乳腺癌HER2状态、临床病理特征及预后分析

目的探讨乳腺癌患者的HER2状态、临床病理特征及预后之间的关系。方法选取福州大学附属省立医院629例同时做过HER2 IHC及FISH检测的浸润性乳腺癌手术病例,应用2019版乳腺癌HER2检测指南分析HER2状态、临床病理特征及预后。结果IHC结果:0~1+、2+、3+分别占53.10%、22.26%、24.64%;FISH结果:阴性和阳性病例分别占66.77%和33.23%。导管癌、小叶癌及特殊类型肿瘤之间FISH检测结果差异具有统计学意义(P=0.001),而IHC检测结果差异无统计学意义(P>0.05)。不同性别、发病年龄、肿瘤最大径、组织学分级、淋巴结转移与否两种方法检测结果差异无统计学意义(P>0.05)。针对女性病例,IHC与FISH两种检测方法比较差异具有统计学意义(P<0.001);明确阴性跟阳性病例中,一致性检验,Kappa=0.925,P=0.000;相关性分析,r=0.696,P=0.000。随访病例生存曲线可见赫赛汀治疗组DFS高于非治疗组,IHC阴性FISH阳性病例组有无赫赛汀治疗患者差异具有统计学意义(P<0.05);一致病例与不一致病例DFS比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论基于2019版乳腺癌HER2检测指南,FISH检测结果与肿瘤类型有关;IHC与FISH检测结果具有很好的一致性,二者结果呈正相关;FISH法的检出率高于IHC法,条件允许时,建议做FISH检测确认;结果不一致时,FISH结果对临床制定治疗决策可能更具指导意义。

介绍一种简单易行的石蜡包埋组织富集肿瘤细胞方法

目前常用的分子病理方法主要有实时荧光定量PCR(realtime fluorescence quantitative PCR)、直接测序法、二代测序(Next-generation sequencing,NGS)等,标本的质量会显著影响这些方法检测结果的准确性,不但要求足够肿瘤细胞数量还要一定的肿瘤细胞比例,对于肿瘤细胞比例低的不达标的标本需要进行肿瘤细胞的富集。

四种技术平台检测甲状腺癌NTRK融合变异的比较

目的探讨免疫组化、DNA-based NGS、FISH和qRT-PCR四种技术平台检测甲状腺癌NTRK融合变异的一致性。方法对40例临床组织样本(其中31例为甲状腺癌样本)同时行FISH、免疫组化、DNA-based NGS和qRT-PCR法检测NTRK融合基因。结果四种技术平台均检测的31例甲状腺癌样本中,与FISH技术相比,免疫组化的敏感性、特异性、阳性预测值(positive predictive value,PPV)、阴性预测值(negative predictive value,NPV)和总符合率(total coincidence rate,TCR)分别为100%(9/9)、90.9%(20/22)、81.8%(9/11)、100%(20/20)、93.5%(29/31),其PPV较差;DNA-based NGS的敏感性、特异性、PPV、NPV和TCR分别为44.4%(4/9)、100%(22/22)、100%(4/4)、81.5%(22/27)、83.9%(26/31),其敏感性较差;qRT-PCR和FISH技术检测的一致性为100%(31/31)。与FISH技术相比,免疫组化、DNA-based NGS和qRT-PCR的Kappa值分别为0.853、0.532和1.000。在40例临床组织样本中,39例与FISH结果一致,仅1例(脂肪纤维瘤病样神经肿瘤)因检测范围未覆盖NTRK的少见融合类型(LMNA:exon4-NTRK1:exon10)qRT-PCR法未检出,基于RNA检测融合的qRT-PCR与FISH技术的符合率最高。结论基于RNA的qRT-PCR技术具有敏感性高、特异性高,操作便捷、判读简易的特性,可能是适用于病理科常规临床检测甲状腺癌NTRK融合变异的优选方案。

