茯苓酸通过Nrf2/SLC7A11/GPX4信号通路调控铁死亡改善阿尔茨海默病大鼠认知障碍的研究

背景阿尔茨海默病(AD)是一种常见且不可逆转的神经退行性脑疾病,严重影响患者的生活品质和生存质量,目前仍缺乏有效的治疗方法延缓或阻止疾病进展。中药及其活性成分在防治AD方面具有重要潜力。目的探讨茯苓酸(PA)对AD大鼠认知障碍及核因子E2相关因子2(Nrf2)/溶质载体家族7A11(SLC7A11)/谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)信号通路的影响。方法2022年1—9月将75只6~8周龄雄性SPF级SD大鼠依据随机数字表法分为对照组(Control组)、AD模型组(Model组)、PA治疗组(PA组),PA+Nrf2抑制剂组(PA+ML385组),除Control组外制备AD大鼠模型。造模成功后,PA组腹腔注射50 mg/kg PA,PA+ML385组腹腔注射50 mg/kg PA+30 mg/kg Nrf2抑制剂ML385,Control组与Model组腹腔注射等量0.9%氯化钠溶液。末次给药24 h后进行Morris水迷宫实验,第2、4、6天进行定位航行实验,记录大鼠到达平台的时间(逃避潜伏期),第7天移走平台,记录大鼠在120 s内滞留平台时间和穿越平台次数。Nissl染色后观察各组大鼠海马神经元病理变化,普鲁士蓝染色检测海马组织铁沉积,免疫荧光染色检测海马神经元GPX4表达,检测海马组织谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、Fe2+含量,蛋白质印迹法(Western blotting)检测大鼠海马组织Nrf2、SLC7A11、GPX4蛋白表达。结果末次给药第2、4、6天Model组逃避潜伏期高于Control组、PA组,PA+ML385组高于PA组,差异有统计学意义(P<0.05);Model组平台停留时间、穿越平台次数低于Control组、PA组,PA+ML385组低于PA组,差异有统计学意义(P<0.05)。Nissl染色结果示Model组神经元坏死严重,细胞核皱缩,尼氏体数目减少;PA组神经元坏死减少,排列紧密且尼氏体增多;PA+ML385组神经元损伤明显加重,尼氏体数目减少。普鲁士蓝染色结果示Model组铁沉积较Control组增加,与Model组比较,PA组铁沉积减少,PA+ML385组较PA组铁沉积增多。免疫荧光染色结果示Model组绿色荧光减弱,GPX4阳性细胞减少,PA组细胞绿色荧光较Model组增强,GPX4阳性细胞增多,PA+ML385组较PA组GPX4阳性细胞减少。Model组GSH低于Control组、PA组,PA+ML385组低于PA组,差异有统计学意义(P<0.05);Model组MDA、Fe2+高于Control组、PA组,PA+ML385组高于PA组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Model组Nrf2、SLC7A11、GPX4蛋白相对表达量低于Control组、PA组,PA+ML385组低于PA组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论PA可改善AD大鼠认知障碍,其机制可能与通过激活Nrf2/SLC7A11/GPX4信号通路抑制铁死亡有关。

