胡黄连苷Ⅱ在大鼠体内的药代动力学

目的：研究胡黄连苷Ⅱ在大鼠体内的药代动力学。方法：大鼠单剂量静注给予胡黄连苷Ⅱ后，采用HPLC-MS法测定大鼠血浆、组织、粪便、尿液及胆汁中的胡黄连苷Ⅱ。色谱柱为Hypersil ODS2柱，（5μm，150mm×4．6mm），流动相为甲醇：水（47：53），内标为替硝唑。ESI选择正离子检测：检测离子为[M＋Na]^＋m/z535．00（胡黄连苷Ⅱ）、[M＋H]^＋m／z247．90（内标）。结果：血浆样品中，胡黄连苷Ⅱ的线性范围为0．05．20．0μg·mL^-1（r=0.9998）；各浓度的提取回收率均大于76％；最低定量限为0．05μg·mL^-1。静注给予2.5、5.0、10.0mg·kg^-1后，大鼠体内胡黄连苷Ⅱ浓度快速降低，平均消除半衰期仅为19．6min。AUC与剂量呈现良好的线性相关性，提示胡黄连苷Ⅱ在大鼠体内的处置属于线性动力学。静脉注射给药后胡黄连苷Ⅱ广泛分布于各组织，其中肾和肝组织中浓度最高。胡黄连苷Ⅱ主要通过尿液和胆汁排泄，在尿液中的平均累积排泄百分率为11．79％；胆汁中平均累积排泄百分率为7．80％；粪便中未检测出胡黄连苷Ⅱ。胡黄连苷Ⅱ平均血浆蛋白结合率为30．0％。结论：静注给药后，胡黄连苷Ⅱ迅速从大鼠体内消除，并可在体内广泛分布。有约19．59％以原型形式从胆汁和尿液排泄。

甘草酸、甘草次酸及苦参碱等对实验性胆汁淤积大鼠作用的比较

目的:观察甘草酸(GL)、甘草次酸(GA)、苦参碱(MT)、氧化苦参碱(OMT)、丹参酚酸B(SAB)、水飞蓟素(SI)和地塞米松(DEX)对异硫氰酸-1-萘酯(ANIT)致急性肝内胆汁淤积的作用。方法:应用灌胃ANIT(50 mg/kg)建立大鼠急性肝内胆汁淤积病理模型,观察上述药物对大鼠肝功能各项生化指标、肝组织病理改变、2 h胆汁流量和酮洛酚葡萄糖醛酸结合物(KPG)的累计胆排泄率的影响。结果:GL、GA和MT均能明显减轻ANIT导致的胆管损伤、胆汁淤积和肝细胞损伤。DEX减轻胆管损伤,对肝细胞损伤无保护作用。OMT、SAB和SI不能减轻ANIT的肝脏毒性。结论:GL、GA、MT和DEX对ANIT诱导的急性肝内胆汁淤积型肝炎有明显的保护作用,而且GL、GA和MT的保护作用优于DEX。

LC-MS法测定人血浆中的甘草次酸

目的:建立测定人血浆中甘草次酸的 LC-MS 方法。方法:人空白血浆0.5 mL 中加入甘草次酸及内标格列喹酮,以乙酸乙酯萃取后取上清液挥干,再用流动相溶解,进行 LC/MS 测定。色谱条件:岛津 VP-ODS 色谱柱(2 μm,150 mm×2.0mm),甲醇-3 mmol·L^(-1)醋酸铵水溶液-冰醋酸(92:8:2)为流动相,流速:0.2 mL·min^(-1);质谱条件:电喷雾离子化(ESI)方式,采用选择性离子检测(SIM),检测离子为正离子,甘草次酸 SIM 的离子为[M+H]^+(m/z 471),内标格列喹酮 SIM 的离子为[M+H]^+(m/z 528)。结果:本方法线性范围为5～500 ng·mL^(-1),最低定量限(LOQ)为5 ng·mL^(-1)。准确度、精密度以及稳定性均符合有关要求。结论:本法简便,灵敏度高,可用于药代动力学试验中人血浆的甘草次酸浓度测定。

我国农业科技创新活动中若干问题的思考与对策

本文分析了我国农业科技创新中存在的过分依赖市场化、重大突破少、研究成果转化率不高、科技创新领军人物和高水平人才不足、科技创新精神不够等问题,并针对这些问题,提出掌握国际科技发展水平、创新点的选择、创新组织模式和创新文化建设等对策。