采用Illumina测序技术检测非小细胞肺癌驱动基因关键位点突变

肺癌尤其是非小细胞肺癌(non-small cell lung cancers,NSCLC)是许多国家常见且病死率位于首位的恶性肿瘤[1]。目前认为NSCLC是由一系列驱动基因突变形成的恶性肿瘤,包括EGFR、ALK、KRAS、NRAS、BRAF、HER-2、ROS1、RET、MET和PIK3CA等基因。现阶段手术、化疗、放疗等治疗手段效果均不理想[2],针对以上10个基因突变的分子靶向治疗的出现给患者带来了新曙光,但前提是必须有精确的分子学信息,这就要求有合适的分子检测方法。Illumina测序技术已应用于多种常见肿瘤基因的检测,如乳腺癌、胰腺癌等。本文现介绍采用Illumina测序技术在检测和分析NSCLC以上10个驱动基因关键位点突变的应用。

胃幽门螺旋杆菌感染检测的4种特殊染色方法比较

幽门螺杆菌（HP）感染与多种疾病有关,尤其是消化系统疾病,包括良性病变、癌前病变和恶性病变,因此,HP感染的诊断和治疗显得尤为重要。组织学诊断HP的优点是可以同时进行胃黏膜的病理学诊断且特异性较高。随着内镜技术在基层医院的广泛应用,组织学诊断HP逐渐成为常规项目。本文对HP检测常用的4种特殊染色方法——革兰氏细菌染色法、改良Giemsa染色法、硼酸亚甲蓝法、HP-Stain法进行比较,寻找到适合基层医院病理科应用的方法。

低度恶性潜能多房囊性肾肿瘤32例临床病理分析

目的分析低度恶性潜能多房囊性肾肿瘤(MCRNLMP)的临床病理学特征,提高对该肿瘤的认识。方法回顾性分析32例MCRNLMP的临床资料、组织学形态、免疫组化,并进行相关文献复习,探讨其临床病理特征。结果32例MCRNLMP中,男女比为23∶9,年龄29~73岁,平均49.9岁;左侧肾15例,右侧17例,多为体检发现肾占位。镜下多数囊腔内衬单层细胞,细胞核WHO/ISUP 1级或2级,部分间隔内可见小簇状透明细胞,但并非膨胀性生长。免疫组化示32例瘤细胞均CK(AE1/AE3)、vimentin、碳酸酐酶IX(CAIX)、PAX-2和PAX-8(+),28例CD10(+);CD68、TFE3(-),Ki-67增殖指数1~3%。随访3~78个月,均无复发及转移。结论MCRNLMP具有低度恶性潜能,预后极好。组织学上肿物以囊性成分为主,囊壁上皮部分为透明细胞,须与多种肾囊性病变鉴别。术前确诊困难,主要依靠术后病理明确诊断,同时也需结合临床及影像学资料。

DOG1抗体新克隆MX067在胃肠间质瘤病理诊断应用中的初步评价

目的对DOG1抗体新克隆MX067在胃肠间质瘤(GIST)病理诊断应用进行初步评价。方法收集71例GIST组织和79例非GIST肿瘤组织(乳腺癌、胃癌、神经鞘瘤和结肠癌等),制成组织芯片分别进行DOG1鼠单抗MX067、K9及兔单抗SP31免疫组化染色及分析对比。结果 DOG1 MX067、K9和SP31抗体在GIST中的阳性检出率分别为90. 14%(64/71)、88. 73%(63/71)及88. 73%(63/71),DOG1 MX067抗体在GIST中的阳性检出率与K9、SP31抗体无显著性差异(P>0. 05)。DOG1 SP31在神经鞘瘤组织中出现8. 82%(3/34)的阳性反应,而DOG1MX067和DOG1 K9为阴性。DOG1 MX067抗体检测诊断GIST的敏感性高于DOG1 K9、SP31,DOG1 MX067特异性等于K9,高于DOG1 SP31,DOG1 MX067 ROC曲线下面积0. 926大于DOG1K9、SP31。结论克隆号为MX067的DOG1抗体特异性强,敏感性高,对于GIST的诊断有较高的临床应用价值,建议推广和应用于GIST的病理诊断。