基于网络药理学探讨益气养阴化浊通络方治疗糖尿病肾病的作用机制

目的:通过网络药理学技术探究益气养阴化浊通络方治疗糖尿病肾病的分子机制。方法:通过TCMSP数据库获取益气养阴化浊通络方相关药物靶点,GeneCard、OMIM及PharmGkb数据库获取糖尿病肾病相关靶点。Venny R软件获取益气养阴化浊通络方治疗糖尿病肾病的潜在靶点,Cytoscape 3.8.0软件构建药物-有效成分-靶点-疾病网络图。对潜在靶点进行PPI互作网络分析、GO功能及KEGG通路富集分析。结果:共获取益气养阴化浊通络方有效成分66个,有效靶点254个,糖尿病肾病相关靶点4755个,取交集后获取潜在靶点179个。PPI分析获取核心靶点MAPK3、TP53、MAPK1、HSP90AA1、JUN、AKT1、RELA、MAPK14等;GO功能富集分析体现在对氧化应激的反应、细胞对化学压力的反应、对外来刺激的反应、对活性氧的反应等;细胞组分多在膜筏、膜微域、转录调节因子、复合囊泡腔等;分子功能多在DNA结合转录因子结合、RNA聚合酶II特异性DNA结合转录因子结合、核受体活性、配体激活的转录因子活性等;KEGG通路富集分析多在糖尿病并发症中的脂质与动脉粥样硬化、年龄-RAGE信号通路在糖尿病并发症中的作用、前列腺癌、乙肝、人巨细胞病毒感染、化学致癌-受体激活及流体切应力与动脉粥样硬化等通路。结论:通过网络药理学技术探究益气养阴化浊通络方治疗糖尿病肾病的作用机制,为后续相关研究提供理论依据和数据支撑。

赵青春教授乌梅丸验案3则

乌梅丸是治疗厥阴病的代表方,历代医家认为乌梅丸只治蛔虫病及久利不止。赵青春教授经过多年临床研究,对于乌梅丸主要治疗寒热错杂、上热下寒、虚实并见等证的含义,进行了深入认识,临床上运用乌梅丸治疗失眠、下肢水肿、咳嗽等内科杂病,效果显著,拓展了乌梅丸的运用范围。文章总结整理赵教授运用乌梅丸辨治验案3则,以飨同道。

岭南名医林夏泉养血熄风、涤痰定痫法辨治癫痫的临床经验

整理和分析了岭南名医林夏泉先生(以下尊称林老)以养血熄风、涤痰定痫法辨治癫痫的经验。林老为广东省中医院建院史上九大名医之一,获"广东省名老中医"称号,擅治癫痫。林老认为癫痫乃诸因素导致体内气血虚弱、脏气不平,风、痰、虚交互为患,血虚风痰气逆所致,病位在肝脾肾三脏,病性为本虚标实;治疗以祛风、化痰、养血为法,发作期当养血熄风、除痰开窍定痫,缓解期则宜补肾健脾柔肝;立"除痫散"一方,用治癫痫疗效颇佳。林老辨治癫痫经验对于后世临证治疗癫痫具有较好的参考意义。

调畅肝、脾、胃气机论治偏头痛经验

偏头痛是内科常见心身疾病,发病率高,复发率高。临床实践发现:偏头痛常伴发脾胃症状,伴发焦虑、失眠、健忘等。辨证偏头痛病机之关键为脾虚、脾失健运、肝脾失调,"木郁克土"或"土壅木郁"是该病主要病机。治疗应从肝、脾、胃同调论治,以气血调和为主,健脾运脾为先,肝、脾、胃同调为治疗之根本;具体用药遵循"脾宜健,胃宜和,肝宜疏"的原则;同时配合心理疏导、精神安慰等心身并治之法。

清脑通络方对老年性阿尔茨海默病大鼠海马突触结构的重建作用

目的:观察清脑通络方对老年性阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)模型大鼠海马突触结构的影响。方法:将大鼠随机分为青年组、老年组、模型组、石杉碱甲组、清脑通络方组。除青年组和老年组外,其他各组大鼠注射D-半乳糖和鹅膏蕈氨酸到基底前脑进行造模。造模成功后,清脑通络方组大鼠灌胃清脑通络方6 g/(kg·d),石杉碱甲组大鼠灌胃石杉碱甲0.3 mg/(kg·d),青年组、老年组、模型组大鼠以等体积生理盐水灌胃,连续4周。电镜观察大鼠海马CA1区和CA3区分子层突触特征,用体视学方法分析海马CA1区和CA3区突触数密度(N_v)、突触连接带面密度(S_v)和突触连接带平均面积(S)。结果:老年组大鼠CA1区和CA3区突触数密度、突触面密度与青年组比较无明显变化。与老年组比较,模型组大鼠CA1区和CA3区突触数密度、突触面密度显著降低(P<0.01)。与模型组比较,清脑通络方组大鼠在CA1区和CA3区的突触数密度、突触面密度显著增加(P<0.05,P<0.01);石杉碱甲组大鼠在CA1区和CA3区的突触数密度增加,在CA3区突触面密度增加(P<0.01)。与石杉碱甲组比较,清脑通络方组大鼠在CA1区的突触面密度增加(P<0.01)。结论:清脑通络方对老年性AD大鼠海马突触密度有显著的改善作用。

