固相萃取-液相色谱-串联质谱测定人体尿液中有机磷酸酯及其二酯和羟基代谢物

尿液中的有机磷酸酯二酯代谢物(di-OPEs)是现阶段识别和量化人体暴露于有机磷酸酯(OPEs)的首选生物标志物.目前鲜有研究同时对OPEs及其二酯代谢物、羟基代谢物(OH-OPEs)进行分析测定,且关注的目标化合物种类较少.本研究对尿液前处理过程中常用的净化浓缩方法进行了优化,建立了人体尿液样品中14种OPEs、7种di-OPEs和3种OH-OPEs的高效液相色谱-串联质谱分析方法(HPLC-MS/MS).取2 mL样品经β-葡萄糖醛酸酶/芳基硫酸酯酶酶解6 h后,加入2%甲酸/水调节pH,然后用STRATA-X-AW固相萃取柱进行净化,收集固相萃取过程中的2%甲酸/甲醇淋洗液和2%氨水/甲醇洗脱液氮吹浓缩后分别进行OPEs、OH-OPEs和di-OPEs的HPLC-MS/MS测定,OPEs和OHOPEs的质谱检测选用电喷雾正离子模式电离,di-OPEs选用负离子模式,在多重反应监测模式(MRM)下测定.尽管尿液样品中多数目标物质在检测时存在基质效应(均值24%-159%),但通过合适的同位素内标进行校正,可以抵消部分基质影响.在优化的条件下,24种目标物质在0.05-40 ng·mL^(−1)范围内线性关系良好(r>0.99),方法检出限(MDL)0.0008-0.32 ng·mL^(−1),加标回收率60%-131%,RSD为4%-22%.采用本方法对实际人体尿液样本进行分析,7种di-OPEs和3种OH-OPEs的总含量为0.07-7.04 ng·mL^(−1),中位含量为0.54 ng·mL^(−1),14种OPEs的总含量为<MDL-0.68 ng·mL^(−1),中位含量为0.05 ng·mL^(−1).两种具有直接工业生产应用的di-OPEs(磷酸二苯基酯DPHP和磷酸二丁酯DBP)检出率高于60%,其来源值得追溯.一种新型有机磷酸酯阻燃剂3-异丙基苯基二苯基磷酸酯(3IPPDPP)的检出率为66.7%,应该引起关注.

认知诊断模型中题目拟合评估的研究

有效应用认知诊断模型(cognitive diagnosis model,CDM)的一个关键步骤是检查模型和测验题目是否拟合。尽管已有研究将IRT中的题目拟合检验方法应用于CDM中,然而这些方法在CDM中的表现仍缺乏系统的比较研究。本研究通过模拟实验比较了χ2,G2,S-χ2,z(r),z(l)和Stone-Q1的一类错误率和统计检验力。实验结果显示,综合一类错误率和统计检验力而言,当用ACDM作为生成模型时,z(r)和z(l)的效果最优;当生成模型是DINA或DINO时,在高质量测验中,z(r)的表现最好,而在低质量测验中,χ2和G2的表现更好。最后通过一个实测数据分析,进一步检验了题目拟合检验方法的实证应用效果。

医学生临床实习中存在的问题与对策

医学临床实习是高等医学教育的重要组成部分,是医学生在完成临床理论学习后进入临床实践的重要时期。该文针对现在临床实习中存在的一些问题,进行分析研究,并提出针对性的解决方案,以期达到改进临床实习现状和提高实习质量的目的。