幽门螺旋杆菌感染与胃癌Ki-67表达、Her-2基因状态及临床病理特征的关系

目的探讨幽门螺旋杆菌(H.pylori,Hp)感染与胃癌Ki-67表达水平、Her-2基因状态及临床病理特征的关系。方法收集113例2014年6月至2018年6月于福建省立医院术后诊断为胃癌的标本,分别采用硼酸亚甲蓝染色法检测Hp,免疫组化Elivision法检测Ki-67蛋白表达,荧光原位杂交法(FISH)检测Her-2基因状态,并对其临床病理特征进行分析。结果Hp感染80例(70.8%),Ki-67蛋白阴性表达3例(2.7%),弱阳性4例(3.5%),中度阳性51例(45.1%),强阳性55例(48.7%),Hp感染与Ki-67蛋白表达无关(P=0.346);Her-2基因扩增48例(42.5%),胃癌Hp感染与Her-2基因扩增有关(P=0.000);在临床病理特征方面,检测出胃上段癌Hp感染32例,下段癌48例,肿瘤不同发生部位Hp阳性率差异有统计学意义(P=0.046)。结论Hp感染可促进胃癌Her-2基因扩增,Her-2基因的活化可能是导致胃癌发病的机制之一。Hp感染与胃癌发生的部位有关,胃下段癌Hp阳性比例较高,及时完全根除HP可能对预防胃下段癌更有临床价值,这对诊断及判断胃癌预后也有重要的提示作用。

PEDF在植入型凶险性前置胎盘中的表达及其对血管内皮细胞迁移、侵袭的影响

目的探讨色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)在植入型凶险性前置胎盘中的表达及其对脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)迁移、侵袭能力的影响。方法选择2014年7月~2015年7月福建省立医院剖宫产分娩的植入型凶险性前置胎盘(PA)组14例,前置胎盘(PP)组16例。采用免疫组化法检测两组胎盘的PEDF和VEGF的定位表达及微血管密度(microvascular vascular density,MVD);用RT-PCR及Western blot检测胎盘的PEDF和VEGF的mRNA和蛋白质表达;用ELISA检测外周血清中PEDF和VEGF水平。培养脐静脉内皮细胞,设阴性对照组和不同浓度的PDEF干预组,用平板划痕和Transwell侵袭实验检测HUVEC细胞的迁移和侵袭能力,用ELISA检测培养上清液中VEGF水平。结果 PA组与PP组相比,胎盘PEDF的mRNA和蛋白表达明显降低而VEGF则明显升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。胎盘PEDF表达与胎盘VEGF、MVD及胎盘植入深度呈负相关关系(均P<0.05),与外周血清PEDF水平呈正相关关系(P<0.05)。各PEDF干预组的迁移和侵袭细胞数显著低于阴性对照组(均P<0.05)。随干预浓度增加,HUVEC细胞的迁移和侵袭能力降低(均P<0.05)。结论 PEDF可以反映植入型凶险性前置胎盘的异常血管密度和植入程度,抑制血管内皮细胞的迁移和侵袭能力,可作为影像学检查的重要补充诊断方法和潜在的治疗切入点。

胃组织活检幽门螺旋杆菌检测方法比较

目的分析比较四种胃活检幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)检测方法,旨在找出一种敏感性,特异性高且操作便捷的检测方法.方法选取490例胃黏膜活检组织标本,采用快速尿激酶法(rapidureasetest,RUT)、荧光定量聚合酶链反应(fluorescence quantitative polymerase chain reaction,q PCR)、硼酸亚甲蓝法和免疫组织化学法(immunohistochemistry,IHC)进行检测,观察H.pylori的显示情况,对阳性率进行χ2检验.结果 RUT、q PCR、硼酸亚甲蓝法和IHC在490例标本中的H. pylori阳性检出率分别为18.98%、63.88%、32.04%和38.16%,差异具有统计学意义(P <0.005).结论 IHC检测H. pylori阳性组织,镜检为H. pylori呈黄褐色而周围胃黏膜组织细胞核呈蓝色,对比强烈,更为直观,有助于实验者获取具有潜在临床应用价值的形态学信息,且实验操作对仪器、实验人员无特殊要求.故建议将IHC检测胃活检H. pylori作为指导临床诊断H. pylori感染、实行H. pylori除菌治疗和疗效判断的依据之一.

