重结晶法制备次氯血红素

以氯化血红素为原料,经间苯二酚还原,合成了次氯血红素.采用多次重结晶方法,使所得的次氯血红素质量分数大于95%,收率大于85%.

3,4,5,6-四溴酚磺酞合成及纯化方法的改进

以2-磺基苯甲酸环酐为原料,溴代后与苯酚反应合成3,4,5,6-四溴酚磺酞粗产品,并用溶剂抽提和重结晶方法进行纯化.结果表明,所得产物的纯度为97.45%,收率为36.5%.

药食同源植物醛糖还原酶抑制剂的筛选

选取50余种药食同源植物,根据糖尿病并发症的病发机理,筛选含有有效醛糖还原酶抑制剂(ARI)的天然成分,利用测定的IC_(50)值作为参考,比对各已知有抑制活性的样本植物的醛糖还原酶(AR)抑制效率.结果表明:柠檬、苦瓜、李子和石榴的ARI活性较强,其IC_(50)值分别为0.74,0.64,0.25,0.027mg/mL.

THP保护拉坦前列素内半缩醛的合成

以商品化的(1S,5R,6R,7R)-7-苯甲酰氧基-6-[3(S)-3-羟基-5-苯基-1(E)-戊基]-2-氧杂双环[3.3.0]辛烷-3-酮为原料,经4步反应合成一种四氢呋喃(THP)保护的拉坦前列素内半缩醛,并用核磁共振氢谱(1 H NMR)、核磁共振碳谱(13 C NMR)、红外光谱(IR)和质谱(MS)对产物进行表征.结果表明,终产物的收率为65.7%,纯度为99.0%.

新型醛糖还原酶抑制1-乙酰基-1H-吲哚-3-乙酸酯的合成及其抑制活性

醛糖还原酶抑制剂(ARIs)抑制多元醇途径的醛糖还原酶是治疗糖尿病并发症的重要策略。以2-氯苯甲酸为起始原料,在碱性条件下经铜催化,与甘氨酸反应生成氯代邻羧基苯基甘氨酸,再与乙酸酐反应,生成N-乙酰基邻羧基苯甲酸。然后在吡啶催化下合环,生成1-乙酰基-^(1)H-吲哚-3-乙酸酯(AIA),总收率为79.0%,纯度为99.0%。通过^(1)H NMR、^(13)C NMR和MS(ESI)对其结构进行表征,并对该化合物的的醛糖还原酶抑制活性进行测定,IC 50=9.4×10^(-2)μM。

靶向沉默人HER2/neu基因的RNA干扰

针对人HER2/neu基因的mRNA序列,设计并构建shRNA干扰载体,经聚合酶链式反应(PCR)及测序鉴定后转染SK-BR-3细胞,并检测HER2/neu mRNA和蛋白抑制情况及SK-BR-3细胞迁移能力的变化.实验结果表明:构建了3个HER2/neu-shRNA真核表达质粒;3个重组质粒均可不同程度下调HER2/neu mRNA和蛋白表达水平,并抑制SK-BR-3细胞的迁移;其中1号重组质粒效应最强,对mRNA和蛋白的抑制率分别为84.65%和74.98%.

三异丙醇胺硼酸酯的合成与表征

以三异丙醇胺和硼酸为原料,经酯化反应合成三异丙醇胺硼酸酯,并用重结晶方法纯化,制得高纯度的终产物,产物结构通过质谱(MS)、核磁共振氢谱(1 H NMR)、红外光谱(FTIR)等方法表征.研究反应物物质的量比、反应温度、反应时间和共沸溶剂对合成反应的影响以及重结晶溶剂和溶剂比例对纯化效果的影响.结果表明,最优条件下合成的三异丙醇胺硼酸酯的质量分数为99.8%,收率为87.1%.

2-氧杂双环[3,3,0]辛-6-烯-3-酮对映异构体手性拆分及光学纯度的测定

以表面涂覆纤维素-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)手性硅胶为固定相,以V(正己烷)∶V(异丙醇)=95∶5的溶剂为流动相,拆分对映异构体2-氧杂双环[3,3,0]辛-6-烯-3-酮.流速为0.8mL/min,柱温25℃,检测波长205nm.结果表明:该条件下对映异构体的分离度为3.0,能有效拆分,用面积归一化方法可确定光学纯度.

新型醛糖还原酶抑制剂1-乙酰基-5-(4-氟苯基)-1H-吡咯-3-基乙酸酯的合成及抑制活性

以4-氟肉桂酸为原料,依次经过硫酸氢钾氧化、开环加成和乙酸酐催化反应,合成了一种新型的醛糖还原酶抑制剂1-乙酰基-5-苯基-(4-氟)-1H-吡咯-3-基乙酸酯(4-F-APPA),总收率51%,纯度大于98%,其结构经~1H NMR,^(13)C NMR, IR和MS(ESI)表征。并研究了4-F-APPA的抑制活性。结果表明:4-F-APPA的IC_(50)为7.2×10^(-2 )μM,优于阳性对照药依帕司他。