宫颈癌的新辅助化疗

1概述宫颈癌作为最常见的妇科恶性肿瘤，严重威胁广大妇女的健康。传统的治疗方式为手术或放疗，放疗适用于各种期别的宫颈癌，但器官损伤却难以逆转；手术主要用于治疗早期患者。近年来，随着新的有效的化疗药物不断问世和医学模式的转换，化疗在宫颈癌治疗中的地位日益得到重视，宫颈癌的治疗已经逐渐转变为手术、放疗、化疗的综合治疗。化疗作为重要的辅助治疗方式，其应用主要有以下几种方式：

p53基因第72位密码子多态性与宫颈癌及HPV-16、18E6之间关系的研究

目的探讨宫颈癌及其癌前病变中p53基因第72位密码子多态性的表达及其与HPV16、18E6表达之间的关系，以了解p58基因第72位密码子多态性是否可以作为预测宫颈癌发生的一项高危因子。方法以PCR法检测81例宫颈鳞癌（高分化13例、中分化24例、低分化44例；Ⅰb期24例、Ⅱa期15例、Ⅱb期37例、Ⅲa期5例）、18例宫颈腺癌、88例宫颈上皮内瘤样病变（CINⅡ30例、CINⅢ58例）及60例正常宫颈组织中p53基因第72位密码子多态性及HPV16、18E6的表达。结果p53Arg纯合子、p53Arg／Pro杂合子及p53Pro纯合子在宫颈鳞癌、腺癌和CIN（Ⅱ～Ⅲ）中分别占58．02％、30．86％、11．12％；55．55％、27．78％、16．67％I59．09％、21．59％、19．32％。各组中p53Arg纯合子明显高于p53Arg／Pro杂合子及p53Pro纯合子，且差异有统计学意义（P〈0．05IP〈0．01）。正常宫颈组织中p53Arg纯合子、p53Arg／Pro杂合子及p53Pro纯合子分别为23．33％、40．OO％、36．67％，三者间无统计学意义（P〉0．05）。宫颈癌组（鳞癌及腺癌）、CIN（Ⅰ～Ⅱ）组中p53Arg纯合子均高于正常对照组中p53Arg纯合子，且差异有统计学意义（P〈0．05）；宫颈鳞癌中HPVl6、18E6（＋）亚组中p53Arg纯合子显著高于HPV16、18E6（-）亚组及HPVl6、18E6（＋）正常对照组亚组（P〈0．05，P〈0．01）。各组中p53Arg纯合子均高于p53Pro纯合子（P〈0．05）；p53Arg纯合子及等位基因均未随宫颈癌临床分期及分化程度而变化，与宫颈癌前病变程度亦无关系。结论p53Arg纯合子可作为预测宫颈癌及其癌前病变的一项高危因子，与高危型HPVE6同时检测可提示宫颈病变的发展趋势；p53Arg纯合子与宫颈癌临床分期及分化程度无明显相关性。

停经3^+月,不规则阴道流血伴下腹隐痛1月,腹痛加重1天

1病例摘要患者，47岁，因停经3＋月，不规则阴道流血伴下腹隐痛1月，腹痛加重1天，于2016年9月6日入院。患者平素月经不甚规律，月经周期30～60天，

金属基质蛋白酶及其抑制物与子宫内膜癌

细胞外基质 (ECM)降解是肿瘤侵袭转移的重要信号和途径。金属基质蛋白酶 (MMPs)是溶解基质的一组重要酶类。金属基质蛋白酶组织抑制剂 (TIMPs)是MMPs的特异性抑制物 ,两者的表达 ,代谢平衡与子宫内膜癌的浸润转移 ,生理病理和临床预后有密切关系。MMPs-TIMPs调节失衡 ,ECM降解以及基底膜消失 ,均可促进子宫内膜癌的发生浸润转移。MMPs,TIMPs表达量的检测可作为早期诊断 ,监测妇科恶性肿瘤的理想标志物 ,并可针对其平衡采取相应的肿瘤治疗措施。

32卷8期疑难病案

患者,15岁,藏族,未婚无性生活史。因痛经进行性加重3年,腹痛3个月于2016年3月7日到我院就诊。患者12岁月经初潮,周期规律,为30天,经期4天。自初潮起即出现进行性加重的经期下腹痛,经量少,经期后腹痛缓解。3个月前开始出现下腹痛,月经结束后腹痛仍持续,程度剧烈,且在月经期加重。