犬嫁接性梭形动脉瘤的高频超声观察与病理学评价

目的建立犬嫁接性梭形动脉瘤模型,高频超声(high-frequency ultrasound,HFUS)观察模型的长期可靠性,光镜与透射电镜(TEM)评价模型的病理学特征。方法 10只犬采用全麻和显微外科的方法,将双侧的颈外静脉剥离外膜后,取1.5cm嫁接同侧颈总动脉制作梭形动脉瘤模型20枚;术后第2、4、12周分别进行HFUS检测血管参数;术后6、12、24周分别选择2只犬的4枚动脉瘤模型解剖后进行病理学观察;其余4只犬继续观察至24个月。结果 10只犬全部存活,术后经HFUS观察:共收获大小相似的梭形动脉瘤模型20枚(成模率达100%),瘤腔内为涡流,术后12周模型膨胀性增大,并具有自发破裂的趋势;HFUS可清晰地显示动脉瘤壁的内膜增厚、增生斑块和钙化;模型的病理学观察显示:在血流动力学作用下,6、12周,瘤壁以损伤、应激增生为主;24周瘤壁以适应性重塑为主。术后12个月发现1枚动脉瘤自发破裂并闭塞,病理学显示瘤壁多层次出血、内膜崩裂、远端吻合口斑块钙化、脱落,瘤腔内多层次血栓闭塞。长达24个月的观察表明:破裂梭形动脉瘤模型的血流动力学作用机制和病理学特征,与人体真正的颅内动脉瘤生理特性相符合。结论犬嫁接性梭形动脉瘤模型制作简便、可重复性强、稳定可靠。

EGFR基因突变与肺非小细胞肺癌临床病理特征的关系探讨

目的分析评估新分类中肺腺癌各组织学亚型与EGFR基因突变及临床病理特征之间的关系。方法收集我院2012-2014年确诊的肺癌患者标本194例,其中手术标本139例均依据2015年新WHO分类方法进行组织学分类,采用扩增阻滞突变系统(ARMS)方法对所有标本EGFR基因外显子18-21(E18-21)进行检测。分析EGFR基因状态与临床病理特征及病理组织学分类之间的关系。结果有116例标本发生EGFR基因突变,新分类中各组织学亚型之间突变情况不同,EGFR突变率在以贴壁为主型肺腺癌中高,含贴壁成分的肺腺癌比不含此成分的肺腺癌突变率高,含腺泡成分比不含腺泡成分的肺腺癌突变率高,差异均有统计学意义(P<0.05),而含乳头成分的肺腺癌比不含此成分的肺腺癌EGFR突变率高,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论在肺腺癌中,EGFR基因突变状态与性别、吸烟史及组织学亚型有关联。女性、不吸烟者、以贴壁成分为主及含贴壁、腺泡成分的肺腺癌有较高的EGFR基因突变率。