食品饲料中维生素E的荧光测定

测定维生素E的方法中,分光光度法干扰因素较多,准确性差。色谱法装置复杂,步骤繁琐,不宜用于大量样品的测定。用荧光法测定维生素E,不需昂贵的设备,且筒便、快速。与薄层色谱法相比,也证明较佳。 实验部分 (一)仪器 玻璃仪器:圆底烧瓶,容量瓶,分液漏斗,三角烧瓶(具塞)等。 恒温水浴锅:调节温度(±1℃)。 荧光分光光度计:岛津RF-510。 (二)试剂和溶液 无水乙醇(分析纯),50％KOH溶液(W/V),乙醚(分析纯),正已烷(分析纯),25％抗坏血酸水溶液(W/V),无水硫酸钠。

数字图像法测定养殖水中的孔雀石绿

建立一种简单、可靠的养殖水中孔雀石绿的数字图像检测方法。以1-己基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐离子液体富集水样品,再用手机拍照获取样品信息,最后用数字图像结合多层感知器神经网络定量分析孔雀石绿的含量。该法测定结果的相对标准偏差不大于6%(n=5),加标回收率为97.8%~103.0%。该方法可用于养殖水中孔雀石绿的含量测定。

大鼠胆汁中酮洛芬Ⅱ相代谢物酮洛芬葡萄糖醛酸的测定方法

目的:建立 RP-HPLC 法测定胆汁中酮洛芬Ⅱ相代谢物酮洛芬葡萄糖醛酸(S-KPG、R-KPG)。方法:采用 ODS 柱(5μm,4.6 mm×250 mm);流动相为乙腈-水(35:65),内含0.05 mol·L^(-1)磷酸二氢钾和0.005 mol·L^(-1)的四丁基溴化胺,pH5.6;流速为1 mL·min^(-1);检测波长232 nm;柱温30℃;进样是20μL。内标为10 mg·L^(-1)的萘普生甲醇溶液。结果:在2～1000μmol·L^(-1)浓度范围内,胆汁中 S-KPG、R-KPG 回归方程分别为 Y=0.0039X-0.0256,r=0.9998和 Y=0.0039X-0.0229,r=0.9998;最低检测限分别为0.5 μmol·L^(-1)和1 μmol·L^(-1)。S-KPG 和 R-KPG 在室温和胆汁生理 pH 时不稳定,在 pH4时最稳定。结论:本文应用 RP-HPLC 检测胆汁 S-KPG、R-KPG,方法简便、易行、实用,可以作为肝脏葡萄糖醛酸转移酶活性和胆排泄实验研究的分析手段。

急性实验性肝损伤对大鼠酮洛芬Ⅱ相代谢和胆排泄的影响

目的探讨通过酮洛芬(KP)代谢参数的变化分析肝脏功能的可能性。方法以KP为工具药,用四氯化碳(CCl_4)和α-萘异硫氰酸酯(ANIT)建立急性肝损伤大鼠模型。体内实验,KP 20 mg·kg^(-1)iv后,测定大鼠血浆、胆汁中KP及其Ⅱ相代谢物酮洛芬葡萄糖醛酸结合物(S-KPG和R-KPG)。体外微粒体孵育实验,测定KP葡萄糖醛酸化反应v_(max)和K_m。结果体内实验结果显示,与对照组相比,CCl_4肝损伤模型大鼠KPG累计胆排泄率降低[(54±18)% vs (90±7)%],ANIT肝损伤模型大鼠的KPG胆排泄几乎完全被抑制[(4.9±2.0)%]。与对照组比,CCl_4和ANIT肝损伤模型组KP药动学参数lgAUC_(0～∞)增加[(5.26±0.19),(5.05±0.10) vs (4.67±0.07)]、~t1/2β延长[(284.2±150.0),(129.0±37.0)min vs (67.8±21.7)min]、清除率降低[(0.046±0.019),(0.080±0.011)mL·min^(-1) vs (0.169±0.026)mL·min^(-1)],血浆KPG浓度明显升高。与对照组比较,ANIT肝损伤模型组血浆S-KPG的AUC_(0～∞)增高了约10倍。微粒体孵育试验表明,与对照组比,CCl_4和ANIT肝损伤模型组大鼠肝脏葡萄糖醛酸转移酶活性有轻至中度降低,v_(max):(0.9±0.5),(1.1±0.6)mmol·g^(-1)·min^(-1) vs (2.9±0.9)mmol·g^(-1)·min^(-1);K_m:(6.8±1.6),(5.4±1.5)mmol·L^(-1) vs (13.6±1.2)mmol·L^(-1)。结论急性肝损伤时KP药代动力学参数发生改变,说明可以通过考察KP的动力学参数的变化,尤其是lgAUC_(0～∞),t_(1/2β),清除率和KPGs累计胆排泄率,来反映肝功能情况。