交界性卵巢肿瘤再分期手术11例临床分析

目的:探讨交界性卵巢肿瘤再分期手术的临床价值。方法:2006年1月至2010年12月在外院初次手术未全面分期而在我院接受再分期手术的交界性卵巢肿瘤患者共11例,平均年龄34.1岁,其中ⅠA期9例,ⅠB期2例;组织学类型:浆液性交界性肿瘤7例,黏液性交界性肿瘤3例,子宫内膜样交界性肿瘤1例。结果:经过再分期手术,4例患者分期提高,包括1例黏液性交界性卵巢肿瘤,1例子宫内膜样交界性卵巢肿瘤和2例浆液性交界性卵巢肿瘤。初次手术残留肿瘤的部位为对侧卵巢1例,腹腔冲洗液中3例发现肿瘤细胞(其中1例初次手术为腹腔镜术中肿瘤破裂)。再分期术后随访至今,共随访18～70个月,平均随访时间42.6个月,分期未改变的7例患者和分期提高的4例患者均无复发。结论:对于交界性卵巢肿瘤,是否再分期手术需结合患者初次手术探查的彻底性、肿瘤的组织学亚型和患者的观点综合考虑,再分期手术对于浆液性肿瘤患者可能有益。

42例卵巢恶性生殖细胞肿瘤临床特征及预后分析

目的:探讨卵巢恶性生殖细胞肿瘤的临床特征与预后的关系。方法:收集我院2006年8月至2012年2月收治的42例卵巢恶性生殖细胞肿瘤的临床资料,分析其肿瘤类型、分期、治疗方案等预后相关因素,研究其临床特征与不良预后的关系。结果:42例卵巢恶性生殖细胞肿瘤包括混合性生殖细胞肿瘤16例(38.1%)、未成熟畸胎瘤12例(28.6%)、无性细胞瘤6例(14.3%),卵黄囊瘤4例(9.5%)、绒毛膜癌1例(2.4%)及胚胎癌1例(2.4%)等。42例患者全部进行手术治疗,其中30例在初次手术中保留了生育功能,34例在术后给予BEP方案(博来霉素+依托泊苷+顺铂)或BVP方案(博来霉素+长春新碱+顺铂)化疗。2年生存率97.5%(39/40),死亡1例(Ⅳ期混合性生殖细胞肿瘤),复发率37.5%(15/40),混合性生殖细胞肿瘤复发占66.7%(10/15);5年生存率88.2%(15/17),死亡2例(均为恶性混合性生殖细胞肿瘤)。不同病理分期、肿瘤直径、肿瘤类型和手术方式的5年生存率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:保留生育功能手术及规范化的BEP或BVP方案化疗,5年总体生存率较高,但混合性生殖细胞肿瘤预后相对较差。卵巢恶性生殖细胞肿瘤的病理分期、肿瘤直径及肿瘤类型与生存率的关系还需进一步研究。

上皮性卵巢癌AIB1蛋白表达水平及与雌、孕激素受体表达的相关性研究

目的检测AIB1蛋白在上皮性卵巢癌中的表达情况,及其表达与雌激素受体(estrogen receptor,ER)、孕激素受体(progesterone receptor,PR)表达之间的关系,初步探讨AIB1蛋白在上皮性卵巢癌发生、发展中的作用。方法采用免疫组化S-P法检测正常卵巢及卵巢良、恶性肿瘤组织中AIB1蛋白的表达水平,并分析其与临床病理特征的关系,同时检测卵巢癌中ER、PR的表达情况,并分析其与AIB1表达之间的相关性。结果(1)卵巢癌中AIB1蛋白的阳性表达率为65.2%,明显高于正常卵巢(8.3%)和卵巢良性肿瘤(25.0%)。(2)临床～期的晚期病例中AIB1的阳性表达明显高于～期的早期病例(P=0.000);低分化组较之高、中分化组,有更高水平AIB1蛋白的阳性表达(P=0.022,P=0.018);淋巴结转移组中AIB1的表达明显高于阴性组(P=0.007),未发现不同病理类型间AIB1蛋白表达存在差异。(3)69例卵巢癌中,ER、PR的阳性表达率分别为31.9%、26.1%,未发现AIB1蛋白的表达与ER、PR的表达间存在相关性。结论AIB1可能通过非激素依赖的途径参与了上皮性卵巢癌的发生、发展过程。

