碳青霉烯耐药革兰阴性杆菌感染的血液病患者的临床特征及30天内死亡危险因素分析

目的:探讨血液病住院患者合并碳青霉烯耐药革兰阴性杆菌(CRO)感染的临床特征及分析30 d全因死亡的危险因素。方法:回顾性分析2015年1月至2020年12月于山西医科大学第三医院血液内科住院的77例血液病合并CRO感染患者的临床资料及实验室检查资料,采用多因素Logistic回归分析影响患者感染后30 d死亡的危险因素。结果:77例血液病合并CRO感染的患者中,感染30 d内死亡29例,存活48例,病死率达37.66%。在这些患者中共检出93株病原菌,其中鲍曼不动杆菌检出率最高(25.81%,24/93),其次为铜绿假单胞菌(18.28%,17/93)。肺部是CRO感染最常见的部位。检出病原菌对碳青霉烯类药物高度耐药,对亚胺培南耐药最低抑菌浓度(MIC)≥16μg/ml的占64.52%(60/93)。单因素分析结果显示,确诊CRO感染时白蛋白浓度<25 g/L(P=0.048)、血肌酐浓度≥120μmol/L(P=0.023)、年龄校正查尔森共病指数(ACCI)(P=0.037)以及原发病的治疗方法(支持治疗、免疫抑制剂治疗、化疗、HSCT)(P=0.048)与感染后30 d全因死亡显著相关;多因素Logistic回归分析结果显示,确诊CRO感染时白蛋白浓度<25 g/L(P=0.014,OR=6.171)、血肌酐浓度≥120μmol/L(P=0.009,OR=10.867)是血液病患者合并CRO感染30d内死亡的独立危险因素。结论:血液病合并CRO感染的患者病死率高,检出病原菌对亚胺培南高度耐药,确诊感染时白蛋白浓度<25 g/L和血肌酐浓度≥120μmol/L是患者感染后30 d内死亡的独立危险因素。

耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌的耐药分子学研究

目的研究该院临床分离的耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌的耐药分子学机制。方法分析该院临床微生物实验室分离的耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌株(CRKP),采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)和全自动微生物分析仪(VITEK-2 compact)鉴定细菌并进行药物敏感试验分析,采用改良Hodge试验(MHT)和碳青霉烯酶灭活试验(CIM)进行表型确证;聚合酶链式反应(PCR)法检测碳青霉烯酶基因型,并进行基因测序BLAST比对和多位点序列分析(MLST)。结果46株耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌对常用抗菌药物均表现出高耐药性;耐碳青霉烯表型确证均呈阳性,PCR检测结果显示其中包括A类碳青霉烯酶(KPC-2型)和B类金属酶(NDM-1和IMP-4),MLST分型以ST11型为主。结论该院分离的耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌的耐药分子学机制主要以产KPC-2型碳青霉烯酶的ST11型为主,同时有少量其他型别的检出,加强院内感染监测强度和力度,以及进一步规范抗菌药的合理使用显得尤为重要。

土地戈登菌引起腹膜透析相关性腹膜炎1例

土地戈登菌（Gordonia terrae）是一种革兰阳性杆菌,生长缓慢,弱抗酸染色阳性。最初从土壤中分离,在临床上引起感染较少见,但对于免疫力低下者有致病风险[1-3]。本研究报道1例腹膜透析相关性腹膜炎患者,腹透液经培养、鉴定,病原菌最终确定为土地戈登菌。1病历摘要患者,男,52岁。2013年2月诊断为尿毒症,采取血液透析及腹膜透析治疗。患有慢性阻塞性肺病、高血压3级、