骨碎补研究进展

骨碎补是水龙骨科植物槲蕨[Drynaria fortune(Kunze)J.Sm.]的干燥根茎,是骨伤治疗常用中药,具有治疗疼痛、补肾强筋骨的功效,所含化学成分有黄酮类、酚酸类、木质素、甾体类和苷类等,被广泛用于治疗骨科相关疾病,药用价值高。通过对骨碎补的生物学习性、植物学特征、繁育技术等进行综述,以期为骨碎补的研究和进一步开发利用提供参考和借鉴。

基于非靶向代谢组学的蜘蛛香不同部位差异代谢物分析

目的:研究蜘蛛香不同部位的代谢物差异,促进蜘蛛香资源的综合利用。方法:利用非靶向代谢组学技术,对蜘蛛香的根茎、根和叶3个部位的代谢物进行差异性比较分析。结果:从蜘蛛香的根茎、根和叶中共鉴定出491个代谢物,主要代谢物有挥发油、多糖、氨基酸等。蜘蛛香根茎、根和叶中的代谢物差异显著,根与叶、根茎与叶、根与根茎之间的差异代谢物分别为145、109、122个,根茎和叶中含莪术烯醇、4-羟基肉桂酸、芥子酸胆碱、5-羟基-1-四氢萘酮、4-乙基苯甲醛、松脂醇4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷和5-胸苷酸二钠盐较少,而根中较多;根和根茎中含茶碱、芹菜素和阿尔泊酚酸较少,而叶中较多。根茎、根和叶的差异代谢物主要富集在类苯丙酸生物合成通路,氨酰tRNA生物合成通路和丙氨酸、天冬氨酸与谷氨酸代谢通路。结论:蜘蛛香的根茎、根和叶中含有挥发油、多糖、氨基酸等大量的差异代谢物,研究结果可为蜘蛛香不同部位关键代谢物的挖掘和充分利用提供参考。

金毛狗的研究进展

金毛狗Cibotium barometz(L.)J.Sm.为桫椤目蚌壳蕨科植物,其根茎称为金毛狗脊。金毛狗含有挥发油类、蕨素类、酚酸类、黄酮类、多糖类、萜类及微量元素等化学成分,具有较高的观赏、药用和食用价值。近年来,金毛狗的野生资源不断减少,现已被列入国家二级保护植物。对金毛狗的资源状况、生物学特性、种苗繁育技术、化学成分和药用价值等方面进行综述,以期为其种苗繁育、野生资源的可持续发展、科学保护和合理的开发利用提供参考。

L──抗坏血酸脂肪酸酯的特性和应用

采用酯交换法合成L—抗坏血酸脂肪酸酯其得率高于直接酯化法，6－L－抗坏血酸棕榈酸酯（AscorbylPalmitate简称AP）与自由基反应能阻止油脂中过氧化物形成；与O2反应能保证抗氧化活性；与VE配合使用具有增效抗氧化作用。国际粮农组织和世界卫生组织批准AP每天允许摄入量为1．25g／kg体重。AP在浓缩状况及混合配物RonoxamA中十分稳定。AP的抗氧化效果优于BHA．BHT．AL．AM具有抗菌活性。

凶险性前置胎盘伴不同程度植入患者剖宫产治疗分析

目的探讨凶险性前置胎盘伴不同程度植入患者进行剖宫产治疗的情况。方法回顾性分析2014年1月至2018年1月接收凶险性前置胎盘患者共60例的诊疗情况。按照是否伴有胎盘植入,分为两组,其中对照组没有胎盘植入,观察组有胎盘植入。对两组患者的围产结局进行比较分析,对观察组患者植入部位、植入面积和止血方法统计分析。结果观察组患者手术时间、住院时间显著长于对照组患者,失血量、输血量、失血性休克例数和脏器损伤例数均显著多于对照组患者,比较差异具有统计学意义(P<0.05),两组的新生儿出生体重和新生儿窒息例数的比较无统计学差异(P>0.05);观察组患者胎术中止血方法包括局部"8"字缝合20例(66.67%)、宫腔填纱术12例(40.00%)、子宫动脉结扎术9例(30.0%)、MTX局部注射20例(66.67%)、B-lynch缝合术6例(20.00%)、子宫动脉栓塞术9例(30.0%)、子宫切除术7例(23.33%)。结论凶险性前置胎盘伴胎盘植入手术时间较长、失血量较多、产后失血性休克及脏器损伤发生率较高,严重危及产妇生命。应在产前对病情做好诊断,术中结合多种止血方法,果断处理,术后严密监测,共同提高临床效果。