雷公藤内酯醇对卵巢癌细胞株A2780作用的实验研究

目的:观察雷公藤内酯醇对卵巢癌细胞株的A2780的抑制作用,以及与顺铂联合用药的协同作用,并与顺铂单独作用相比较,评价其作为抗肿瘤药物的价值。方法:MTT检测不同的用药方式对卵巢癌细胞A2780增殖的抑制作用;形态学观察经雷公藤内酯醇作用后细胞的生长情况;流式细胞仪检测雷公藤内酯醇作用后细胞的凋亡情况。结果:1)雷公藤内酯醇对卵巢癌细胞A2780的增殖有明显抑制作用,呈量-效、时-效关系(P<0.05)。其在较小的浓度下即可产生很好的抑制效果(5 mg/L时,抑制率80%;0.5 mg/L时,抑制率60%;(0.005 mg/L)时,抑制率40%)。2)雷公藤内酯醇与顺铂相比较,在浓度<5 mg/L雷公藤内酯醇队卵巢癌细胞A2780的抑制作用优于顺铂(P<0.05),但在大于此浓度下则两者无明显差异(P>0.05);在24、48、72 h作用点时,雷公藤内酯醇IC50均小于顺铂IC50。3)在低浓度下,雷公藤与顺铂两者联合用药后的抑制率大于顺铂单用药抑制率,而小于雷公藤内酯醇单用药抑制率,其抑制率受作用时间影响更大,随作用时间的延长其抑制率明显增高,尤其在作用48 h以后,抑制率增加更为明显(P<0.05)。4)流式细胞检测经雷公藤内酯醇作用后A2780细胞有凋亡(P<0.05)。倒置相差显微镜下观察经雷公藤内酯醇作用后细胞生长明显受到抑制。结论:雷公藤内酯醇对卵巢癌细胞株A2780有明显的抑制作用,有量-效、时-效关系;在较低的浓度下,其抑制率明显高于顺铂;雷公藤内酯醇与顺铂联合用药的作用,随时间的延长抑制率增大。雷公藤内酯醇抑制肿瘤的作用可能是通过诱导细胞凋亡实现的。

妊娠期肝内胆汁淤积症

妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)为一种妊娠期特有的疾病,其病因不详。该病首次报道于19世纪80年代,于20世纪60年代得到详细报道,属高危妊娠之列。ICP最大的危害是发生胎儿窘迫,常使胎儿突然胎死宫内,并增加母体产后出血的风险。临床主要症状为瘙痒。临床上对ICP的处理存在两种过激的倾向,因此对ICP的诊断需规范化,需排除其他相关性疾病。建议诊断时进行分度,以便合理制定临床治疗方案,避免处理上的盲目性。

妊娠与子宫内膜癌

子宫内膜癌是女性生殖道最常见的恶性肿瘤之一，其2008年全球新发病例数约287100例，位居女性生殖道恶性肿瘤第2位。在美国等发达国家，子宫内膜癌的患者例数已大大超过其他类型的生殖道恶性肿瘤，高居第1位。而在我国北京、上海等经济发达城市及地区，由于宫颈癌筛查的普及和人们生活方式的转变，子宫内膜癌也于近些年超过宫颈癌跃居成为女性生殖道恶性肿瘤发病率的首位。