2017-2020年某院临床分离耐碳青霉烯阴沟肠杆菌检测及分析

目的通过研究本院近3年耐碳青霉烯阴沟肠杆菌,探讨其临床分布及相关耐药基因分布情况。方法收集2017年1月至2020年9月山西白求恩医院分离的33株耐碳青霉烯阴沟肠杆菌为研究对象,利用全自动快速生物质谱检测系统(美国Bruker,MicroflexLT/SH)进行细菌鉴定,VITEK2-Compact全自动微生物分析系统进行细菌药敏试验。采用改良碳青霉烯灭活试验进行耐药表型筛选。采用PCR方法检测碳青霉烯酶基因(bla_(IMP)、bla_(KPC)、bla_(NDM)、bla_(VIM)和bla_(OXA-48))。对所有菌株进行MLST分型和同源性分析。质粒接合转移实验研究耐药质粒的传播。结果22株阴沟肠杆菌对厄他培南、亚胺培南、美罗培南均耐药,11株仅对厄他培南耐药。其中16株阴沟肠杆菌产_(NDM)-1,4株产_(NDM)-5,2株产IPM-1,1株菌同时产_(NDM)-1和_(KPC)-2。11株仅对厄他培南耐药阴沟肠杆菌中有两株检出bla_(NDM)-1、两株检出bla_(KPC)-2基因。MLST分型主要流行株为ST418型。质粒接合转移实验有14株转移成功。结论本院耐碳青霉烯类阴沟肠杆菌从2017年逐年增加,2020年出现暴发流行。携带的碳青霉烯酶基因以bla_(NDM)为主,ST418型菌株占多数。耐药基因可通过质粒水平传播,所以加强临床耐药菌株筛检及控制对临床抗感染治疗作用关键。

全自动血细胞分析仪稀释模式用于脑脊液细胞计数及分类检测的可能性

目的:探讨ABX PENTRA 60血细胞分析仪在脑脊液细胞计数及分类中应用的可能性。方法:采用ABX PENTRA 60血细胞分析仪稀释模式对100份脑脊液标本进行白细胞计数、红细胞计数和白细胞分类分析,并与人工显微镜计数分类法结果进行对比。白细胞分类手工法采用瑞氏染色法,仪器法采用荧光染色和流式细胞术原理进行分类。结果:两种方法对脑脊液标本白细胞计数、红细胞计数、单个核及多个核细胞的绝对计数检测差异无统计学意义(P>0.05),并且两种方法具有良好的相关性(白细胞计数r=0.988、红细胞计数r=0.988、单个核细胞绝对计数r=0.953,多个核细胞绝对计数r=0.981)。结论:应用ABX PENTRA 60血细胞分析仪的稀释模式进行脑脊液细胞计数、分类快速准确。全自动血细胞分析仪稀释模式检测脑脊液常规中细胞计数及分类可在临床应用中推广。

耐碳青霉烯肠杆菌科细菌的耐药基因研究

近年来,随着碳青霉烯类药物的使用量增加,对碳青霉烯类抗生素敏感性降低甚至耐药的肠杆菌科细菌检出率呈持续上升趋势,出现了耐碳青霉烯肠杆菌科细菌（CRE）并且日益增多。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素产生耐药的主要机制有：产碳青霉烯酶、膜孔蛋白缺失或改变合并产Amp C酶或高产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）以及外排泵[1]。

668例血培养阳性标本中病原菌分布及耐药情况分析

目的：总结山西大医院改革MIC药敏方法以来血培养阳性病原菌的分布及耐药情况。方法：将2013年6月~2015年6月山西大医院送检血培养阳性标本668例进行传种、鉴定并进行药敏试验。结果：6 844例血培养送检标本中阳性共计668例,阳性率9.7%。其中共分离出17种细菌、4种真菌。革兰染色阳性菌314例（47%）,革兰染色阴性菌348例（52%）,真菌6例（1%）。668例患者多分布于血液科（14.9%）、ICU（12.1%）普外科（11.1%）。主要革兰阳性菌对万古霉素、利奈唑胺、替考拉宁等敏感,对青霉素耐药严重。主要革兰阴性菌对亚胺培南、美罗培南、阿米卡星、头孢哌酮舒巴坦等敏感。结论：血培养检测是临床血液感染病原学诊断的必要手段。本研究血培养病原菌主要以大肠埃希菌（32.6%）和耐甲氧西林表皮葡萄球菌（16.4%）为主,血培养检出病原菌经MIC药敏试验反映出耐药情况严重,为临床合理使用抗菌药物提供依据。