从肝热痰浊血瘀论治脑血管微栓子理论

脑血管微栓子清除新机制——脑血管微栓子外渗作用的发现被美国心脏学会和美国卒中学会评为2010年卒中领域的十大研究进展之一,微栓子清除机制的研究成为热点。本文从肝热痰浊血瘀立论脑血管微栓子的产生,并对清肝活血法和化瘀通络法治疗脑血管微栓子进行分析。

三伏贴治疗小儿哮喘的临床观察

目的：观察传统穴＋神阙、命门穴三伏贴敷治疗小儿哮喘的临床疗效。方法：将符合研究方案的160例支气管哮喘患儿随机分为治疗组及对照组各80例。治疗组采用咳喘三伏贴药饼贴敷在肺俞、定喘、风门、百劳、膏肓、天突、膻中穴;运脾开胃降气贴药饼贴敷在神阙、命门穴上。于初伏开始,每5日贴敷1次,贴满三伏为1个疗程,共1～2个疗程,6个月后统计疗效;对照组胸背穴位贴敷同治疗组,神阙、命门穴未贴敷。于初伏开始,每10日贴敷1次,贴满三伏为1个疗程,共1-2个疗程,6个月后统计疗效。结果：两组疾病疗效比较,治疗组控制显效率为72.5%,对照组控制显效率为38.8%,差异有统计学意义（P〈0.05）;中医症候疗效比较,治疗组痊愈显效率为75.0%,对照组痊愈显效率为45.0%,两组差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：运用传统穴＋神阙、命门穴三伏贴敷治疗小儿哮喘,疗效肯定,优于传统三伏贴,可以起到防治小儿哮喘的目的。

转型背景下《中医儿科学》教学方法改革

在南阳理工学院转型为应用型大学的背景下,我校儿科团队在《中医儿科学》传统讲授法基础上开展的"换位教学"调动学生积极性;"演示法""纠错法"结合提高学生动手能力;病案教学与临床见习结合训练临床思维能力;改革考试考核方法引导学生向理论与实践、思维与能力结合的方向发展。突出以学生为教学主体,以能力培养为教学目的,以期达到培养高素质应用型人才的教学目标。经过一系列改革,不仅学生自主学习的积极性提高,期末考卷分析及见习结束后带教教师的评价均提示临床思维能力、实践动手能力也不断提高,优于改革前的传统教学。

从脉之渗濡作用浅议调理肝肺在血脉病治疗中的意义

传统医学中"脉"的概念,一定程度上涵盖了现代医学"血管"的功能范畴,即通行气血、约束气血并渗灌气血和外渗有形实邪的作用。脉之功能的发挥,同营卫气血、五脏等有着紧密的联系,尤其是肝及肺在气机疏泄、开阖中的作用对于脉之外渗及濡养功能的发挥有重要的意义。

基于中医儿科学的学生自主学习模式探究

在提高大学生自主学习能力的背景下,我校儿科团队在中医儿科学传统讲授法的基础上,对自主学习模式进行探究。下发自主学习任务单、自主学习指南,将通用型学习与翻转课堂结合、专题型学习与小组协作学习结合,改革考试方法,调动学生自主学习的积极性,提高学生的文献查阅能力、沟通交流能力。