高原鼠兔和高原鼢鼠肠道微生物组及常见抗生素抗性基因的比较

高原鼠兔和高原鼢鼠是青藏高原的两种优势小型哺乳动物,其肠道微生物在宿主高原适应性方面发挥着重要作用,同时,作为野生动物,它们的肠道微生物也可能携带抗生素抗性基因并将其传播给人类,造成抗生素药物失效。因此,对这两个物种肠道微生物组和抗生素抗性基因的研究十分重要。本研究通过16S rRNA基因测序,定量PCR等技术获得两物种肠道菌群特征并检测到了抗生素抗性基因。结果发现,在门水平上,高原鼢鼠肠道拟杆菌门(Bacteroidetes)的相对丰度更高;而高原鼠兔肠道厚壁菌门(Firmicutes)和放线菌门(Actinobacteria)的相对丰度更高,在属水平上,高原鼢鼠的拟杆菌属(Bacteroides)和S24-7科中某属的相对丰度更高,而高原鼠兔的普雷沃氏菌(Prevotella)、颤螺菌属(Oscillospira)、YRC22和瘤球菌科(Ruminococcaceae)中某属的相对丰度更高。这些微生物大多与植物多糖分解有关。另外,高原鼠兔肠道微生物的α多样性高于高原鼢鼠,两物种间肠道菌群结构差异度大,这可能是由物种及膳食结构的差异共同决定的。两物种体内均能检测出抗生素抗性基因,本次研究共检测到3类抗生素抗性基因,分别是四环素类抗性基因tetQ,tetM-01和tetG-01;磺胺类抗性基因sul1和sul2;以及多重耐药基因floR,其中某些抗生素抗性基因与部分菌群具有相关关系。这些结果表明野生动物体内也存在抗生素抗性基因的蓄积,这些抗生素抗性基因可能传播给人类,对人类的健康产生危害,但可以通过调节野生动物肠道菌群来降低抗生素抗性基因的蓄积与传播。

基于非靶向代谢组学的草果不同部位间差异代谢物分析

目的:对草果不同部位间代谢物差异进行分析,为探究草果非药用部位的潜在应用价值提供参考。方法:利用非靶向代谢组学技术,对草果的茎、叶和果实3个部位的代谢物进行差异性比较分析。结果:基于非靶向代谢组学技术鉴定草果茎、叶和果实的代谢物,筛选出了373个代谢物,主要包括萜类、酚类、碳水化合物和碳水化合物结合物、氨基酸、肽和类似物、脂肪酸和共轭物、类固醇和类固醇衍生物、类花生酸、醇和多元醇类及黄酮类等,茎与叶、茎与果实、叶与果实之间的差异代谢物分别为45、72、85个;2,5-二羟基苯甲酸酯、十二烷酸、5-甲硫基腺苷、腺苷、丙酸睾丸酮、D-葡萄糖-1-磷酸、乳清酸核苷和栎精在茎中含量最高,在果实中含量最少;L-苹果酸和氧代戊二酸等代谢物在叶中含量最高,在果实中含量最少;亚油酸代谢和丙氨酸、天门冬氨酸和谷氨酸代谢是形成草果组织差异代谢物的重要代谢途径。结论:草果的茎、叶、果实同样富含许多相同的活性代谢物质,其非药用部位也具有重要的食品和药品等方面经济利用价值,为草果的开发和充分利用提供一定的科学依据。

液相色谱-串联质谱法测定SD大鼠全血中新型亲环蛋白D抑制剂RN-0001浓度

建立了液相色谱-串联质谱法测定新型亲环蛋白D抑制剂RN-0001在SD大鼠全血中的浓度。样品前处理采用简单的蛋白沉淀法,色谱分离在Gemini C18110,色谱柱(50 mm×2 mm,5μm)上进行,以含10 mmol/L乙酸铵和0.1%甲酸的水溶液作为流动相A,含0.1%甲酸的甲醇溶液作为流动相B,在0.8 mL/min流速下梯度洗脱。待测物RN-0001和内标环孢菌素A的检测采用正离子电喷雾多反应监测模式,其检测离子对分别为m/z 645.4/156.2和m/z 601.8/156.1。RN-0001在30.0 ng/mL~30.0μg/mL浓度范围内线性关系良好(r 2>0.9961),定量下限为30.0 ng/mL,批内和批间的精密度小于5.2%,批内和批间准确度在-3.6%~6.7%之间。RN-0001基质样品在室温放置18 h,-80℃冰箱放置40天以及经过5次冻融循环后均稳定。SD大鼠尾静脉注射3 mg/kg的RN-0001注射液进行药代动力学研究,RN-0001的半衰期t 1/2为3.53 h,峰浓度C 0为9370 ng/mL,血药浓度-时间曲线下面积AUC 0-24 h为5300 h·ng/mL。结果表明,所建方法适用于RN-0001在SD大鼠体内的药代动力学研究。