手性HPLC法分析双乙酰科立内酯对映异构体

建立了前列腺素中间体双乙酰科立内酯对映异构体的手性高效液相色谱测定方法。采用硅胶表面涂覆有纤维素-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)的手性色谱柱(OD-H,4.6 mm×250 mm,5μm),以正己烷-异丙醇(V∶V=80∶20)为流动相,流速1.0 mL/min,柱温40℃,检测波长205 nm,外标法测定对映异构体超量值。结果双乙酰科立内酯对映异构体分离度为3.5,(+)-双乙酰科立内酯在0.199~3.980 mg/mL(R^(2)=0.9994)、(-)-双乙酰科立内酯在0.198~3.960 mg/mL(R^(2)=0.9994)浓度范围线性关系良好。(+)-双乙酰科立内酯低、中、高浓度平均加样回收率(RSD)分别为99.38%(0.43%)、99.30%(0.88%)、100.10%(0.51%),(-)-双乙酰科立内酯低、中、高浓度平均加样回收率(RSD)为99.76%(0.86%)、100.07%(0.26%)、99.27%(0.20%)。3批样品平均对映异构体超量值为4.75%、70.10%、-75.33%。方法简便、快速,能准确测定双乙酰科立内酯对映异构体超量值,为前列腺素药物手性中间体提供新的分离和检测方法。

顺式双环[3.2.0]庚-2-烯-6-酮对映异构体手性拆分及含量测定

目的高效液相色谱法拆分顺式双环[3.2.0]庚-2-烯-6-酮对映异构体并进行含量测定,同时进行含量测定的方法学研究。方法采用硅胶表面涂覆有直链淀粉-三(S)-α-甲基苯基氨基甲酸酯手性固定相,以正己烷-异丙醇(体积比95∶5)为流动相,流速0.8 mL·min^(-1),柱温25℃,检测波长210 nm,采用外标法测定顺式双环[3.2.0]庚-2-烯-6-酮对映异构体的含量,采用面积归一化法计算对映异构体超量值。结果顺式双环[3.2.0]庚-2-烯-6-酮对映异构体分离度为11.4,两个对映异构体在质量浓度2~40 mg·L^(-1)内有良好线性关系(R^(2)≥0.999),(+)-顺式双环[3.2.0]庚-2-烯-6-酮低、中、高质量浓度平均加样回收率(RSD)分别为99.16%(0.8%)、99.34%(0.8%)、100.2%(0.7%);(-)-顺式双环[3.2.0]庚-2-烯-6-酮低、中、高质量浓度平均加样回收率RSD分别为99.72%(0.9%)、100.0%(0.3%)和98.81%(0.6%)。结论该方法能够用面积归一化法准确测定顺式双环[3.2.0]庚-2-烯-6-酮对映异构体超量值,为前列腺素类药物手性中间体提供新的分离方法。

柱前手性衍生化-HPLC法测定科立内酯二醇对映异构体含量

基于柱前手性衍生化-HPLC法,以联苯-4-甲酰氯为衍生化试剂,采用硅胶表面涂覆有直链淀粉-三(s)-α-甲基苯基氨基甲酸酯手性色谱柱(AS-H,4.6 mm×250 mm,5μm),以正己烷-无水乙醇(V∶V=80∶20)为流动相,流速1 mL/min,柱温30℃,检测波长275 nm,外标法计算科立内酯二醇对映异构体超量值。结果显示,科立内酯二醇对映异构体衍生物分离度为2.8,(+)-科立内酯二醇衍生物在2.07~41.40μg/mL、(-)-科立内酯二醇衍生物在1.95~39.06μg/mL范围有良好线性关系(R2=0.9991、R2=0.9991)。(+)-科立内酯二醇衍生物低、中、高浓度平均加样回收率(RSD)分别为99.36%(0.51%)、99.24%(0.89%)、100.24%(0.65%);(-)-科立内酯二醇衍生物低、中、高浓度平均加样回收率(RSD)为99.74%(0.89%)、100.02%(0.31%)、98.81%(0.63%)。方法简便、快速,能准确测定科立内酯二醇对映异构体超量值,为前列腺素药物手性中间体提供新的分离和检测方法。

一种合成拉坦前列素的新方法

拉坦前列素是治疗青光眼和高眼压症的首选药物.现有合成方法存在路线长、收率低、异构体杂质难以分离等问题.本研究以苯甲酰基科里内酯为原料,氧化后与2-氧代-4-苯丁基膦酸二甲酯通过改良Horner-Wadsworth-Emmons反应形成ω侧链,经还原、脱保护、氢化、四氢吡喃基(THP)保护、还原内酯得到内半缩醛,然后以(4-羧基丁基)三苯基溴化鏻与六甲基二硅基胺基钠(NaHMDS)形成磷叶立德通过Wittig反应形成α侧链,经酯化、脱保护基后,合成了拉坦前列素,并用正相液相色谱法纯化,制得终产物,产物用1H NMR,13C NMR,IR和HRMS进行了结构表征.结果表明,拉坦前列素纯度达99.91%,总收率为19.2%.为拉坦前列素的合成提供一种高收率、高纯度、可大批量合成的新方法.