山西省2015—2022年某医院血流感染耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌检测及分析

目的 通过研究山西白求恩医院2015年1月—2022年1月血流感染患者血培养分离耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌,总结其流行病学和分子生物学特点。方法 收集山西白求恩医院2015年1月—2022年1月血流感染患者血培养分离肺炎克雷伯菌为研究对象,进行细菌鉴定,药敏试验、改良碳青霉烯灭活试验筛选耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌。对所有菌株进行二代测序并分析,其中2株拉丝实验阳性耐碳青霉烯高毒力肺炎克雷伯菌进行全基因组测序。结果 山西白求恩医院2015年1月—2022年1月血流感染患者血培养分离肺炎克雷伯菌共431株,耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌共33株,其中耐碳青霉烯高毒力肺炎克雷伯菌11株,其中拉丝实验阳性2株。所有菌株对厄他培南、亚胺培南均耐药,仅1株对美罗培南中介。33株耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌中26株产KPC-2、4株产NDM-1;有3株双酶型耐碳青霉烯高毒力肺炎克雷伯菌(KPC-2/NDM-9、KPC-2/OXA-1、NDM-1/OXA-1);4株未检测到碳青霉烯耐药基因。二代测序后进化分析结果显示33株耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌主要序列类型(sequence types, ST)型别为ST11、ST147、ST412,主要血清型为KL64、KL47、KL25。质粒接合转移实验有18株转移成功。2株拉丝实验阳性菌株经全基因组测序发现携带毒力质粒和耐药质粒。结论 本院血流感染患者检出耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌从2015年逐年增加,2021年出现暴发流行。携带的碳青霉烯酶基因以KPC-2为主,ST11/KL64型菌株占多数。进一步加强临床耐药菌株筛检及控制对临床抗感染治疗作用关键。

糖尿病足患者感染孔兹创伤球菌一例

孔兹创伤球菌是一种兼性厌氧菌,最初被认为是人类皮肤、特别是下肢的正常菌。孔兹创伤球菌引起的人类感染较少见,只有少数病例报道。然而,随着糖尿病、肿瘤等慢性疾病及处于免疫力低下的患者增多,这种微生物已被认为是一种条件致病菌,甚至可以导致严重感染。本文报道1例由孔兹创伤球菌引起的严重糖尿病足感染,最终抗感染治疗成功的患者。

革兰阴性杆菌碳青霉烯酶检测方法的研究进展

随着碳青霉烯类药物使用量的增加，耐碳青酶烯类革兰阴性菌逐渐增多，其耐药机制主要是产碳青霉烯酶，因此快速准确鉴定碳青霉烯酶及类型，对于及时有效地治疗和控制感染具有重要意义。早期的检测方法有显色培养基、改良霍奇试验和纸片协同试验，但所需时间长；生化方法耗时短且敏感性和特异性较高，但不能区分亚型；激光解吸电离时间飞行质谱（MALDI－TOF）目前可用于菌种鉴定、亚型分类以及耐药基因的检测。在各种碳青霉烯酶基因技术中，二代测序（NGS）技术不仅可以检测碳青霉烯酶基因，还可以检测整合子、转座子和质粒等，可同时完成菌株流行病学和耐药机制的研究。该文就目前碳青霉烯酶表型和基因检测方法的优缺点作了综述。

产NDM-1耐碳青霉烯酶肠杆菌科细菌筛查研究

目的对本院2013年1月-2014年12月临床分离耐碳青霉烯酶肠杆菌科细菌进行blaNDM-1基因筛查,初探本院blaNDM-1基因携带阳性菌存在现状。方法采用MALDI-TOF质谱检测系统对所有菌株进行鉴定,用VITEK-2全自动微生物分析仪检测菌株的MIC值,筛选其中耐碳青霉烯酶肠杆菌科细菌,用改良Hodge试验进行表型确认,同时对试验菌株的blaNDM-1基因应用PCR方法进行筛检,其中阳性株外送进行PCR产物基因测序,测序结果进行BLAST比对。结果 14株耐碳青霉烯酶肠杆菌科细菌分别是8株肺炎克雷伯菌,6株大肠埃希菌。14株菌中有5株对替加环素敏感,9株对替加环素中介。仅从1株来自患者腹水标本中分离的肺炎克雷伯菌中检出blaNDM-1基因,基因序列同源性为99%。结论本次从肠杆菌科肺炎克雷伯菌中检出blaNDM-1基因,应为山西省首次报道,警示院感等相关部门应重视并加强对blaNDM-1基因携带菌的监测与筛查。

耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌21株实验室检测与分析

碳青霉烯类抗生素广泛应用于治疗多重耐药细菌引起的严重感染,如革兰氏阴性细菌,尤其是产生高水平AmpC酶或ESBLs的菌株.过去的十几年间,耐碳青霉烯的非发酵菌较为普遍,而耐碳青霉烯的肠杆菌科相对少见.但最近几年,耐碳青霉烯的肠杆菌科细菌正在增加.耐碳青霉烯肠杆菌科细菌的耐药机制最常见的是产生能够水解碳青霉烯类抗生素的碳青霉烯酶.本研究通过筛选本院临床分离的耐碳青霉烯肠杆菌科细菌,进行表型检测方法的研究、产酶基因型的分析及产酶菌株的多序列位点分析.通过研究分析掌握本院的碳青霉烯耐药情况并比较临床实验室检测碳青霉烯酶的方法.