纳米氧化锌对A549细胞脂质过氧化作用

目的探讨纳米氧化锌(ZnO NPs)对人肺泡Ⅱ型上皮细胞株A549细胞的氧化损伤作用。方法取对数生长期A549细胞,以剂量0、10、20、40 mg/L的ZnO NPs溶液进行染毒,分别设为相应的剂量组。染毒4 h后,以流式细胞术检测细胞内活性氧水平;染毒8 h后,采用酶标仪检测丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)活力。结果 10、20、40 mg/L剂量组A549细胞内活性氧水平均高于0 mg/L剂量组(P<0.05);A549细胞内活性氧水平随ZnO NPs染毒剂量的增加而增加(P<0.01)。与0 mg/L剂量组比较,10、20、40 mg/L剂量组A549细胞SOD活力均下降(P<0.05),MDA水平和MDA/SOD比值均升高(P<0.05);A549细胞SOD活力随ZnO NPs染毒剂量的增加而下降(P<0.01),MDA水平和MDA/SOD比值均随ZnO NPs染毒剂量的增加而升高(P<0.01)。结论ZnO NPs可诱导A549细胞发生脂质过氧化,呈剂量-效应关系。

LC-MS法测定大鼠血浆中银杏内酯B的浓度

目的:建立测定大鼠血浆中银杏内酯B浓度的LC-MS方法。方法:取大鼠血浆50μL,加2.5mol.L-1盐酸10μL酸化后,加入内标格列本脲,以1mL乙醚萃取后取上清液挥干,用50%甲醇1mL溶解,取10μL进行LC-MS测定。色谱条件:色谱柱为HypersilODS2柱(5μm,4.6mm×150mm),流动相:甲醇-0.01%氨水(52:48);流速:1.0mL.min-1;质谱条件:电喷雾离子化(ESI)方式,以选择性负离子方式检测,银杏内酯B和内标格列本脲的选择检测离子质荷比分别为m/z423.1([M-H]-)和m/z492.1([M-H]-)。结果:银杏内酯B的线性范围为0.05～10.0μg.mL-1,最低定量限(LOQ)为0.05μg.mL-1。准确度、精密度以及稳定性均符合有关要求。结论:本方法专属性强,灵敏度高,线性关系良好,操作简便,适用于药代动力学研究。

IL-6/STAT3信号通路对B族链球菌感染孕妇早产的预测价值

目的 探究白细胞介素-6(IL-6)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)信号通路对B族链球菌(GBS)感染孕妇早产的预测价值。方法 选择2019年2月-2021年2月绍兴市中心医院医共体总院就诊的GBS感染孕妇112例,根据GBS感染患者的妊娠结局,将其分为早产组32例和足月分娩组80例,比较两组孕妇一般资料、IL-6水平、STAT3蛋白[磷酸化细胞信号传导与转录活化因子3(p-STAT3)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、核因子(NF)-κB亚基p-65]表达水平、阴道病原菌及孕妇GBS血清分型,探究IL-6/STAT3信号通路在GBS感染早产中的作用。结果 早产组细菌性阴道炎(BV)、外阴阴道假丝酵母菌病(VVC)发生率均高于足月分娩组(P<0.05),两组滴虫发生率比较,无统计学差异;早产组IL-6水平高于足月分娩组(P<0.05);蛋白质印迹法蛋白表达显示,早产组p-STAT3、p-Akt、p-65灰度值均高于足月分娩组(P<0.05);预测GBS感染孕妇早产时,IL-6、p-STAT3、p-Akt、p-65的受试者工作特征曲线(ROC)曲线下面积分别为0.803、0.868、0.842、0.937;早产组孕妇中GBS基因型为:Ⅲ型24例为主占比75.00%,足月分娩组孕妇的基因型Ⅲ型42例占比52.50%。结论 GBS感染后可能通过调控IL-6/STAT3信号通路及影响微生态平衡而引发孕妇早产,而早产组孕妇中GBS基因型以Ⅲ型为主,因而在临床预防及治疗中还需关注Ⅲ型孕妇,避免造成不良妊娠结局。