与顺铂 ( Cis)、阿霉素 ( Dox)、氟尿嘧啶 ( 5 - FU )合用具有相加或协同作用 ,且具有诱导分化作用 ,可降低端粒酶活性的表达。结论 :黄芩黄酮 A具有体外抗肿瘤活性 ,对 Cis、Dox、5 -

板蓝根高级不饱和脂肪组酸的体外抗人肝癌BEL-7402细胞活性

目的 :研究板蓝根高级不饱和脂肪组酸体外抗人肝癌BEL 74 0 2细胞的活性。方法 :MTT法测定细胞毒作用 ,集落形成实验观察药物对肝癌细胞增殖的抑制作用 ,PCR ELISA试剂盒测定细胞的端粒酶活性。结果 :板蓝根高级不饱和脂肪组酸能抑制BEL 74 0 2细胞的增殖 ,其IC50 为 0 6mg·mL-1,有促使肿瘤细胞向正常细胞逆转的趋势 ,可降低端粒酶活性的表达。结论

羧乙基锗倍半氧化物对肝癌的化学预防作用研究

羧乙基锗倍半氧化物 (Carboxyethylgermanium简称Ge - 132 )对体外肝癌细胞无明显直接杀伤作用 ,但能降低肝癌细胞在软琼脂上的集落形成率。在AFB1致大鼠肝癌体内短期实验模型中发现 ,Ge - 132具有抵抗黄曲霉素 (AflatoxinB1简称AFB1)降低超氧化物歧化酶 (SuperoxideDismutase简称SOD)活力的作用 ,Ge -132的摄入时间、剂量可影响SOD活力大小。提示Ge -

大、小鼠摄入AFB_1和羧乙基锗倍半氧化物体内超氧化物歧化酶变化研究

本实验通过观察摄入ＡＦＢ１及Ｇｅ－１３２后Ｗｉｓｔａｒ大鼠和昆明小鼠体内ＳＯＤ活力的变化，进一步了解ＡＦＢ１代谢途径和Ｇｅ－１３２与自由基的关系。实验表明，摄入ＡＦＢ１的ＳＯＤ活力受到抑制，而摄入Ｇｅ－１３２后ＳＯＤ活力得到提高，且一次性摄入ＡＦＢ１后ＳＯＤ活力最终得到恢复，其中大鼠对ＡＦＢ１敏感性相对较大。

黄曲霉毒素B_1与超氧化物歧化酶的关系

用羟胺法测定 AFB_1染毒后小鼠体内红细胞及肝组织中 SOD 活力的变化,探讨AFB_1致癌的可能机制。结果表明,AFB_1对 SOD 活力的抑制有一时间峰值,染毒6h 后对SOD 活力影响最大,SOD 活力下降比对照组有明显的差异(P<0. 05) 。提示 AFB_1毒性可能与自由基有关。

尿中单羟酚类物质的测定对妇科肿瘤诊断的临床意义

目的建立一种妇科肿瘤标志物的测定方法。方法测定正常女性、子宫肌瘤、宫颈癌、卵巢癌患者尿中单羟酚类物质的含量。结果各组患者尿样中MHP含量随肿瘤的发生，肿瘤细胞的分化程度而升高。结论预示单羟酚类物质的定量测定在妇科肿瘤的早期诊断上有一定的意义。

反相和低压干柱柱色谱组合快速分离纯化氧化苦参碱工艺研究

目的从中药苦参中快速分离纯化氧化苦参碱。方法采用反相C18柱色谱与正相低压干柱柱色谱从苦参的醇提物中分离纯化氧化苦参碱。结果经优化操作条件的反相柱色谱可去除非极性和极性较小的成分,采用低压干柱柱色谱可快速、有效将氧化苦参碱与其他生物碱成分、极性化合物分离,获得的氧化苦参碱与标准品比较结构、性质一致。结论根据正相色谱和反相柱色谱分离特点,建立了分离纯化氧化苦参碱的方法。

含氧化苦参碱血清的制备与抗肿瘤作用关系研究

目的研究不同给药方式,不同采血时间获得的含氧化苦参碱血清对卵巢癌细胞HO8910的生长抑制作用,探讨含药血清的制备方法。方法选择SD大鼠,采用肌注、灌胃、腹腔注射等形式给予氧化苦参碱药物,分别在不同时间取血,通过TLC法判断血清的化学成分,MTT法确定这些含药血清对卵巢癌细胞HO8910的生长抑制作用。荧光显微镜观察细胞的形态学的改变。结果不同的给药方式获得的含药血清均含有氧化苦参碱,每天肌注给药两次,连续给药3d,末次给药后1h采血获得的含药血清对卵巢癌细胞的抑制作用最强,荧光显微镜下观察到典型的细胞凋亡形态学变化。结论经代谢后含氧化苦参碱血清仍具有抑制肿瘤细胞生长的作用。其抑制作用与给药形式、采血时间有明显的关系。

羧乙基锗倍半氧化物在黄曲霉毒素B_1致大鼠肝癌过程中的抗氧化作用研究

:目的与方法 :本文采用AFB1致大鼠肝癌体内短期实验模型 ,测定血清与肝组织的SOD活力 ,进一步研究摄入Ge - 132的剂量、时间与抗氧化作用的关系。结果 :发现Ge - 132具有抵抗AFB1降低SOD活力的作用 ,Ge - 132的摄入时间、剂量可影响SOD活力大小。结论 :提示Ge - 132的抗氧化作用与抑癌作用有关 。

正常人尿中单羟酚类物质含量的测定研究

目的 :确定正常人尿中单羟酚衍生物 (MHP)含量范围。方法 :采用可见分光光度法 ,定量测定 18～ 6 0岁各类正常人及 HBs Ag阳性携带尿液中单羟酚类物质。结果 :MHP含量与年龄、性别有一定的关系 ,194例健康人尿中 MHP含量为正态分布 ,第 95百分位数的 OD值上限为 0 .3,对应酪氨酸含量是 2 .46 m mol/ L。而 HBs Ag阳性携带者尿液 MHP与正常人无显著性差异。结论 :此实验结果在运用 MHP进行肿瘤筛查时 。