玉液汤对气阴两虚型糖尿病大鼠血糖与胰岛素受体的影响

为了探讨玉液汤疗效及其降糖的分子机理,采用佐脲链菌素复制糖尿病大鼠模型,随机分为正常组、模型组、治疗组和对照组,分别给予蒸馏水、玉液汤和消渴丸,观察血糖、血脂、糖化血红蛋白、胰岛素水平和肝脏胰岛素受体、受体底物1基因表达水平。结果表明:注射SMZ后动物血糖、血脂、糖化血红蛋白明显升高,胰岛素水平明显降低,两组均能明显降低糖尿病大鼠血糖、血脂、糖化血红蛋白水平、提高糖尿病大鼠胰岛素的水平,与模型组比较差异有统计学意义(P <0. 05),治疗组与对照组两组间比较差异无统计学意义(P>0. 05);治疗组与对照组均能增加糖尿病大鼠肝脏胰岛素受体(insulin receptor,IR)、胰岛素受体底物(insulin receptor substrate,IRS) mRNA水平,与模型组比较差异有统计学意义(P <0. 05),治疗组与对照组两组间比较差异无统计学意义(P>0. 05)。可见,玉液汤能降低糖尿病大鼠血糖、提高胰岛素水平,其机理可能是影响胰岛素受体-受体底物实现的。

合并高血压病、糖尿病及高脂血症的脑卒中高危患者中医证素特征研究

目的:研究合并高血压病、糖尿病及高脂血症的脑卒中高危患者中医证素特征及与主要理化指标的相关性。方法:将300例同时诊断高血压病、糖尿病、高脂血症,但无缺血或出血性脑卒中病史的中老年患者(年龄≥45岁),统计并分析该人群的中医证素分布特征及主要理化指标与证素之间的相关性。结果:病位证素中肝、肾的积分均值及总体出现比率较高。病性证素中痰、湿、阴虚的积分均值及总体出现比率较高,其中虚实夹杂证占45.7%。主要理化指标与中医证素的相关性检验有统计学意义。结论:脑卒中高危人群的主要证素分布以肝、肾、痰、湿、阴虚为主,主要理化指标与中医证素具有相关性。

原发性高血压病中医体质特征及中医干预

我国脑卒中发病率正以每年8.7%的速率上升,而高血压病作为脑卒中最重要的危险因素,77%的初发脑卒中都与高血压病有关。体质作为疾病发生的内在因素,在原发性高血压病的发生、发展,以及中医干预治疗方面有重要的意义。运用中医体质学说对原发性高血压病中医体质分布类型、体质与证候、并发症和合并病的关系,以及辨体质论治等进行阐述,为高血压病的"未病先防""已病防变"和"因人制宜"提供参考。

止渴降糖丸联合耳穴压豆治疗气阴两虚型糖尿病临床观察

目的:观察止渴降糖丸联合耳穴压豆治疗气阴两虚型糖尿病的临床疗效。方法:选取2018年1月—2021年7月南阳市中医院收治的气阴两虚型糖尿病患者69例,按随机数字表法将患者分为对照组23例和治疗组46例。对照组给予盐酸二甲双胍片治疗,治疗组在对照组基础上给予止渴降糖丸口服,双侧耳穴压豆治疗。观察两组患者不同时间点空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(2 h PG)情况,比较治疗前后糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)水平和中医证候评分变化情况,以及临床综合疗效。结果:经治12周后,治疗组FBG、2 h PG、HbA1c、FINS、HOMA-IR水平、中医证候评分均明显下降,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组临床总有效率为95.6%(43/45),高于对照组的85.7%(18/21),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:止渴降糖丸联合耳穴压豆治疗气阴两虚型糖尿病效果显著,可有效控制血糖,改善胰岛素抵抗,改善中医证候。