耐酪氨酸冢村菌致腹壁脓肿一例

耐酪氨酸冢村菌是一种革兰阳性棒状杆菌, 临床微生物实验室鉴定常与奴卡菌、马红球菌和戈登菌等难区分。耐酪氨酸冢村菌引起的人类感染病例报道较少, 且临床表现易被误诊为结核分枝杆菌感染。然而, 随着糖尿病、肾病、肿瘤等慢性疾病患者增多, 这种微生物对于免疫力低下患者被认为是一种条件致病菌, 甚至可以导致严重感染, 正确的病原学诊断非常重要。本文报道1例最初诊断结核性腹膜炎, 进一步培养确诊由耐酪氨酸冢村菌引起腹壁脓肿, 最终抗感染治疗成功的患者。

耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌41株分布及耐药机制

目的通过检测分析耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(CRKP)的流行病学资料,研究耐药趋势及耐药机制。方法收集山西白求恩医院2018年1月至2019年1月临床分离的耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌,对其进行鉴定、药敏及表型筛选。通过PCR方法检测主要碳青霉烯耐药基因[A类丝氨酸酶(KPC),B类金属β-内酰胺酶(NDM型、IMP型、VIM型)以及D类丝氨酸酶(OXA)-48等]和外膜孔道蛋白基因(OmpK35、OmpK36),并对孔道蛋白基因检测的阳性菌株采用实时荧光定量PCR进行基因表达的相对定量分析。结果经分析,CRKP的分离率为4.91%。CRKP时间分布以2019年1月分离率最高,为29.27%;CRKP年龄主要集中在21~80岁,其中以41~50岁分离率最高,为24.39%;科室分布以重症医学科为主,分离率为24.39%,其次为普通外科21.95%、康复医学科14.63%及神经外科12.20%;标本分布以痰标本为主,分离率为31.71%,其次为尿19.51%、血19.51%及分泌物12.20%。CRKP对亚胺培南、厄他培南的耐药率分别为90.24%、100.00%;对环丙沙星及阿米卡星的耐药率分别为95.12%和56.10%,对β-内酰胺类、氨基糖苷类耐药率均较高。改良碳青霉烯灭活实验(mCIM)和EDTA-改良碳青霉烯灭活实验(eCIM)显示有31株(75.61%)菌株表型表现为丝氨酸酶,有3株(7.32%)为金属酶;检出的碳青霉烯酶基因,有39株(95.12%)为KPC型,1株(2.44%)NDM型,1株(2.44%)同时具有以上KPC型和NDM型;只有1株(2.44%)菌株缺失OmpK36基因,余均存在OmpK35及OmpK36。进一步分析OmpK35中41株只有9株(21.95%)表达下调,而OmpK36中40株有38株(95.00%)表达下调。结论CRKP耐药现象严峻,感染年龄以中青年为主,且主要集中在重症医学科,以痰液标本为主;其CRKP的耐药机制主要为产KPC型丝氨酸酶和外膜孔道蛋白OmpK36缺失及表达下降。

2015年临床分离菌株分布及耐药性分析

目的了解本院临床分离菌株的分布及耐药性。方法采用抗菌药物MIC和纸片扩散法药敏试验。参照CLSI2014年版标准判读药敏结果,用WHONET 5.6软件进行总结分析。结果 2014年11月-2015年11月共收集非重复临床分离菌株4 998株,革兰阴性菌3 378株,占67.6%;革兰阳性菌1 620株,占32.4%。居前5位的细菌依次为大肠埃希菌(22.3%)、肺炎克雷伯菌(13.2%)、鲍曼不动杆菌(9.5%)、铜绿假单胞菌(7.2%)、金黄色葡萄球菌(7.1%)。肠杆菌科细菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为<3%、<20%、<50%。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的检出率为12.4%,耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌占81.1%,未检出耐万古霉素和耐利奈唑胺的菌株。检出耐万古霉素粪肠球菌1株,屎肠球菌3株。结论山西大医院临床分离菌株以革兰阴性杆菌为主,与全国耐药监测数据相符,耐药情况不容忽视。