结核分枝杆菌DNA实时定量PCR技术在临床病理诊断中的应用

目的探讨实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,FQ-PCR)检测结核分枝杆菌(Mycobaeterium tuberculosis,MTB)在临床组织病理学诊断中的应用价值。方法收集我院2013年5月-2015年2月临床确诊的144例结核病(tuberculosis,TB)患者,对其石蜡包埋组织标本行组织病理学检查,并同时采用组织切片抗酸染色及FQ-PCR技术检测MTB-DNA,并对这三种方法的阳性检出率进行比较。结果在144例临床诊断TB患者的石蜡包埋组织中,FQ-PCR法检测MTB阳性68例,阳性率为47.22%,抗酸染色法检测阳性22例,阳性率为15.28%,组织病理学法检测阳性74例,阳性率为51.39%,三者阳性率比较差异有统计学意义(P<0.01)。FQ-PCR法对肺活检标本、肺叶切除标本和胸膜活检标本MTB的阳性检出率均高于组织病理学法和抗酸染色法;对淋巴结活检标本和其他组织标本的阳性检出率高于抗酸染色法,但低于组织病理学法。结论 FQ-PCR技术简便、快捷,敏感性明显好于传统抗酸染色法,可作为TB分子病理诊断的重要检测方法,为组织病理学诊断提供可靠的依据,具有较高的临床应用价值。

胃癌表达Her-2的情况和临床分期的联系

目的:探讨人表皮生长因子受体2(Her-2)在胃癌中的表达情况以其与胃癌临床分期的联系。方法:选取笔者所在医院就诊的237例胃癌病例,利用免疫组织化学染色法分别检测每个患者手术标本中肿瘤组织与正常胃黏膜的Her-2蛋白的表达情况,进行比较。结果:肿瘤组织Her-2表达的阳性率为26.58%,显著高于正常胃黏膜Her-2表达的阳性率为0%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。此外,Her-2在胃癌组织中的可疑阳性率31.65%亦显著高于正常胃组织5.06%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。Ⅳ期患者胃癌标本Her-2蛋白表达的阳性率达64.28%,显著高于Ⅲ、Ⅱ、Ⅰ期,比较差异均有统计学意义(P<0.05);并且随着胃癌分期水平的减低,Her-2阳性率亦随之降低,两者呈正相关。结论:与正常胃黏膜相比,Her-2蛋白在胃癌组织中的表达率显著增高,并且与胃癌分期呈现正相关。

4类材料包裹治疗犬梭形动脉瘤的高频超声观察与病理学评价

目的探讨生物膜等4类材料包裹治疗犬梭形动脉瘤(FFA)模型的远期疗效。方法 10只犬的20枚梭形动脉瘤分别用生物膜、自体颈外静脉(EJV)、膨体聚四氟乙烯膜片(e-PTFE)、涤纶片等建立完全匹配包裹模型各5枚,观察建模后血流动力学变化与病理学改变。结果随建模时间延长,EJV降解、模型膨胀性增大,瘤壁机化、钙化、炎症反应严重,24个月破裂并闭塞1枚;涤纶片无降解、瘤壁炎症反应严重,6个月5枚瘤腔完全闭塞;e-PTFE无降解、瘤壁炎症反应轻、有钙化趋向,24个月e-PTFE出现1枚闭塞;生物膜包裹3个月后开始多层次降解,并诱导组织再生,无炎症反应。高频超声动态观察提示不同包裹材料与瘤壁微小间隙、增生斑块、血管弹性等的演变过程以及模型的不同部位血流速度有着不同的变化(P<0.05)。结论包裹材料的生物力学稳定性与组织排斥反应是影响血流动力学与包裹远期疗效的关键因素。生物膜被动降解同时原位诱导组织再生,具有良好的力学稳定性与生物相容性,是动脉瘤包裹治疗的理想材料。

非小细胞肺癌患者126例凝血3项指标改变的临床分析

目的探讨非小细胞肺癌（NSCLC）患者凝血三项指标改变的临床意义。方法对126例NSCLC患者采用全自动血球分析仪,以电阻抗射频和细胞化学法测定血小板（PLT）;采用全自动血凝仪,分别以磁珠法和免疫比浊法测定纤维蛋白原（FIB）和D-二聚体（DD）。结果 126例患者中114例出现凝血功能异常,2例发生深静脉血栓;Ⅱ~Ⅳ期患者较Ⅰ期患者PLT、DD水平显著升高,转移组患者较无转移组患者FIB、DD水平显著升高,差异有统计学意义（P〈0.05）;鳞癌、腺癌两组相关指标比较的差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 NSCLC患者FIB、DD水平与肿瘤分期、有无转移相关联。若能预防性抗凝治疗,预防血栓形成,对改善预后或有一定帮助。