温肾醒脑方对血管性痴呆大鼠认知功能的影响及机制研究

目的:研究温肾醒脑方对血管性痴呆(Vascular dementia,VD)大鼠认知功能的改善作用及对Nrf2、Keap1相关信号通路的影响。方法:70只雄性SD大鼠随机分成正常组、假手术组、模型组、脑复康组(0.15 g/kg)、温肾醒脑方给药组(高剂量组5 g/kg、中剂量组2.5 g/kg、低剂量组1.25 g/kg),每组10只动物。采用双侧颈总动脉永久性结扎法建立VD模型。给予温肾醒脑方灌胃治疗后,Morris水迷宫测试治疗后VD大鼠认知功能的改善情况。检测脑组织中SOD、MDA、GSH-Px、NOS,HE染色观察脑海马组织的病理变化情况,RT-PCR大鼠脑组织NQO1、HO-1的mRNA水平和Western Blot检测Keap1、Nrf2、NQO1、HO-1蛋白水平的表达情况以及EMSA检测Nrf2与ARE结合力。结果:与正常组比较,VD模型组大鼠逃避潜伏期明显较长,游泳总距离明显缩短,穿越站台总数明显减少(P<0.01);大脑组织中MDA含量显著增加,SOD、GSH-Px和NOS的含量明显减少(P<0.01);大脑组织结构明显受损伤,细胞形态改变,细胞核固缩,核仁不清晰;同时大脑组织中细胞核Nrf2蛋白表达降低、细胞质中Keap1蛋白表达增加,NQO1、HO-1 mRNA和蛋白表达降低(P<0.01)。与VD模型组比较,脑复康和温肾醒脑方组大鼠的认知行为得到很大的提高,脑组织MDA、SOD、GSH-Px、NOS含量和脑组织病理结构得到很好的改善,Nrf2、Keap1、NQO1、HO-1在mRNA水平或蛋白水平上有一定程度改变,特别是温肾醒脑方组大鼠的改善非常显著。结论:温肾醒脑方可以改善VD大鼠的认知行为,其机制可能与Nrf2-Keap1-NQO1/HO-1抗氧化应激信号通路相关。

柴胡加龙骨牡蛎汤加减联合针灸治疗原发性抑郁症的临床观察

观察柴胡加龙骨牡蛎汤加减联合针灸治疗原发性抑郁症的临床疗效及对生活质量的影响。方法:根据纳入和排除标准选取60例抑郁症患者,随机分为治疗组和对照组,每组各30例。治疗组采用针灸配合柴胡加龙骨牡蛎汤治疗;对照组采用帕罗西汀治疗,治疗4周后观察并记录患者用药前、后的症状及生活质量变化情况,根据汉密尔顿抑郁量表(HAMD)、抑郁自评表(SDS)、SF(36量表对治疗效果等进行评定。结果:经过4周的治疗后,治疗组和对照组的总有效率分别为93.3%和80.0%,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗组HAMD、SDS评分显著低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:柴胡加龙骨牡蛎汤加减联合针灸治疗抑郁症无胃肠道副作用,并且可以显著改善患者的抑郁状态并提高其生活质量。