上皮性卵巢癌AIB1蛋白表达水平及其与凋亡相关性的初步研究

目的观察AIB1蛋白在上皮性卵巢癌中的表达,并探讨其与凋亡调节蛋白P53、Bcl-2表达之间的关系。方法应用免疫组化SP法检测24例正常卵巢、24例卵巢良性肿瘤、18例卵巢交界性肿瘤及69例上皮性卵巢癌中AIB1、P53、Bcl-2蛋白的表达,同时测定卵巢癌中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)状态,分析AIB1的表达与P53蛋白、Bcl-2蛋白、ER、PR的表达间有无相关性。结果1AIB1在正常卵巢、卵巢良性肿瘤、卵巢交界性肿瘤、上皮性卵巢癌中阳性表达率分别为8.33%、25.00%、38.89%、65.22%,卵巢癌中AIB1蛋白的阳性表达率高于其他卵巢组织(P<0.05)。AIB1蛋白在卵巢癌中过表达的发生率为36.23%,低分化、临床晚期、淋巴结受累的病例较之中、高分化、临床早期、无淋巴结转移的病例AIB1蛋白的过表达发生率升高(P<0.05)。2相关性分析显示AIB1蛋白与P53、Bcl-2蛋白表达呈正相关(r=0.342,P=0.004;r=0.311,P=0.009),与ER、PR的表达无相关性。结论上皮性卵巢癌中,AIB1蛋白的表达率明显升高,与卵巢癌的恶性生物学行为关系密切。AIB1蛋白可能通过非激素依赖途径影响了凋亡调节蛋白如P53、Bcl-2的表达,从而参与了上皮性卵巢癌的发生发展过程。

女性生殖道瘘57例病因分析

目的:探讨女性生殖道瘘的病因及预防措施。方法:回顾性分析我院妇产科2000年1月至2005年12月收治入院的57例女性生殖道瘘病例的病因。结果:产伤和妇科手术占女性生殖道瘘病因的前两位,分别占56.1%(32/57)和33.3%(19/57)。结论:产伤和妇科手术是引起女性生殖道瘘的主要原因。加强围产期保健、积极处理产科合并症以及提高妇科手术技术是降低女性生殖道瘘发生率的关键因素。

腹痛1天,加重10小时

1病历摘要 患者，39岁，G1P1，因腹痛1天，加重10小时于2012年2月2613夜急诊入院。患者入院前1天无明显诱因出现下腹隐痛，未予特殊处理。10小时前，腹痛症状加重，无寒战发热、头昏、乏力、潮热盗汗、恶心呕吐、阴道流血、腹泻、血便、尿频、尿急、尿痛、血尿等不适，外院B超检查示“盆腔积液，附件占位”，转我院急诊，予以收治入院。患者自诉近期食欲差，平素月经规律，末次月经：2012年2月2013，经量正常，否认痛经，白带无异常，否认其他病史。

课外辅导班对小学生英语学习的影响

从目前东港区小学生参加英语课外辅导班的情况着手,通过对小学生参加英语辅导班现状的研究与分析及参加辅导班原因,探讨课外辅导班对学生英语水平影响。对此我们得出:大部分学生对自己所参加的辅导机构比较满意,并且参加辅导班后英语成绩有一定进步。所以,只要学生自愿,家长或学校老师可以推荐他们到正规的课外辅导机构参加相应的英语辅导,这样既可以提高他们学习英语的兴趣,又可以加强他们学习英语的能力,有助于他们的英语学习和身心发展。

32卷8期疑难病案讨论选登

1诊断 ①阴道斜隔综合征：Ⅰ型，无孔型斜隔；②卵巢巧克力囊肿待排。 2诊断依据 2．1患者，15岁，未婚无性生活史。进行性痛经加重3年，腹痛3个月。患者12岁月经初潮，周期规律，30天，经期4天，经量少。