PEDF对胎盘位置附着异常中异常胎盘微血管床形成的研究

目的探讨色素上皮衍生因子(PEDF)对胎盘位置附着异常中胎盘微血管床形成的影响。方法选择2014年6月至2015年8月我院剖宫产分娩的孕妇48例,其中胎盘植入(PA组)16例,前置胎盘(PP组)16例,对照组16例。胎盘进行病理学检查,免疫组化检测三组胎盘组织的MVD;RT-PCR及Western Blot检测胎盘组织中PEDF和VEGF的m RNA和蛋白质表达。结果①三组胎盘组织中PEDF及VEGF蛋白含量、PEDF及VEGF m RNA含量及MVD比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。②胎盘中PEDF与VEGF、MVD均呈负相关关系(r=-0.778,P=0.000;r=-0.827,P=0.000)。③胎盘血管情况:PA组绒毛血管数量丰富,管径粗大,侵及肌壁间血管;PP组绒毛间血管增生程度有所减轻,未侵及肌层;对照组则无上述变化。结论①胎盘位置异常组中胎盘的PEDF表达过低是导致VEGF负性调节不足以及胎盘病理性血管形成的原因,参与了胎盘位置异常的发生。②三组胎盘中PEDF含量均有显著差异,提示PEDF含量可以反映异常胎盘血管的侵袭程度。

延胡索酸水合酶缺陷型子宫平滑肌瘤29例临床病理特征

目的探讨延胡索酸水合酶(fumarate hydratase,FH)缺陷型子宫平滑肌瘤(fumarate hydratase-deficiency in uterine leiomyomas,FH-DUL)的临床病理学特征。方法回顾性分析29例FH-DUL的临床病理学特征及免疫表型等,并复习相关文献。结果患者年龄27~52岁,平均43岁。镜检:肿瘤有两种类型,经典型占62.1%(18/29),可见数量不等的核大深染细胞和局灶或多灶的奇异型细胞,有嗜酸性核仁及核周空晕;类似“普通型平滑肌瘤(usual leiomyomas,UL)”样型占37.9%(11/29),细胞轻度异型性,无明显嗜酸性大核仁。免疫表型:28例FH完全缺失,1例FH和29例2-琥珀酸-半胱氨酸(2-succino-cysteine,2SC)均弥漫阳性。1例行分子遗传学检测,未检测到FH基因胚系突变。29例均行手术切除,术后均无瘤生存。结论FH-DUL属于子宫平滑肌瘤的罕见亚型,诊断依赖于临床影像学、病理形态学及免疫表型,必要时行FH基因检测辅助诊断,需与UL及其它子宫间叶源性肿瘤鉴别,治疗以手术切除为主,预后较好。

胃倒置增生性息肉1例并文献复习

目的探讨胃倒置增生性息肉(inverted hyperplastic polyp,IHP)的临床病理学特征、诊断及鉴别诊断、治疗及预后。方法回顾性分析1例胃IHP的临床病理学及免疫表型特征等,并复习相关文献。结果患者女性,45岁。超声内镜检查发现胃体大弯侧见一黏膜下隆起,表面黏膜光滑。镜检:胃壁黏膜下层可见胃黏膜上皮成分呈息肉样增生,中央形成一空腔,空腔内层表面胃小凹上皮增生肥大、伸长、扭曲并扩张变形,延伸到间质,上皮下间质见增生的幽门腺。免疫表型:空腔内层表面增生的小凹上皮MUC5A弥漫阳性,上皮下增生的幽门腺MUC6弥漫阳性。结论胃IHP是一种极其罕见的病变,具有特殊的镜下形态,需与异位组织、深在性囊性胃炎、高分化胃腺癌等鉴别。