温肾醒脑方对血管性痴呆大鼠脑组织Nrf2-ARE信号通路的影响

为探讨温肾醒脑方(WXD)对血管性痴呆(vascular dementia,VD)大鼠认知功能的改善作用及对Nrf2-ARE信号通路的影响,将70只雄性SD大鼠随机分成正常组、假手术组、模型组、脑复康组(0.15 g/kg)、温肾醒脑方给药组(高剂量组5 g/kg、中剂量组2.5 g/kg、低剂量组1.25 g/kg),每组10只动物,采用双侧颈总动脉永久性结扎法建立VD模型,给予温肾醒脑方灌胃治疗后,Morris水迷宫测试治疗后VD大鼠认知功能的改善情况,检测脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、一氧化氮合酶(NOS),RT-PCR检测大鼠脑组织醌NADH脱氢酶(NQO1)、血红素氧合酶1(HO-1)的mRNA水平,运用Western Blot检测Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)、核因子E2相关因子2(Nrf2)、NQO1、HO-1蛋白水平的表达情况以及EMSA检测Nrf2与抗氧化反应元件(ARE)结合力。结果表明:与正常组比较,VD模型组大鼠逃避潜伏期明显较长,游泳总距离明显缩短,穿越站台总数明显减少(P<0.01);大脑组织中MDA含量显著增加,SOD、GSH-Px和NOS的含量明显减少(P<0.01);同时大脑组织中细胞核Nrf2蛋白表达降低、细胞质中Keap1蛋白表达增加,NQO1、HO-1 mRNA和蛋白表达降低(P<0.01)。与VD模型组比较,脑复康和温肾醒脑方组大鼠的认知行为得到很大的提高,脑组织MDA、SOD、GSH-Px、NOS含量和脑组织病理结构得到很好的改善,Nrf2、Keap1、NQO1、HO-1在mRNA水平或蛋白水平上有一定程度改变,特别是温肾醒脑方组大鼠的改善非常显著。可见温肾醒脑方可以改善VD大鼠的认知行为,其机制可能与Nrf2-ARE抗氧化应激信号通路相关。

基于FC的CBL教学模式在中医外科教学中的实践

目的探究基于翻转课堂(Fipped class,FC)的以病例为基础的(Case based learning,CBL)在中医外科教学中的应用效果。方法对南阳理工学院五年制2015级中医学专业2个教学班,分成对照组和实验组进行教学对比研究。同时,采用形成性评价形式,进行主、客观教学效果评估。结果实践结果表明,基于FC的CBL教学模式,在提高学生自主学习能力、临床思维能力、沟通表达能力等方面均有明显优势(P<0.05);且能充分体现"以学生为中心"的教育理念,有利于促进学生的知识、能力、素质协调发展。结论基于FC的CBL教学模式更符合中医外科学临床教学的实际需要,值得深入研究及推广应用。

温肾醒脑方对血管性痴呆大鼠Ang-1和HIF-1α表达的影响

目的:探讨温肾醒脑方对血管性痴呆(vascular dementia,VD)大鼠血管生成素-1(Ang-1)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的影响。方法:采用劳倦过度、房事不节法,高脂饮食法,以及反复性脑缺血再灌注结合降压法复制肾(阳)虚痰瘀型VD模型。将大鼠随机分为假手术组、模型对照组、温肾醒脑方组3组,每组18只。动物于造模后2 h开始灌胃,温肾醒脑方组以7.1 g/kg药液(体表面积换算,相当于60 kg成人量的3倍)灌胃给药,每天1次;模型对照组与假手术组给予等体积蒸馏水。各组动物在手术后2 h和处死前2 h进行神经功能评分。分别于造模后3 d、7 d和14 d处死动物,采用免疫组织化学法检测Ang-1与HIF-1α表达情况。结果:与假手术组对比,模型对照组和温肾醒脑方组大鼠的神经功能评分差别均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。与同一时间点模型对照组对比,用药3 d,7 d和14 d的温肾醒脑方组的神经功能评分降低,差别有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。VD大鼠脑缺血后Ang-1阳性细胞随时间延长而增加,温肾醒脑方能促进其表达,与模型对照组对比差别有统计学意义(P<0.01)。模型对照组大鼠HIF-1α表达增强,并随缺血时间的延长呈持续上升趋势,7 d后增长速度放慢,至14 d达到最高值;温肾醒脑方组HIF-1α表达水平在各时间点均高于模型对照组(P<0.01)。结论:温肾醒脑方可促进VD大鼠脑缺血后神经功能的恢复,促进脑组织中Ang-1和HIF-1α的表达。